Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
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私たちは、生理学、生態学、医学の学部の Severynovska Olena 教授、Oles Honchar ドニプロペトロウシク大学、ドニプロペトロウシク、ウクライナの彼女のサポートと私たちの議論への有益な貢献に感謝します。得られたデータは、R.K. の博士論文の一部です。

ネゲブのベン・グリオン大学の動物管理委員会, イスラエルは、このプロトコルで使用されるすべての治療および試験手順を承認しました.
1. 実験手順におけるラットの作製
注:体重 300-350 g の成人男性スプレイグ-スプラーグラットを選択します。
<ol><li>ラットを、ケージあたり4個、22° c、40% の湿度でビバリウムで、逆12時間の明暗サイ...

ここで提示された MCAO 技術が元の MCAO モデルよりも安全であると考えられる方法の1つは、後頭部動脈、末端舌、上顎動脈を含む ECA およびその枝が損なわれないという事実によって示されるICA によって MCA を閉塞するとき。ECA (およびその枝) の元の MCAO モデルのオフセットは、遠位に46それらを切開し、凝固させることによって、masticating 筋肉47への血管供給への妥協のために咀嚼の障害を?...

脳卒中は、米国1、2、3の死-ルワンダ以後疾患のリストに第四であり、それは先進国4の成人における障害の大部分を引き起こします。これにより、脳卒中は世界で最も重要な健康問題の中でも有数の候補となります。脳卒中生存患者における正常は稀であり, 約 15%-40% が永久的な障害を患っている生存の犠牲者, 20% は脳卒中発症後3ヶ月5, そして、彼らを助けるために他の人を必要とする6ヶ月の生存の約3分の1各日を通して6.脳卒中はまた、国民健康支出の増加を考慮していると伝えられている7.アメリカ心臓協会からの推定値は、20108の $500億以上で米国の打撃関連コストを持っています。
脳卒中は、個人の長期的な損害を引き起こすだけでなく、一部の生存者は、認知症、疲労、不安、抑うつ、せん妄、および攻撃性などの感情的および行動障害に苦しむ傾向があります9,10,11 、12、13、14。脳卒中後の最も再発性の心理的な続編は、脳卒中後の抑うつ (PSD) であり、生存15,16,17の約 40%-50% で診断されている。脳卒中誘発性うつ病は、18、19、20、21、22の罹患率および死亡率の増加をもたらす。PSD の病態生理学は完全には知られていないが、それは明らかに複数の要因によって引き起こされ、障害、認知障害、および病変部位23にリンクされている。
MCAO によって作成された病巣脳虚血のラットモデルは、脳卒中24、25、26、27の最も広範な動物モデルである。ICA を介して MCA を閉塞させることによりラットにおける PSD の誘導を実証する際に、MCAO モデルにおける死亡率および変動性を最小化する技術が採用されている28.
このプロトコルの主な目的は、MCAO の修正モデルである ICA を介して MCA を閉塞させることによって、ラットの PSD を誘発する手順の概略を示すことであり、これにより死亡率と変動性28の結果が減少する。具体的な目的としては、神経学的・組織学的検査 (神経性重症度スコア [NSS]、梗塞ゾーンの体積、脳浮腫) を実施し、MCAO の有効性を検証し、行動検査を用いてこの MCAO プロシージャが感情的障害の発症に及ぼす影響 (主に PSD)

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

脳卒中後うつ病 (PSD) は、虚血性脳卒中に起因するすべての精神医学的合併症の最も再発性である。大多数 (約 60%)すべての虚血性脳卒中患者が PSD に罹患し、死亡および健康の低下に対する虚血性脳卒中関連前駆体であると考えられる障害である。PSD の病態生理学は依然として不明瞭である。さらに、PSD の発症・発生のメカニズムを研究し、治療法を見出すために、ラットの内部頸動脈 (ICA) を介して中大脳動脈 (MCA) を閉塞させることを必要とする新たなプロトコールの開発を試みた。このプロトコルは、中大脳動脈閉塞 (MCAO) を介してラットに誘発される PSD のモデルを記述する。また、実験に使用される Porsolt 強制水泳試験とショ糖の嗜好試験は、調査中のラットの抑うつ気分を確認し、評価することである。元の手順について規定されているように、外部頚動脈 (ECA) を通してカテーテルを挿入するのではなく、この MCAO 技術は、ICA を直接通過するモノフィラメントを有する。この MCAO 技術は数年前に開発され、死亡率と変動性の低下につながります。使用される基準が生物学的モデルの選択において好ましいことは一般に受け入れられている。このプロトコルで得られたデータは、MCAO のこのモデルは、ラットの PSD を誘発する方法である可能性があり、潜在的に新しい薬やその他の神経保護剤の病態生理学と将来の発展の理解につながる可能性があることを示しています。

組織学的所見 (表 1) は、偽対照群の動物と比較した場合の全脳 (p < 0.0001) MCAO に対する百分率として統計的有意な梗塞体積を明らかにした。また、実験群 (p < 0.0003) からの評価を偽対照群のものと並行して配置した場合には統計学的に有意な脳浮腫も報告された。
得られた NSS スコアは、表2に示さ...

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A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

ここでは、内部頚動脈を介して中大脳動脈を閉塞させることによってラットに脳卒中後うつ病を誘導するプロトコールを提示する。私達は誘発された抑うつ気分を確認し、評価するために Porsolt 強制水泳テストおよびスクロースの好みテストを使用する。

ラットの脳卒中後うつ病を誘導するための中大脳動脈閉塞技術

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

我々のプロトコルは、脳卒中後うつ病の発症のメカニズムを研究し、より効率的な治療法を見つけるのを助けるためにラットの新しい内側脳動脈閉塞技術を提案する。私たちの技術の主な利点は、体重変化、脳浮腫、梗塞量の変動を減らし、処置関連死を最小限に抑える能力です。オスの300〜350グラムのスプレイグ・ドーリーラットの尾ピンチに対する応答の欠如を確認した後、動物を摂氏37度の加熱プレートに置き、直腸プローブを使用してコア体温を監視します。動物の目に軟膏を塗布し、首から髪を剃ります。次いで、70%アルコールクロルヘキシジンで露出した皮膚を消毒し、標準的な技術に従って閉塞を行う前に無菌外科用ドレープでラットを覆う。神経学的重症度スコアを得るために、閉塞したラットを平らな表面に置き、動物が自由に動き出すことを可能にする。1分後、ネズミを尻尾で後ろ向きにそっと引っ張り、動物の歩行反応を等級付けします。梗塞の体積を測定するには、調製された染色された脳スライスを1,600インチの解像度で1,600ドットでスキャンし、トリミングしてすべての画像のスケールを標準化します。次に、標準化された画像を適切な画像解析ソフトウェアプログラムにロードし、トレースツールを使用して、マークされたパーラの面積を6つの連続した2ミリメートルスライスで測定し、梗塞サイズを脳全体のスライス全体の割合として決定します。手術後30~33日後、動物を個々のケージの中の閉鎖的で静かで軽く制御された部屋に移し、1%スクロース溶液100ミリリットルを含むボトルを各ケージに24時間入れます。翌日、ボトルと飲食水を12時間取り除きます。剥奪期間の終わりに、1%スクロース溶液の100ミリリットルを含むボトル1本と、各ケージに100ミリリットルの水道水を含むボトル1本を4時間置きます。次に、消費したスクロース溶液と水の体積を記録し、各動物のスクロース好みに対する親和性の計算を可能にする。ポルソルトの強制泳ぎ試験では、手術後30~33日後、摂氏25度の80センチメートルを含む垂直プレキシガラスシリンダーに各ラットを15分間置きます。習慣期の終わりに、ラットが摂氏32度で加熱されたエンクロージャで15分間乾燥してから、動物を自宅のケージに戻します。翌日、ラットを最後の5分間シリンダーに戻し、5分間のテストを記録して、その期間中の不動の総持続時間を計算できるようにします。組織学的分析は、シャム対照群の動物と比較した場合のMCAO後の総脳容積に対する割合として統計的に有意な梗塞容積を明らかにする。統計的に有意な脳浮腫は、偽の対照群と比較して実験動物でも観察される。MCAO動物は、手術後50分、24時間、7日間でシャム作動動物と比較して神経学的性能が低い。MCAOラットはまた、スクロースの量が大幅に少なく、ポルトー塩の強制泳ぎ検査中に、シャム操作動物と比較してより長い不動を示す。これは行動性脳卒中研究のための重要なモデルであり、将来の治療法を評価したり、治療物質の有効性に関する重要な前臨床データを提供するためのツールとして役立つ可能性があります。

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

げっ歯類の授乳でモデル産後うつ病への慢性的社会的ストレスを使用

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

禁欲ラットで探しているヘロインに長期の食事制限の影響を研究するための手順

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Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

脂肪嗜好：摂食行動の新規モデルラットにおける

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性のリニューアルを観察する手順

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The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

変更された穴会は - マウスとラットにおける行動、認知と社会的相互作用を測定する

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

外傷性脳損傷後のラットの行動の赤字を検出

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

リバーシブルの冷却誘起 Deactivations 歩行猫障害メモリへの皮質の貢献を研究するには

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

ラットにおけるうつ病のような動作を誘導する新しい方法

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

くすぐり、ラットを処理するときに肯定的な影響を誘発するためのテクニック

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

ラットにおける試合のサンプル テストを延期臭ベースを使用してメタ認知的応答のテスト

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...