Name: the galleria mellonella waxworm infection model for disseminated candidiasis
Uploaded: 2018-11-17T15:00:00
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저자는 갤러리아 mellonella 이 연구에 사용 하기 위해 취득 파 멜 라 워싱턴와 리아 앤더슨의 도움을 인정 하 고 싶습니다.

설명 하는 모든 메서드는 무척 추 동물 호스트의 사용에 의존 하 고 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 승인 필요 하지 않습니다.
1. 갤러리아 mellonella Waxworm 애벌레
<ol><li>도매 및 공급 업체는 호르몬, 항생제, 또는 다른 치료는 애벌레를 소개 하지 않습니다 및 배 고 라이브 표본 수에서 애벌레를 주문.<ol>
<li>실험의 과정에서 동일한 모든 애벌레를 구입 해야 합니다....

<ol>
	<li>Kauffman, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+multicenter+surveillance+study+of+funguria+in+hospitalized+patients.+The+National+Institute+for+Allergy+and+Infectious+Diseases+(NIAID)+Mycoses+Study+Group.">Prospective multicenter surveillance study of funguria in hospitalized patients. The National Institute for Allergy and Infectious Diseases (NIAID) Mycoses Study Group.</a> Clinical Infectious Diseases. 30 (1), 14-18 (2000).</li><li>Horn, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+outcomes+of+candidemia+in+2019+patients:+data+from+the+prospective+antifungal+therapy+alliance+registry.">Epidemiology and outcomes of candidemia in 2019 patients: data from the prospective antifungal therapy alliance registry.</a> Clinical Infectious Diseases. 48 (12), 1695-1703 (2009).</li><li>Pfaller, M. A., Diekema, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+invasive+candidiasis:+a+persistent+public+health+problem.">Epidemiology of invasive candidiasis: a persistent public health problem.</a> Clinical Microbiology Reviews. 20 (1), 133-163 (2007).</li><li>Sardi, J. C., Scorzoni, L., Bernardi, T., Fusco-Almeida, A. M., Mendes Giannini, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+species:+current+epidemiology,+pathogenicity,+biofilm+formation,+natural+antifungal+products+and+new+therapeutic+options.">Candida species: current epidemiology, pathogenicity, biofilm formation, natural antifungal products and new therapeutic options.</a> Journal of Medical Microbiology. 62, 10-24 (2013).</li><li>Segal, E., Frenkel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+in+Vivo+Models+of+Candidiasis.">Experimental in Vivo Models of Candidiasis.</a> J Fungi (Basel). 4 (1), (2018).</li><li>Conti, H. R., Huppler, A. R., Whibley, N., Gaffen, S. 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J., Zugasti, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C.+elegans:+model+host+and+tool+for+antimicrobial+drug+discovery.">C. elegans: model host and tool for antimicrobial drug discovery.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 4 (3), 300-304 (2011).</li><li>Amorim-Vaz, S., Delarze, E., Ischer, F., Sanglard, D., Coste, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examining+the+virulence+of+Candida+albicans+transcription+factor+mutants+using+Galleria+mellonella+and+mouse+infection+models.">Examining the virulence of Candida albicans transcription factor mutants using Galleria mellonella and mouse infection models.</a> Frontiers in Microbiology. 6, 367 (2015).</li><li>Harding, C. R., Schroeder, G. N., Collins, J. W., Frankel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Galleria+mellonella+as+a+model+organism+to+study+Legionella+pneumophila+infection.">Use of Galleria mellonella as a model organism to study Legionella pneumophila infection.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50964 (2013).</li><li>Jacobsen, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+as+a+model+host+to+study+virulence+of+Candida.">Galleria mellonella as a model host to study virulence of Candida.</a> Virulence. 5 (2), 237-239 (2014).</li><li>Tsai, C. J., Loh, J. M., Proft, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+infection+models+for+the+study+of+bacterial+diseases+and+for+antimicrobial+drug+testing.">Galleria mellonella infection models for the study of bacterial diseases and for antimicrobial drug testing.</a> Virulence. 7 (3), 214-229 (2016).</li><li>Hirakawa, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+phenotypic+intra-species+variation+in+Candida+albicans.">Genetic and phenotypic intra-species variation in Candida albicans.</a> Genome Research. 25 (3), 413-425 (2015).</li><li>Dunn, M. J., Kinney, G. M., Washington, P. M., Berman, J., Anderson, M. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+diversification+accompanies+gene+family+expansion+of+MED2+homologs+in+Candida+albicans.">Functional diversification accompanies gene family expansion of MED2 homologs in Candida albicans.</a> PLoS Genetics. 14 (4), (2018).</li><li>Astvad, K. M. T., Meletiadis, J., Whalley, S., Arendrup, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluconazole+Pharmacokinetics+in+Galleria+mellonella+Larvae+and+Performance+Evaluation+of+a+Bioassay+Compared+to+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+for+Hemolymph+Specimens.">Fluconazole Pharmacokinetics in Galleria mellonella Larvae and Performance Evaluation of a Bioassay Compared to Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry for Hemolymph Specimens.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 61 (10), (2017).</li><li>Mesa-Arango, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+non-mammalian+host+Galleria+mellonella+can+be+used+to+study+the+virulence+of+the+fungal+pathogen+Candida+tropicalis+and+the+efficacy+of+antifungal+drugs+during+infection+by+this+pathogenic+yeast.">The non-mammalian host Galleria mellonella can be used to study the virulence of the fungal pathogen Candida tropicalis and the efficacy of antifungal drugs during infection by this pathogenic yeast.</a> Med Mycol. 51 (5), 461-472 (2013).</li><li>Brennan, M., Thomas, D. Y., Whiteway, M., Kavanagh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+virulence+of+Candida+albicans+mutants+in+mice+and+Galleria+mellonella+larvae.">Correlation between virulence of Candida albicans mutants in mice and Galleria mellonella larvae.</a> FEMS Immunology and Medical Microbiology. 34 (2), 153-157 (2002).</li><li>Fuchs, B. B., O'Brien, E., Khoury, J. B., Mylonakis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+using+Galleria+mellonella+as+a+model+host+to+study+fungal+pathogenesis.">Methods for using Galleria mellonella as a model host to study fungal pathogenesis.</a> Virulence. 1 (6), 475-482 (2010).</li><li>Kavanagh, K., Fallon, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+larvae+as+models+for+studying+fungal+virulence.">Galleria mellonella larvae as models for studying fungal virulence.</a> Fungal Biology Reviews. 24 (1-2), 79-83 (2010).</li><li>Hull, C. M., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+mating+type-like+locus+in+the+asexual+pathogenic+yeast+Candida+albicans.">Identification of a mating type-like locus in the asexual pathogenic yeast Candida albicans.</a> Science. 285 (5431), 1271-1275 (1999).</li><li>Legrand, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homozygosity+at+the+MTL+locus+in+clinical+strains+of+Candida+albicans:+karyotypic+rearrangements+and+tetraploid+formation.">Homozygosity at the MTL locus in clinical strains of Candida albicans: karyotypic rearrangements and tetraploid formation.</a> Molecular Microbiology. 52 (5), 1451-1462 (2004).</li><li>Lockhart, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Candida+albicans,+white-opaque+switchers+are+homozygous+for+mating+type.">In Candida albicans, white-opaque switchers are homozygous for mating type.</a> Genetics. 162 (2), 737-745 (2002).</li><li>Miller, M. G., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White-opaque+switching+in+Candida+albicans+is+controlled+by+mating-type+locus+homeodomain+proteins+and+allows+efficient+mating.">White-opaque switching in Candida albicans is controlled by mating-type locus homeodomain proteins and allows efficient mating.</a> Cell. 110 (3), 293-302 (2002).</li><li>Wu, W., Lockhart, S. R., Pujol, C., Srikantha, T., Soll, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterozygosity+of+genes+on+the+sex+chromosome+regulates+Candida+albicans+virulence.">Heterozygosity of genes on the sex chromosome regulates Candida albicans virulence.</a> Molecular Microbiology. 64 (6), 1587-1604 (2007).</li><li>Herrero, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=KRE5+gene+null+mutant+strains+of+Candida+albicans+are+avirulent+and+have+altered+cell+wall+composition+and+hypha+formation+properties.">KRE5 gene null mutant strains of Candida albicans are avirulent and have altered cell wall composition and hypha formation properties.</a> Eukaryotic Cell. 3 (6), 1423-1432 (2004).</li><li>Hall, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mnn2+mannosyltransferase+family+modulates+mannoprotein+fibril+length,+immune+recognition+and+virulence+of+Candida+albicans.">The Mnn2 mannosyltransferase family modulates mannoprotein fibril length, immune recognition and virulence of Candida albicans.</a> PLoS Pathogens. 9 (4), 1003276 (2013).</li><li>Wojda, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+of+the+greater+wax+moth+Galleria+mellonella.">Immunity of the greater wax moth Galleria mellonella.</a> Journal of Insect Science. 24 (3), 342-357 (2017).</li><li>Bergin, D., Reeves, E. P., Renwick, J., Wientjes, F. B., Kavanagh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superoxide+production+in+Galleria+mellonella+hemocytes:+identification+of+proteins+homologous+to+the+NADPH+oxidase+complex+of+human+neutrophils.">Superoxide production in Galleria mellonella hemocytes: identification of proteins homologous to the NADPH oxidase complex of human neutrophils.</a> Infection and Immunity. 73 (7), 4161-4170 (2005).</li><li>Lange, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+Sequence+of+Galleria+mellonella+(Greater+Wax+Moth).">Genome Sequence of Galleria mellonella (Greater Wax Moth).</a> Genome Announcements. 6 (2), (2018).</li><li>Krappmann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lightning+up+the+worm:+How+to+probe+fungal+virulence+in+an+alternative+mini-host+by+bioluminescence.">Lightning up the worm: How to probe fungal virulence in an alternative mini-host by bioluminescence.</a> Virulence. 6 (8), 727-729 (2015).</li><li>Chowdhary, A., Voss, A., Meis, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidrug-resistant+Candida+auris:+'new+kid+on+the+block'+in+hospital-associated+infections.">Multidrug-resistant Candida auris: 'new kid on the block' in hospital-associated infections.</a> Journal of Hospital Infection. 94 (3), 209-212 (2016).</li><li>Delarze, E., Ischer, F., Sanglard, D., Coste, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptation+of+a+Gaussia+princeps+Luciferase+reporter+system+in+Candida+albicans+for+in+vivo+detection+in+the+Galleria+mellonella+infection+model.">Adaptation of a Gaussia princeps Luciferase reporter system in Candida albicans for in vivo detection in the Galleria mellonella infection model.</a> Virulence. 6 (7), 684-693 (2015).</li></ol>

G. mellonella waxworm 모델 C. albicans 독성의 신속 하 고 재현성 분석을 위한 효과적인 도구로 서 있다. 이 상세한 프로토콜 애벌레의 일괄 처리에서 동일한 사이트에 정의 된 감염 복용량의 일관 된 납품에 의존합니다. 감염 복용량 애벌레 그들의 초기 도착 및 영수증을 다음 10 일 사이 사용 하 여 비슷한 결과 생산 하는 반면 G. mellonella 사망률에 지대한 영향을 있다. MTLα 대립 ...

칸디 다 종에 기회 주의 병원 체로는 일반적인 인간의 공생은 심하게 immunocompromised 및 dysbiotic 환자. 많은 칸디 다 종의 질병을 일으킬 수 있습니다, 비록 C. albicans 전파 칸디 다 증1,2의 가장 널리 퍼진 원인이 다. 조직의 질환 C. albicans 의 이전 제한 호스트 장벽 중 직접 침투 또는 외과 사이트 및 몸3의 다른 위반에 대 한 소개를 통해 혈 류를 액세스에서 발생 합니다. 칸디 다 종 다양 한 filamentation, biofilm 형성, 면역 세포 회피 및 탈출, 그리고 철4청소를 포함 하 여 호스트 내에서 조직의 질환을 일으키는 병원 성 프로세스를 활용 합니다. 개별 병원 성 기계 장치를 조사 하기 위해 존재 하는 생체 외에서 접근 하지만 동물 모델 질병 결과5,6의 전체를 조사 하기 위해 최상의 옵션을 제공 하기 위해 계속. 이전 연구는7,8 vivo에서재현 하는 데 실패 하는 독성의 생체 외에서 조사 약속의 많은 경우 자세한 있다. 따라서, 동물 모델은 여전히 독성을 평가 하는 데 필요한 vivo에서. 대부분 질병 모델 생쥐 C. albicans 자연스럽 게 공생9murine 시스템을 식민지로 무 능력에도 불구 하 고 인간의 감염에 대 한 대리 모 역할을 사용 합니다. 무척 추 동물 모델 전파 칸디 다의 선 충 류 꼬마 선 충, 비록 열매 Drosophila melanogaster, 그리고 waxworm 갤러리아 mellonella, 비행 근본적인 차이 대 한 우려 기본 생리학, 호스트 몸 온도 및 노출 경로 방해 그들의 광범위 한 수용10,11.
가장 최근에, G. mellonella waxworm 감염 모델은 다양 한 세균과 곰 팡이 병원 균12,,1314의 모델 pathogenicity에 채택 되었습니다. 이 모델의 장점, 사용의 용이성 및 murine 모델에 비해 동물 선행에 대하여 윤리적인 관심사를 감소의 상대적으로 저렴 한 비용, 증가 처리량을 포함 됩니다. 연구원에 대 한이 여러 변수, 강한 자신감을 간격, 더 빠른 실험 및 동물 프로토콜의 바이패스 테스트 증가 수로 변환 합니다. G. mellonella 빠르게 임상 격리11,15에서 biofilm 형성, filamentation, 및 유전자 규칙에 필요한 유전자의 섭 동을 따라 하는 C. albicans 독성을 평가 하기 위해 플랫폼을 역임 했다 ,16. 최근 연구 조사 G. mellonella 를 사용 하 여 마약 활동 및 저항 설정 아래에서 vivo에서 , 그렇지 않으면 도전 및 시간이 걸리는 의 약 동학을 평가 하기 위해 항진균 효능의 통합 17,18. 그러나, G. mellonella 에서 C. albicans 독성의 연구 되어 복잡 한 실험과 다른 독성 고기를 생산 하는 연구 그룹 간의 일관성 프로토콜 내에서 변이의 소문에 하면 높은 수준에 의해 마우스 및 waxworms11,13,19,,2021사이. 여기, 우리는 C. albicans 감염, 증가 재현성 독성 실험에서 표준화 murine에 독성의 앞에서 설명한 연구와 일관성을 입증 하는 G. mellonella 프로토콜 개요 모델입니다.
이전 학문 C. albicans 짝짓기 염색체 5에 유형 같은 (MTL) 로커 스 셀 정체성과 짝짓기 능력 Saccharomyces cerevisiae 와 다른 Ascomycete 균 류22와 유사한 규제를 설명 했다. C. albicans 격리의 대다수는 MTL는 MTLα 대립 유전자의 (MTL가/α), 각각의 하나를 인코딩 MTL 로커 스 heterozygous은 되며 따라서 살 균15, 23 , 24. heterozygosity (LOH) 또는 돌연변이의 손실을 통해 MTL 대립 유전자 중의 손실 homozygous MTL는 또는 MTLα 종자 살 균 '화이트' 상태에서 phenotypic 스위치를 받을 수 있는 지도 유능한 '불투명' 상태25짝짓기. 이전 작업 MTL heterozygosity의 손실 또한 다른 스트레인 배경26에 걸쳐 조직의 감염의 murine 모델에서 독성을 줄일 것을 강조 했다. 여기, 우리는 MTL heterozygosity G. mellonella에서 독성에의 기여를 묘사 하기 위해 유전으로 유사한 실험 세트를 사용 하 여 전파 칸디 다에 대 한 G. mellonella 모델 선발. 우리가 보여 MTL 구성 C. albicans pathogenicity 영향을 MTLα 긴장 했다 적은/α에 MTL및 MTL는 셀 결과 비슷한 악성 murine 감염 모델26내.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:852px;" width="853">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Galleria mellonella</td>
			<td style="width:140px;">Snackworms.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Buy twice as many worms as expected to use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 uL, Model 1701 N SYR Cemented needle, 26G, type 2 syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Petri dish, 100X15 mm, 500 pack</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microcentrifuge tube, 1.7 mL, 500 pack</td>
			<td style="width:140px;">VWR</td>
			<td>87003-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Phosphate Buffered Saline (Biotechnology grade), 500 mL</td>
			<td style="width:140px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">97062-818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Ethanol absolute, &#8805;99.5% pure, 500 mL</td>
			<td style="width:140px;">Millipore Sigma</td>
			<td>EM-EX0276-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:427px;">autoclaved ddH2O</td>
			<td style="width:140px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the galleria mellonella waxworm infection model for disseminated candidiasis

칸디 다 종은 피부, 점 막 표면 및 위장을 식민지 화 하는 인간의 일반적인 버섯 모양 공생 이다입니다. 특정 조건에서 칸디 다 잘으로 생명이 조직의 감염, 있는 그들의 관련 된 높은 사망률으로 인해 조사의 주요 초점으로 점 막 감염을 쇠 약의 결과로 그들의 자연적인 틈새 자라 다 수 있습니다. 동물 모델 전파 감염의 질병의 진행을 공부 하 고 해 부 Candida pathogenicity의 특성에 대 한 존재 합니다. 이들의 갤러리아 mellonella waxworm 감염 모델 조직 독성의 높은 처리량 조사에 대 한 비용 효율적인 실험 도구를 제공합니다. 다른 많은 세균과 진 핵 전염 성 요원 되어 효과적으로 공부 했다 G. mellonella pathogenicity, 이해 하기에 널리 허용된 모델 시스템을 만들기. 아직, G. mellonella 감염 하는 데 사용 하는 방법에 변화는 phenotypic 결과 변경 하 고 결과의 해석을 복잡 하 게 수 있습니다. 여기, 우리는 장점과 단점은 조직의 칸디 다 병 인을 연구 하 고 재현성을 향상 하는 방법을 자세히 waxworm 모델의 개요. 우리의 결과 G. mellonella 에서 사망률 속도의 범위를 강조 표시 하 고 이러한 활동을 조절 수 있는 변수를 설명. 궁극적으로,이 방법을 전파 칸디 다의 모델에서 독성 연구 윤리, 빠르고, 비용 효율적인 방식으로 서 있다.

여기, G. mellonella waxworms 조사 C. albicans를 사용 하 여 감염의 전파 칸디 다 모델의 사용에 대 한 재현 방법을 보여 줍니다. 보관, 유지 관리 및 감염에 대 한 애벌레의 선택 G. mellonella 사망 (그림 1A)에 재현성을 보험사의 중요 한 구성 요소입니다. 활성, 건강 한 애벌레 연한 노란색/탄 색, 그리고이 시스템은 일반적으로 ?...

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The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis

갤러리아 mellonella 전파 칸디 다에 대 한 무척 추 동물 모델 역할을 합니다. 여기, 우리는 감염 세부 프로토콜 및 모델의 효과 대 한 지원 데이터를 제공.

갤러리아 mellonella Waxworm 감염 모델 전파 칸디 다에 대 한

Candida species are common fungal commensals of humans colonizing the skin, mucosal surfaces, and gastrointestinal tract. Under certain conditions, ...

이 방법은 긴장 독성및 이 프로세스에 특정 유전자의 기여에 관하여 칸디다 필드에 있는 중요한 질문에 대답하는 것을 도울 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 동물 사용에 관한 우려를 피하고, 견고하고 빠르며, 저렴하며, 실험당 많은 수의 동물을 제공한다는 것입니다. 일반적으로 말하기, 이 방법에 새로운 개인 가능성이 실험의 시작 전에 웜 생존가능성을 평가 하는 몇 가지 어려움을 거 야 또는 그들은 웜의 일관성 없는 주입에 몇 가지 문제가 있을 수 있기 때문에 조금 투쟁.유충에 호르몬, 항생제 또는 그밖 처리를 소개하지 않는 도매업자 및 공급 업체에게서 유충을 주문하고 살아있는 견본을 발송하고 전달할 수 있습니다. 애벌레가 도착하면 각 용기에 확인하여 애벌레의 건강과 생존 가능성을 확인하십시오. 건강한 유충은 침구 아래에 완전히 침수되고, 움직이고, 검은 자국이나 몸을 따라 변색이 있는 유충이 거의 없는 노란색, 밝은 황갈색 색채를 가지고 있습니다.유충은 최대 2주 동안 주변 온도의 통풍 공간에 용기에 보관할 수 있습니다. 갤러리아 멜론라 감염용 효모 세포를 준비하기 위해, C.albicans 균주를 중간 속도로 회전하는 드럼에서 표준 배양 튜브의 변형당 신선한 효모 펩톤-덱스트로스 국물의 3밀리리터로 하룻밤 사이에 주입되는 균주를 성장시킵니다. 다음 날 아침, 원심분리로 세포를 수집하고, 신선한 PBS 의 5 밀리리터에서 효모를 세 번 씻어 원심분리.마지막 세척 후, 신선한 PBS의 1 밀리리터에서 세포를 다시 중단하고 마이크로 원심 분리기 튜브로 효모를 전송합니다. 1 대 100, 1 대 1, 000 및 1 대 100, 000 농도로 추가 PBS로 세포를 일렬로 희석시키고 1 대 100 및 1 대 000 희석에서 세포를 계산합니다. 새로운 마이크로센트심분리기 튜브에서 PBS 농도의 밀리리터당 7번째 세포당 2.5배 10으로 세포를 조정하고, 1대 100, 000 희석의 적절한 부피를 도금하여 감염용량의 정확도를 확인하여 1개의 효모-펩톤-덱스트로스 에 100개의 콜로니 형성 유닛을 달성하여 각 배양에 사용되는 배양에 대한 매연성-덱스트로오스 격판에 100개의 콜로니 형성 유닛을 달성한다.칸디다 세포와 유충을 감염시키기 위해, 먼저 소량의 왁스웜 침구를 생물학적 복제당 100x15센티미터 멸균 페트리 접시에 넣고, 26게이지 바늘이 장착된 10마이크로리터 주사기를 70%의 마이크로리터와 3회 PBS의 3회 살균하였다. 다음으로, C.albicans의 접종 희석을 소용돌이시키고, 주사기에 세포의 10 마이크로리터를 적재합니다. G.mellonella 애벌레의 하나의 용기를 열고, 조심스럽게 유충을 밝히기 위해 침구를 켜기 위해 손가락을 사용하여, 몸에 검은 색소 침착의 부족으로 건강에 좋은 유사한 크기의 노란색, 황갈색 애벌레를 선택, 중간 및 인덱스 손가락과 엄지 손가락을 사용하여 연필을 잡는 것과 유사한 방식으로 하나의 애벌레를 데리러.애벌레를 등에 굴려 다리가 위를 향하고, 손가락과 엄지 손가락 사이의 몸의 전체 길이를 잡고 유충이 말리거나 주사에서 벗어날 수 없도록합니다. 한편, 주사기를 회전시켜 바늘 벨이 위로 향하도록 하고, 배꼽의 전체 길이를 뒤쪽 왼쪽 다리와 접합하여 몸체에 천천히 삽입하여 바늘이 몸에 침투하고 애벌레의 몸을 안쪽으로 밀어 넣지 않도록 합니다. 이 절차에서 가장 중요한 단계는 애벌레 몸에 손상을 최소화하고 전체 볼루스가 접종되는 방식으로 왁스 웜을 주입하는 것입니다.그런 다음 칸디다 무접종의 전체 10 마이크로 리터를 주입하고 바늘을 추출합니다. 접종 후 100mm 에서 15밀리미터 페트리 접시에 동일한 칸디다 문화에서 최대 10개의 애벌레를 주입하고 8일 동안 37°C의 유충을 배양합니다. 24시간마다 요리를 확인하여 죽음을 모니터링합니다.사망률은 처음에 어두운 색소 침착, 검은 패치 또는 바디의 형성 및 운동의 부족에 의해 평가될 수 있습니다. 필멸의 삶을 확인하려면 핀셋을 사용하여 모리번드 유충을 등에 부드럽게 굴리고 애벌레의 밑면을 핀셋으로 가볍게 찌릅니다. 나방으로 새끼를 넣기 시작하는 애벌레는 분석에 포함될 수 있지만 몰트하기 시작하면 제거해야합니다.G.mellonella 죽음의 운동학에 있는 유충에 있는 유충 감염된 0 또는 10 일 도착 후에 존재하지 않습니다. 질병의 특징적인 표시는 감염에 굴복하는 두 나이에서 애벌레에서 생깁니다, 운동성의 총 손실 및 결국 죽음의 앞에 검은 패치에 방법을 주는 변색으로 시작. C.albicans감염은 변색 및 이환율의 이 과정을 가속화하지만 감염되지 않거나 PBS 주입 된 애벌레에 비해 죽음으로 이어지는 표현표의 폭포를 크게 변경하지 는 않습니다.특히, 임상적으로 고립된 C.albicans 균주중 하나에서 짝짓기 유형과 같은 호모 또는 이종고를 가진 G.mellonella의 감염은 PBS 주입 동물에 비해 사망률의 높은 비율을 생성, 프로토 트로피크 유도균 균주의 주사는이 모델에서 치명적인 효과를 감쇠하는 동안. 건강한 애벌레를 선택하고 애벌레를 다루는 데 온화하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 여러 균주가 접종될 경우 칸디다 세포가 너무 오랫동안 PBS에 앉지 않도록 주의하십시오.이 절차에 따라, 유충 내의 면역 학적 프로파일링 및 칸디다 국소화와 같은 다른 방법은 감염 시 숙주와 곰팡이 병원체 사이의 상호 작용에 대한 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수 있습니다. 개발 후, 이 기술은 연구원이 높은 처리량 형식을 사용하여 칸디다 병증을 탐구하는 길을 열었습니다. 칸디다 알비칸스와 함께 일하는 것은 주의가 필요하며, 개인 보호 장비의 마모를 포함한 표준 예방 조치는 항상 이 절차를 수행하는 동안 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

세균성 접착 연구에 전단 응력을 소개합니다

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

연구

면역학 및 감염병학

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

Zebrafish 애벌레의 분해해 칸디다 증의 비침습 이미징

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

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곤충<em&gt; 갤러리아 mellonella</em&gt; 세균 Pathogenesis를 조사 할 수있는 강력한 감염 모델로

The study of bacterial virulence often requires a suitable animal model. Mammalian models of infection are costly and may raise ethical issues. The use of ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

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사용<em&gt; 갤러리아 mellonella</em&gt; 모델 생물로 공부하기<em&gt; 레지오넬라 뉴모 필라</em&gt; 감염

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

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에 의해 제작 상피 손상의 분석<em&gt; Entamoeba 아메바</em&gt; 감염

Entamoeba histolytica is the causative agent of human amoebiasis, a major cause of diarrhea and hepatic abscess in tropical countries. Infection is ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Swimbladder 주입에 의해 애벌레 Zebrafish의 점막 칸디다증 모델링

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

형광 기반의 뉴 라미니다 아제 억제 분석은 항 바이러스제의 뉴 라미니다 아제 억제제 클래스에 인플루엔자 바이러스의 감수성을 평가하기 위해

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

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갤러리아 mellonella 구강 관리 모델 Study Commensal-Induced 타고 난 면역 반응에

The investigation of the immunogenic potential of commensal bacteria on the host immune system is one essential component when studying intestinal ...

Use of the Invertebrate Galleria mellonella as an Infection Model to Study the Mycobacterium tuberculosis Complex

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결핵 균복합체를 연구하기 위한 감염 모델로 무척추동물 갤러리아 멜로넬라 사용

Tuberculosis is the leading global cause of infectious disease mortality and roughly a quarter of the world&#8217;s population is believed to be infected ...

Tools for the Real-Time Assessment of a Pseudomonas aeruginosa Infection Model

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슈도모나스 아에루기노사 감염 모델의 실시간 평가를 위한 도구

Pseudomonas aeruginosa (Pa) is one of the most common opportunistic pathogens associated with cystic fibrosis (CF). Once Pa colonization is established, a ...