Name: the galleria mellonella waxworm infection model for disseminated candidiasis
Uploaded: 2018-11-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis at JoVE.com

Yazarlar bu çalışmada kullanılmak Galleria mellonella edinmenizde Pamela Washington ve Leah Anderson yardım kabul etmek istiyorum.

Tüm yöntem tanımlamak omurgasız ana bilgisayarların kullanımı üzerinde itimat ve kurumsal hayvan bakım ve kullanmak Komitesi (IACUC) onayı gerektirmeyen.
1. galleria mellonella Waxworm larvalar
<ol><li>Toptancılar ve bu hormonlar, antibiyotikler veya diğer tedavilere larvalar tanıtmak değil ve gemi ve canlı örnekler teslim edebiliyoruz tedarikçilerden sipariş larvaları.<ol>
<li>Bütün larva deneme süresince aynı tedarikçiden satın almak emin olun. 30 ° C civ...

<ol>
	<li>Kauffman, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+multicenter+surveillance+study+of+funguria+in+hospitalized+patients.+The+National+Institute+for+Allergy+and+Infectious+Diseases+(NIAID)+Mycoses+Study+Group.">Prospective multicenter surveillance study of funguria in hospitalized patients. The National Institute for Allergy and Infectious Diseases (NIAID) Mycoses Study Group.</a> Clinical Infectious Diseases. 30 (1), 14-18 (2000).</li><li>Horn, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+outcomes+of+candidemia+in+2019+patients:+data+from+the+prospective+antifungal+therapy+alliance+registry.">Epidemiology and outcomes of candidemia in 2019 patients: data from the prospective antifungal therapy alliance registry.</a> Clinical Infectious Diseases. 48 (12), 1695-1703 (2009).</li><li>Pfaller, M. A., Diekema, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+invasive+candidiasis:+a+persistent+public+health+problem.">Epidemiology of invasive candidiasis: a persistent public health problem.</a> Clinical Microbiology Reviews. 20 (1), 133-163 (2007).</li><li>Sardi, J. C., Scorzoni, L., Bernardi, T., Fusco-Almeida, A. M., Mendes Giannini, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+species:+current+epidemiology,+pathogenicity,+biofilm+formation,+natural+antifungal+products+and+new+therapeutic+options.">Candida species: current epidemiology, pathogenicity, biofilm formation, natural antifungal products and new therapeutic options.</a> Journal of Medical Microbiology. 62, 10-24 (2013).</li><li>Segal, E., Frenkel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+in+Vivo+Models+of+Candidiasis.">Experimental in Vivo Models of Candidiasis.</a> J Fungi (Basel). 4 (1), (2018).</li><li>Conti, H. R., Huppler, A. R., Whibley, N., Gaffen, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+candidiasis.">Animal models for candidiasis.</a> Current Protocols in Immunology. 105, 11-17 (2014).</li><li>Heymann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+siderophore+iron+transporter+of+Candida+albicans+(Sit1p/Arn1p)+mediates+uptake+of+ferrichrome-type+siderophores+and+is+required+for+epithelial+invasion.">The siderophore iron transporter of Candida albicans (Sit1p/Arn1p) mediates uptake of ferrichrome-type siderophores and is required for epithelial invasion.</a> Infection and Immunity. 70 (9), 5246-5255 (2002).</li><li>Priest, S. J., Lorenz, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Virulence-Related+Phenotypes+in+Candida+Species+of+the+CUG+Clade.">Characterization of Virulence-Related Phenotypes in Candida Species of the CUG Clade.</a> Eukaryotic Cell. 14 (9), 931-940 (2015).</li><li>Savage, D. C., Dubos, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+indigenous+yeast+in+the+murine+stomach.">Localization of indigenous yeast in the murine stomach.</a> J Bacteriol. 94 (6), 1811-1816 (1967).</li><li>Ewbank, J. J., Zugasti, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C.+elegans:+model+host+and+tool+for+antimicrobial+drug+discovery.">C. elegans: model host and tool for antimicrobial drug discovery.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 4 (3), 300-304 (2011).</li><li>Amorim-Vaz, S., Delarze, E., Ischer, F., Sanglard, D., Coste, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examining+the+virulence+of+Candida+albicans+transcription+factor+mutants+using+Galleria+mellonella+and+mouse+infection+models.">Examining the virulence of Candida albicans transcription factor mutants using Galleria mellonella and mouse infection models.</a> Frontiers in Microbiology. 6, 367 (2015).</li><li>Harding, C. R., Schroeder, G. N., Collins, J. W., Frankel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Galleria+mellonella+as+a+model+organism+to+study+Legionella+pneumophila+infection.">Use of Galleria mellonella as a model organism to study Legionella pneumophila infection.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50964 (2013).</li><li>Jacobsen, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+as+a+model+host+to+study+virulence+of+Candida.">Galleria mellonella as a model host to study virulence of Candida.</a> Virulence. 5 (2), 237-239 (2014).</li><li>Tsai, C. J., Loh, J. M., Proft, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+infection+models+for+the+study+of+bacterial+diseases+and+for+antimicrobial+drug+testing.">Galleria mellonella infection models for the study of bacterial diseases and for antimicrobial drug testing.</a> Virulence. 7 (3), 214-229 (2016).</li><li>Hirakawa, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+phenotypic+intra-species+variation+in+Candida+albicans.">Genetic and phenotypic intra-species variation in Candida albicans.</a> Genome Research. 25 (3), 413-425 (2015).</li><li>Dunn, M. J., Kinney, G. M., Washington, P. M., Berman, J., Anderson, M. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+diversification+accompanies+gene+family+expansion+of+MED2+homologs+in+Candida+albicans.">Functional diversification accompanies gene family expansion of MED2 homologs in Candida albicans.</a> PLoS Genetics. 14 (4), (2018).</li><li>Astvad, K. M. T., Meletiadis, J., Whalley, S., Arendrup, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluconazole+Pharmacokinetics+in+Galleria+mellonella+Larvae+and+Performance+Evaluation+of+a+Bioassay+Compared+to+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+for+Hemolymph+Specimens.">Fluconazole Pharmacokinetics in Galleria mellonella Larvae and Performance Evaluation of a Bioassay Compared to Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry for Hemolymph Specimens.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 61 (10), (2017).</li><li>Mesa-Arango, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+non-mammalian+host+Galleria+mellonella+can+be+used+to+study+the+virulence+of+the+fungal+pathogen+Candida+tropicalis+and+the+efficacy+of+antifungal+drugs+during+infection+by+this+pathogenic+yeast.">The non-mammalian host Galleria mellonella can be used to study the virulence of the fungal pathogen Candida tropicalis and the efficacy of antifungal drugs during infection by this pathogenic yeast.</a> Med Mycol. 51 (5), 461-472 (2013).</li><li>Brennan, M., Thomas, D. Y., Whiteway, M., Kavanagh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+virulence+of+Candida+albicans+mutants+in+mice+and+Galleria+mellonella+larvae.">Correlation between virulence of Candida albicans mutants in mice and Galleria mellonella larvae.</a> FEMS Immunology and Medical Microbiology. 34 (2), 153-157 (2002).</li><li>Fuchs, B. B., O'Brien, E., Khoury, J. B., Mylonakis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+using+Galleria+mellonella+as+a+model+host+to+study+fungal+pathogenesis.">Methods for using Galleria mellonella as a model host to study fungal pathogenesis.</a> Virulence. 1 (6), 475-482 (2010).</li><li>Kavanagh, K., Fallon, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galleria+mellonella+larvae+as+models+for+studying+fungal+virulence.">Galleria mellonella larvae as models for studying fungal virulence.</a> Fungal Biology Reviews. 24 (1-2), 79-83 (2010).</li><li>Hull, C. M., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+mating+type-like+locus+in+the+asexual+pathogenic+yeast+Candida+albicans.">Identification of a mating type-like locus in the asexual pathogenic yeast Candida albicans.</a> Science. 285 (5431), 1271-1275 (1999).</li><li>Legrand, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homozygosity+at+the+MTL+locus+in+clinical+strains+of+Candida+albicans:+karyotypic+rearrangements+and+tetraploid+formation.">Homozygosity at the MTL locus in clinical strains of Candida albicans: karyotypic rearrangements and tetraploid formation.</a> Molecular Microbiology. 52 (5), 1451-1462 (2004).</li><li>Lockhart, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Candida+albicans,+white-opaque+switchers+are+homozygous+for+mating+type.">In Candida albicans, white-opaque switchers are homozygous for mating type.</a> Genetics. 162 (2), 737-745 (2002).</li><li>Miller, M. G., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White-opaque+switching+in+Candida+albicans+is+controlled+by+mating-type+locus+homeodomain+proteins+and+allows+efficient+mating.">White-opaque switching in Candida albicans is controlled by mating-type locus homeodomain proteins and allows efficient mating.</a> Cell. 110 (3), 293-302 (2002).</li><li>Wu, W., Lockhart, S. R., Pujol, C., Srikantha, T., Soll, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterozygosity+of+genes+on+the+sex+chromosome+regulates+Candida+albicans+virulence.">Heterozygosity of genes on the sex chromosome regulates Candida albicans virulence.</a> Molecular Microbiology. 64 (6), 1587-1604 (2007).</li><li>Herrero, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=KRE5+gene+null+mutant+strains+of+Candida+albicans+are+avirulent+and+have+altered+cell+wall+composition+and+hypha+formation+properties.">KRE5 gene null mutant strains of Candida albicans are avirulent and have altered cell wall composition and hypha formation properties.</a> Eukaryotic Cell. 3 (6), 1423-1432 (2004).</li><li>Hall, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mnn2+mannosyltransferase+family+modulates+mannoprotein+fibril+length,+immune+recognition+and+virulence+of+Candida+albicans.">The Mnn2 mannosyltransferase family modulates mannoprotein fibril length, immune recognition and virulence of Candida albicans.</a> PLoS Pathogens. 9 (4), 1003276 (2013).</li><li>Wojda, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+of+the+greater+wax+moth+Galleria+mellonella.">Immunity of the greater wax moth Galleria mellonella.</a> Journal of Insect Science. 24 (3), 342-357 (2017).</li><li>Bergin, D., Reeves, E. P., Renwick, J., Wientjes, F. B., Kavanagh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superoxide+production+in+Galleria+mellonella+hemocytes:+identification+of+proteins+homologous+to+the+NADPH+oxidase+complex+of+human+neutrophils.">Superoxide production in Galleria mellonella hemocytes: identification of proteins homologous to the NADPH oxidase complex of human neutrophils.</a> Infection and Immunity. 73 (7), 4161-4170 (2005).</li><li>Lange, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+Sequence+of+Galleria+mellonella+(Greater+Wax+Moth).">Genome Sequence of Galleria mellonella (Greater Wax Moth).</a> Genome Announcements. 6 (2), (2018).</li><li>Krappmann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lightning+up+the+worm:+How+to+probe+fungal+virulence+in+an+alternative+mini-host+by+bioluminescence.">Lightning up the worm: How to probe fungal virulence in an alternative mini-host by bioluminescence.</a> Virulence. 6 (8), 727-729 (2015).</li><li>Chowdhary, A., Voss, A., Meis, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidrug-resistant+Candida+auris:+'new+kid+on+the+block'+in+hospital-associated+infections.">Multidrug-resistant Candida auris: 'new kid on the block' in hospital-associated infections.</a> Journal of Hospital Infection. 94 (3), 209-212 (2016).</li><li>Delarze, E., Ischer, F., Sanglard, D., Coste, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptation+of+a+Gaussia+princeps+Luciferase+reporter+system+in+Candida+albicans+for+in+vivo+detection+in+the+Galleria+mellonella+infection+model.">Adaptation of a Gaussia princeps Luciferase reporter system in Candida albicans for in vivo detection in the Galleria mellonella infection model.</a> Virulence. 6 (7), 684-693 (2015).</li></ol>

G. mellonella waxworm modeli C. albicans virülans hızlı ve tekrarlanabilir analizi için etkili bir araç duruyor. Bu ayrıntılı iletişim kuralı aynı site için tanımlanmış bir bulaşıcı doz tutarlı teslim üzerine larva bir dizi dayanır. Larvalar ilk varış ve alış irsaliyesi izleyen on gün arasında kullanımı benzer sonuçlar üretilen ise bulaşıcı doz G. mellonella mortalite üzerinde derin bir etkisi vardır. MTLα alleli bozulma larva ölüm değiştirmemey...

Candida türlerinin çoğu fırsatçı patojenler olarak ortaya yeteneğine sahip ortak insan commensals ağır immün ve dysbiotic hastalar. Her ne kadar pek çok Candida tür hastalığa neden olabilir, C. albicans Dissemine kandidiyazis1,2en yaygın nedeni. Sistemik hastalığı kan dolaşımına daha önce kısıtlayıcı ana engelleri ya doğrudan penetrasyon veya cerrahi siteleri ve diğer ihlaller vücut3giriş aracılığıyla erişme C. albicans kaynaklanır. Candida türleri çeşitli filamentation, biyofilm oluşumu, bağışıklık hücre kaçırma ve kaçış ve4atma demir de dahil olmak üzere ana bilgisayar içinde sistemik hastalığı neden patojenik kullanmaktadır. Vitro yaklaşımlar bireysel patojenik mekanizmaların araştırmak için vardır, ancak hayvan modelleri hastalık sonucu5,6tamamını araştırmak için en iyi seçenek sunmaya devam ediyoruz. Önceki araştırma vivo içinde7,8çoğaltmak başarısız virülans in vitro araştırmalar umut verici, birçok örnekleri ayrıntılı. Böylece, hayvan modelleri yine virülans değerlendirmek gerekir içinde vivo. Çoğu hastalık modelleri C. albicans yetersizlik doğal komensal9fare sistemleri kolonize rağmen insan enfeksiyonları için bir vekil olarak hizmet verecek fareler güveniyor. Dissemine kandidiyazis omurgasız modelleri arasında Yuvarlak solucanlar Caenorhabditis elegans, meyve Drosophila melanogasterve waxworm Galleria mellonella, her ne kadar sinek temel farklar hakkında endişeler temel fizyolojisi ana bilgisayar vücut sıcaklığı ve maruz kalma yolları onların geniş kabul10,11. engel
Son olarak, G. mellonella waxworm enfeksiyon modeli modeli patojenitesi bakteriyel ve fungal patojenlerin12,13,14, geniş bir aralığı için kabul edilmiştir. Bu modelin avantajları onun nispeten düşük maliyetli, yüksek üretilen iş dahil, kullanım kolaylığı ve Etik kaygılar ile ilgili hayvan ihsan fare modellerle karşılaştırıldığında sınırlı. Araştırmacılar için bu test birden çok değişken, daha güçlü güven aralıkları, daha hızlı deneme ve bypass hayvan iletişim kurallarının artan yeteneği çevirir. G. mellonella hızla pertürbasyon klinik yalıtır11arasında,15 biyofilm oluşumu, filamentation ve gen düzenleme için gerekli genleri takip C. albicans virülans değerlendirmek için bir platform olarak hizmet vermiştir ,16. Son yıllarda yapılan çalışmalarda soruşturma antifungal etkinliğinin farmakokinetik uyuşturucu etkinlik ve direnç Aksi takdirde zor ve zaman alıcı vivo içinde ayarları'nın altında değerlendirmek için G. mellonella kullanarak dahil var. 17,18. Henüz, G. mellonella C. albicans virülans çalışmaların varyasyon deneyleri ve farklı virülans fenotipleri üretmek araştırma grupları arasında tutarsız iletişim kuralları içinde bildirildi yüksek düzeyde karmaşık bir hal Fareler waxworms11,13,19,20,ve21arasında. Burada, bir G. mellonella protokol C. albicans enfeksiyonları, artış tekrarlanabilirlik virülans deneylerde standartlaştırmak ve tutarlılık virülans antikorundan daha önce açıklanan çalışmaları ile göstermek için anahat modelleri.
Önceki çalışmalar türü gibi (MTL) odağı kromozom 5 üzerinde çiftleşme C. albicans hücre kimliğini ve yetkinlik Saccharomyces cerevisiae ve diğer Ascomycete mantar22benzer çiftleşme düzenleyen gösterdi. C. albicans yalıtır çoğunluğu MTL odağı her biri MTLbir ve MTLα gen (MTLbir/α) kodlama Heterozigoz ve sonuç olarak steril15, vardır 23 , 24. heterozygosity (LOH) veya mutasyon yoluyla MTL gen kaybı olur homozigoz MTLbir veya fenotipik anahtarından steril 'beyaz' durumuna geçirmek için MTLα suşları yetkili 'opak' devlet25çiftleşme. Önceki çalışma MTL heterozygosity kaybı da virülans sistemik enfeksiyon fare modelleri farklı zorlanma arka planlar26arasında azaltır vurgulanmış bulunmaktadır. Burada, G. mellonella modeli Dissemine kandidiyazis MTL heterozygosity G. mellonellavirülans için katkısını tasvir için genetik olarak benzer bir deneysel set kullanarak için ayrıntılı. Biz MTL yapılandırma C. albicans patojenitesi, etkilemiş nerede MTLα suşları MTLbir/α ve MTLbir hücre, benzer bulgular ile ilgili olarak daha az öldürücü olduğunu gösterir fare enfeksiyon modeli26içinde.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:852px;" width="853">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Galleria mellonella</td>
			<td style="width:140px;">Snackworms.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Buy twice as many worms as expected to use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 uL, Model 1701 N SYR Cemented needle, 26G, type 2 syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Petri dish, 100X15 mm, 500 pack</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microcentrifuge tube, 1.7 mL, 500 pack</td>
			<td style="width:140px;">VWR</td>
			<td>87003-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Phosphate Buffered Saline (Biotechnology grade), 500 mL</td>
			<td style="width:140px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">97062-818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:427px;">Ethanol absolute, &#8805;99.5% pure, 500 mL</td>
			<td style="width:140px;">Millipore Sigma</td>
			<td>EM-EX0276-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:427px;">autoclaved ddH2O</td>
			<td style="width:140px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the galleria mellonella waxworm infection model for disseminated candidiasis

Candida türlerinin ortak mantar commensals deride, mukozal yüzeyler ve gastrointestinal sistem kolonize insanlar vardır. Belirli koşullar altında onların doğal niş araştırma onların ilişkili yüksek mortalite oranları nedeniyle önemli bir odak noktası olan, iyi olarak yaşamı tehdit eden sistemik enfeksiyonlar olarak mukozal hastalık zayıflatıcı kaynaklanan Candida sarmak. Hayvan modelleri Dissemine enfeksiyon hastalığı ilerleme eğitim ve Candida patojenitesi özellikleri dissekan için mevcut. Bunlar sistemik virülans yüksek üretilen iş araştırmalar için düşük maliyetli bir deneysel araç Galleria mellonella waxworm enfeksiyon modeli sağlar. Birçok diğer bakteriyel ve ökaryotik bulaşıcı yaygın olarak kabul edilen modeli sistemi yapım o patojenitesi, anlamak için G. mellonella içinde etkili bir şekilde incelenmiştir. Henüz, G. mellonella bulaştırmak için kullanılan yöntem varyasyon fenotipik sonuçları değiştirmek ve sonuçların yorumlanması zorlaştırıyor. Burada, avantajları ve dezavantajları sistemik Candida Patogenez çalışma ve tekrarlanabilirlik geliştirmek için bir yaklaşım detay waxworm modelinin anahat. Sonuçlarımız G. mellonella mortalite kinetik aralığı vurgulamak ve bu kinetik modüle değişkenler açıklanmaktadır. Sonuçta, bu yöntem virülans Dissemine kandidiyaz, bir modeli eğitim için etik, hızlı ve uygun maliyetli bir yaklaşım gibi duruyor.

Burada, G. mellonella waxworms C. albicanskullanarak enfeksiyon Dissemine kandidiyazis modeli araştırmak için kullanmak için tekrarlanabilir bir yöntemi göstermektedir. Uygun bir depolama, bakım ve larva için hastalık yelpazesi tekrarlanabilirlik G. mellonella mortalite (Şekil 1A) sigortalanması kritik bileşeni vardır. Etkin olan sağlıklı larvalar var açık sarı/tan renk ve eksikliği siyah yamalar...

Watch this Scientific Journal Video about The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis at JoVE.com

The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis

Galleria mellonella Dissemine kandidiyazis için omurgasız bir model olarak hizmet vermektedir. Burada, enfeksiyon ayrıntılı protokol ve modelin etkinliği için destek veri sağlar.

Galleria mellonella Waxworm enfeksiyon modeli Dissemine kandidiyazis için

Candida species are common fungal commensals of humans colonizing the skin, mucosal surfaces, and gastrointestinal tract. Under certain conditions, ...

Bu yöntem, candida alanında suş virülansı ve belirli genlerin bu süreçlere katkıları hakkında anahtar soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin başlıca avantajları, hayvan kullanımı ile ilgili endişeleri önler, sağlam, hızlı, ucuz ve deney başına hayvan sayısı nın yüksek olmasını sağlar. Genel olarak konuşursak, bu yönteme yeni olan bireyler büyük olasılıkla biraz mücadele edeceklerdir, çünkü denemenin başlangıcından önce solucanların canlılığını değerlendirmekte biraz zorluk çekerler veya solucanların tutarsız enjeksiyonu ile ilgili bazı sorunlar yaşayabilirler.Larvalara hormon, antibiyotik veya diğer tedavileri tanıtmayan ve canlı numuneleri gönderip teslim edebilen toptancılardan ve tedarikçilerden larva sipariş imretmek. Larvalar geldiğinde, larvaların sağlığını ve canlılığını doğrulamak için her konteynırı kontrol edin. Sağlıklı larvalar tamamen yatak altında batırılmış olacak, hareketli, ve vücut boyunca siyah işaretleri veya renk değişiklikleri içeren birkaç larva ile sarı, açık tan renklendirme sahip.Larvalar, iki haftaya kadar ortam sıcaklığında havalandırılan bir alanda kaplarında saklanabilir. Galleria mellonella enfeksiyonu için maya hücreleri hazırlamak için, c.albicans suşları bir gecede taze maya-pepton-dekstroz suyu standart kültür tüpleri standart kültür tüpleri başına üç mililitre enjekte edilecek büyümek orta hızda dönen bir davul ve 30 derece santigrat. Ertesi sabah, santrifüj ile hücreleri toplamak ve taze PBS santrifüj beş mililitre üç kez maya yıkayın.Son yıkamadan sonra, taze PBS bir mililitre hücreleri resuspend ve bir mikrosantrifüj tüp içine maya aktarın. Bire 100, bire 1, 000 ve 1-100,000 konsantrasyonlarda ek PBS'deki hücreleri seri olarak seyreltin ve hücreleri 1'e 100 ve 1'e 1,000 seyreltmelerden sayar. Hücreleri yeni bir mikrosantrifüj tüpünde PBS konsantrasyonunun mililitrebaşına 2,5 katı 10'a ayarlayın ve enfeksiyonda kullanılacak her kültür için bir maya-pepton-dekstroz tabakası üzerinde 100 koloni oluşturma ünitesine ulaşmak için 100 adet koloni oluşturma ünitesini elde etmek için 1-100'e kadar olan seyreltme hacmini kaplamak suretiyle enfeksiyöz dozun doğruluğunu onaylayın.Larvaları Candida hücreleriyle enfekte etmek için, ilk olarak küçük miktarda balmumu solucanı biyolojik çoğaltma başına 100 x 15 santimetrelik steril Petri kabına yayın ve 10 mikrolitrelik bir şırıngaile 26-gauge iğne ile donatılmış 10 mikrolitrelik şırıngayı üç kez sterilize edin, 10 mikrolitrelik bir iğneyi %70 etanol 10 mikrolitre ve yıkama başına 10 mikrolitre PBS ile üç kez sterilize edin. Sonra, C.albicans aşıseyreltme girdap ve şırınga içine hücrelerin 10 mikrolitre yükleyin. G.mellonella larvaları bir konteyner açın ve dikkatle larvaları ortaya çıkarmak için yatak açmak için bir parmak kullanın, vücutlarında siyah pigmentasyon eksikliği ile sağlıklı sarı, tan larvaları seçerek, orta ve işaret parmakları ve başparmak kullanarak bir kalem kavramaya benzer bir şekilde bir larva almak için.Larvayı sırtına yuvarlayın, böylece bacaklar yukarı bakacak, vücudun tüm uzunluğunu parmaklar ve başparmak arasında tutarak larva kıvrılamaz veya enjeksiyondan uzaklaşamaz. Diğer elinizle, şırıngayı, iğne eğiminin yukarı bakacak şekilde döndürün ve en arkadaki sol bacakla kavşakta eğimin tüm uzunluğunu yavaşça vücuda takın, iğnenin vücuda nüfuz etmesini ve larvanın gövdesini içe doğru itmemesini sağlar. Bu işlemin en kritik adımı, larva gövdesine verilen zararın en aza indirilen ve tam bolus aşılanır şekilde balmumu solucanenjeksiyonudur.Sonra Candida inoculum tam 10 mikrolitre enjekte ve iğne ayıklayın. Aşılamayı takiben her 100 x 15 milimetrelik Petri kabında aynı Candida kültüründen enjekte edilen 10 larvayı bir arada barındırın ve larvayı sekiz gün boyunca 37 derecede kuluçkaya yatırın. Ölümü izlemek için her 24 saatte bir bulaşıkları kontrol et.Mortalite başlangıçta koyu pigmentasyon tarafından değerlendirilebilir, siyah yamalar veya organların oluşumu, ve hareket eksikliği. Mortaliteyi doğrulamak için, cımbızkullanarak larvaları sırtlarına hafifçe yuvarlayın ve larvaların alt tarafını cımbızla hafifçe dürtün. Güveler halinde pupate başlar Larvalar analize dahil edilebilir ancak erimeye başlarsa çıkarılmalıdır.G.mellonella ölüm kinetiği önemli bir fark larvaenfekte sıfır veya varıştan 10 gün sonra arasında var. Hastalığın karakteristik belirtileri enfeksiyona yenik her iki yaştan larvalarda ortaya çıkar, toplam hareketlilik kaybı ve sonunda ölümden önce siyah yamalar yol verir renk değişikliği ile başlayan. C.albicans ile enfeksiyon renk değişikliği ve morbidite bu süreci hızlandırır ama önemli ölçüde enfekte olmayan veya PBS enjekte larvaları ile karşılaştırıldığında ölüme yol açan fenotik belirteçlerin basamaklı değiştirmez.Özellikle, test edilen klinik olarak izole edilmiş C.albicans suşlarının herhangi birinden çiftleşme tipi benzeri homo-veya heterozigotlarla G.mellonella enfeksiyonu PBS enjekte edilen hayvanlara göre yüksek mortalite oranları üretirken, prototrofik türev suşların enjeksiyonları bu modeldeki öldürücü etkiyi zayıflatır. Sağlıklı larvaları seçmeyi ve larvaları idare etmede nazik olmayı unutmamak önemlidir. Birden fazla suş aşılanacaksa, Candida hücrelerinin PBS'de çok uzun süre bekletmemeye özen.Bu prosedürü takiben, bir enfeksiyon sırasında konak ve mantar patojeni arasındaki etkileşimler hakkında ek soruları cevaplamak için immünolojik profilleme ve larva içinde Candida lokalizasyonu gibi diğer yöntemler de uygulanmaktadır. Bu teknik, geliştirildikten sonra araştırmacıların yüksek iş lenme biçimleri kullanarak Candida patogenezini keşfetmelerinin yolunu açmıştır. Candida albicans ile çalışan bakım gerektirir ve kişisel koruma ekipmanları nın aşınması da dahil olmak üzere standart önlemler, her zaman bu prosedürü gerçekleştirirken alınması gerektiğini unutmayın.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

The Galleria mellonella Waxworm Infection Model for Disseminated Candidiasis

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Bakteriyel Yapışma Çalışma Kesme Stres Tanıtımı

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Non-invasive Imaging of Disseminated Candidiasis in Zebrafish Larvae

Zebra balığı Larva yılında Dissemine Kandidiyazis non-invaziv Görüntüleme

Disseminated candidiasis caused by the pathogen Candida albicans is a clinically important problem in hospitalized individuals and is associated with a 30 ...

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

Böcek<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Bakteriyel Patogenez İnceleyecek Güçlü Enfeksiyon Model olarak

The study of bacterial virulence often requires a suitable animal model. Mammalian models of infection are costly and may raise ethical issues. The use of ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Kullanımı<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Bir Model Organizma olarak Eğitim için<em&gt; Legionella pneumophila</em&gt; Enfeksiyon

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

Yapımcı Epitel Hasar Analizi<em&gt; Entamoeba histolytica</em&gt; Enfeksiyon

Entamoeba histolytica is the causative agent of human amoebiasis, a major cause of diarrhea and hepatic abscess in tropical countries. Infection is ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Swimbladder Enjeksiyon ile Larva Zebra balığı Mukozal Candidiazis Modelleme

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Floresans tabanlı Nöraminidaz İnhibisyonu Tahlili antivirallerin nöraminidaz inhibitörü Class Nezle Virüslerinden eğilimi değerlendirilebilir

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

A Galleria mellonella Oral Administration Model to Study Commensal-Induced Innate Immune Responses

Bir Galleria mellonella Oral yönetim modeli için Study Commensal-Induced doğuştan gelen bağışıklık yanıtı

The investigation of the immunogenic potential of commensal bacteria on the host immune system is one essential component when studying intestinal ...

Use of the Invertebrate Galleria mellonella as an Infection Model to Study the Mycobacterium tuberculosis Complex

Use of the Invertebrate Galleria mellonella as an Infection Model to Study the Mycobacterium tuberculosis Complex

Mycobacterium tüberküloz kompleksinin incelenmesi Için bir enfeksiyon modeli olarak ınvertebrate Galleria mellonella kullanımı

Tuberculosis is the leading global cause of infectious disease mortality and roughly a quarter of the world&#8217;s population is believed to be infected ...

Tools for the Real-Time Assessment of a Pseudomonas aeruginosa Infection Model

Tools for the Real-Time Assessment of a Pseudomonas aeruginosa Infection Model

Pseudomonas aeruginosa Enfeksiyon Modelinin Gerçek Zamanlı Değerlendirilmesi için Araçlar

Pseudomonas aeruginosa (Pa) is one of the most common opportunistic pathogens associated with cystic fibrosis (CF). Once Pa colonization is established, a ...