Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

Vi takker professor Olena Severynovska fra Institut for fysiologi, fakultetet for biologi, økologi og medicin, Oles Honchar Dnipro University, Dnipro, Ukraine for hendes støtte og nyttige bidrag til vores diskussioner. De indsamlede data er en del af R.K. ph. d.-afhandling.

Dyrepleje Udvalget på Ben-Gurion University of the Negev, Israel godkendte alle behandling og testprocedurer, der anvendes i denne protokol.
1. forberedelse af rotter til forsøgs proceduren
Bemærk: Vælg voksne mandlige Sprague-Dawley rotter, der vejer 300-350 g.
<ol><li>Hus rotter, fire pr bur, i en vivarium ved 22 °C og 40% fugtighed, med en omvendt 12 h lys/mørk cyklus (lyser ved 8:00 a.m.) og ubegrænset adgang til mad og vand.</li>
	<li>...

En af de måder, hvorpå den mcao-teknik, der præsenteres her, kan anses for sikrere end den oprindelige mcao-model, illustreres af, at Revisionsretten og dens filialer, herunder occipital arterien, den terminale og den maxillære arterie, ikke kompromitteres ved at inkludere MCA via ICA. Den oprindelige mcao model 's forskydning af Revisionsretten (og dens filialer), ved distalt dissekere og koagulerende dem46, forårsager nedsat mastication, på grund af et kompromis til den vaskulære forsynin...

Slagtilfælde er fjerde på listen over dødsstraf begår sygdomme i USA1,2,3, mens det forårsager de fleste handicap hos voksne i de udviklede lande4; Dette gør slagtilfælde en førende udfordrer blandt verdens mest betydningsfulde sundhedsspørgsmål. Normalitet i slagtilfælde-overlevende patienter er sjælden, med omkring 15%-40% af overlevelse ofre lider permanent handicap, 20% kræver institutionel pleje 3 måneder efter slagtilfælde debut5, og omkring en tredjedel af 6-måneders overlevelsesmuligheder har brug for andre til at hjælpe dem med at leve hver dag6. Stroke angiveligt også tegner sig for de stigende nationale sundhedsudgifter7. Estimater fra American Heart Association har slagtilfælde-relaterede omkostninger i USA på over $50.000.000.000 i 20108.
Ikke alene har slagtilfælde forårsage individer ' langsigtede skader, men nogle overlevende tendens til at lide følelsesmæssige og adfærdsmæssige lidelser, såsom demens, træthed, angst, depression, delirium, og aggression9,10,11 ,12,13,14. Den mest tilbagevendende psykologiske fortsættelse efter et slagtilfælde er post-slagtilfælde depression (PSD), diagnosticeret i omkring 40%-50% af overlevelse15,16,17. Slagtilfælde induceret depression resulterer i øget sygelighed og dødelighed18,19,20,21,22. Den Patofysiologi af PSD er ikke kendt helt, men det er tilsyneladende forårsaget af flere faktorer og er knyttet til handicap, kognitiv svækkelse, og læsion site23.
Rotte model af fokal hjernen iskæmi, skabt af mcao, er den mest udbredte dyremodel af slagtilfælde24,25,26,27. Ved påvisning af induktion af PSD i rotter ved at inkludere MCA via ICA, er teknikker, der minimerer dødelighed og variation i MCAO-modellen, ansat28.
Hovedformålet med denne protokol er at skitsere trin til at inducere PSD i rotter ved at inkludere MCA via ICA, en modificeret model af MCAO, som reducerer dødelighed og resultatet af variabilitet28. Specifikke mål omfatter udførelse af neurologiske og histologiske undersøgelser (bestemmelse af den neurologiske sværhedsgrad score [NSS], volumen af infarkt område, og hjerneødem) for at verificere effekten af MCAO og ved hjælp af adfærdsmæssige tests til at undersøge indflydelse af denne MCAO procedure på udviklingen af følelsesmæssige forstyrrelser, primært PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

Post-slagtilfælde depression (PSD) er den mest tilbagevendende af alle psykiske komplikationer som følge af en iskæmisk slagtilfælde. Et større flertal (ca. 60%) af alle iskæmiske slagtilfælde patienter lider af PSD, en lidelse anses for at være en iskæmisk slagtilfælde-relateret forløber for øget død og forringelse i sundhed. Den Patofysiologi af PSD er stadig uklar. At studere mekanismen for udvikling og forekomst af PSD yderligere, og for at finde ud af en terapi, vi forsøgte at udvikle en ny protokol, der kræver, at den midterste cerebral arterie (MCA) via den indre carotis arterie (ICA) i rotter. Denne protokol beskriver en model af PSD induceret i rotter gennem den midterste cerebral arterie okklusion (MCAO). Også anvendes i forsøget er Porsolt tvungen svømme test og saccharosepræference test for at bekræfte og evaluere depressiv humør af rotter under undersøgelse. I stedet for at indsætte kateteret gennem den eksterne carotidarterie (ECA), som foreskrevet for den oprindelige procedure, denne MCAO teknik har mono filamentet passerer direkte gennem ICA. Denne MCAO teknik blev udviklet for et par år siden og fører til en reduktion i dødelighed og variation. Det er almindeligt anerkendt, at de anvendte kriterier foretrækkes ved udvælgelsen af biologiske modeller. De data, der opnås med denne protokol viser, at denne model af MCAO kunne være en måde at inducere PSD i rotter og kunne potentielt føre til forståelsen af Patofysiologi og den fremtidige udvikling af nye lægemidler og andre neuroprotektive Agenter.

Histologiske Fund (tabel 1) afslørede en statistisk signifikant infarkt volumen i procent af total hjernen (p < 0,0001) efter mcao sammenlignet med dyr i Sham-Control gruppen. Også rapporteret var en statistisk signifikant hjerneødem, når evalueringen fra den eksperimentelle gruppe (p < 0,0003) blev sat side om side med den af Sham-kontrolgruppen.
De opnåede NSS-scorer, som er repræsenter...

Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

Her præsenterer vi en protokol til at fremkalde post-slagtilfælde depression i rotter ved at okkoere den midterste cerebral arterien via den indre carotis arterien. Vi bruger Porsolt tvungen svømme test og saccharosepræference testen for at bekræfte og evaluere inducerede depressive stemninger.

En Middle cerebral arterie okklusion teknik til inducerende post-slagtilfælde depression i rotter

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

Vores protokol foreslår en ny mediale cerebral arterie okklusion teknik hos rotter til at hjælpe med at studere mekanismen for post-slagtilfælde depression udvikling og for at finde en mere effektiv behandling. Den største fordel ved vores teknik er dens evne til at reducere variabiliteten i vægtændringer, hjerneødem og infarkt volumen, og for at minimere procedurerelaterede dødsfald. Efter at have bekræftet en manglende reaktion på hale knivspids i en mandlig 300 til 350-gram Sprague Dawley rotte, placere dyret på en 37 grader Celsius varmeplade og bruge en rektal sonde til overvågning af kernen kropstemperatur.Påfør salve til dyrets øjne og barber håret fra halsen. Derefter desinficere den eksponerede hud med 70 procent alkohol chlorhexidin, og dække rotten med den sterile kirurgiske drapere, før du udfører okklusion i henhold til standard teknikker. For at opnå den neurologiske sværhedsgrad score, placere en okkluderet rotte på en flad overflade og lad dyret til at bevæge sig frit.Efter et minut, forsigtigt trække rotten bagud ved halen og grade dyrets gangart svar. For at måle infarkt volumen, scanne de forberedte farvede hjerne skiver på en 1, 600 med 1, 600 prikker per tomme opløsning og beskære og standardisere skalaen for alle billederne. Indlæs derefter de standardiserede billeder i et passende billedanalysesoftwareprogram, og brug et sporingsværktøj til at måle området markeret bleghed i seks på hinanden følgende to millimeter skiver for at bestemme den infarkte størrelse som en procentdel af hele hjernesnittet.30 til 33 dage efter operationen overføres dyrene til et lukket, roligt og lyskontrolleret rum i de enkelte bure, og en flaske med 100 milliliter 1 % saccharoseopløsning ind i hvert bur i 24 timer. Den næste dag, fjerne flaskerne samt mad og drikkevand i 12 timer. Ved afsavnsperiodens afslutning skal der i fire timer ind på en flaske med 100 milliliter 1 % saccharoseopløsning og en flaske, der indeholder 100 milliliter postevand, indgå i hvert bur.Derefter registreres mængden af saccharoseopløsningen og det vand, der forbruges, for at gøre det muligt at beregne affiniteten for at saccharosepræference for hvert dyr. For Porsolt's tvunget-svømme test, 30 til 33 dage efter operationen, første sted hver rotte i en lodret plexiglas cylinder, der indeholder 80 centimeter af 25 grader Celsius vand i 15 minutter. Ved slutningen af tilvænningsperioden, lad rotten tørre i 15 minutter i det opvarmede kabinet ved 32 grader Celsius, før han returnerer dyret til sit hjem bur.Den næste dag, returnere rotten til cylinderen i en sidste fem minutter, registrering af fem minutters test for at tillade beregning af den samlede varighed af immobilitet i denne periode. Histologisk analyse afslører en statistisk signifikant infarkt volumen som en procentdel af den samlede hjerne volumen post-MCAO sammenlignet med dyr i fingeret kontrolgruppe. Et statistisk signifikant hjerneødem observeres også hos forsøgsdyrene sammenlignet med den fingerede kontrolgruppe.MCAO dyr demonstrere lavere neurologiske præstationer i forhold til sham-opererede dyr på 50 minutter, 24 timer, og syv dage efter operationen. MCAO rotter også forbruge en betydeligt lavere mængde saccharose og udviser en længere immobilitet under Porsalt's tvunget-svømme test i forhold til de sham-opererede dyr. Dette er en vigtig model for adfærdsmæssige slagtilfælde undersøgelser og kunne tjene som et redskab til at vurdere fremtidige behandlinger eller give kritiske prækliniske data om effekten af terapeutiske stoffer.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Brug Kronisk Social Stress til model fødselsdepression hos diegivende Gnavere

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

En procedure til at undersøge effekten af ​​langvarig mad begrænsning på Heroin Søger i afholdende Rats

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Fat præference: A Novel Model af spiseadfærd i rotter

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

En procedure til at Overhold Kontekst-induceret Fornyelse af Pavlov-condition Alkohol-søger adfærd i rotter

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

Den modificerede Hole Board - Måling Behavior, Erkendelse og social interaktion hos mus og rotter

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Påvisning af adfærdsmæssige underskud i rotter efter traumatisk hjerneskade

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

Vendbar køling-induceret deaktiveringer at studere kortikale bidrag til hindring hukommelse i den omvandrende kat

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

En ny metode for at fremkalde en Depression-lignende adfærd i rotter

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Kildrende, en teknik for at fremkalde Positive indflydelse, når du håndterer rotter

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Test for Metacognitive at reagere ved hjælp af en lugt-baserede forsinket Match til prøve Test hos rotter

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...