Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
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Nous remercions le professeur Olena Severynovska du département de physiologie, Faculté de biologie, d’écologie et de médecine, l’Université d’oles Honchar Dnipro, Dnipro, Ukraine pour son soutien et des contributions utiles à nos discussions. Les données obtenues font partie de la thèse de doctorat de la Dr.

Le Comité de soins aux animaux de l’Université Ben Gourion du Negev, Israël a approuvé toutes les procédures de traitement et d’essai utilisées dans ce protocole.
1. préparation des rats pour la procédure expérimentale
Remarque: Sélectionner des rats Sprague-Dawley mâles adultes pesant 300-350 g.
<ol><li>Loger les rats, quatre par cage, dans un vivarium à 22 ° c et 40% d’humidité, avec un cycle de lumière/obscurité inversé d...

L’une des façons dont la technique MCAO présentée ici pourrait être jugée plus sûre que le modèle original du MCAO est illustrée par le fait que la CEA et ses branches, y compris l’artère occipital, le terminal linguale et l’artère maxillaire, ne sont pas compromises lors de l’occlusion de la MCA via l’ICA. Le décalage du modèle MCAO original de la CEA (et de ses branches), en disséquant et en coagulant distalement les46, provoque une mastication altérée, en raison d’un ...

Le AVC est le quatrième sur la liste des maladies qui commettent des décès aux États-Unis1,2,3, alors qu’il provoque la majorité des handicaps chez les adultes dans les pays développés4; Cela fait de l’AVC un concurrent de premier plan parmi les problèmes de santé les plus importants au monde. La normalité chez les patients souffrant d’AVC est rare, avec environ 15%-40% des victimes de survie souffrant d’incapacité permanente, 20% nécessitant des soins institutionnels 3 mois après l’apparition de l’AVC5, et environ un tiers des survivants de 6 mois ayant besoin d’autres pour les aider à vivre chaque jour6. L’accident vasculaire cérébral serait également responsable de l’augmentation des dépenses de santé nationales7. Les estimations de l’American Heart Association ont des coûts liés aux AVC aux États-Unis à plus de $50 milliards en 20108.
Non seulement l’AVC provoque des dommages à long terme des individus, mais certains survivants ont tendance à souffrir des troubles émotionnels et comportementaux, tels que la démence, la fatigue, l’anxiété, la dépression, le délire, et l’agression9,10,11 ,12,13,14. La suite psychologique la plus récurrente après un AVC est la dépression post-AVC (PSD), diagnostiquée dans environ 40%-50% des survivances15,16,17. La dépression induite par les AVC entraîne une augmentation de la morbidité et de la mortalité18,19,20,21,22. La pathophysiologie de PSD n’est pas connue complètement, mais elle est apparemment causée par de multiples facteurs et est liée à l’invalidité, déficience cognitive, et le site de la lésion23.
Le modèle de rat de l’ischémie du cerveau focal, créé par le MCAO, est le modèle animal le plus répandu de l’AVC24,25,26,27. En démontrant l’induction de PSD chez le rat en occluant le MCA par l’ICA, des techniques qui minimisent la mortalité et la variabilité dans le modèle de MCAO sont employées28.
L’objectif principal de ce protocole est de décrire les étapes pour induire le PSD chez le rat en occluant le MCA par l’intermédiaire de l’ICA, un modèle modifié de MCAO, qui réduit la mortalité et le résultat de la variabilité28. Les objectifs spécifiques comprennent l’exécution d’examens neurologiques et histologiques (détermination du score de sévérité neurologique [NSS], le volume de la zone d’infarctus et œdème cérébral) pour vérifier l’efficacité du MCAO et l’utilisation de tests comportementaux pour examiner la influence de cette procédure MCAO sur le développement de troubles émotionnels, principalement PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

La dépression post-AVC (PSD) est la plus récurrente de toutes les complications psychiatriques résultant d’un AVC ischémique. Une plus grande majorité (environ 60%) de tous les patients atteints d’AVC ischémique souffrent de PSD, un trouble considéré comme un précurseur ischémique lié aux AVC pour augmenter la mortalité et la dégradation de la santé. La pathophysiologie de PSD est encore obscure. Pour étudier le mécanisme de développement et l’occurrence de PSD plus loin, et pour découvrir une thérapie, nous avons tenté de développer un nouveau protocole qui nécessite d’occlusion l’artère cérébrale moyenne (MCA) par l’intermédiaire de l’artère carotidienne interne (ICA) chez les rats. Ce protocole décrit un modèle de PSD induit chez les rats à travers l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO). Aussi utilisé dans l’expérience sont le Porsolt test de natation forcée et le test de préférence de saccharose pour confirmer et évaluer l’humeur dépressif des rats sous enquête. Plutôt que d’insérer le cathéter à travers l’artère carotide externe (ECA), comme stipulé pour la procédure initiale, cette technique de MCAO a le monofilament passant directement par l’ICA. Cette technique de MCAO a été développée il y a quelques années et conduit à une réduction de la mortalité et de la variabilité. Il est généralement admis que les critères utilisés sont privilégiés dans la sélection des modèles biologiques. Les données obtenues avec ce protocole montrent que ce modèle de MCAO pourrait être un moyen d’induire le PSD chez le rat et pourrait potentiellement conduire à la compréhension de la pathophysiologie et le développement futur de nouveaux médicaments et d’autres agents neuroprotecteurs.

Les résultats histologiques (tableau 1) révèlent un volume d’infarctus statistiquement significatif en pourcentage du cerveau total (p < 0,0001) post-MCAO comparativement aux animaux du groupe de contrôle factice. On a également signalé un œdème cérébral statistiquement significatif lorsque l’évaluation du groupe expérimental (p < 0,0003) a été mise côte à côte avec celle du groupe de contrôle factice.
<p class="jove_content" fo...

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A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

Ici, nous présentons un protocole pour induire la dépression post-AVC chez les rats en occluant l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide interne. Nous utilisons le test de natation forcée Porsolt et le test de préférence de saccharose pour confirmer et évaluer les ambiances dépressives induites.

Une technique d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne pour induire la dépression post-AVC chez les rats

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

Notre protocole propose une nouvelle technique médiale d’occlusion de l’artère cérébrale chez les rats pour aider à étudier le mécanisme du développement de dépression post-AVC et pour trouver une thérapie plus efficace. Le principal avantage de notre technique est sa capacité à réduire la variabilité des changements de poids, de l’oedème cérébral et du volume infarctus, et à minimiser les décès liés à la procédure. Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement de la queue chez un rat Sprague Dawley mâle de 300 à 350 grammes, placez l’animal sur une plaque chauffante de 37 degrés Celsius et utilisez une sonde rectale pour surveiller la température corporelle centrale.Appliquer de la pommade sur les yeux de l’animal et raser les cheveux du cou. Ensuite, désinfectez la peau exposée avec 70 pour cent de chlorhexidine d’alcool, et couvrez le rat avec le drapé chirurgical stérile avant d’effectuer l’occlusion selon les techniques standard. Pour obtenir le score de gravité neurologique, placez un rat occlus sur une surface plane et laissez l’animal se déplacer librement.Après une minute, tirez doucement le rat vers l’arrière par la queue et classez la réponse de démarche de l’animal. Pour mesurer le volume infarctus, numérisez les tranches de cerveau tachées préparées à une résolution de 1 600 par 1 600 points par pouce et recadrer et normalisez l’échelle pour toutes les images. Ensuite, chargez les images normalisées dans un logiciel approprié d’analyse d’image et utilisez un outil de traçage pour mesurer la zone de la pâleur marquée en six tranches consécutives de deux millimètres pour déterminer la taille infarctuse en pourcentage de la tranche entière du cerveau.30 à 33 jours après l’opération, transférez les animaux dans une pièce fermée, calme et contrôlée par la lumière dans des cages individuelles, et placez une bouteille contenant 100 millilitres de solution de saccharose de 1 % dans chaque cage pendant 24 heures. Le lendemain, retirer les bouteilles ainsi que la nourriture et l’eau potable pendant 12 heures. À la fin de la période de privation, placez une bouteille contenant 100 millilitres de solution de saccharose de 1 % et une bouteille contenant 100 millilitres d’eau du robinet dans chaque cage pendant quatre heures.Ensuite, enregistrez le volume de la solution saccharose et de l’eau consommée pour permettre le calcul de l’affinité avec la préférence saccharose pour chaque animal. Pour le test de natation forcée de Porsolt, 30 à 33 jours après l’opération, placez chaque rat dans un cylindre vertical en plexiglas contenant 80 centimètres d’eau de 25 degrés Celsius pendant 15 minutes. À la fin de la période d’accoutumabilité, laisser sécher le rat pendant 15 minutes dans l’enclos chauffé à 32 degrés Celsius avant de retourner l’animal dans sa cage d’origine.Le lendemain, remettre le rat au cylindre pendant cinq dernières minutes, en enregistrant le test de cinq minutes pour permettre le calcul de la durée totale de l’immobilité pendant cette période. L’analyse histologique révèle un volume d’infarctus statistiquement significatif en pourcentage du volume total du cerveau post-MCAO par rapport aux animaux du groupe témoin factice. Un oedème cérébral statistiquement significatif est également observé chez les animaux expérimentaux par rapport au groupe témoin factice.Les animaux de MCAO démontrent des performances neurologiques inférieures comparées aux animaux simulés à 50 minutes, 24 heures, et sept jours après chirurgie. Les rats MCAO consomment également une quantité significativement plus faible de saccharose et présentent une immobilité plus longue pendant les tests de natation forcée de Porsalt par rapport aux animaux opérés par feinte. Il s’agit d’un modèle important pour les études comportementales sur les accidents vasculaires cérébraux et pourrait servir d’outil pour évaluer les thérapies futures ou fournir des données précliniques critiques sur l’efficacité des substances thérapeutiques.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

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Recherche

Sciences du comportement

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Une procédure pour l&#39;observation de renouvellement induite contexte-de pavlovien conditionné alcool comportement de recherche chez le rat

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Le Conseil Trou modification - Comportement, cognition et l&#39;interaction sociale souris et des rats de mesure

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