Name: a new portable in vitro exposure cassette for aerosol sampling
Uploaded: 2019-02-22T13:00:00
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लेखक बोइस solomonov और वर्जीनिया राष्ट्रमंडल नवाचार मशीन की दुकान के लिए तेजी से प्रोटोटाइप उपकरण के साथ मदद के लिए शुक्रिया अदा करना चाहूंगा । लेखकों को भी क्रिस्टियन romero-lewinski समूह के fuentes शुक्रिया अदा करना चाहूंगा, डॉ vitaliy avrutin, डॉ दिमित्री pestov, और वर्जीनिया राष्ट्रमंडल नैनोमेट्रिक मुख्य लक्षण वर्णन सुविधा के कण लक्षण वर्णन के साथ उनकी मदद के लिए । यह कार्य वर्जीनिया राष्ट्रमंडल विश्वविद्यालय में कॉलेज ऑफ इंजीनियरिंग द्वारा डॉ लेविंस्की को प्रदान किए गए स्टार्टअप फंडों द्वारा समर्थित था ।

ऑपरेटरों व्यक्तिगत सुरक्षात्मक उपकरण पहनना चाहिए (उदा लैब कोट, दस्ताने, काले चश्मे) जब कदम 1, 2, 3, 5, और 6 प्रदर्शन ।
1. सामग्री की तैयारी
<ol><li>
सिस्टम असेंबली के लिए सामग्री तैयार करें और दोहराव सु...

फिल्टर कैसेट श्वास क्षेत्र में एयरोसोलों को इकट्ठा करने का एक सरल, सस्ता तरीका प्रदान करते हैं; हालांकि, फिल्टर से निकाले गए एयरोसोल के नमूने पूरे एयरोसोल (यानी गैसों, वोलाटिलेस, और पार्टिकुलस) का प्रति...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Scanning mobility particle sizer (SMPS)</td>
			<td>TSI, Inc.</td>
			<td>3910</td>
			<td>NanoSMPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical particle sizer (OPS)</td>
			<td>TSI, Inc.</td>
			<td>3330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Pipe, 4&#34; Long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>4830K116</td>
			<td>Standard-Wall 304/304L, Threaded on Both Ends, 1/8 Pipe Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brass Ball Valve with Lever Handle</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>4112T12</td>
			<td>Compact High-Pressure Rating, 1/8 NPT Female</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel Pipe, 2&#34; Long</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>7753K121</td>
			<td>Standard Wall, Threaded on One End, 1/8 Pipe Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPA filter</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>09-744-12</td>
			<td>HEPA-Cap Disposable Air Filtration Capsule</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Generator</td>
			<td>PISCO USA</td>
			<td>VCH10-018C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PIVEC</td>
			<td>VCU</td>
			<td></td>
			<td>For design please contact authors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Resistive heater</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/4&#34; barbed connectors</td>
			<td>Zefon International, Inc.</td>
			<td>459743</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porous tubing</td>
			<td>Scientific Commodities, Inc.</td>
			<td>BB2062-1814A</td>
			<td>Hydrophilic 10 um pores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Battery power bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture insert</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>353095</td>
			<td>24 well plate insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter Forceps</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>09-753-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>13-711-27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Fiber Filters</td>
			<td>SKC</td>
			<td>225-7</td>
			<td>Binder-Free Type AE Filter 37 MM 1.00 um pore</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra Micro Balance</td>
			<td>A&#38;D</td>
			<td>BM-22</td>
			<td>Housed in environmental chamber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37 mm filter cassette</td>
			<td>SKC</td>
			<td>225-3250</td>
			<td>Filter Cassette Blank, 37 mm, Clear Styrene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Variable flow vacuum pump</td>
			<td>SKC</td>
			<td>220-5000TC</td>
			<td>AirChek TOUCH, 5 to 5000 mL/min</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1090</td>
			<td>40 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1088</td>
			<td>100 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper Particles</td>
			<td>U.S. Research Materials, Inc.</td>
			<td>US1117M</td>
			<td>800 nm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a new portable in vitro exposure cassette for aerosol sampling

इस प्रोटोकॉल विट्रो एक्सपोजर सिस्टम में एक नया परिचय, अपने लक्षण वर्णन और प्रदर्शन सहित पहना जा रहा है, में सक्षम । वायु-तरल इंटरफेस (ALI) इन विट्रो एक्सपोज़र सिस्टम अक्सर बड़े और भारी होते हैं, उत्सर्जन के स्रोत पर क्षेत्र और ऑपरेशन के लिए परिवहन कर रहे हैं या श्वास क्षेत्र के भीतर मुश्किल है । इन प्रणालियों के miniaturization के माध्यम से, प्रयोगशाला क्षेत्र के लिए लाया जा सकता है, प्रसंस्करण समय में तेजी लाने और एक अधिक उपयुक्त जोखिम विधि है कि एयरोसोल कोशिकाओं से संपर्क करने से पहले बदल नहीं करता प्रदान. विट्रो एक्सपोजर कैसेट (pivec) में पोर्टेबल एक ३७ मिमी फिल्टर कैसेट के लिए एक पारंपरिक प्रयोगशाला की स्थापना के बाहर विट्रो विषाक्तता परीक्षण में अनुमति के लिए adapts । pivec तांबे नैनोकणों के तीन आकारों का उपयोग करने के लिए साठा दक्षता gravimetric और कण संख्या एकाग्रता विश्लेषण के आधार पर निर्धारित की विशेषता थी । प्रारंभिक cytotoxicity प्रयोगों को उजागर फेफड़ों की कोशिकाओं के साथ प्रदर्शन किया गया था, जबकि सेल व्यवहार्यता को बनाए रखने के कणों को जमा करने के लिए प्रणाली की क्षमता का निर्धारण । pivec विट्रो एक्सपोजर डिवाइस में उपलब्ध लम्बवत प्रवाह की तुलना करते समय एक समान या बढ़ी हुई जमाव दक्षता प्रदान करता है । कम नमूना throughput के बावजूद, छोटे आकार विट्रो अली एक्सपोजर सिस्टम में मौजूदा करने के लिए कुछ लाभ देता है । ये व्यक्तिगत निगरानी के लिए पहना जा करने की क्षमता शामिल, प्रयोगशाला से उत्सर्जन के स्रोत के लिए गतिशीलता, और एक कम उपयोगकर्ता लागत को बनाए रखते हुए स्थानिक संकल्प के लिए कई प्रणालियों सेट अप करने के लिए विकल्प. पीवीओसी एक ऐसी प्रणाली है जो क्षेत्र में एयरोसोलों और श्वास क्षेत्र के भीतर एक हवा-interfaced पर, विट्रो मॉडल में एकत्रित करने में सक्षम है ।

व्यावसायिक विट्रो विष विज्ञान में सेलुलर व्यवहार्यता बनाए रखने शामिल है जबकि एयरोसोल जोखिम प्रदर्शन । पीवीओसी सिस्टम चित्रा 2में दिखाया गया है, जिसमें तापमान और आर्द्रता ?...

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A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

एयरोसोल नमूनाकरण के लिए विट्रो एक्सपोजर कैसेट में एक नया पोर्टेबल

यहां, हम पोर्टेबल सेलुलर एयरोसोल एक्सपोजर प्रदर्शन और सेलुलर प्रतिक्रिया को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं । विधि कोशिकाओं का उपयोग करता है, हवा में बड़े-तरल इंटरफेस, विवो फिजियोलॉजी में नकल उतार. कॉपर नैनोपैर्टिकल एयरोसोलों के लिए सेलुलर प्रतिक्रिया प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों पीढ़ी और लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज रिहाई के रूप में cytotoxicity के माध्यम से ऑक्सीडेटिव तनाव के रूप में मनाया गया ।

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...

यह प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है, क्योंकि पीईडब्ल्यूईसी वास्तविक दुनिया के एयरोसोल के लिए सेल संस्कृति के सीधे जोखिम की अनुमति देता है। प्रणाली के लिए एक ही हवा एक व्यक्ति सांस का नमूना चेतावनी दी जा सकती है, हवा की गुणवत्ता की निगरानी के एक नए प्रकार को सक्षम करने । इस तकनीक का मुख्य लाभ बेंच-टॉप सिस्टम के लिए दुर्गम स्थानों पर सुसंस्कृत फेफड़ों की कोशिकाओं पर एयरोसोल पर कब्जा करने में आसानी है, जैसे कि प्रवेश के स्रोत पर या श्वास क्षेत्र के भीतर।प्रक्रिया का प्रदर्शन डॉ लिन Secondo, मेरी प्रयोगशाला से हाल ही में स्नातक, और नथानिएल Wygal, मेरी प्रयोगशाला से एक स्नातक छात्र होगा । इस प्रयोग के लिए, परीक्षण से पहले 24 घंटे के लिए संग्रहीत परीक्षण सामग्री और नियंत्रित वातावरण। शुष्क फैलाव प्रणाली को इकट्ठा करने के लिए, गेंद वाल्व को चार इंच लंबे, 1/8 आकार थ्रेडेड पाइप के एक छोर से कनेक्ट करें।यह पार्टिकल हूपर के रूप में कार्य करता है। कण हॉपर के खुले अंत के माध्यम से, तांबे नैनोकणों की वांछित मात्रा में डाल दिया। फिर एक और गेंद वाल्व के साथ कण हॉपर बंद करें।दो इंच लंबे, 1/8 साइज के पाइप को वॉल्व से कनेक्ट करें। दो इंच पाइप के चारों ओर तीन इंच लंबा, डेढ़ इंच बाहरी व्यास टयूबिंग रखें। छोटे टयूबिंग के अंदर एक HEPA फिल्टर डालें, प्रवाह दिशा सुनिश्चित करने के लिए गेंद वाल्व के माध्यम से है ।थ्रेडिंग का उपयोग करके, वैक्यूम जनरेटर को दूसरी बॉल वाल्व से कनेक्ट करें। इसके बाद वैक्यूम जनरेटर को एयर टैंक से कनेक्ट करें। इसे प्रायोगिक सेटअप से जोड़ने के लिए वैक्यूम जनरेटर के आउटलेट पर 1/4 इंच बाहरी व्यास टयूबिंग रखो ।वांछित प्रवाह सेट करने के लिए एयर टैंक पर मुख्य वाल्व और नियामक वाल्व चालू करें। हेपा फिल्टर के निकटतम बॉल वाल्व खोलें फिर वैक्यूम जनरेटर के निकटतम गेंद वाल्व खोलें। उन्हें बंद करने से पहले लक्षण वर्णन या एक्सपोजर के दौरान उन्हें खुला रखें।पहले बॉल वाल्व वैक्यूम जनरेटर के निकटतम, और फिर हेपा फिल्टर के निकटतम गेंद वाल्व। प्रवाह को रोकने के लिए एयर टैंक पर मुख्य और नियामक वाल्व बंद करें। साफ करने के लिए, बॉल वाल्व और वैक्यूम जनरेटर को धोने के लिए 70% इथेनॉल का उपयोग करें।नसबंदी के लिए ऑटोक्लेव में मेटल पाइप डालें। एयर लिक्विड इंटरफेस पर कोशिकाओं को बनाने के बाद, कोशिकाओं को 24 घंटे के लिए संतुलन बनाने की अनुमति दें। इकट्ठा करने के लिए, अच्छी तरह से सामना करना पड़ के साथ PIVEC आधार ले और शीर्ष पर सेल संस्कृति डालने एडाप्टर कनेक्ट ।माइक्रोपिपेट का उपयोग करके पीईईईसी के आधार के कुएं में सेल कल्चर मीडिया के चार मिलीलीटर जोड़ें। अनुकूलक के भीतर सेल संस्कृति डालने जगह करने के लिए चिमटी का प्रयोग करें। PIVEC शीर्ष टुकड़ा के संकीर्ण भाग के साथ ऊपर का सामना करना पड़ रहा है, एडाप्टर से कनेक्ट ।ध्यान से, डक्ट टेप की एक परत के साथ PIVEC लपेटें। PIVEC के ऊपर और नीचे 37 मिलीमीटर कैसेट टुकड़े कनेक्ट करने के लिए पुश करें। 1/4 इंच कंटीले एडाप्टर को कैसेट इनलेट और आउटलेट में रखें।आधार पर तारों के साथ PIVEC के आसपास प्रतिरोधी हीटर लपेटें। सुरक्षित करने के लिए टेप। इन्सुलेशन के लिए एल्यूमीनियम पन्नी के आठ दौर के साथ PIVEC लपेटें, और टेप के साथ सुरक्षित।PIVEC के शीर्ष पर एडाप्टर के लिए 1/2 इंच बाहरी व्यास टयूबिंग कनेक्ट करें । बाँझ पानी से असुरक्षित टयूबिंग निकालें और PIVEC के शीर्ष पर टयूबिंग के भीतर जगह है। धूम हुड के लिए स्थानांतरण प्रणाली और अंगूठी स्टैंड और सुरक्षित पर PIVEC शिकंजा।एयरोसोल जनरेटर के आउटलेट पर 1/4 इंच व्यास टयूबिंग को असुरक्षित टयूबिंग से जोड़कर पीईईईसी को एयरोसोल सिस्टम से कनेक्ट करें । PIVEC के निकास को 1/4 इंच व्यास ट्यूबिंग से कनेक्ट करें जो एक हेपा फिल्टर और वाई कनेक्टर द्वारा वैक्यूम पंप से जुड़ा हुआ है। वाल्व चालू करें और पंप प्रवाह दर को 0.5 लीटर प्रति मिनट सेट करें।वाल्व बंद करने और पंप बंद करने से पहले दस मिनट के लिए तांबे नैनोकणों के लिए कोशिकाओं का पर्दाफाश । एयरोसोल सिस्टम से PIVEC निकालें। चिमटी का उपयोग कर सेल संस्कृति डालें बाहर ले लो और वांछित जैविक परख शुरू करने के लिए बाँझ अच्छी तरह से थाली में जगह है।प्रस्तावित एक्सपोजर समय अंक, कार्बन डाइऑक्साइड इनक्यूबेटर को वापस डालें डाल दिया। ड्रॉपर का उपयोग करके पीईडब्ल्यूईसी से मीडिया को एस्पिरेट करें। PIVEC को धोने के लिए 70% इथेनॉल का उपयोग करें और अगले प्रयोग से पहले कम से कम 30 मिनट के लिए पराबैंगनी प्रकाश के साथ इसे स्टरलाइज करें।PIVEC को जमाव दक्षता निर्धारित करने के लिए तांबे के नैनोकणों के तीन आकारों का उपयोग करने की विशेषता थी। 24 अच्छी तरह से डिजाइन के लिए समग्र रूप से बढ़ा हुआ बयान मनाया जाता है, फिर छह अच्छी तरह से डिजाइन। यह 40 नैनोमीटर और 800 नैनोमीटर तांबे के कणों की तुलना में 100 नैनोमीटर के लिए थोड़ा कम हो जाता है।तांबे नैनोपार्टिकल एयरोसोल की कण संख्या एकाग्रता फिल्टर आधारित स्कैनिंग गतिशीलता कण सिज़र, साथ ही ऑप्टिकल कण सिज़र माप द्वारा निर्धारित किया गया था। पोस्ट एक्सपोजर विश्लेषण 37 मिलीमीटर फिल्टर और सेल संस्कृति डालने के बीच खुराक संबंध का निर्धारण करके तेजी से किया जा सकता है। तुलना 0.05 से कम पी-वैल्यू वाले 800 नैनोमीटर कॉपर कणों के लिए एक मजबूत संबंध दिखाती है।पूरे साहित्य में विट्रो एक्सपोजर सिस्टम में लंबवत-प्रवाह की तुलना में, परीक्षण किए गए कण आकारों की सीमा पर PIVEC की जमाव दक्षता रिपोर्ट किए गए मूल्यों की तुलना में तुलनीय है, या बढ़ी हुई है। याद रखने वाली सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि यद्यपि यह प्रोटोकॉल प्रयोगशाला सेटिंग में पीईईईसी के उपयोग को दर्शाता है, लेकिन इसे एक्सपोजर की साइट पर एयरोसोल के लिए सेलुलर प्रतिक्रियाओं को मापने के लिए डिज़ाइन किया गया था। ऑन-साइट परीक्षण करते समय, परीक्षण एयरोसोल की जमाव दक्षता की विशेषता होना महत्वपूर्ण है।जमाव दक्षता उन कणों की जमा खुराक निर्धारित करती है जिनसे कोशिकाएं उजागर होती हैं। अतिरिक्त जैविक परख एक्सपोजर के कारण अधिक सेलुलर प्रतिक्रिया अंत बिंदुओं की जांच करने के लिए किया जा सकता है। PIVEC का उपयोग 3डी-प्रिंटिंग प्रक्रियाओं के दौरान उत्पन्न एयरोसोल के कारण सेलुलर प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए किया गया है, जैसे धातु बांधने की मशीन जेटिंग, और फ्यूज्ड फिलामेंट निर्माण।नैनोकणों का उपयोग, विशेष रूप से एयरोसोल रूप में, खतरनाक हो सकता है और किसी भी एक्सपोजर को धूम हुड में किया जाना चाहिए। सेलुलर काम एक जैव सुरक्षा कैबिनेट में किया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Environment

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

Methods for Performing Crosses in Setaria viridis, a New Model System for the Grasses

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पार प्रदर्शन के लिए तरीके<em&gt; Setaria viridis</emघास के लिए&gt;, एक नया मॉडल प्रणाली

Setaria viridis is an emerging model system for C4 grasses. It is closely related to the bioenergy feed stock switchgrass and the grain crop foxtail ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

Enterovirus और संस्कृति और आर टी-qPCR के द्वारा जल में Norovirus घटना के लिए EPA विधि 1615. मापन। वायरस के नमूने की आई संग्रह

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes (Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Soil Sampling and Isolation of Entomopathogenic Nematodes Steinernematidae, Heterorhabditidae

मिट्टी नमूना लेने और Entomopathogenic नेमाटोड के अलगाव (Steinernematidae, Heterorhabditidae)

Entomopathogenic nematodes (a.k.a. EPN) represent a group of soil-inhabiting nematodes that parasitize a wide range of insects. These nematodes belong to ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. II. Total Culturable Virus Assay

EPA विधि 1615. Enterovirus और संस्कृति और RT-qPCR द्वारा पानी में Norovirus घटना के मापन। द्वितीय। कुल कृषि योग्य वायरस परख

A standardized method is required when national studies on virus occurrence in environmental and drinking waters utilize multiple analytical laboratories. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

Enterovirus और संस्कृति और RT-qPCR द्वारा पानी में Norovirus घटना की ईपीए विधि 1615 मापन। भाग III। RT-qPCR द्वारा वायरस का पता लगाने

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Clean Sampling and Analysis of River and Estuarine Waters for Trace Metal Studies

स्वच्छ सैम्पलिंग और ट्रेस धातु अध्ययन के लिए नदी और मुहाने जल का विश्लेषण

Most of the trace metal concentrations in ambient waters obtained a few decades ago have been considered unreliable owing to the lack of contamination ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

संशोधन और Arthropods के फील्ड सैम्पलिंग के लिए एक पत्ता ब्लोअर-VAC के आवेदन

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

जल का उपयोग करने में अंतःस्रावी गतिविधि के लिए स्क्रीनिंग वाणिज्यिक रूप से उपलब्ध<em&gt; इन विट्रो</em&gt; Transactivation bioassays

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems (PEMS) for the Real-driving Emissions (RDE) Regulation in Europe

Implementation of Portable Emissions Measurement Systems PEMS for the Real-driving Emissions RDE Regulation in Europe

यूरोप में वास्तविक ड्राइविंग उत्सर्जन (RDE) नियमन के लिए पोर्टेबल उत्सर्जन मापन प्रणाली (PEMS) का कार्यान्वयन

Vehicles are tested in controlled and relatively narrow laboratory conditions to determine their official emission values and reference fuel consumption. ...

A Flow-through Exposure System for Evaluating Suspended Sediments Effects on Aquatic Life

जलीय जीवन पर निलंबित कर दिया मूल्यांकन के निक्षेपों प्रभाव के लिए एक प्रवाह के माध्यम से एक्सपोजर सिस्टम

This paper describes the Fish Larvae and Egg Exposure System (FLEES). The flow-through exposure system is used to investigate the effects of suspended ...