Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

وأيد هذا العمل بالمنح من المعهد الوطني للعامة الطبية العلوم (نيجمس) في المعاهد الوطنية للصحة (2 ف 20 GM103480/06 و 1R01GM123081 إلى J.X.)، الأموال أوتيس غليب مؤسسة البحوث الطبية، LB606 ني، وبدء التشغيل من جامعة نبراسكا الطبي مركز.

كافة في فيفو الإجراءات المبينة أدناه بموافقة "اللجنة إياكوك" في المركز الطبي في جامعة نبراسكا.
1. إعداد الحلول لمعيار اليكتروسبينينج
<ol><li>في أنبوب زجاج 20 مل، حل ز 2 من poly(ε-caprolactone) (PCL، Mw = كاتشين 80) في خليط المذيبات من الميثان (DCM) و N، N-dimethylformamide (DMF) بحصة 4:1 (v/v) بتركيز 10% (w/v). ?...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

تحويل ماتس نانوفيبير اليكتروسبون 2D التقليدية إلى السقالات 3D الموسعة تم التحقيق فيها عن طريق شركة تنفيسها2 . ماتس نانوفيبير 2D التقليدية هي الموسعة بنجاح عن طريق السوائل2 CO دون الحرجة. الخطوات الحاسمة هي اختﻻق ماتس نانوفيبير 2D تحت شرط أمثل وقطع الحصير دون تشويه الحواف (...

مفهوم تطوير سقالة اصطناعية التي يمكن زرعها في المرضى للمساعدة في إصلاح الأنسجة والتجديد هو الذي قد ساد ميدان الطب التجديدي لعدة عقود. سقالة اصطناعية مثاليا يخدم للحث على الهجرة الخلية من الأنسجة السليمة المحيطة، ويوفر بنية للخلية البذر والالتصاق وإشارات، وانتشار والتمايز، تدعم الأوعية الدموية، يسمح للأوكسجين الكافي و إيصال التغذية، ويعزز النشاط المناعي المضيفة لضمان نجاح بعد غرس1. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدامه كناقل لتضمين الجزيئات المضادة للميكروبات لمساعدة في الجرح الشفاء1،3،،من67،،من89. القدرة على التحكم في إطلاق هذه الجزيئات البيولوجية الزمانية من سقالة اصطناعية هي سمة مرغوب فيه آخر أن يعتبر عندما السقالات الهندسة1.
وقد تم اليكتروسبينينج تقنية استخداماً جيدا لإنتاج السقالات نانوفيبير1،3،2،4،،من56. وأجريت محاولات سابقة لإنشاء سقالة نانوفيبير مثل تلك التي تمت مناقشتها هنا بدرجات متفاوتة من النجاح. ومع ذلك، محدودة السقالات nanofiber التقليدية قدرات لتحقيق هذه الأهداف. وقد السقالات nanofiber التقليدية معظمهم الحصير ثنائي الأبعاد1،3. هذه السقالات نونيكسبانديد هي المزدحمة مع أحجام المسام الصغيرة؛ وهذا يحصر تسلل خلية، والهجرة، والتمايز كما أنها لا تعزز بيئة ما يكفي من مشابهة لتلك الموجودة في فيفو8،7،،من19. ولهذا السبب، تم إنشاء أحدث تقنيات إعداد السقالة نانوفيبير اليكتروسبون 3D لتعديل العيوب المتأصلة التي تأتي مع ماتس نانوفيبير 2D. تؤدي هذه التقنيات في السقالات 3D؛ ومع ذلك، محدودة الانطباق بسبب أساليب الإنتاج التي تتطلب المحاليل وإجراءات التجميد. نتائج هذه المعالجة في التوزيع العشوائي للنانو دون المنظمة مقيدة، سمك مناسب، و/أو المسامية المطلوب تقديم العظة نانوتوبوجرافيك الكافية اللازمة للهجرة الخلية وانتشار. هذه العوامل تؤدي السقالات نانوفيبير اليكتروسبون 3D السابقة التي تفتقر إلى تقليد الكافية للمعيشة الأنسجة1،7،،من89.
تم إجراء محاولات أكثر حداثة في تطوير سقالة الموسعة، 3D مع بيوميميكري أفضل من المصفوفة خارج الخلية (ECM) استخدام إجراء معالجة حل بورهيدريد (نأبه4) صوديوم مائية والقوالب المصممة مسبقاً للمساعدة في مراقبة أفضل شكل الناتج عن سقالة7،8. ومع ذلك، هذا الأسلوب غير مثالية حيث أنها تتطلب استخدام المحاليل والتفاعلات الكيميائية، والتجميد التي قد تتداخل مع البوليمرات وأي الجزيئات الحيوية المغلفة التي للذوبان في الماء. الإضافات المستخدمة قد يسبب أيضا تأثيرات جانبية خلال الأنسجة التجدد8،9. CO2 التوسع في الأسلوب المبين في هذه المادة إلى حد كبير يقلل من الوقت اللازم للتجهيز ويلغي الحاجة للمحاليل، ويحافظ على المبلغ ووظيفة الجزيئات النشطة بيولوجيا بقدر أكبر مما السابق 9من الأساليب المتبعة.
في الدراسات السابقة والمضادات الحيوية، والفضة، 1α، 25 ديهيدروكسيفيتامين د3ومضادات الميكروبات الببتيد ليرة لبنانية-37 تم تحميلها في السقالات nanofiber منفردة ومجتمعة لإمكانات هذه السقالات للإفراج عن وكلاء للتحقيق زيادة المعونة في الجرح الشفاء9،10،،من1213. غرض إثبات هذا الأسلوب لتوسيع سقالة nanofiber، سيتم تحميل كومارن 6، صبغة فلورسنت، في سقالة تثبت إمكانية تضمين السقالة مع مختلف المركبات المطلوبة. هذا الأسلوب من تلفيق سقالة nanofiber الموسعة بالاقتران مع الجزيئات النشطة بيولوجيا مغلفة يحمل إمكانيات كبيرة لتجديد الأنسجة والتئام الجروح، وإنشاء نماذج ثلاثية الأبعاد من الأنسجة وإيصال الأدوية الموضعية.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

وقد اليكتروسبينينج هذه التكنولوجيا المفضلة في إنتاج سقالة الاصطناعية، والوظيفية بسبب بيوميميكري للمصفوفة خارج الخلية وسهولة السيطرة على تكوين وهيكل، وقطرها من الألياف. ومع ذلك، على الرغم من هذه المزايا، نانوفيبير اليكتروسبون التقليدية السقالات تأتي مع القيود بما في ذلك مشوش المسامية منخفضة وحجم المسام الصغيرة، التوجه نانوفيبير والحصير أساسا ثنائي الأبعاد. على هذا النحو، هناك حاجة ماسة لتطوير عملية جديدة لاختلاق السقالات نانوفيبير اليكتروسبون أنه يمكن التغلب على القيود المذكورة أعلاه. ويرد هنا، طريقة مبتكرة وبسيطة. حصيرة نانوفيبير 2D تقليدية تتحول سقالة 3D مع سمك المرجوة ومسافة الفجوة، المسامية والعظة نانوتوبوجرافيك للسماح للخلية البذر والانتشار من خلال تنفيسها السائل2 CO دون الحرجة. بالإضافة إلى توفير سقالة لتجديد الأنسجة تحدث، يوفر هذا الأسلوب أيضا الفرصة لتغليف الجزيئات النشطة بيولوجيا مثل الببتيدات المضادة للميكروبات لإيصال الأدوية المحلية. السقالات nanofiber2 توسع شركة إمكانات كبيرة في تجديد الأنسجة والتئام الجروح والأنسجة 3D النمذجة وإيصال الأدوية الموضعية.

الفعالية من توسيع ماتس نانوفيبير اليكتروسبون 2D التقليدية إلى السقالات 3D عبر تنفيسها السائل2 CO الحرجة قد تجلى بصفات مختلفة: زيادة سمك السقالات من 1 ملم عند دون علاج إلى 2.5 ملم و 19.2 مم مع واحد واثنين من العلاجات2 CO، على التوالي (الشكل 3 ألف-ج</stro...

Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

يوضح هذا المقالة التقنية لتوسيع حصيرة نانوفيبير اليكتروسبون (2D) التقليدية، والبعد الثاني في سقالة (3D) 3-بعد عن طريق تنفيسها السائل2 CO دون الحرجة. هذه السقالات زيادة 3D، الرموز نانوتوبوجرافيك الخلوية تقليد عن كثب، والحفاظ على وظائف الجزيئات البيولوجية مغلفة داخل النانو.

توسيع نطاق ماتس نانوفيبير اليكتروسبون بعد يومين إلى ثلاثة-البعد السقالات

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

وأبلغ هذا البروتوكول عن تحول الألياف النانوية التقليدية من 2D إلى 3D، عن طريق اكتئاب سائل ثاني أكسيد الكربون دون الحرجة الذي لم يتحقق من قبل. هذه الطريقة تزيل العديد من القضايا المرتبطة بالأساليب السابقة ، بما في ذلك استخدام المحاليل المائية والتفاعلات الكيميائية ، والعمليات المتعددة الخطوات ، وفقدان نشاط الجزيئات البيولوجية المغلفة ، والقيود المفروضة على البوليمرات الهدّية. إثبات هذا الإجراء هو شيكسوان تشن، وهو ما بعد النشر من مختبري.في أنبوب زجاجي 20 ميليلتر، تذوب غرامين من PCL في خليط من المذيبات ديكلوروميثان و DMF، مع نسبة أربعة إلى واحد بتركيز 10 في المئة. ضع الأنبوب الزجاجي في دوار مختبر حتى يصبح الحل واضحًا. قد يختلط الحل خلال الليل.لإعداد جهاز Electrospinning ، أولا ، إضافة حل PCL إلى حقنة 20 ملليلتر مع إبرة حادة قياس 21 المرفقة. تأكد من عدم وجود هواء في الحقنة، وانفصام الأنابيب. ضع أسطوانة فولاذية دوارة مع جامع الأرض 12 سنتيمترًا من طرف الإبرة.باستخدام مقاطع التمساح، قم بتوصيل التيار المباشر امدادات الطاقة عالية الجهد إلى الإبرة، وضمان أن المجمع هو أساس. بالنسبة لـ 20 ملليلتر من محلول PCL، قم بتعيين معلمة مضخة الحقنة باستخدام قطر 20.27 ملليمتر، ومعدل تدفق 0.5 ملليلتر في الساعة. تحقق مما إذا كانت القطرات تتشكل عند طرف الإبرة.تطبيق إمكانات كهربائية من 20 كيلوفولت بين سبينليت وجامع الأرض تقع 20 سم بعيدا عن سبينر. جمع فافة nanofiber الانحياز في طبل ، وتناوب في 2000 دورة في الدقيقة. جمع حصائر نانو ألياف PCL بمجرد أن تصل إلى سمك ما يقرب من ملليمتر واحد.اغمر حصائر الألياف النانوية PCL في النيتروجين السائل لمدة خمس دقائق. الحفاظ على حصائر نانو ألياف PCL في النيتروجين السائل، ولكمة حصائر نانو ألياف PCL مع لكمة قطرها 0.5 ملليمتر. ضع حصائر الألياف النانوية PCL في النيتروجين السائل لمدة خمس دقائق.قطع الحصير إلى مربع سنتيمتر واحد في واحد باستخدام مقص جراحي حاد أثناء غمره في النيتروجين السائل لتجنب تشوه الحواف. ضع حصيرة القطع في أنبوب طرد مركزي 30 ملليلتر مع حوالي غرام واحد من الجليد الجاف. غط الغطاء بإحكام، والسماح للجليد الجاف لتغيير ثاني أكسيد الكربون السائل.بمجرد أن يكون السائل قد تشكل في الأنبوب ، والإفراج بسرعة الضغط عن طريق فتح الغطاء. إزالة ومراقبة سقالة منتفخة من الأنبوب. ضع السقالة في أنبوب جديد للطرد المركزي مع الجليد الجاف ، وكرر تحقيق سُمك الرغبة.تعقيم سقالات الألياف النانوية الموسعة في أكسيد الإيثيلين قبل الحضانة مع الخلايا. تظهر فعالية توسيع 2D التقليدية 2D قواصير الألياف النانوية في سقالات 3D عن طريق depressurization من السائل CO2 تحت الحرجة على اليسار بعد العلاج الثاني. زاد سمك السقالة من ملليمتر واحد عند عدم علاجه إلى 2.5 ملليمتر مع علاج واحد من ثاني أكسيد الكربون، إلى 19.2 ملليمتر مع اثنين من علاجات ثاني أكسيد الكربون.زادت مسامية السقالات من 79.5 في المئة للفرش غير المعالجة ، إلى 92.1 في المئة بعد العلاج الأول ، إلى 99.0 في المئة بعد العلاج الثاني. وهذا أمر مهم لأن درجة اختراق الخلايا في سقالة، وبالتالي فعاليتها للحث على التجديد، تعتمد إلى حد كبير على المسامية. تكشف صور SEM أن الهيكل الليفي المكتظ بالزحمة العالية من الحصير 2D غير المعالج تم تحويله إلى هياكل مرتبة ذات طبقات مع ألياف نانوية محاذية بعد التوسع مع CO2.في فيفو أجريت الدراسات من قبل زرع تحت الجلد من CO2 الموسعة الألياف النانوية السقالات مع ثقوب مربعة إلى الفئران. وهذا يسمح للهجرة الخلوية والانتشار داخل الثقوب، فضلا عن مزيد من التسلل داخل طبقات الألياف النانوية التي تم إنشاؤها أثناء التوسع. من الأسبوع الأول إلى أربعة بعد الزرع ، أظهرت السقالات الموسعة زيادة كبيرة في عدد الأوعية الدموية التي تشكلت ، والخلايا العملاقة متعددة النوى بالمقارنة مع حصيرة ألياف النانو التقليدية.بعد هذا الإجراء، يمكن دمج جزيئات مختلفة بما في ذلك عوامل النمو، ومركبات التضمين الأميني، وكلاء هيمستيك، والعوامل المضادة للصغرى في حصائر الألياف النانوية وتوسيعها في سائل ثاني أكسيد الكربون دون الحرجة. ويمكن استخدام سقالات الألياف النانوية الموسعة الوظيفية لاستكشاف أسئلة جديدة في مجالات علمية أخرى، مثل الهوسات، والوقاية والعلاج من العدوى، وعلم المناعة، وتجديد الأنسجة وإصلاحها. المذيبات العضوية سامة، وينبغي التعامل معها في غطاء محرك السيارة الكيميائية.وعلاوة على ذلك، ينبغي استخدام حاوية يمكن أن تتحمل الضغط العالي لسائل ثاني أكسيد الكربون دون الحرجة في التوسع.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection كريسبر/Cas9 البروتين في أجنة سمك السلور القناة، Ictalurus punctatus، لتحرير الجينات

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

كانالوستومي كنهج العمليات جراحية لإيصال الأدوية المحلية إلى آذان الداخلية من الفئران الكبار والأطفال حديثي الولادة

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

اختبار دور البلازميدات Multicopy في تطور المقاومة للمضادات الحيوية

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

مقايسة بسيطة وسريعة، والكمية لقياس إصلاح الحمض النووي-البروتين كروسلينكس على البلازميدات Transfected في خلايا الثدييات

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

منهاج متجه لينتيفيرال الكفاءة في تقديم أدوات تحرير ابيجينومي إلى الإنسان الناجمة عن نماذج المرض المستمدة من الخلايا الجذعية Pluripotent

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

جيل من الأعضاء الورم من نماذج الماوس المهندسة وراثيا من سرطان البروستاتا

Methods based on homologous recombination to modify genes have significantly furthered biological research. Genetically engineered mouse models (GEMMs) ...

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

إدخال الجين بالضربة القاضية مباشرة في مرحلة Amastigote من التريبانوسوما كروزي باستخدام نظام CRISPR/Cas9

Trypanosoma cruzi is a pathogenic protozoan parasite that causes Chagas&#8217; disease mainly in Latin America. In order to identify a novel drug target ...

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

استخدام خلايا Drosophila S2 للتصوير الحي لقسم الخلايا

Drosophila S2 cells are an important tool in studying mitosis in tissue culture, providing molecular insights into this fundamental cellular process in a ...

Characterization of Functionally Associated miRNAs in Glioblastoma and their Engineering into Artificial Clusters for Gene Therapy

توصيف miRNAs المرتبطة وظيفيا في الورم الصفراوي وهندستها إلى مجموعات اصطناعية للعلاج الجيني

The biological relevance of microRNAs (miRNAs) in health and disease significantly relies on specific combinations of many simultaneously deregulated ...

Use of Freeze-thawed Embryos for High-efficiency Production of Genetically Modified Mice

استخدام الأجنة المذابة بالتجميد لإنتاج الفئران المعدلة وراثياً بكفاءة عالية

The use of genetically modified (GM) mice has become crucial for understanding gene function and deciphering the underlying mechanisms of human diseases. ...