Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
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हम फिजियोलॉजी विभाग के प्रोफेसर Olena Severynovska, जीव विज्ञान, पारिस्थितिकी के संकाय, और चिकित्सा, उनके समर्थन और हमारी चर्चाओं के लिए उपयोगी योगदान के लिए, Dnipro, यूक्रेन Honchar Dnipro विश्वविद्यालय, डीएनआईपीआरओ, धंयवाद । प्राप्त डाटा आरके की पीएचडी थीसिस का हिस्सा है ।

बेन-Gurion विश्वविद्यालय के दक्खिन के पशु देखभाल समिति, इसराइल सभी उपचार और परीक्षण इस प्रोटोकॉल में प्रयुक्त प्रक्रियाओं को मंजूरी दे दी ।
1. प्रयोगात्मक प्रक्रिया के लिए चूहों की तैयारी
<p class="jove...

एक तरीका है जिसमें MCAO तकनीक यहां प्रस्तुत सुरक्षित समझा जा सकता है की तुलना में मूल MCAO मॉडल तथ्य यह है कि ECA और उसकी शाखाओं, पश्चकपाल धमनी सहित, टर्मिनल जिह्वा, और जंभिक धमनी से समझौता नहीं कर रहे है से सचित?...

स्ट्रोक संयुक्त राज्य अमेरिका1,2,3में मौत की बीमारी की सूची पर चौथा है, जबकि यह विकसित देशों में वयस्कों में विकलांग के बहुमत4का कारण बनता है; यह स्ट्रोक दुनिया के सबसे महत्वपूर्ण स्वास्थ्य के मुद्दों के बीच एक प्रमुख दावेदार बनाता है । स्ट्रोक में सामान्य स्थिति-जीवित रोगियों के लगभग 15%-४०% स्थायी विकलांगता पीड़ित के साथ, 20% संस्थागत देखभाल की आवश्यकता होती है 3 महीने स्ट्रोक शुरुआत के बाद5, और के बारे में एक तिहाई 6 महीने के survivals दूसरों की जरूरत है उन्हें जीने में मदद करने के लिए के माध्यम से प्रत्येक दिन6। स्ट्रोक कथित तौर पर भी बढ़ती राष्ट्रीय स्वास्थ्य व्यय7के लिए खातों । अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन से अनुमान २०१० में $५०,०००,०००,००० से अधिक संयुक्त राज्य अमेरिका में स्ट्रोक से संबंधित लागत है ।
न केवल स्ट्रोक के कारण व्यक्तियों के दीर्घकालिक नुकसान करता है, लेकिन कुछ बचे भावनात्मक और व्यवहार विकारों, जैसे पागलपन, थकान, चिंता, अवसाद, प्रलाप, और आक्रामकता के रूप में पीड़ित करते है9,10,11 ,12,13,14। एक स्ट्रोक के बाद सबसे आवर्ती मनोवैज्ञानिक अगली कड़ी के बाद स्ट्रोक अवसाद (PSD) है, के बारे में 40%-survivals15,16,17के ५०% में पता चला । स्ट्रोक प्रेरित अवसाद में वृद्धि हुई रुग्णता और मृत्यु दर18,19,20,21,22। PSD के pathophysiology पूरी तरह से नहीं जाना जाता है, लेकिन यह जाहिरा तौर पर कई कारकों के कारण होता है और विकलांगता, संज्ञानात्मक हानि से जुड़ा हुआ है, और23घाव साइट ।
फोकल ब्रेन ischemia के चूहे मॉडल, mcao द्वारा बनाई गई, स्ट्रोक24,25,26,27के सबसे व्यापक पशु मॉडल है । में आईसीए के माध्यम से एमसीए अधिविष् ट द्वारा चूहों में PSD के प्रेरण का प्रदर्शन, तकनीक है कि मृत्यु दर और mcao मॉडल में परिवर्तनशीलता को ंयूनतम28कार्यरत हैं ।
इस प्रोटोकॉल का प्राथमिक उद्देश्य आईसीए, mcao के एक संशोधित मॉडल, जो मृत्यु दर और परिवर्तनशीलता के परिणाम को कम कर देता है के माध्यम से एमसीए को अधिविष् ट द्वारा चूहों में PSD उत्प्रेरण के लिए चरणों की रूपरेखा है28। विशिष्ट उद्देश्य न्यूरोलॉजिकल और हिस्टोलॉजिकल परीक्षा (स्नायविक गंभीरता स्कोर [एनएसएस] निर्धारित करने, रोधगलन क्षेत्र की मात्रा, और मस्तिष्क edema) MCAO की प्रभावकारिता की पुष्टि करने और व्यवहार परीक्षण का उपयोग करने के लिए जांच करने के लिए शामिल है भावनात्मक विकारों के विकास पर इस MCAO प्रक्रिया के प्रभाव, मुख्य रूप से PSD ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

बाद स्ट्रोक अवसाद (PSD) सभी मनोरोग एक इस्कीमिक स्ट्रोक से उत्पंन जटिलताओं के सबसे आवर्ती है । एक बड़ा बहुमत (के बारे में ६०%) सभी इस्कीमिक स्ट्रोक रोगियों के PSD, एक विकार के लिए एक इस्कीमिक स्ट्रोक की वृद्धि हुई मौत और स्वास्थ्य में गिरावट के लिए संबंधित अग्रदूत माना जाता से पीड़ित हैं । PSD के pathophysiology अभी भी अस्पष्ट है । विकास और PSD के आगे की घटना के तंत्र का अध्ययन करने के लिए, और एक चिकित्सा खोजने के लिए, हम एक नया प्रोटोकॉल है कि चूहों में आंतरिक कैरोटिड धमनी (आईसीए) के माध्यम से मध्य मस्तिष्क धमनी (एमसीए) अधिविष् ट की आवश्यकता है विकसित करने का प्रयास किया । यह प्रोटोकॉल मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा (MCAO) के माध्यम से चूहों में प्रेरित PSD के एक मॉडल का वर्णन करता है । इसके अलावा प्रयोग में इस्तेमाल किया porsolt मजबूर परीक्षण और सुक्रोज वरीयता परीक्षण की पुष्टि और जांच के तहत चूहों की अवसादग्रस्तता मूड का मूल्यांकन करने के लिए । बल्कि बाहरी कैरोटिड धमनी (ECA), के रूप में मूल प्रक्रिया के लिए निर्धारित के माध्यम से कैथेटर डालने से, इस MCAO तकनीक monofilament सीधे ICA के माध्यम से गुजर रहा है । इस MCAO तकनीक कुछ साल पहले विकसित किया गया था और मृत्यु दर और परिवर्तनशीलता में कमी की ओर जाता है । आमतौर पर यह स्वीकार किया जाता है कि प्रयुक्त मापदंड जैविक मॉडलों के चयन में पसंद किए जाते हैं । इस प्रोटोकॉल के साथ प्राप्त आंकड़ों से पता चलता है कि mcao के इस मॉडल को चूहों में PSD उत्प्रेरण का एक तरीका हो सकता है और संभावित रोगपायोलॉजी और नई दवाओं और अंय न्यूरोप्रोटेक्टिव एजेंटों के भविष्य के विकास की समझ के लिए नेतृत्व कर सकते हैं ।

Histological निष्कर्षों (तालिका 1) कुल मस्तिष्क (पी < ०.०००१) के बाद mcao के प्रतिशत के रूप में एक सांख्यिकीय महत्वपूर्ण रोधगलितांश मात्रा से पता चला जब नकली नियंत्रण समूह में पशुओं की तुलना मे...

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A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

यहाँ हम आंतरिक मन्या धमनी के माध्यम से मध्य मस्तिष्क धमनी को अधिविष् ट द्वारा चूहों में पोस्ट स्ट्रोक अवसाद को प्रेरित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । हम porsolt मजबूर परीक्षण तैरना और सुक्रोज वरीयता परीक्षण की पुष्टि करने और प्रेरित अवसादग्रस्तता मूड का मूल्यांकन करने के लिए ।

चूहों में पोस्ट स्ट्रोक अवसाद उत्प्रेरण के लिए एक मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा तकनीक

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

हमारे प्रोटोकॉल चूहों में एक नया मध्यीय मस्तिष्क धमनी occlusion तकनीक का प्रस्ताव करने में मदद करने के लिए स्ट्रोक के बाद अवसाद के विकास के तंत्र का अध्ययन और एक और अधिक कुशल चिकित्सा खोजने के लिए । हमारी तकनीक का मुख्य लाभ वजन में परिवर्तन, मस्तिष्क एडिमा, और इनफाक्ट वॉल्यूम में परिवर्तनशीलता को कम करने और प्रक्रिया से संबंधित मौतों को कम करने की क्षमता है। एक पुरुष ३०० से ३५०-ग्राम Sprague Dawley चूहा में पूंछ चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करने के बाद, एक ३७ डिग्री सेल्सियस हीटिंग प्लेट पर जानवर जगह है और कोर शरीर के तापमान की निगरानी के लिए एक गुदा जांच का उपयोग करें ।जानवर की आंखों पर मरहम लगाएं और गर्दन से बालों को शेव करें। फिर, 70 प्रतिशत अल्कोहल क्लोरहेक्सीडीन के साथ उजागर त्वचा को कीटाणुरहित करें, और मानक तकनीकों के अनुसार ऑक्सीक्लूजन करने से पहले बाँझ सर्जिकल ड्रैप के साथ चूहे को कवर करें। न्यूरोलॉजिकल गंभीरता स्कोर प्राप्त करने के लिए, एक सपाट सतह पर एक ऑक्सलेड चूहा रखें और जानवर को स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित करने की अनुमति दें।एक मिनट के बाद, धीरे से पूंछ से चूहे को पीछे खींचें और जानवर की चाल प्रतिक्रिया को ग्रेड करें। इनफार्ट वॉल्यूम को मापने के लिए, तैयार दाग मस्तिष्क स्लाइस को 1, 600 बाय 1, 600 डॉट्स प्रति इंच रिज़ॉल्यूशन और क्रॉप पर स्कैन करें और सभी छवियों के लिए पैमाने का मानकीकरण करें। फिर, मानकीकृत छवियों को एक उपयुक्त छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर प्रोग्राम में लोड करें और पूरे मस्तिष्क स्लाइस के प्रतिशत के रूप में इनफार्ट आकार निर्धारित करने के लिए लगातार छह दो मिलीमीटर स्लाइस में चिह्नित पल्लर के क्षेत्र को मापने के लिए एक ट्रेसिंग टूल का उपयोग करें।सर्जरी के 30 से 33 दिन बाद, जानवरों को अलग-अलग पिंजरों में एक बंद, शांत, प्रकाश नियंत्रित कमरे में स्थानांतरित करें, और प्रत्येक पिंजरे में 1% सुक्रोज समाधान के 100 मिलीलीटर युक्त बोतल को 24 घंटे के लिए रखें। अगले दिन बोतलों के साथ-साथ खाने-पीने का पानी 12 घंटे के लिए निकाल लें। अभाव अवधि के अंत में, एक बोतल रखें जिसमें 1% सुक्रोज समाधान के 100 मिलीलीटर और एक बोतल जिसमें 100 मिलीलीटर नल का पानी चार घंटे के लिए प्रत्येक पिंजरे में होता है।फिर, प्रत्येक जानवर के लिए सुक्रोज वरीयता के लिए आत्मीयता की गणना की अनुमति देने के लिए सुक्रोज समाधान और पानी की मात्रा रिकॉर्ड करें। पोर्सोल्ट के जबरन तैरने वाले परीक्षण के लिए, सर्जरी के 30 से 33 दिन बाद, प्रत्येक चूहे को 15 मिनट के लिए 25 डिग्री सेल्सियस पानी के 80 सेंटीमीटर वाले ऊर्ध्वाधर प्लेक्सीग्लास सिलेंडर में रखें। आदत अवधि के अंत में, चूहे को अपने घर पिंजरे में जानवर लौटने से पहले 32 डिग्री सेल्सियस पर गर्म बाड़े में 15 मिनट के लिए सूखने की अनुमति दें।अगले दिन, चूहे को अंतिम पांच मिनट के लिए सिलेंडर में वापस करें, उस अवधि के दौरान गतिहीनता की कुल अवधि की गणना की अनुमति देने के लिए पांच मिनट की परीक्षा रिकॉर्ड करते हैं। हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण नकली नियंत्रण समूह में जानवरों की तुलना में कुल मस्तिष्क की मात्रा के बाद एमसीएओ के प्रतिशत के रूप में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण इनफार्ट वॉल्यूम का पता चलता है। नकली नियंत्रण समूह की तुलना में प्रायोगिक जानवरों में एक सांख्यिकीय-महत्वपूर्ण मस्तिष्क एडीमा भी मनाया जाता है।एमसीएओ जानवर 50 मिनट, 24 घंटे और सर्जरी के बाद सात दिनों में नकली संचालित जानवरों की तुलना में कम न्यूरोलॉजिकल प्रदर्शन का प्रदर्शन करते हैं। एमसीएओ चूहे भी सुक्रोज की काफी कम मात्रा का उपभोग करते हैं और नकली-संचालित जानवरों की तुलना में पोर्साल्ट के मजबूर-तैरने वाले परीक्षणों के दौरान लंबी गतिहीनता प्रदर्शित करते हैं। यह व्यवहार स्ट्रोक अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण मॉडल है और भविष्य के उपचारों का आकलन करने या चिकित्सीय पदार्थों की प्रभावकारिता पर महत्वपूर्ण प्रीक्लिनिकल डेटा प्रदान करने के लिए एक उपकरण के रूप में काम कर सकता है।

Research

JoVE Journal

Behavior

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