Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

Wij danken professor Olena Severynovska van de afdeling fysiologie, faculteit biologie, ecologie en geneeskunde, oles Honchar Dnipro University, Dnipro, Oekraïne voor haar steun en nuttige bijdragen aan onze discussies. De verkregen gegevens maken deel uit van het proefschrift van reremy.

Het Comité van de Dierenzorg van de Universiteit van Ben-Gurion van Negev, Israël keurde alle behandelings en testende procedures goed die in dit protocol worden gebruikt.
1. voorbereiding van ratten voor de experimentele procedure
Opmerking: Selecteer volwassen mannelijke Sprague-Delombaerde ratten met een gewicht van 300-350 g.
<ol><li>Huis de ratten, vier per kooi, in een Vivarium bij 22 °C en 40% vochtigheid, met een omgekeerde 12 h lichte/...

Een van de manieren waarop de MCAO techniek hier gepresenteerd kan worden als veiliger dan de oorspronkelijke MCAO model wordt geïllustreerd door het feit dat de REKENkamer en haar vestigingen, met inbegrip van de achterhoofd slagader, de Terminal linguale, en de kaakslag ader, zijn niet aangetast Wanneer afsluiter de MCA via de ICA. De oorspronkelijke MCAO model offset van de Rekenkamer (en haar takken), door distally ontleden en coaguleren ze46, veroorzaakt verminderde kauwen, als gevolg van ee...

De slag is vierde op de lijst van dood-begaande ziekten in de Verenigde Staten1,2,3, terwijl het de meerderheid van handicaps bij volwassenen in ontwikkelde landen4veroorzaakt; Dit maakt slag een belangrijke mededinger onder de belangrijkste gezondheidskwesties van de wereld. Normaliteit in beroerte-overlevende patiënten is zeldzaam, met ongeveer 15%-40% van de overleving slachtoffers lijden permanente handicap, 20% die institutionele zorg 3 maanden na een beroerte begin5, en ongeveer een derde van de 6-maanden overleving nodig anderen om hen te helpen leven door elke dag6. Stroke naar verluidt ook rekeningen voor de stijgende nationale uitgaven voor gezondheidszorg7. Schattingen van de American Heart Association heeft Stroke-gerelateerde kosten in de Verenigde Staten op meer dan $50.000.000.000 in 20108.
Niet alleen beroerte veroorzaken individuen ' op lange termijn schade, maar sommige overlevenden hebben de neiging om emotionele en gedragsstoornissen lijden, zoals dementie, vermoeidheid, angst, depressie, delirium, en agressie9,10,11 ,12,13,14. De meest terugkerende psychologische vervolg na een beroerte is post-takt depressie (PSD), gediagnosticeerd in ongeveer 40%-50% van de overleving15,16,17. De slag-veroorzaakte depressie resulteert in verhoogde morbiditeit en mortaliteit18, 19,20,21,22. De pathofysiologie van PSD is niet volledig bekend, maar het is blijkbaar veroorzaakt door meerdere factoren en is gekoppeld aan handicap, cognitieve stoornissen, en laesie site23.
De rat model van focale hersen ischemie, gemaakt door MCAO, is de meest wijdverbreide diermodel van slag24,25,26,27. Bij het aantonen van de inductie van PSD in ratten door afsluiter het MCA via de ICA, technieken die het minimaliseren van sterfte en variabiliteit in de MCAO model zijn tewerkgesteld28.
De primaire doelstelling van dit protocol is het schetsen van de stappen voor het induceren van PSD bij ratten door afsluiter het MCA via de ICA, een gewijzigd model van MCAO, die sterfte en de uitkomst van variabiliteit28vermindert. Specifieke doelstellingen zijn het uitvoeren van neurologische en histologische onderzoeken (het bepalen van de neurologische Ernst Score [NSS], het volume van de infarct zone, en hersenoedeem) om de werkzaamheid van MCAO te verifiëren en het gebruik van gedrags tests om de invloed van deze MCAO procedure op de ontwikkeling van emotionele stoornissen, vooral PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

Post-takt depressie (PSD) is de meest terugkerende van alle psychiatrische complicaties als gevolg van een ischemische beroerte. Een grotere meerderheid (ongeveer 60%) van alle ischemische beroerte patiënten lijden aan PSD, een aandoening die wordt beschouwd als een ischemische beroerte voorloper voor een verhoogde dood en degradatie in de gezondheidszorg. De pathofysiologie van PSD is nog steeds duister. Om te studeren het mechanisme van de ontwikkeling en het optreden van PSD verder, en om uit te vinden een therapie, hebben we geprobeerd om een nieuw protocol dat vereist afsluiter de middelste hersen slagader (MCA) via de interne halsslagader (ICA) bij ratten te ontwikkelen. Dit protocol beschrijft een model van PSD geïnduceerd bij ratten door middel van de middelste cerebrale slagader occlusie (MCAO). Ook gebruikt in het experiment zijn de Porsolt gedwongen zwemmen test en de sacharose voorkeur test te bevestigen en evalueren van de depressieve stemming van de ratten in onderzoek. In plaats van het plaatsen van de katheter door de externe halsslagader (Rekenkamer), zoals bepaald voor de oorspronkelijke procedure, deze MCAO techniek heeft de monofilament passeren rechtstreeks door de ICA. Deze MCAO techniek is een paar jaar geleden ontwikkeld en leidt tot een vermindering van de sterfte en variabiliteit. Men aanvaardt algemeen dat de gebruikte criteria bij de selectie van biologische modellen de voorkeur hebben. De gegevens die met dit protocol worden verkregen tonen aan dat dit model van MCAO een manier zou kunnen zijn om PSD bij ratten te veroorzaken en zou potentieel tot het begrip van de pathofysiologie en de toekomstige ontwikkeling van nieuwe drugs en andere neuroprotectieve agenten kunnen leiden.

Histologische bevindingen (tabel 1) onthulden een statistisch significant infarct volume als percentage van de totale hersenen (p < 0,0001) post-MCAO in vergelijking met dieren in de Sham-controlegroep. Ook gemeld was een statistisch significante hersenoedeem toen de evaluatie van de experimentele groep (p < 0,0003) werd naast elkaar gezet met die van de Sham-controlegroep.
De NSS scores, zoals...

Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

Hier presenteren we een protocol te induceren post-takt depressie bij ratten door afsluiter het midden cerebrale slagader via de interne halsslagader. We gebruiken de Porsolt geforceerde zwem test en de sacharose voorkeur test om geïnduceerde depressieve stemmingen te bevestigen en te evalueren.

Een middelste cerebrale slagader occlusie techniek voor het induceren van post-takt depressie bij ratten

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

Ons protocol stelt een nieuwe mediale cerebrale slagader occlusie techniek bij ratten om te helpen bij het bestuderen van het mechanisme van post-stroke depressie ontwikkeling en het vinden van een meer efficiënte therapie. Het belangrijkste voordeel van onze techniek is de mogelijkheid om de variabiliteit in gewichtsveranderingen, hersenoedeem en infarctvolume te verminderen en om proceduregerelateerde sterfgevallen te minimaliseren. Na bevestiging van een gebrek aan reactie op staart snuifje in een mannelijke 300 tot 350-gram Sprague Dawley rat, plaats het dier op een 37 graden Celsius verwarmingsplaat en gebruik een rectale sonde voor het toezicht op de kern lichaamstemperatuur.Breng zalf aan op de ogen van het dier en scheer het haar vanaf de nek. Desinfecteer vervolgens de blootgestelde huid met 70 procent alcoholchlorhexidine en bedek de rat met het steriele chirurgische laken voordat de occlusie volgens de standaardtechnieken wordt uitgevoerd. Om de neurologische ernstscore te verkrijgen, plaatst u een afgesloten rat op een vlak oppervlak en laat u het dier vrij bewegen.Na een minuut, trek voorzichtig de rat naar achteren door de staart en rang van het dier gang reactie. Om het infarct volume te meten, scan de voorbereide gekleurde hersenen plakjes op een 1, 600 bij 1, 600 stippen per inch resolutie en gewas en standaardiseren van de schaal voor alle beelden. Laad vervolgens de gestandaardiseerde afbeeldingen in een geschikt softwareprogramma voor beeldanalyse en gebruik een traceringstool om het gebied van gemarkeerde bleekheid te meten in zes opeenvolgende segmenten van twee millimeter om de infarctgrootte te bepalen als een percentage van het hele hersensegment.30 tot 33 dagen na de operatie, breng de dieren naar een gesloten, rustige, lichtgecontroleerde kamer in individuele kooien, en plaats een fles met 100 milliliter van 1%sucrose oplossing in elke kooi gedurende 24 uur. De volgende dag, verwijder de flessen evenals het voedsel en drinkwater voor 12 uur. Plaats aan het einde van de ontberingsperiode één fles met 100 milliliter sacharoseoplossing en één fles met 100 milliliter kraanwater in elke kooi gedurende vier uur.Vervolgens registreert u het volume van de sacharoseoplossing en het verbruikte water om de affiniteit met sacharosevoorkeur voor elk dier te kunnen berekenen. Voor porsolt's gedwongen zwemtest, 30 tot 33 dagen na de operatie, plaats elke rat eerst in een verticale plexiglascilinder met 80 centimeter Celsius water gedurende 15 minuten. Laat de rat aan het einde van de gewenningsperiode 15 minuten drogen in de verwarmde behuizing bij 32 graden Celsius voordat het dier terugkeert naar zijn thuiskooi.De volgende dag, de rat terug te keren naar de cilinder voor een laatste vijf minuten, het opnemen van de vijf minuten test om de berekening van de totale duur van de immobiliteit in die periode mogelijk te maken. Histologische analyse onthult een statistisch significant infarct volume als een percentage van het totale hersenvolume post-MCAO in vergelijking met dieren in de sham control groep. Een statistisch significant hersenoedeem wordt ook waargenomen bij de proefdieren in vergelijking met de sham control groep.MCAO-dieren vertonen lagere neurologische prestaties in vergelijking met door schijnbediende dieren na 50 minuten, 24 uur en zeven dagen na de operatie. MCAO ratten consumeren ook een aanzienlijk lagere hoeveelheid sacharose en vertonen een langere immobiliteit tijdens porsalt's gedwongen zwemmen tests in vergelijking met de sham-operated dieren. Dit is een belangrijk model voor gedragsslagstudies en kan dienen als een instrument voor het beoordelen van toekomstige therapieën of het verstrekken van kritische preklinische gegevens over de werkzaamheid van therapeutische stoffen.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Met behulp van Chronische Sociale Stress om model postnatale depressie bij zogende Knaagdieren

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Een procedure om het effect van langdurig Eten Beperking Heroïne zoek naar in Abstinent Ratten Studie

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Vet voorkeur: A Novel Model van eetgedrag bij ratten

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Een procedure om-Context geïnduceerde Vernieuwing Observeer van Pavlov-geconditioneerde Alcohol-zoekend gedrag bij ratten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

De Modified Hole Board - Het meten van gedrag en cognitieve en sociale interactie bij muizen en ratten

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Opsporen van gedrags tekorten in ratten na traumatisch hersenletsel

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

Omkeerbare koeling-geïnduceerde deactiveringen te bestuderen van de corticale bijdragen aan belemmering geheugen in de wandelende kat

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Een nieuwe methode voor het induceren van een depressie-achtige werking in ratten

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Kietelen, een techniek om positieve invloed bij het verwerken van ratten

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Match-naar-Sample Test bij ratten vertraagd testen voor metacognitieve reageert met behulp van een op geur gebaseerde

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...