Name: functional magnetic resonance spectroscopy at 7 t in the rat barrel cortex during whisker activation
Uploaded: 2019-02-08T14:00:00
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Este trabajo fue apoyado por la concesión del rastro de la empresa LabEx, referencia ANR-10-LABX-57 y un Francés-Suiza ANR-FNS otorga referencia ANR-15-CE37-0012. Los autores agradecen Aurélien Trotier por su apoyo técnico.

Animales todos los procedimientos se llevaron a cabo siguiendo las directrices de Experimentación Animal de la Directiva Europea del Consejo de las comunidades de 24 de noviembre de 1986 (86/609/CEE). El protocolo se reunieron las directrices éticas del Ministerio francés de agricultura y bosques y fue aprobado por los comités de ética locales (Comité d 'éthique pour L' expérimentation Animale Burdeos n ° 50112090-A).
Nota: Durante las mediciones de Señor, un nivel adecuado de aneste...

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	<li>Pellerin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-dependent+regulation+of+energy+metabolism+by+astrocytes:+an+update.">Activity-dependent regulation of energy metabolism by astrocytes: an update.</a> Glia. 55, 1251-1262 (2007).</li><li>Pellerin, L., Magistretti, P. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+the+physiological+effects+of+alpha2-agonists+related+to+the+clinical+use+of+medetomidine+in+small+animal+practice.">A review of the physiological effects of alpha2-agonists related to the clinical use of medetomidine in small animal practice.</a> Canadian Veterinary Journal. 44, 885-897 (2003).</li><li>Weber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+fully+noninvasive+and+robust+experimental+protocol+for+longitudinal+fMRI+studies+in+the+rat.">A fully noninvasive and robust experimental protocol for longitudinal fMRI studies in the rat.</a> Neuroimage. 29, 1303-1310 (2006).</li><li>Hartmann, M. J., Johnson, N. J., Towal, R. B., Assad, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+characteristics+of+rat+vibrissae:+resonant+frequencies+and+damping+in+isolated+whiskers+and+in+the+awake+behaving+animal.">Mechanical characteristics of rat vibrissae: resonant frequencies and damping in isolated whiskers and in the awake behaving animal.</a> The Journal of Neuroscience. 23, 6510-6519 (2003).</li><li>Prichard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lactate+rise+detected+by+1H+NMR+in+human+visual+cortex+during+physiologic+stimulation.">Lactate rise detected by 1H NMR in human visual cortex during physiologic stimulation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88, 5829-5831 (1991).</li><li>Sappey-Marinier, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+photic+stimulation+on+human+visual+cortex+lactate+and+phosphates+using+1H+and+31P+magnetic+resonance+spectroscopy.">Effect of photic stimulation on human visual cortex lactate and phosphates using 1H and 31P magnetic resonance spectroscopy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 12, 584-592 (1992).</li><li>Mazuel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+neuronal+MCT2+knockdown+in+the+rat+somatosensory+cortex+reduces+both+the+NMR+lactate+signal+and+the+BOLD+response+during+whisker+stimulation.">A neuronal MCT2 knockdown in the rat somatosensory cortex reduces both the NMR lactate signal and the BOLD response during whisker stimulation.</a> PLoS One. 12, e0174990 (2017).</li><li>Castellano, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NAA+and+NAAG+variation+in+neuronal+activation+during+visual+stimulation.">NAA and NAAG variation in neuronal activation during visual stimulation.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 45, 1031-1036 (2012).</li><li>Sarchielli, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+1H-MRS+findings+in+migraine+patients+with+and+without+aura+assessed+interictally.">Functional 1H-MRS findings in migraine patients with and without aura assessed interictally.</a> Neuroimage. 24, 1025-1031 (2005).</li><li>Baslow, M. H., Hrabe, J., Guilfoyle, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+relationship+between+neurostimulation+and+N-acetylaspartate+metabolism+in+the+human+visual+cortex:+evidence+that+NAA+functions+as+a+molecular+water+pump+during+visual+stimulation.">Dynamic relationship between neurostimulation and N-acetylaspartate metabolism in the human visual cortex: evidence that NAA functions as a molecular water pump during visual stimulation.</a> Journal of Molecular Neuroscience. 32, 235-245 (2007).</li><li>Mangia, S., Tkac, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+relationship+between+neurostimulation+and+N-acetylaspartate+metabolism+in+the+human+visual+cortex:+evidence+that+NAA+functions+as+a+molecular+water+pump+during+visual+stimulation.">Dynamic relationship between neurostimulation and N-acetylaspartate metabolism in the human visual cortex: evidence that NAA functions as a molecular water pump during visual stimulation.</a> Journal of Molecular Neuroscience. 35, 245-248 (2008).</li><li>Baslow, M. H., Hrabal, R., Guilfoyle, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+of+the+authors+to+the+Letter+by+Silvia+Mangia+and+Ivan+Tkac.">Response of the authors to the Letter by Silvia Mangia and Ivan Tkac.</a> Journal of Molecular Neuroscience. 35, 247-248 (2008).</li><li>Barros, L. F., Weber, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CrossTalk+proposal:+an+important+astrocyte-to-neuron+lactate+shuttle+couples+neuronal+activity+to+glucose+utilisation+in+the+brain.">CrossTalk proposal: an important astrocyte-to-neuron lactate shuttle couples neuronal activity to glucose utilisation in the brain.</a> The Journal of Physiology. 596, 347-350 (2018).</li><li>Bak, L. K., Walls, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CrossTalk+opposing+view:+lack+of+evidence+supporting+an+astrocyte-to-neuron+lactate+shuttle+coupling+neuronal+activity+to+glucose+utilisation+in+the+brain.">CrossTalk opposing view: lack of evidence supporting an astrocyte-to-neuron lactate shuttle coupling neuronal activity to glucose utilisation in the brain.</a> The Journal of Physiology. 596, 351-353 (2018).</li></ol>

La corteza del cañón, también llamada S1BF de la corteza somatosensorial o campo de barril, es una región dentro de la capa cortical IV que se puede observar mediante citocromo c oxidasa tinción9, y su organización es conocida ya que ha sido descrito en gran parte 10,11. Uno vibrisas está conectado a un barril, en que unos 19.000 neuronas se organizan en una columna12. La vía de la barba a barril corteza tie...

El cerebro posee mecanismos intrínsecos que permiten la regulación de su sustrato principal (por ejemplo, glucosa), tanto por su contribución y su utilización, dependiendo de las variaciones en la actividad cerebral local. Aunque la glucosa es el sustrato principal de energía para el cerebro, experimentos llevados a cabo en los últimos años han demostrado que lactato, que es producido por los astrocitos, podría ser un sustrato eficiente de la energía para las neuronas. Esto plantea la hipótesis de una lanzadera de lactato entre astrocitos y neuronas1. ANLS, astrositos neurona lactato transporte2, la teoría es todavía muy debatida pero ha llevado a la propuesta de la glucosa, en lugar de ir directamente a las neuronas, pueden entrar en los astrocitos, donde es metabolizado a lactato, un metabolito que es , entonces, transferido a las neuronas, que utilizan como sustrato energético eficiente. Existir un servicio de transporte en vivo, tendría varias consecuencias importantes tanto para descifrar las alteraciones metabólicas observadas para la comprensión de las técnicas básicas de proyección de imagen cerebral funcional (tomografía por emisión de positrones [PET]) en patologías del cerebro.
Para estudiar el metabolismo del cerebro y, particularmente, las interacciones metabólicas entre neuronas y astrocitos, cuatro técnicas principales están disponibles (no incluye micro-/ nanosensores): autorradiografía, animal doméstico, dos fotones fluorescente microscopia confocal y a la señora. Autorradiografía fue uno de los primeros métodos propuestos y proporciona imágenes de la acumulación regional de radioactivo 14C-2-deoxyglucose en rebanadas de cerebro, mientras PET rendimientos en vivo imágenes de la captación regional de radiactivo 18 F-desoxiglucosa. Ambos tienen la desventaja de la utilización de moléculas de irradiative mientras que la producción de imágenes de resolución espacial baja. Microscopía de dos fotones proporciona resolución celular de sondas fluorescentes, sino dispersión de la luz por tejido limita la profundidad de la proyección de imagen. Estas tres técnicas se han utilizado previamente para estudiar neuroenergetics en roedores durante barba estimulación3,4,5,6. En vivo MRS tiene la doble ventaja de ser no invasivo y no radiactivo, y se puede explorar cualquier estructura cerebral. Por otra parte, MRS puede ser realizado durante la activación neuronal, una técnica llamada a MRS funcional (fMRS), que se ha desarrollado muy recientemente en roedores7. Por lo tanto, se propone un protocolo para monitorizar el metabolismo cerebral durante la actividad cerebral por 1H-MRS en vivo y no invasor. El procedimiento se describe en ratas adultas saludables con la activación del cerebro obtenida por una soplo de aire barba estimulación realizada directamente en un reproductor de imágenes de resonancia magnética (de Sr.) T 7 pero se puede adaptar en animales genéticamente modificados, así como en cualquier condición patológica .

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 mL syringe with needle</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company, USA</td>
			<td>2020-10</td>
			<td>0.33 mm (29 G) x 12.7 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1H spectroscopy surface coil</td>
			<td>Bruker, Ettlingen, Germany</td>
			<td>T116344</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7T Bruker Biospec system</td>
			<td>Bruker, Ettlingen, Germany</td>
			<td>70/20 USR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arduino Uno based pulsing device</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezole</td>
			<td>V&#233;toquinol, S.A., France</td>
			<td>V8335602</td>
			<td>Antisedan, 4.28 mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breathing mask</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>TVM laboratoire, France</td>
			<td>40365</td>
			<td>Ocry gel 10 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction chamber</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
			<td>30x17x15 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inlet flexible pipe</td>
			<td>Gardena, Germany</td>
			<td>1348-20</td>
			<td>4.6-mm diameter, 3m long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane pump, Model 100 series vaporizer, classic T3</td>
			<td>Surgivet, Harvard Apparatus</td>
			<td>WWV90TT</td>
			<td>from OH 43017, U.S.A</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, liquid for inhalation</td>
			<td>Vertflurane, Virbac, France</td>
			<td>QN01AB06</td>
			<td>1000 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KD Scientific syringe pump</td>
			<td>KD sientific, Holliston, USA</td>
			<td>Legato 110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LCModel software</td>
			<td>LCModel Inc., Ontario, Canada</td>
			<td>6.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine hydrochloride</td>
			<td>V&#233;toquinol, S.A., France</td>
			<td>QN05CM91</td>
			<td>Domitor, 1 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropore roll of adhesive plaster</td>
			<td>3M micropore, Minnesota, United States</td>
			<td>MI912</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropore roll of adhesive plaster</td>
			<td>3M micropore, Minnesota, United States</td>
			<td>MI925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monitoring system of physiologic parameter</td>
			<td>SA Instruments, Inc, Stony Brook, NY, USA</td>
			<td>Model 1025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fresenius Kabi, Germany</td>
			<td>B05XA03</td>
			<td>0.9 % 250 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Outlet flexible pipe</td>
			<td>Gardena, Germany</td>
			<td>1348-20</td>
			<td>4.6-mm diameter, 4m long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paravision software</td>
			<td>Bruker, Ettlingen, Germany</td>
			<td>6.0.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral intravenous catheter</td>
			<td>Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon</td>
			<td>SP500930S</td>
			<td>22 G x 1&#34;, 0.85x25 mm, 35 mL/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat head coil</td>
			<td>Bruker, Ettlingen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodic heparin, injectable solution</td>
			<td>Choai, Sanofi, Paris, France</td>
			<td>B01AB01</td>
			<td>5000 IU/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solenoid control valves, plunger valve 2/2 way direct-acting</td>
			<td>Burkert, Germany</td>
			<td>3099939</td>
			<td>Model type 6013</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Terumo 2 ml syringe</td>
			<td>Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon</td>
			<td>SY243</td>
			<td>with 21 g x 5/8&#34; needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Terumo 5 mL syringe</td>
			<td>Terumo, Shibuya, Tokyo, Japon</td>
			<td>05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wistar RJ-Han rats</td>
			<td>Janvier Laboratories, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

functional magnetic resonance spectroscopy at 7 t in the rat barrel cortex during whisker activation

Espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) ofrece la oportunidad de medir el contenido de metabolitos cerebrales en vivo y no invasor. Gracias a avances tecnológicos durante la última década y el aumento de fuerza del campo magnético, ahora es posible obtener buena resolución espectros en vivo en el cerebro de la rata. Neuroenergetics (es decir, el estudio del metabolismo cerebral) y, especialmente, interacciones metabólicas entre los diferentes tipos de células han atraído cada vez más interés en los últimos años. Entre estas interacciones metabólicas, todavía se discute la existencia de un servicio de transporte de lactato entre neuronas y astrocitos. Por lo tanto, resulta de gran interés para realizar espectroscopia de resonancia magnética funcional del protón (1H-MRS) en un modelo de rata de cerebro activación y monitor de lactato. Sin embargo, el pico de lactato de metilo superpone picos de resonancia de lípidos y es difícil de cuantificar. El protocolo que se describe a continuación permite metabólico y lactato fluctuaciones monitorizada en un área cerebral activada. Activación cerebral se obtiene por la estimulación de la barba y 1H-MRS se realiza en la corteza activada cañón correspondiente, cuya área se detecta usando sangre oxígeno-nivel-dependiente de resonancia magnética funcional (fMRI en negrilla). Describen detalladamente todos los pasos: la elección de los anestésicos, bobinas y secuencias, alcanzar barba eficiente estimulación directamente en el imán y procesamiento de datos.

Este protocolo permite la cuantificación de las fluctuaciones de metabolitos durante la activación cerebral, que se obtiene por la estimulación de la barba derecha directamente en el imán.
En este estudio, el objetivo general del fMRI audaz era comprobar que la estimulación de la barba era eficiente, visualizar la zona de S1BF activada y para ubicar correctamente el voxel 1H-fMRS. El dispositivo incorporado para ...

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Functional Magnetic Resonance Spectroscopy at 7 T in the Rat Barrel Cortex During Whisker Activation

Espectroscopia de resonancia magnética funcional en 7 T en la corteza del cañón de rata durante la activación de la barba

Después de comprobar por sangre oxígeno-nivel-dependiente funcional resonancia magnética (fMRI en negrilla) que el correspondiente barril somatosensorial corteza área (llamado S1BF) está correctamente activado, el principal objetivo de este estudio es cuantificar el contenido de lactato fluctuaciones en los cerebros de rata activado por espectroscopia de resonancia magnética localizada del protón (1H-MRS) en el T. 7

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy offers the opportunity to measure cerebral metabolite contents in vivo and noninvasively. Thanks to ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la neurogenética y descifrar los cambios metabólicos que se producen entre los estados de reposo y activados. La principal ventaja de esta técnica es seguir esta variación in vivo en tiempo real de una manera no invasiva. En particular, esta técnica se puede aplicar a animales patológicos o modificados genéticamente, por ejemplo para determinar el papel de una proteína específica en la interacción metabólica entre las neuronas y las lyocellas. Comience colocando un sensor de respiración en la cama de imán y transfiriendo la rata a la cama de imán en la posición propensa con su nariz en la máscara de isoflurano y con el sensor de respiración situado entre la caja torácica y la cama de imán. Asegúrese de que los bigotes adecuados estén libres y asegure la rata con cinta adhesiva. Utilice cinta adhesiva para hacer una venta que atrapa todos los bigotes correctos y alinee el tubo de salida flexible del sistema de soplado de aire a lo largo de la cama de RMN de rata para que la parte que sale del tubo sea perpendicular y aproximadamente un centímetro y medio de la venta. A continuación, fije la tubería en su posición con más cinta. A continuación, conecte el tubo de entrada flexible de una fuente de aire comprimido a una entrada de válvula de control de solenoide y el tubo de salida a la salida de la válvula de control de solenoide, teniendo cuidado de que la válvula de control de solenoide permanezca fuera de la sala de imán. Utilice el puerto transistor transistor-lógica para conectar el dispositivo pulsante en la válvula solenoide y el imán y configure el dispositivo de modo que la frecuencia de pulsación sea de ocho hercios, el tiempo de pulsación sea de 20 segundos y el tiempo de descanso sea de 10 segundos. Para la estimulación del bigote coloque la rata con el cerebro en posición vertical y asegure al animal con barras para los oídos. Coloque la bobina de la matriz de volumen por encima de la cabeza y fije la matriz con cinta adhesiva. Encienda el sistema de soplado de aire para comprobar que la venta se mueve en la dirección anteroposterior sin rotación y sin fricción. A continuación, apague el sistema de soplado de aire y coloque la bobina del extremo de la cama en el centro del imán. Para la resonancia funcional dependiente del nivel de oxígeno en sangre, compruebe de nuevo el movimiento de venta y utilice una secuencia de localización para confirmar que la rata está bien posicionada. Arrastre la pestaña de secuencia del localizador al nombre de la instrucción y haga clic en Continuar. Si la ubicación está bien, arrastre la pestaña de secuencia T2 Star FID EPI al nombre de la instrucción, centre el campo de visión en el centro del cerebro y haga clic en la plataforma de ajuste para abrir la instrucción de escaneo editada. A continuación, grabe un mapa B0 e inicie la secuencia T2 Star FID EPI. Adquiera otra secuencia de localización como acaba de demostrarse para comparar con la primera y compruebe si la rata se ha movido durante la secuencia EPI FID de estrella T2. A continuación, vuelva a colocar el lecho en su posición inicial y retire la bobina de la matriz de volumen. Para procesar las imágenes, abra el archivo T2 Star FID EPI y lea la imagen T2 Star FID EPI en la pantalla de la imagen. Abra la ventana de inicio del controlador funcional y en la pestaña de procesamiento seleccione la ventana de imágenes funcionales. Defina el protocolo de estimulación y seleccione la ventana de protocolo, estableciendo el período de encendido en 40 y el período de apagado en 20.Haga clic en invertir la atribución y arrastre el control deslizante de estado de estimulación hacia la izquierda para seleccionar un valor de uno. En la ventana de preprocesamiento, establezca el filtro mediano en plano para el preprocesamiento y el filtro mediano 2D 3D para el postprocesamiento. A continuación, haga clic en ejecutar. Arrastre los cursores para ajustar la tabla de búsqueda de superposición y visualizar el área del cerebro activada. Para colocar correctamente la bobina de superficie para la espectroscopia de resonancia magnética de protones o MRS, gire la cabeza aproximadamente 30 grados en el sentido de las agujas del reloj para que la bobina de superficie se pueda colocar justo por encima de la corteza del barril izquierdo en una posición horizontal y situada en el centro del imán cuando esté dentro del imán. Enchufe la bobina de superficie y fije la bobina en su lugar con cinta adhesiva. Compruebe que la venta todavía puede moverse correctamente cuando el sistema de soplado de aire está encendido. A continuación, coloque la cama en el imán y compruebe de nuevo el movimiento de venta.Confirme la posición correcta del animal con la secuencia de localización como se ha demostrado y arrastre la pestaña de secuencia T2-TurboRARE a la ventana de nombre de la instrucción. A continuación, haga clic en continuar para ejecutar el programa de análisis y permitir la localización correcta del voxel dentro de la corteza de campo de barril somatosensorial. Al final de la exploración arrastre la pestaña de secuencia láser a la ventana de nombre de la instrucción y coloque el voxel en el centro del área de la corteza de campo del barril somatosensorial. Haga clic en la plataforma de ajuste para abrir la instrucción de escaneo editada y haga clic en wobble para cambiar ligeramente la impedancia de la bobina del receptor para la sintonización. Cuando finalice la afinación, haga clic en Aplicar para cerrar el editor de instrucciones y aplicar los cambios en la instrucción editada. Registre un mapa B0 e inicie la adquisición de MRS pro diem durante un período de descanso. Adquirir otra secuencia de localización para comparar con la primera y confirmar que la rata no se movió durante la adquisición del láser. A continuación, encienda el sistema de soplado de aire y utilice la secuencia láser para realizar un segundo MRS de protones. Realice una secuencia de localización final para comprobar si la rata se ha movido antes de devolver la cama a su posición inicial. A continuación, retire la bobina de superficie y vuelva a colocar la rata en el banco con supervisión hasta la recuperación completa. Para procesar las imágenes MRS, abra la combinación lineal de espectros de modelo o software de modelo LC y seleccione el tipo de datos y el archivo adecuados. Haga clic en Aceptar y en la sección de título introduzca manualmente un título y defina un rango de piezas adecuado por mililitro. A continuación, haga clic en Ejecutar modelo LC para iniciar la cuantificación del modelo LC. Cuando los bigotes derecho se estimulan utilizando el sistema de soplado de aire casero como se ha demostrado, se detecta una señal BOLD positiva en la corteza del barril izquierdo, también llamado campo de barril somatosensorial. El uso de imágenes de resonancia magnética anatómica y un esquema de atlas cerebral de rata, el área cerebral activada visualizada por la RESONANCIA magnética funcional BOLD permite colocar un voxel en el área de campo del barril somatosensorial que se activa durante la estimulación del bigote. Cuando el paradigma de la estimulación del bigote se activa se observa un aumento en el contenido de lactato en el campo del barril somatosensorial izquierdo. Para visualizar mejor las fluctuaciones metabólicas entre los períodos de reposo y activados se puede realizar una resta espectral. De este espectro restado el aumento en el contenido de lactato con la activación del cerebro se puede visualizar mucho más fácilmente. Por ejemplo, en esta rata la señal N-acetillaspartato se redujo ligeramente. Mientras que el pico de lactato apenas se detecta en este espectro de desconvolución in vivo en reposo, el modelo LC fue capaz de cuantificar el pico con una buena precisión y Cram

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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