Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

אנו מודים לפרופסור אולנה סוינינסקה של מחלקת הפיזיולוגיה, הפקולטה לביולוגיה, אקולוגיה ורפואה, יולס הונchar דניפרו, דניפרו, אוקראינה לתמיכה ותרומות מועילות לדיונים שלנו. הנתונים שהושגו הם חלק מעבודת הדוקטורט של ק.

הוועדה לטיפול בבעלי חיים באוניברסיטת בן-גוריון בנגב אישרה את כל תהליכי הטיפול והבדיקות המשמשים בפרוטוקול זה.
1. הכנת חולדות להליך הניסיוני
הערה: בחר חולדות בוגרים גברי-דאולי במשקל 300-350 g.
<ol><li>הבית החולדות, ארבעה לכלוב, ב יבר ב 22 ° צ' ו 40% לחות, עם היפוך 1...

אחת הדרכים בהן טכניקת MCAO המוצגת כאן יכולה להיחשב בטוחה יותר ממודל MCAO המקורי מומחש על-ידי העובדה כי ה-ECA וענפיו, כולל עורק העורף, המסוף הלשוני ועורק הלסת הראשי, אינם נחשפים כשסגר את הMCA באמצעות ה-ICA. מודל MCAO המקורי של היסט של ECA (ואת ענפיו), על ידי מבתר קרוש אותם46, גורם לקויי מסטיק, בש...

השבץ הוא הרביעי ברשימת מחלות מבצע המוות בארצות הברית1,2,3, בעוד היא גורמת לרוב המוגבלות אצל מבוגרים במדינות מפותחות4; זה הופך שבץ מתמודד מוביל בין בעיות הבריאות המשמעותית ביותר בעולם. נורמליות בחולים ששרדו הוא נדיר, עם כ 15%-40% של קורבנות הישרדות סבל נכות קבוע, 20% הדורשים טיפול מוסדי 3 חודשים לאחר הופעת שבץ5, וכשליש של 6 חודשים שורדים הזקוקים לאחרים כדי לעזור להם לחיות כל יום6. קו הדיווחים גם לחשבון את ההוצאות הלאומיות בריאות לאומית7. האומדנים מאיגוד הלב האמריקני יש עלויות הקשורות לשבץ בארצות הברית ברחבי $50,000,000,000 ב 20108.
לא רק שבץ לגרום נזק לטווח ארוך של אנשים, אבל כמה ניצולים נוטים לסבול הפרעות רגשיות והתנהגותיות, כגון דמנציה, עייפות, חרדה, דיכאון, הזיות, ותוקפנות9,10,11 ,12,13,14. ההמשך הפסיכולוגי החוזרות ביותר לאחר שבץ הוא דיכאון לאחר שבץ (PSD), אובחן כ 40%-50% של שרידות15,16,17. דיכאון בהשפעת שבץ תוצאות התחלואה ותמותה מוגברת18,19,20,21,22. הפתופסיולוגיה של PSD הוא לא ידוע לחלוטין, אבל זה נגרם כנראה על ידי גורמים מרובים והוא מקושר נכות, ליקוי קוגניטיבי, ואת הנגע באתר23.
המודל חולדה של איסכמיה המוח מוקד, נוצר על ידי mcao, הוא הדגם הנפוץ ביותר בעלי חיים של שבץ24,25,26,27. ב להפגין את אינדוקציה של PSD בחולדות על ידי הסגר את MCA באמצעות ICA, טכניקות למזער את התמותה והשונות במודל MCAO מועסקים28.
המטרה העיקרית של פרוטוקול זה היא לתאר את הצעדים לגרימת PSD בחולדות על ידי הסגר את MCA דרך ה-ICA, מודל שונה של MCAO, אשר מפחית את התמותה ואת תוצאת השונות28. מטרות ספציפיות כוללות ביצוע בדיקות נוירולוגיות היסטולוגית (קביעת הציון החומרה הנוירולוגית [nss], נפח של אזור הלב, בצקת במוח) כדי לאמת את היעילות של mcao ושימוש במבחני התנהגות כדי לבחון את ה השפעה זו הליך MCAO על פיתוח הפרעות רגשיות, בעיקר PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

לאחר שבץ דיכאון (PSD) הוא חוזר ונשנה ביותר של כל הסיבוכים הפסיכיאטריים כתוצאה משבץ איסכמי. רוב גדול (כ 60%) של כל המטופלים שבץ מוחי סובלים PSD, הפרעה שנחשבה להיות מבשר איסכמי שבץ הקשורים למוות מוגבר השפלה בריאות. הפתופסיולוגיה של PSD עדיין מעורפל. כדי ללמוד את המנגנון של פיתוח והתרחשות של PSD עוד, וכיצד למצוא טיפול, ניסינו לפתח פרוטוקול חדש שדורש חסימה של עורק המוח האמצעי (MCA) באמצעות עורק הראש הפנימי (ICA) בחולדות. פרוטוקול זה מתאר מודל של PSD המושרה חולדות באמצעות העורק האמצעי מוחין הסגר (MCAO). משמש גם בניסוי הם מבחן לשחות כפויה Porsolt ואת העדפת בדיקת סוכות כדי לאשר ולהעריך את מצב הרוח דיכאון של חולדות תחת חקירה. במקום להוסיף את הקטטר דרך העורק הראשי החיצוני (ECA), כאמור עבור ההליך המקורי, זו טכניקה MCAO יש המונופינט עובר ישירות דרך ה-ICA. טכניקת MCAO זו פותחה לפני מספר שנים ומובילה לירידה בתמותה ובשונות. מקובל בדרך כלל כי הקריטריונים המשמשים מעדיפים בבחירת מודלים ביולוגיים. הנתונים שהושגו עם פרוטוקול זה מראים כי מודל זה של MCAO יכול להיות דרך לגרום PSD בחולדות והוא עלול להוביל להבנת הפתופסולוגיה והתפתחות עתידית של תרופות חדשות וסוכנים עצביים אחרים.

ממצאים היסטולוגית (שולחן 1) חשף אמצעי אחסון משמעותי סיכונים מבחינה סטטיסטית כאחוז של המוח הכולל (p < 0.0001) post-mcao כאשר בהשוואה לבעלי חיים בקבוצת שליטה מזויף. כמו כן דווח שהיה בצקת מוחית סטטיסטית משמעותית כאשר ההערכה מהקבוצה הניסיונית (p < 0.0003) הושם זה לצד זה ש...

Watch this Scientific Journal Video about A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats at JoVE.com

A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

כאן אנו מציגים פרוטוקול כדי לגרום דיכאון לאחר שבץ בחולדות על ידי הסגר את עורק המוח האמצעי באמצעות עורק הראש הפנימי. אנו משתמשים במבחן Porsolt שחייה כפויה במבחן העדפה הסוכות כדי לאשר ולהעריך מצבי דיכאון המושרה.

עורק מוחין בינוני טכניקת הסגר לגרימת שלאחר שבץ דיכאון בחולדות

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

הפרוטוקול שלנו מציע טכניקה חדשה של העורק המוחי המדיאלי בחולדות כדי לעזור ללמוד את המנגנון של התפתחות דיכאון לאחר שבץ ולמצוא טיפול יעיל יותר. היתרון העיקרי של הטכניקה שלנו הוא היכולת שלה להפחית את השונות בשינויים במשקל, בצקת במוח, נפח אוטם, ולמזער מקרי מוות הקשורים להליך. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת זנב בעכבר זכר 300 עד 350 גרם ספראג דאולי, מניחים את החיה על צלחת חימום 37 מעלות צלזיוס ולהשתמש בדיקה רקטלי לניטור טמפרטורת הגוף הליבה.יש למרוח משחה על עיני החיה ולגילוח את השיער מהצוואר. לאחר מכן, לחטא את העור החשוף עם 70 אחוז אלכוהול chlorhexidine, ולכסות את החולדה עם וילון כירורגי סטרילי לפני ביצוע העורק על פי טכניקות סטנדרטיות. כדי לקבל את ציון החומרה הנוירולוגית, מניחים חולדה occluded על משטח שטוח ולאפשר את החיה לנוע בחופשיות.לאחר דקה אחת, משוך בעדינות את החולדה לאחור בזנב ודרג את תגובת ההליכה של החיה. כדי למדוד את עוצמת הקול האוטמת, סרוק את פרוסות המוח המוכתמות המוכנות ברזולוציה של 1, 600 על 1, 600 נקודות לאינץ' וחתוך ותקן את קנה המידה עבור כל התמונות. לאחר מכן, טען את התמונות הסטנדרטיות לתוכנה מתאימה לניתוח תמונה ולהשתמש בכלי מעקב כדי למדוד את האזור של חיוורון מסומן בשש פרוסות רצופות של שני מילימטרים כדי לקבוע את גודל האוטם כאחוז מפרוסת המוח כולה.30 עד 33 ימים לאחר הניתוח, מעבירים את בעלי החיים לחדר סגור, שקט ומבוקר אור בכלובים בודדים, ומעבירים בקבוק המכיל 100 מיליליטר של תותב סוכרוז אחד לכל כלוב למשך 24 שעות. למחרת, להסיר את הבקבוקים, כמו גם את האוכל ומי שתייה במשך 12 שעות. בתום תקופת הקיפוח, מניחים בקבוק אחד המכיל 100 מיליליטר של תותב סוכרוז 1 ובקבוק אחד המכיל 100 מיליליטר של מי ברז לתוך כלוב במשך ארבע שעות.לאחר מכן, להקליט את הנפח של פתרון סוכרוז ומים נצרך כדי לאפשר חישוב של הזיקה כדי sucrose העדפה עבור כל בעל חיים. למבחן השחייה הכפויה של פורסולט, 30 עד 33 ימים לאחר הניתוח, יש למקם תחילה כל חולדה בצילינדר פרספקס אנכי המכיל 80 ס"מ של 25 מעלות צלזיוס במשך 15 דקות. בתום תקופת ההרגעה, אפשרו לחולדה להתייבש במשך 15 דקות במתחם המחומם ב-32 מעלות צלזיוס לפני החזרת החיה לכלוב הביתי שלה.למחרת, להחזיר את החולדה לתוך הצילינדר במשך חמש דקות אחרונה, הקלטת הבדיקה חמש דקות כדי לאפשר חישוב של משך הזמן הכולל של חוסר תנועה במהלך תקופה זו. ניתוח היסטולוגי חושף נפח אוטם מובהק סטטיסטית כאחוז מנפח המוח הכולל לאחר MCAO בהשוואה לבעלי חיים בקבוצת הביקורת המזויפת. בצקת מוחית מובהקת סטטיסטית נצפית גם בבעלי החיים הניסיוניים בהשוואה לקבוצת הביקורת המזויף.בעלי חיים MCAO להפגין הופעות נוירולוגיות נמוכות יותר בהשוואה לבעלי חיים המופעלים על ידי זיוף ב 50 דקות, 24 שעות, ושבעה ימים לאחר הניתוח. חולדות MCAO גם צורכות כמות נמוכה משמעותית של סוכרוז ומציגות חוסר תנועה ארוך יותר במהלך מבחני השחייה הכפויה של פורסלט בהשוואה לבעלי החיים המופעלים על ידי זיופים. זהו מודל חשוב למחקרי שבץ התנהגותי והוא יכול לשמש ככלי להערכת טיפולים עתידיים או מתן נתונים פרה-קליניים קריטיים על היעילות של חומרים טיפוליים.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

שימוש בלחץ חברתי כרוני לדיכאון לאחר לידה בדגם מניקות מכרסמים

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

פרוצדורה כדי לחקור את ההשפעה של הגבלת מזון ממושכת בהרואין מחפש אצל חולדות מתנזרות

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

העדפות שומן: דגם רומן של התנהגות אכילה בחולדות

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

נוהל ללב התחדשות מושרה הקשר של התנהגות אלכוהול מחפשי מיזוג הפבלובית בחולדות

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

מועצת החור השתנה - מדידת התנהגות, קוגניציה ואינטראקציה חברתית בעכברים וחולדות

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

זיהוי חסרונות התנהגותיים אצל חולדות לאחר פגיעה מוחית טראומטית

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

הפיכה Deactivations קירור-induced ללמוד תרומות קורטיקלית מכשול זיכרון של החתול הליכה

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

שיטה חדשה עבור גרימת התנהגות כמו דיכאון אצל חולדות

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

מדגדג, טכניקה להשראת השפעה חיובית בעת טיפול חולדות

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

בדיקת Metacognitive להגיב באמצעות מבוסס על ריח מושהית מבחן התאמה-כדי-Sample בחולדות

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...