Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
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Wir danken Professor Olena Severynovska vom Institut für Physiologie der Fakultät für Biologie, Ökologie und Medizin der Oles Honchar Dnipro Universität, Dnipro, Ukraine für ihre Unterstützung und hilfreiche Beiträge zu unseren Diskussionen. Die gewonnenen Daten sind Teil der Doktorarbeit von R.K.

Der Tierpflegeausschuss der Ben-Gurion-Universität des Negev, Israel, genehmigte alle in diesem Protokoll verwendeten Behandlungs-und Testverfahren.
1. Vorbereitung der Ratten auf die Versuchsvorverfahrengestellung
NOTE: Wählen Sie erwachsene männliche Sprague-Dawley-Ratten mit einem Gewicht von 300-350 g.
<ol><li>Die Ratten, vier pro Käfig, in einem Vivarium bei 22 ° C und 40% Luftfeuchtigkeit, mit einem umgekehrten 12 h Licht-/Dunkelzyklus ...

Eine der Möglichkeiten, wie die hier präsentierte MCAO-Technik als sicherer angesehen werden könnte als das ursprüngliche MCAO-Modell, zeigt sich daran, dass die ECA und ihre Zweige, einschließlich der Okzidentarterie, der Terminallinguale und der Kiefernarterie, nicht beeinträchtigt werden. Beim Verschluss des MCA über die ICA. Der Ausgesatz des ECA (und seiner Zweige) durch den ursprünglichen MCAO-Modell, durch die distale Trennung und Gerinnung von46, verursacht eine beeinträchtigte Ma...

Schlaganfall steht auf der Liste der todbeweiskundierenden Krankheiten inden Vereinigten Staaten von 1,2, 3 anvierterStelle, während er die meisten Behinderungen bei Erwachsenen in den Industrieländernverursacht 4; Dies macht Schlaganfall zu einem führenden Anwärter unter den wichtigsten Gesundheitsproblemen der Welt. Die Normalität bei umschlagsüberlebenden Patienten ist selten, da etwa 15%-40% der Überlebensopfer unter einer dauerhaften Behinderung leiden, 20% eine institutionelle Betreuung 3Monate nach Schlaganfall 5 erfordern und etwa ein Drittel der sechsmonatigen Überlebenden andere benötigen, um ihnen zu helfen, zu leben. Durch jeden Tag6. Schlaganfall soll auch für die steigenden nationalen Gesundheitsausgaben7 verantwortlichsein. Schätzungen der American Heart Association hat die fallbedingten Kosten in den Vereinigten Staaten bei über 50 Milliarden Dollar imJahr 2010 8.
Schlaganfall verursacht nicht nur langfristige Schäden, sondern einige Überlebende neigen dazu, emotionale und Verhaltensstörungen zu erleiden, wie Demenz, Müdigkeit, Angst, Depression, Delirium und Aggression9,10,11 ,12,13, 14. Die wiederkehrende psychologische Fortsetzung nach einem Schlaganfall ist die nach einem Schlaganfall diagnostizierte Depression (PSD), die in etwa40%-50% der Überlebenden15,16, 17diagnostiziertwird. Schlaganfall induzierte Depressionen führen zu erhöhter Morbidität und Mortalität18,19,20,21, 22. Die Pathophysiologie von PSD ist nicht vollständig bekannt, aber sie wird offenbar durch mehrere Faktoren verursacht und ist mit Behinderung, kognitiven Beeinträchtigungen und Läsionenan Ort 23 verbunden.
Das von MCAO geschaffene Rattenmodell der fokalen Hirnischämie ist das am weitesten verbreitete Tiermodell des Schlaganfalls 24,25, 26,27. Bei der Demonstration der Einführung von PSD in Ratten durch den Verschluss des MCA über die ICA werdenTechnikeneingesetzt, die Sterblichkeit und Variabilität im MCAO-Modell minimieren.
Das primäre Ziel dieses Protokolls ist es, die Schritte zur Anregung von PSD in Ratten zu skizzieren, indem man den MCA über die ICA, ein modifiziertes MCAO-Modell, ausschließt, das die Sterblichkeit und das Ergebnis der Variabilität 28 reduziert. Zu den spezifischen Zielen gehören die Durchführung neurologischer und histologischer Untersuchungen (Bestimmung der neurologischen Schwerpunktzahl [NSS], des Volumens der Infarktzone und des Gehirnödems), um die Wirksamkeit von MCAO zu überprüfen und Verhaltenstests zu verwenden, um die Einfluss dieses MCAO-Verfahrens auf die Entwicklung von emotionalen Störungen, vor allem PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

Die poststämtliche Depression (PSD) ist die häufigste aller psychiatrischen Komplikationen, die durch einen ischämischen Schlaganfall entstehen. Größere Mehrheit (ca. 60%) Von allen ischämischen Schlaganfallpatienten leiden an PSD, einer Erkrankung, die als ischämische Schlaganfall-bedingte Vorstufe für einen erhöhten Tod und eine Verschlechterung der Gesundheit angesehen wird. Die Pathophysiologie von PSD ist noch unklar. Um den Entwicklungs-und Vorkommen von PSD weiter zu untersuchen und eine Therapie zu finden, haben wir versucht, ein neues Protokoll zu entwickeln, das das Vertuschen der mittleren zerebralen Arterie (MCA) über die interne Carotid-Arterie (ICA) bei Ratten erfordert. Dieses Protokoll beschreibt ein Modell der PSD, das bei Ratten durch die mittlere zerebrale Arterienverschluss (MCAO) induziert wird. Im Experiment werden auch der Porsolt-Zwangstest und der Saccharose-Präferenztest eingesetzt, um die depressive Stimmung der untersuchten Ratten zu bestätigen und zu bewerten. Anstatt den Katheter durch die äußere Carotid-Arterie (ECA) einzulegen, wie es für das ursprüngliche Verfahren vorgesehen ist, hat diese MCAO-Technik das Monofilament direkt durch die ICA geleitet. Diese MCAO-Technik wurde vor einigen Jahren entwickelt und führt zu einer Verringerung der Sterblichkeit und Variabilität. Es ist allgemein anerkannt, dass die verwendeten Kriterien bei der Auswahl biologischer Modelle bevorzugt werden. Die Daten, die mit diesem Protokoll gewonnen werden, zeigen, dass dieses MCAO-Modell eine Möglichkeit sein könnte, PSD bei Ratten zu induzieren und potenziell zum Verständnis der Pathophysiologie und der zukünftigen Entwicklung neuer Medikamente und anderer neuroprotektiver Wirkstoffe führen könnte.

Histologische Befunde (Tabelle 1) ergaben im Vergleich zu Tieren der Schamkontrollgruppe ein statistisch signifikantes Infarktvolumen als Prozentsatz des gesamten Gehirns (p < 0.0001) nach-MCAO. Auch wurde ein statistisch signifikantes Hirnödem berichtet, als die Auswertung aus der Versuchsgruppe (p < 0.0003) mit der der Schamkontrollgruppe nebeneinander gestellt wurde.
Die in Tabelle ...

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A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um Depressionen bei Ratten nach dem Schlaganfall zu induzieren, indem wir die mittlere zerebrale Arterie über die innere Carotid-Arterie ausschließen. Wir verwenden den Porsolt-erzwungenen Schwimmtest und den Saccharose-Präferenztest, um induzierte depressive Stimmungen zu bestätigen und zu bewerten.

Eine mittelzerebrale Arterienokklusionstechnik zur induzierung einer Depression im Raten nach dem Schlaganfall

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

Unser Protokoll schlägt eine neue mediale Zerebralparese-Okklusionstechnik bei Ratten vor, um den Mechanismus der Entwicklung einer Depression nach dem Schlaganfall zu untersuchen und eine effizientere Therapie zu finden. Der Hauptvorteil unserer Technik ist ihre Fähigkeit, die Variabilität bei Gewichtsänderungen, Hirnödem und Infarktvolumen zu reduzieren und verfahrensbedingte Todesfälle zu minimieren. Nach der Bestätigung eines Mangels an Reaktion auf Schwanz Kneifen in einem männlichen 300 bis 350-Gramm Sprague Dawley Ratte, legen Sie das Tier auf eine 37 Grad Celsius Heizplatte und verwenden Sie eine rektale Sonde zur Überwachung der Kernkörpertemperatur.Tragen Sie Salbe auf die Augen des Tieres auf und rasieren Sie die Haare vom Hals. Dann desinfizieren Sie die exponierte Haut mit 70 Prozent Alkohol chlorhexidin, und bedecken Sie die Ratte mit dem sterilen chirurgischen Vorhang, bevor Sie die Okklusion nach Standardtechniken durchführen. Um den neurologischen Schweregrad zu erhalten, legen Sie eine verstopfte Ratte auf eine flache Oberfläche und lassen Sie das Tier sich frei bewegen.Nach einer Minute ziehen Sie die Ratte vorsichtig am Schwanz nach hinten und gradieren Sie die Gangantwort des Tieres. Um das Infarktvolumen zu messen, scannen Sie die vorbereiteten gebeizten Gehirnscheiben mit einer Auflösung von 1, 600 mal 1, 600 Punkten pro Zoll und schneiden Sie die Skala für alle Bilder. Laden Sie dann die standardisierten Bilder in ein entsprechendes Bildanalyse-Softwareprogramm und verwenden Sie ein Tracing-Tool, um den Bereich des markierten Pallors in sechs aufeinanderfolgenden Zwei-Millimeter-Slices zu messen, um die Infarktgröße als Prozentsatz der gesamten Gehirnscheibe zu bestimmen.30 bis 33 Tage nach der Operation die Tiere in einen geschlossenen, ruhigen, lichtgeregelten Raum in einzelnen Käfigen bringen und 24 Stunden lang eine Flasche mit 100 Millilitern 1%Saccharoselösung in jeden Käfig legen. Am nächsten Tag die Flaschen sowie das Essen und Trinkwasser für 12 Stunden entfernen. Am Ende der Entbehrungsphase eine Flasche mit 100 Millilitern 1%Saccharoselösung und eine Flasche mit 100 Milliliter Leitungswasser in jeden Käfig für vier Stunden.Zeichnen Sie dann das Volumen der Saccharoselösung und das verbrauchte Wasser auf, um die Berechnung der Affinität zur Saccharosepräferenz für jedes Tier zu ermöglichen. Für Porsolts Zwangsschwimmtest, 30 bis 33 Tage nach der Operation, platzieren Sie jede Ratte 15 Minuten lang in einem vertikalen Plexiglaszylinder mit 80 Zentimetern 25 Grad Celsius Wasser. Am Ende der Gewöhnungszeit lassen Sie die Ratte 15 Minuten im beheizten Gehege bei 32 Grad Celsius trocknen, bevor Sie das Tier in seinen Heimischenkäfig zurückführen.Am nächsten Tag, geben Sie die Ratte an den Zylinder für eine letzte fünf Minuten, Aufzeichnung der fünfminütigen Test, um die Berechnung der Gesamtdauer der Unbeweglichkeit während dieses Zeitraums zu ermöglichen. Die histologische Analyse zeigt ein statistisch signifikantes Infarktvolumen als Prozentsatz des gesamten Gehirnvolumens nach DER MCAO im Vergleich zu Tieren in der Scheinkontrollgruppe. Ein statistisch signifikantes Hirnödem wird auch bei den Versuchstieren im Vergleich zur Scheinkontrollgruppe beobachtet.MCAO-Tiere weisen niedrigere neurologische Leistungen im Vergleich zu Scheintieren bei 50 Minuten, 24 Stunden und sieben Tagen nach der Operation auf. MCAO-Ratten konsumieren auch eine deutlich geringere Menge an Saccharose und zeigen eine längere Immobilität während Porsalts Zwangsschwimmtests im Vergleich zu den Scheintieren. Dies ist ein wichtiges Modell für Verhaltensschlaganfallstudien und könnte als Instrument zur Bewertung zukünftiger Therapien oder zur Bereitstellung kritischer präklinischer Daten über die Wirksamkeit therapeutischer Substanzen dienen.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Mit Chronische Sozial Stress zu Modell postpartalen Depression in Lactating Nagetiere

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Forschung

Verhalten

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Eine Vorgehensweise, um die Wirkung von Längerer Essen Beschränkung Heroin suche in abstinent Ratten untersucht

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Fat Vorlieben: A Novel Modell des Essverhaltens bei Ratten

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Eine Vorgehensweise, um Context-induzierte Erneuerung der Pawlowschen Anlage Alkoholsucht bei Ratten Verhalten beobachten

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

Der modifizierte Loch Board - Mess Verhalten, Kognition und Sozialinteraktion an Mäusen und Ratten

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Erkennung von Verhaltensstörungen Defizite bei Ratten nach Schädel-Hirn-Verletzung

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

Reversible Kühlung-induzierte Deaktivierungen kortikalen Beiträge zum Hindernis Speicher in der zu Fuß Katze zu studieren

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Eine neue Methode zur Induktion einer Depression-ähnliches Verhaltens bei Ratten

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Kitzeln, eine Technik zur Induktion positiven Einfluss beim Umgang mit Ratten

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Für die metakognitiven Reaktion mit einem Geruch-basierte Tests verzögert Match Beispieltest bei Ratten

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...