Name: a new portable in vitro exposure cassette for aerosol sampling
Uploaded: 2019-02-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling at JoVE.com

المؤلف يود أن يشكر سولومونوف بوريس وفرجينيا كومنولث الابتكار آلة متجر للحصول على تعليمات النماذج الأولية السريعة الجهاز. الكتاب أيضا يود أن يشكر كريستيان روميرو-فوينتيس الفريق ليونسكي والدكتور فيتالي أفروتين، الدكتور ديمتري بيستوف، وفرجينيا كومنولث المواد النانوية الأساسية توصيف مرفق لمساعدتهم مع توصيف الجسيمات. وأيد هذا العمل بدء التشغيل الأموال المقدمة للدكتور ليونسكي من كلية الهندسة في جامعة فرجينيا كومنولث.

مشغلي يجب ارتداء معدات الوقاية الشخصية (مثل مختبر معطف، قفازات، نظارات) عند تنفيذ الخطوات 1، 2، 3، 5 و 6.
1-إعداد المواد
<ol><li>
إعداد مواد لنظام الجمعية والتعرض للتأكد من التكرار.
	<ol>
<li>تأكد من استخدام جديد أو الإيثانول 70 ٪ تنظيفها ¼ "القطر الداخلي موصلة الأنابيب و ¼" الق?...

أشرطة الكاسيت تصفية توفر طريقة بسيطة وغير مكلفة لجمع الهباء الجوي في منطقة التنفس؛ غير أن الهباء الجوي العينات المستخرجة من المرشحات تمثل الأيروسول كاملة (أي غازات والتطاير والجسيمات) وبالتالي الحد من تقييم الآثار البيولوجية ذات الصلة. استخدام التصميم الأولى للكاسيت تصفية 37 ملم، بيفيك ي...

شخصية أخذ العينات باستخدام تقنيات في المختبر يمكن أن توفر معلومات شاملة بشأن الآثار البيولوجية للهباء الجوي في مكان العمل. 1 التعرض للملوثات في الهواء وتشمل التعرض لهذه المادة الكيميائية ذاتها، أن عينات الهواء التي تم جمعها، تحت ظروف المغمورة حيث عرض الغاز إلى تعليق خلية، التعرض المتقطع استخدام جهاز مثل الروك، أو مباشرة التعرض في واجهة الهواء السائل (على). 2 كثير من هذه التقنيات تجري مع الخلايا التي نمت في تعليق أو جمع العينات قبل التعرض، كل منها يمكن أن تؤثر على الدراسة السمية نظراً للتغيرات المحتملة في الأيروسول. 3 تجنب هذه التغييرات، المختبر يمكن نقله إلى الحقل باستخدام عدة في المختبر على الثقافة تعرض النظم المستخدمة في الأدب،،،من45،،من67 8،،من910،11،،من1213 ولكن قليلة متوفرة تجارياً. 8 , 9 , 12 هذه النظم غالباً ما تكون ضخمة، لا سيما عندما بما في ذلك أدوات لتنظيم درجة الحرارة والرطوبة للبيئة الخلوية ومعدل تدفق الأيروسول عينة. باستخدام بيفيك، التعرض للهباء الجوي يمكن أن يؤديها خارج إعداد مختبر تقليدية أو داخل منطقة التنفس أثناء محاكاة ظروف استنشاق.
أن تحديد من الهباء الجوي ترسب في المختبر مهم للتحقيق في الآثار الصحية بسبب استنشاق. منطقة التنفس، منطقة حدود 30 سم من الفم والأنف،14 حاسمة الأهمية لفهم التعرض للجسيمات النانوية وربط التأثيرات البيولوجية الموجودة في الرئتين. 2 في كثير من الأحيان، الترسب في الخلايا يعرف كفاءة ترسيب، الجسيمات المودعة على وتناول الخلايا مقسوماً على الجسيمات التي تديرها إلى6،نظام15 أو بصورة جماعية بنفس المبالغ. 4 , 16 الأساليب الحالية لقياس الهباء الجوي في منطقة التنفس هي عامل التصفية على أساس والتقاط الجزيئات على مدى فترة معينة أخذ عينات واستخدام عوامل التصفية لإجراء مزيد من التجارب. 17 الرصد الشخصي يتطلب نظام صغيرة التي تأتي مع المفاضلة العينات أقل.
هناك الكثير من النهج لتحديد الآثار الصحية الناجمة عن التعرض للهباء الجوي. النموذج على يسمح للأيروسول تدار مباشرة إلى الخلايا عن طريق الهواء كما هو الحال في سيناريو تعرض حقيقي، حتى الآن أكثر فعالية من حيث التكلفة ووقتاً أقل كثافة مما في فيفو الدراسات بينما يقلد الحواجز الهواء السائل مثل العيون، الجلد، والرئتين. خلايا الرئة نمت على لديها القدرة على توليد طبقة حاجز الاستقطاب،18،19 التي تنتج الصفات الفسيولوجية التي تشبه في فيفو الرئة ظهارة، بما في ذلك إنتاج مخاط والفاعل بشكل خاص خطوط خلايا الشعب الهوائية أو التهاب، أهداب الضرب وتقاطعات ضيق19 ،19،20 وخلية الاستقطاب. 18 تغييرات كهذه يمكن أن تؤثر على الاستجابة الخلوية قياسه في دراسات السمية. 21 بالإضافة إلى ذلك، على نموذج في المختبر نتائج يتعرضون غالباً أكثر حساسية من الخلايا عن طريق تعليق نماذج22 ، وهم قادرون لنموذج السمية الحادة في فيفو استنشاق. 23 , 24 لذلك، نظام تعرض على التي قادرة على إجراء قياسات داخل منطقة التنفس خطوة تالية طبيعية.
بتعريض الخلايا للهباء الجوي مباشرة على مصدر للانبعاثات، يحدث التحقيق في آثار جميع الغازات والمركبات شبه المتطايرة، والجسيمات المتورطين في الخليط. عندما يتم جمع الخليط في عامل تصفية، لم يتم التقاطها بالغازات والمركبات المتطايرة ولا يمكن التحقيق في الخليط كله. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يؤدي إعادة تشكيل الجزيئات في شكل مسحوق أو تعليق سائل إلى التجميع أو التفاعلات الموائع والجسيمات، مثل حل، في تعليق السائل. 25 , 26 عندما تتم إضافة جسيمات الهباء الجوي إلى السائل، هناك إمكانية أعلى للتكتل، وتشكيل27 25،كورونا البروتين أو28 أو التفاعل مع المركبات في السائل، التي يمكن أن تؤثر على الترسيب و تؤثر في استجابة بيولوجية. 29 , 30
التعرض على يستند إلى ثلاثة ملامح الهباء الجوي الرئيسية وسحابة تسوية، موازية وتدفق وتدفق عمودي. سحابة تسوية، يستخدم قبل التعرض للخلية واجهة الهواء السائل (ALICE)،4 نظام مجموعة حيث إيداع الجسيمات من خلال الجاذبية وديفوسيونال تسوية كما الأيروسول تعامل كوحدة واحدة. تدفق مواز، يستخدمها الالكتروستاتيكي الهباء الجوي في المختبر نظام التعرض (الطنف)5 والتعدد الثقافي التعرض الدائرة (MEC) ثانيا،6 يسمح للترسيب من خلال إضافة البراونية من خلال الشخصية تدفق. تدفق عمودي، المستخدمة من قبل ميكروسبرايير،7 "نانو الأيروسول الدائرة" للسمية في المختبر (ناسيفت) و11 والتجاريه على أنظمة8،،من910،12، يضيف انحشار من جسيمات داخل منطقة الترسيب. كثير من هذه النظم التعرض الكبيرة والضخمة، التي تتطلب نظم الزائدة للهباء الجوي قبل التكييف، مضخات للتدفق، أو حتى تدفئة الغرف للحضانة للخلايا. هذا الحجم الكبير يقلل من قابلية للنظام. بدلاً من أخذ العينات مباشرة على مصدر للانبعاثات، هذه النظم غالباً ما يكون إلى الهباء مختبر أو النموذج التي تم إنشاؤها لتحليل العينات. يمكن أن تضيع تعقيد الأيروسول المنبعثة في الترجمة من الميدان إلى المعمل. بيفيك أصغر من النظم الحالية، مع مساحة سطح خارجي حوالي 460 سم2 وتزن 60 غراما فقط، مع التحكم في الحرارة والرطوبة تدمج في نظام يسمح لجهاز محمول للغاية. انخفاض حجم ووزن السماح للنظام بأن ترتديه أو اتخاذها مصدرا للتعرض، وتسمح بأخذ العينات مباشرة.
الحجم الكبير لنظم التعرض الحالي يقلل أيضا من قدرة على القيام بأخذ العينات للتحقيق في التدرجات المكانية في تركيزات. هذا القرار مفتاح عند تحديد الآثار السمية للعديد من الإمكانيات البيئية والمخاطر المهنية مثل أنشطة هذه المسألة أو مكان العمل جسيمات عوادم المركبات التي يحدث فيها هباء. فورا بعد انتهاء الانبعاثات، يصبح هناك تباين المكاني في تركيز الجسيمات. وهذا ينمو مع الوقت تفريق الجزيئات في جميع أنحاء الغلاف الجوي، ويمكن تغيير هذه الآثار استناداً إلى الظروف المحيطة، مثل درجة الحرارة والضغط والرياح والشمس. يمكن أن تبدأ جسيمات إلى سن وأكسدة كذلك مرة المنبعثة31،32 ومعدلات تشتيت تتأثر بالتضاريس؛ سيتم العثور على تركيزات أعلى في الوديان والإنفاق، وهي تباطؤ آثار التشتت، حيث يمكن العثور على تركيزات أقل حيث هناك مساحة كبيرة للتشتت. 33 هذه التغييرات في معدلات انتشارها يمكن أن تكون لها آثار كبيرة على صحة الإنسان ويتبين عند مقارنة عدد البالغين المصابين بالربو الذين يعيشون المناطق الحضرية مقابل في البيئات الريفية. 34 بينما العديد من التعرض لنظم تقديم عينات متعددة في وقت واحد، أنظمة متعددة اللازمة مع وفرة معدات كبيرة لتنفيذ القرار المكانية.
من خلال جلب المختبر إلى الميدان، يمكن تقليل وقت التحليل باستخدام الخلية كله كجهاز استشعار. بعد الآليات البيولوجية المعروفة ونقاط النهاية يمكن أن تساعد في تحديد تكوين الهباء الجوي وحجم. بسبب أساليب إزالة بطيئة، بما في ذلك إزالة mucociliary والبلعمه إزفاء، غالباً ما تتفاعل هذه الجسيمات مع الخلايا تقريبا من أيام لأسابيع3 توليد الأكسدة والالتهابات، وموت الخلية حتى. هذه النهاية البيولوجية يمكن أن يكون نقطة انطلاق لمسارات النتيجة السلبية لأمراض القلب والأوعية الدموية أو مرض الانسداد الرئوي المزمن. وبالإضافة إلى ذلك، يقوم وييمين et al. صفيف فحوصات في المختبر لمقارنة مع قيم الأدب للمدى القصير في فيفو سمية الاستنشاق. 35 وكان من المتوقع في فيفو استجابة مع اثنين من أربع نتائج إيجابية من اختبار سيتوتوكسيسيتي عن طريق الإفراج نازعة لاكتات، الأكسدة من الجلوتاثيون تشكيل الحد وفوق أكسيد الهيدروجين والإصدار، والتهاب المحتملة من الجينات عامل نخر الورم ألفا. من أصل عشرة أكاسيد معدنية نانوسيزيد اختبار، اختبار ستة كنشط (أكسيد التيتانيوم وأكسيد الزنك وأكسيد السيريوم مختلفة أربعة) استخدام التعرض في المختبر مع التأكيد في فيفو. 
من أجل دراسة آثار الهباء الجوي في بيئة مهنية، وضعت لدينا مختبر بيفيك للتعرض في الميدان. بالإضافة إلى ذلك، يمكن ارتداؤها بيفيك لأخذ العينات الشخصي رصدها والتحقيق فيها التعرض لاستنشاق مثل كاسيت تصفية مم 3736 أو أنظمة متعددة يمكن استخدامها لتحقيق القرار المكانية داخل منطقة معينة. هذا البروتوكول، بتوصيف واستخدام بيفيك يناقش فيه. بعد التعرض، ولوحظت الآثار البيولوجية من خلال فحوصات سيتوتوكسيسيتي.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Scanning mobility particle sizer (SMPS)</td>
			<td>TSI, Inc.</td>
			<td>3910</td>
			<td>NanoSMPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical particle sizer (OPS)</td>
			<td>TSI, Inc.</td>
			<td>3330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Pipe, 4&#34; Long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>4830K116</td>
			<td>Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brass Ball Valve with Lever Handle</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>4112T12</td>
			<td>Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel Pipe, 2&#34; Long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>7753K121</td>
			<td>Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPA filter</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>09-744-12</td>
			<td>HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Generator</td>
			<td>PISCO USA</td>
			<td>VCH10-018C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PIVEC</td>
			<td>VCU</td>
			<td></td>
			<td>For design please contact authors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Resistive heater</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; barbed connectors</td>
			<td>Zefon International, Inc.</td>
			<td>459743</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porous tubing</td>
			<td>Scientific Commodities, Inc.</td>
			<td>BB2062-1814A</td>
			<td>Hydrophilic 10 um pores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Battery power bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture insert</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>353095</td>
			<td>24 well plate insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter Forceps</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>09-753-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>13-711-27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Fiber Filters</td>
			<td>SKC</td>
			<td>225-7</td>
			<td>Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra Micro Balance</td>
			<td>A&#38;D</td>
			<td>BM-22</td>
			<td>Housed in environmental chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37 mm filter cassette</td>
			<td>SKC</td>
			<td>225-3250</td>
			<td>Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Variable flow vacuum pump</td>
			<td>SKC</td>
			<td>220-5000TC</td>
			<td>AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1090</td>
			<td>40 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1088</td>
			<td>100 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1117M</td>
			<td>800 nm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a new portable in vitro exposure cassette for aerosol sampling

ويدخل هذا البروتوكول في المختبر تعرض نظام جديد، يمكن أن يجري البالية، بما في ذلك في توصيف والأداء. واجهة الهواء السائل (على) في المختبر التعرض النظم غالباً ما تكون كبيرة وضخمة، مما يجعل النقل الميدانية والعملية في المصدر الانبعاث أو داخل منطقة التنفس صعباً. عن طريق تصغير هذه النظم، يمكن أن يمثل المختبر إلى الميدان، وتعجيل وقت المعالجة وتوفير أنسب أسلوب تعرض لا يغير الأيروسول قبل الاتصال الخلايا. المحمولة في المختبر كاسيت التعرض (بيفيك) تكيف كاسيت تصفية 37 ملم للسماح للسمية في المختبر على اختبار خارج إعداد مختبر تقليدية. بيفيك تميزت باستخدام ثلاثة أحجام من جسيمات نانوية النحاس لتحديد كفاءة الترسيب استناداً إلى قياس الجاذبية وتحليل تركيز عدد الجسيمات. وأجريت التجارب الأولية سيتوتوكسيسيتي مع خلايا الرئة المعرضة لتحديد قدرة النظام على إيداع الجسيمات مع المحافظة على بقاء الخلية. بيفيك يوفر من ترسب مماثلة أو زيادة كفاءة عند مقارنة بتدفق عمودي متوفرة في المختبر أجهزة التعرض. وعلى الرغم من انخفاض الإنتاجية عينة، يعطي صغر حجم بعض المزايا للحالي في المختبر على نظم للتعرض. وتشمل هذه القدرة على أن ترتديه للرصد الشخصي، والتنقل من المختبر إلى مصدر للانبعاثات، والخيار لإنشاء أنظمة متعددة للقرار المكانية مع الحفاظ على مستخدم أقل تكلفة. بيفيك نظام قادر على جمع الهباء الجوي في الميدان وداخل منطقة التنفس على الهواء-ربطه، نموذجا في المختبر .

علم السموم المهنية في المختبر ينطوي على الحفاظ على استمرارية الخلوية أثناء أداء التعرض الهباء الجوي. ويرد النظام بيفيك في الشكل 2، بما في ذلك درجة الحرارة والرطوبة المراقبة بيفيك البالية. وأبقى درجة الحرارة باستخدام سخان مقاوم البطارية وزيادة الأير...

Watch this Scientific Journal Video about A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling at JoVE.com

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

جديدة محمولة في المختبر تعرض كاسيت لأخذ العينات الهباء الجوي

نقدم هنا، وضع بروتوكول لتنفيذ التعرض الأيروسول الخلوية المحمولة وقياس الاستجابة الخلوية. يستخدم الأسلوب الخلايا، نمت في واجهة الهواء السائل، ومحاكاة في فيفو فسيولوجيا. وقد لوحظ الاستجابة الخلوية للهباء الجوي نانوحبيبات النحاس الأكسدة عن طريق توليد أنواع الأكسجين التفاعلية وسيتوتوكسيسيتي كالإصدار نازعة لاكتات.

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...

وهذا البروتوكول هام، حيث أن PIVEC يسمح بالتعرض المباشر لثقافة الخلية إلى الهباء الجوي في العالم الحقيقي. يمكن تحذير النظام من تذوق نفس الهواء الذي يتنفسه الشخص ، مما يتيح نوعًا جديدًا من مراقبة جودة الهواء. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي سهولة التقاط الهباء الجوي على خلايا الرئة المستزرعة في مواقع لا يمكن الوصول إليها من قبل أنظمة مقاعد البدلاء، مثل مصدر القبول أو داخل منطقة التنفس.إثبات الإجراء سيكون الدكتور لين Secondo، خريج حديث من مختبري، وناثانيل ويغال، طالب جامعي من مختبري. بالنسبة لهذه التجربة، يتم تخزين مواد الاختبار والبيئة الخاضعة للرقابة لمدة 24 ساعة قبل الاختبار. لتجميع نظام التشتت الجاف، قم بتوصيل صمام الكرة إلى نهاية واحدة من أربعة بوصة طويلة، 1/8 حجم الأنابيب مترابطة.هذا بمثابة النطاط الجسيمات. من خلال نهاية مفتوحة من النطاط الجسيمات، وضعت في الكمية المطلوبة من الجسيمات النانوية النحاس. ثم أغلق النطاط الجسيمات مع صمام كرة آخر.توصيل اثنين بوصة طويلة، 1/8 حجم الأنابيب إلى صمام. مكان ثلاثة بوصة طويلة، 1/2 بوصة أنابيب قطرها الخارجي حول أنبوب بوصة اثنين. أدخل فلتر HEPA داخل الأنابيب القصيرة ، مما يضمن اتجاه التدفق من خلال صمام الكرة.باستخدام خيوط، وربط مولد فراغ لصمام الكرة الأخرى. ثم، قم بتوصيل مولد الفراغ إلى خزان الهواء. وضع 1/4 بوصة قطر خارجي أنابيب على مأخذ مولد فراغ لتوصيله إلى الإعداد التجريبية.بدوره الصمام الرئيسي والصمامات التنظيمية على خزان الهواء لضبط التدفق المطلوب. فتح صمام الكرة، الأقرب إلى مرشح HEPA ثم فتح صمام الكرة الأقرب إلى مولد فراغ. أبقها مفتوحة أثناء التوصيف أو التعرض قبل إغلاقها.أولا صمام الكرة الأقرب إلى مولد فراغ، ومن ثم صمام الكرة الأقرب إلى مرشح HEPA. إغلاق الصمامات الرئيسية والتنظيمية على خزان الهواء لوقف تدفق. لتنظيف، واستخدام 70٪ الإيثانول لغسل صمامات الكرة والتفريغ مولد.وضع الأنابيب المعدنية في الأوتوكلاف للتعقيم. بعد زراعة الخلايا في الهواء واجهة السائل، والسماح للخلايا لتكواز لمدة 24 ساعة. لتجميع، واتخاذ قاعدة PIVEC مع مواجهة البئر حتى وربط ثقافة الخلية إدراج محول في الأعلى.إضافة أربعة ملليلتر من وسائل الإعلام ثقافة الخلية إلى بئر من قاعدة PIVEC باستخدام micropipette. استخدم الملاقط لوضع البيانات الموروثة الخلية داخل المحول. مع الجزء الضيق من قطعة PIVEC العلوية التي تواجه لأعلى، قم بتوصيله بالمحول.بعناية، التفاف PIVEC مع طبقة واحدة من الشريط اللاصق. ادفع لتوصيل قطع كاسيت 37 ملليمتر على أعلى وأسفل PIVEC. ضع محولات شائكة 1/4 بوصة في مدخل كاسيت ومأخذ.التفاف سخان مقاوم حول PIVEC مع الأسلاك في القاعدة. الشريط لتأمين. التفاف PIVEC مع ثماني جولات من رقائق الألومنيوم للعزل، وآمنة مع الشريط.قم بتوصيل أنابيب قطرها الخارجي 1/2 بوصة بالمحول في الجزء العلوي من PIVEC. إزالة أنابيب المسامية من الماء المعقم ووضع داخل أنابيب على رأس PIVEC. نقل نظام للدخان غطاء محرك السيارة ومشابك PIVEC على موقف حلقة وآمنة.توصيل PIVEC إلى نظام الهباء الجوي عن طريق ربط أنابيب قطر 1/4 بوصة في منفذ مولد الهباء الجوي إلى أنابيب مسامية. قم بتوصيل مخرج PIVEC بقطر 1/4 بوصة الذي يتم توصيله بمصفاة HEPA ومضخة فراغ بواسطة موصل Y. بدوره على الصمامات وتعيين معدل تدفق المضخة إلى 0.5 لتر في الدقيقة الواحدة.تعريض الخلايا لجسيمات نانوية نحاسية لمدة عشر دقائق قبل إغلاق الصمامات وإيقاف المضخة. إزالة PIVEC من نظام الهباء الجوي. إخراج الخلية إدراج ثقافة باستخدام ملاقط ووضعها في لوحة بئر العقيمة لبدء التشايس البيولوجية المطلوبة.نقاط وقت التعرض المقترحة، وضع إدراج مرة أخرى إلى حاضنة ثاني أكسيد الكربون. وسائط التعرق من PIVEC باستخدام القطارة. استخدام 70٪ الإيثانول لغسل PIVEC وتعقيمه مع الأشعة فوق البنفسجية لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل التجربة القادمة.وقد تمّت تقنية PIVEC باستخدام ثلاثة أحجام من الجسيمات النانوية النحاسية لتحديد كفاءة الترسب. ويلاحظ زيادة ترسب عموما لتصميم البئر 24، ثم تصميم الآبار الستة. وهو ينخفض قليلاً لـ 100 نانومتر مقارنة بـ 40 نانومتر و800 جسيمات نحاسية نانومترية.تم تحديد تركيز عدد الجسيمات من الهباء الجوي للجسيمات النانوية النحاسية بواسطة حجم جسيمات الحركة المسحية القائمة على الفلتر، وكذلك قياسات حجم الجسيمات البصرية. يمكن تسريع تحليل ما بعد التعرض عن طريق تحديد العلاقة الجرعة بين مرشح 37 ملليمتر وتدرج ثقافة الخلية. وتظهر المقارنة وجود ارتباط قوي لـ 800 جسيمات نحاسية نانومترية بقيمة p أقل من 0.05.وبالمقارنة مع نظم التعرض في المختبرات المتعامدة في جميع المؤلفات، فإن كفاءة الترسيب في PIVEC على مدى أحجام الجسيمات التي تم اختبارها قابلة للمقارنة أو تزيد من القيم المبلغ عنها. أهم شيء يجب تذكره هو أنه على الرغم من أن هذا البروتوكول يوضح استخدام PIVEC في بيئة مختبرية ، فقد تم تصميمه لقياس الاستجابات الخلوية للهباء الجوي في موقع التعرض. وعند إجراء الاختبار في الموقع، من المهم تحديد كفاءة ترسب الهباء الجوي الاختباري.وتحدد كفاءة الترسيب الجرعة المودعة من الجسيمات التي تتعرض لها الخلايا. يمكن إجراء فحوصات بيولوجية إضافية للتحقيق في نقاط نهاية استجابة أكثر خلوية بسبب التعرض. وقد استخدمت PIVEC لتقييم استجابة الخلوية بسبب الهباء الجوي ولدت خلال عمليات الطباعة 3D، مثل قذف الموثق المعدني، وتصنيع خيوط تنصهر.ويمكن أن يكون استخدام الجسيمات النانوية، ولا سيما في شكل الهباء الجوي، خطراً وينبغي إجراء أي تعرض في غطاء للأبخرة. وينبغي أن يتم العمل الخلوي في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية.

Research

JoVE Journal

Environment

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

طرق لإجراء الصلبان في<em&gt; الهلبانة البلدي</em&gt;، نظام نموذج جديد للأعشاب

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA الطريقة 1615. قياس الفيروسة المعوية ونوروفيروس حدوثها في المياه عن طريق الثقافة وRT-QPCR. I. جمع عينات الفيروسات

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes (Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes Steinernematidae, Heterorhabditidae

أخذ العينات التربة والنيماتودا الممرضة للحشرات عزل (Steinernematidae، Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (a.k.a. EPN) represent a group of soil-inhabiting nematodes that parasitize a wide range of insects. These nematodes belong to ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay

وكالة حماية البيئة الطريقة 1615. قياس الفيروسة المعوية وقوع نوروفيروس في المياه عن طريق الثقافة وRT-QPCR. II. مجموع زروع الفحص الفيروسات

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA الطريقة 1615. قياس الفيروسة المعوية ونوروفيروس التواجد في المياه عن طريق الثقافة وRT-QPCR. الجزء الثالث. كشف الفيروس عن طريق RT-QPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Clean Sampling and Analysis of River and Estuarine Waters for Trace Metal Studies

نظيفة أخذ العينات وتحليل نهر ومصبات الأنهار المياه للدراسات المعدنية تتبع

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

تعديل وتطبيق ورقة المنفاخ-VAC لأخذ العينات مجال المفصليات

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

الكشف عن آخر الغدد الصماء في المياه عن طريق المتاحة تجاريا<em&gt; في المختبر</em&gt; Transactivation اختبارات بيولوجية

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems (PEMS) for the Real-driving Emissions (RDE) Regulation in Europe

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems PEMS for the Real-driving Emissions RDE Regulation in Europe

تنفيذ الانبعاثات محمولة أجهزة القياس (PEMS) لتنظيم انبعاثات يقود ريال مدريد (RDE) في أوروبا

Vehicles are tested in controlled and relatively narrow laboratory conditions to determine their official emission values and reference fuel consumption. ...

A Flow-through Exposure System for Evaluating Suspended Sediments Effects on Aquatic Life

نظام التعرض تدفق من خلال لتقييم موقوف الرواسب التأثيرات على الحياة المائية

This paper describes the Fish Larvae and Egg Exposure System (FLEES). The flow-through exposure system is used to investigate the effects of suspended ...