Name: a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats
Uploaded: 2019-05-22T13:00:00
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Agradecemos ao professor Olena Severynovska do departamento de Fisiologia, faculdade de biologia, ecologia e medicina, Oles Honchar Dnipro University, Dnipro, Ucrânia por seu apoio e contribuições úteis para nossas discussões. Os dados obtidos fazem parte da tese de doutorado da RK.

O Comitê de cuidado animal da Universidade de Ben-Gurion do Negev, Israel aprovou todos os procedimentos do tratamento e de teste usados neste protocolo.
1. preparação de ratos para o procedimento experimental
Nota: Selecione ratos machos adultos Sprague-Dawley pesando 300-350 g.
<ol><li>Abrigar os ratos, quatro por gaiola, em um Biotério a 22 ° c e 40% de umidade, com um ciclo de luz invertida de 12 h/escuro (luzes fora em 8:00 a.m.) e acess...

Uma das maneiras pelas quais a técnica de MCAO aqui apresentada pode ser considerada mais segura do que o modelo original de MCAO é ilustrada pelo fato de que o TCE e seus ramos, incluindo a artéria occipital, o terminal lingual e a artéria maxilar, não estão comprometidos ao oclusar o MCA através do ICA. O offset original do modelo de mcao do ECA (e de suas filiais), desdissecando distalmente e coagulando os46, causa a mastigação danificada, devido a um acordo à fonte vascular aos músc...

O AVC é o quarto na lista de doenças perpetradores da morte nos Estados Unidos1,2,3, enquanto provoca a maioria das deficiências em adultos nos países desenvolvidos4; Isto faz o curso um candidato principal entre as edições de saúde as mais significativas do mundo. A normalidade no acidente vascular cerebral-os pacientes sobreviventes é rara, com cerca de 15%-40% das vítimas de sobrevivência que sofrem de incapacidade permanente, 20% exigindo cuidados institucionais 3 meses após o início do AVC5, e cerca de um terço dos sobreviventes 6-mês precisando de outros para ajudá-los a viver através de cada dia6. O curso declaradamente esclarece também os gastos nacionais crescentes da saúde7. As estimativas da associação americana do coração têm custos do curso-relacionados nos Estados Unidos em mais de $50000000000 em 20108.
Não só o AVC causa danos a longo prazo dos indivíduos, mas alguns sobreviventes tendem a sofrer distúrbios emocionais e comportamentais, como demência, fadiga, ansiedade, depressão, delirium e agressão9,10,11 ,12,13,14. A sequela psicológica mais recorrente após um AVC é a depressão pós-AVC (PSD), diagnosticada em cerca de 40%-50% das sobrevivências15,16,17. A depressão induzida por AVC resulta em aumento da morbidade e mortalidade18,19,20,21,22. A fisiopatologia do PSD não é conhecida completamente, mas aparentemente é causada por múltiplos fatores e está ligada à incapacidade, comprometimento cognitivo e local da lesão23.
O modelo do rato da isquemia cerebral focal, criado por mcao, é o modelo animal o mais difundido do curso24,25,26,27. Ao demonstrar a indução de PSD em ratos por oclusar a MCA através da ICA, empregam-se técnicas que minimizam a mortalidade e a variabilidade no modelo de MCAO28.
O objetivo principal deste protocolo é delinear os passos para induzir PSD em ratos, oclusando o MCA através da AIC, um modelo modificado de MCAO, que reduz a mortalidade e o desfecho da variabilidade28. Os objetivos específicos incluem a realização de exames neurológicos e histológicos (determinando o escore de severidade neurológica [NSS], o volume da zona de infarto e o edema cerebral) para verificar a eficácia do MCAO e usar testes comportamentais para examinar a influência deste procedimento de MCAO no desenvolvimento de desordens emocionais, principalmente PSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbent pad</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Black lusterless perspex box</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>(120 cm &#215; 60 cm &#215; 60 cm), divided into a 25% central zone and the surrounding border zone</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bottles</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">ACBT0262SU</td>
			<td>150 ml bottles filled with 100 ml of water and 100 ml 1%(w/v) sucrose solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Electric Shock</td>
			<td>Heat System Ultasonic Inc.</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon-XL</td>
			<td colspan="2">Mennen Medical Ltd</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Imaging System</td>
			<td style="width:71px;">Kodak</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>For imaging and quantification</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Monofilament</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:71px;">Pharmacy</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Dry towels used for keeping rats dry after immersing them in water</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pexiglass cylinder</td>
			<td style="width:71px;">-</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>a 100 cm tall and 40 cm in diameter cylinder used for carrying out the forced swim test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Purina Chow</td>
			<td style="width:71px;">Purina</td>
			<td align="right" style="width:119px;">5001</td>
			<td>Rodent laboratory chow given to rats, mice and hamster is a life-cycle nutrition that has been used in biomedical researc for over 5 decades. Provided to rats ad libitum in this experiment</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rat Cages</td>
			<td style="width:71px;">Techniplast</td>
			<td style="width:119px;">2000P</td>
			<td>Conventional housing for rodents. Was used for housing rats throughout the experiment</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scanner&#160;</td>
			<td>Canon CanoScan</td>
			<td style="width:119px;">4200F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Video Camera</td>
			<td style="width:71px;">ETHO-VISION (Noldus)</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td>Digital video camera for high definition recording of rat behavior under open field test</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a middle cerebral artery occlusion technique for inducing post-stroke depression in rats

A depressão pós-AVC (PSD) é a mais recorrente de todas as complicações psiquiátricas resultantes de um AVC isquêmico. Uma maior maioria (cerca de 60%) de todos os pacientes com AVC isquêmico sofrem de PSD, um distúrbio considerado um precursor isquêmico relacionado ao AVC para aumento da morte e degradação na saúde. A fisiopatologia do PSD ainda é obscura. Para estudar o mecanismo de desenvolvimento e ocorrência de PSD ainda mais, e para descobrir uma terapia, tentamos desenvolver um novo protocolo que requer a oclusão da artéria cerebral média (MCA) através da artéria carótida interna (ICA) em ratos. Este protocolo descreve um modelo de PSD induzido em ratos através da oclusão da artéria cerebral média (MCAO). Também utilizado no experimento estão o teste de nadada forçada de Porsolt e o teste de preferência de sacarose para confirmar e avaliar o humor depressivo dos ratos investigação. Em vez de inserir o cateter através da artéria carótida externa (ECA), conforme estipulado para o procedimento original, esta técnica de MCAO tem o monofilamento passando diretamente pela AIC. Esta técnica de MCAO foi desenvolvida alguns anos há e conduz a uma redução na mortalidade e na variabilidade. É geralmente aceito que os critérios utilizados são preferidos na seleção de modelos biológicos. Os dados obtidos com este protocolo mostram que este modelo de MCAO poderia ser uma forma de induzir PSD em ratos e poderia potencialmente levar à compreensão da fisiopatologia e do desenvolvimento futuro de novas drogas e outros agentes neuroprotetores.

Os achados histológicos (tabela 1) revelaram um volume de infarto estatisticamente significante como percentual do cérebro total (p < 0, 1) pós-mcao quando comparados aos animais do grupo Sham-controle. Também foi relatado um edema cerebral estatisticamente significante quando a avaliação do grupo experimental (p < 0, 3) foi colocada lado a lado com a do grupo Sham-controle.
Os escores do...

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A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats

Aqui nós apresentamos um protocolo para induzir a depressão do borne-curso nos ratos obstruindo a artéria cerebral média através da artéria carotídea interna. Utilizamos o teste de nadada forçada de Porsolt e o teste de preferência de sacarose para confirmar e avaliar o humor depressivo induzido.

Uma técnica de oclusão da artéria cerebral média para induzir A depressão pós-AVC em ratos

Post-stroke depression (PSD) is the most recurrent of all psychiatric complications resulting from an ischemic stroke. A greater majority (about 60%) of ...

Nosso protocolo propõe uma nova técnica de oclusão da artéria cerebral medial em ratos para ajudar a estudar o mecanismo de desenvolvimento da depressão pós-acidente vascular cerebral e encontrar uma terapia mais eficiente. A principal vantagem de nossa técnica é sua capacidade de reduzir a variabilidade em alterações de peso, edema cerebral e volume de infarto, e minimizar mortes relacionadas ao procedimento. Depois de confirmar a falta de resposta ao aperto de cauda em um rato Desarmado macho de 300 a 350 gramas, coloque o animal em uma placa de aquecimento de 37 graus Celsius e use uma sonda retal para monitorar a temperatura corporal do núcleo.Aplique pomada nos olhos do animal e raspe o cabelo do pescoço. Em seguida, desinfete a pele exposta com 70% de clorexidina alcoólica, e cubra o rato com a cortina cirúrgica estéril antes de realizar a oclusão de acordo com as técnicas padrão. Para obter o escore de gravidade neurológica, coloque um rato ocluído em uma superfície plana e permita que o animal se mova livremente.Depois de um minuto, puxe suavemente o rato para trás pela cauda e a grade da resposta de marcha do animal. Para medir o volume de infarto, escaneie as fatias cerebrais manchadas preparadas em uma resolução de 1.600 por 1.600 pontos por polegada e corte e padronize a escala para todas as imagens. Em seguida, carregue as imagens padronizadas em um programa de software de análise de imagem apropriado e use uma ferramenta de rastreamento para medir a área de palidez marcada em seis fatias consecutivas de dois milímetros para determinar o tamanho do infarto como uma porcentagem de toda a fatia cerebral.30 a 33 dias após a cirurgia, transfira os animais para uma sala fechada, silenciosa e controlada pela luz em gaiolas individuais, e coloque uma garrafa contendo 100 mililitros de solução de 1% de sacarose em cada gaiola por 24 horas. No dia seguinte, retire as garrafas, bem como a comida e a água potável por 12 horas. Ao final do período de privação, coloque uma garrafa contendo 100 mililitros de solução de 1% de sacarose e uma garrafa contendo 100 mililitros de água da torneira em cada gaiola por quatro horas.Em seguida, registo o volume da solução de sacarose e da água consumida para permitir o cálculo da afinidade com a preferência por sacarose para cada animal. Para o teste de natação forçada de Porsolt, 30 a 33 dias após a cirurgia, primeiro lugar cada rato em um cilindro de plexiglass vertical contendo 80 centímetros de água celsius de 25 graus por 15 minutos. Ao final do período de habituação, permita que o rato seque por 15 minutos no recinto aquecido a 32 graus Celsius antes de devolver o animal à gaiola de origem.No dia seguinte, devolva o rato ao cilindro por cinco minutos finais, registrando o teste de cinco minutos para permitir o cálculo da duração total da imobilidade durante esse período. A análise histológica revela um volume de infarto estatisticamente significativo como uma porcentagem do volume total do cérebro pós-MCAO quando comparado com animais do grupo de controle falso. Um edema cerebral estatisticamente significativo também é observado nos animais experimentais em comparação com o grupo de controle falso.Animais MCAO demonstram desempenho neurológico mais baixo em comparação com animais operados por vergonha em 50 minutos, 24 horas e sete dias após a cirurgia. Os ratos de MCAO também consomem uma quantidade significativamente menor de sacarose e exibem uma imobilidade mais longa durante os testes de natação forçada de Porsalt em comparação com os animais operados por farsa. Este é um modelo importante para estudos de avc comportamental e poderia servir como uma ferramenta para avaliar terapias futuras ou fornecer dados pré-clínicos críticos sobre a eficácia de substâncias terapêuticas.

Research

JoVE Journal

Behavior

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

Usando Social Stress Crônico ao Modelo depressão pós-parto em lactação Roedores

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

Comportamento

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

Fat Preference: A Novel Model of Eating Behavior in Rats

Preferência de Gordura: Um Modelo Novel de comportamento alimentar em ratos

Obesity is a growing problem in the United States of America, with more than a third of the population classified as obese. One factor contributing to ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Um procedimento para Observar Renovação induzida por Contexto de pavloviano condicionado Comportamento Álcool-seeking em Ratos

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

The Hole Board Modificado - Medir Comportamento, Cognição e Interação Social em camundongos e ratos

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Reversible Cooling-induced Deactivations to Study Cortical Contributions to Obstacle Memory in the Walking Cat

Reversíveis induzida pelo resfriamento desativações para estudar Cortical contribuições para a memória do obstáculo o gato ambulante

On complex, naturalistic terrain, sensory information about an environmental obstacle can be used to rapidly adjust locomotor movements for avoidance. For ...

A New Method for Inducing a Depression-Like Behavior in Rats

Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

Contagious depression is a phenomenon that is yet to be fully recognized and this stems from insufficient material on the subject. At the moment, there is ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Cócegas, uma técnica para induzir o efeito positivo ao manusear ratos

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Testing for Metacognitive Responding Using an Odor-based Delayed Match-to-Sample Test in Rats

Testes para responder metacognitiva usando um Odor baseado adiada partida-para-amostra teste em ratos

Metamemory involves the cognitive ability to assess the strength of one&#39;s memories. To explore the possibility of metamemory in non-human animals, ...