Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af tilskud fra National Institute of General Medical Science (NIGMS) på NIH (2P 20 GM103480-06 og 1R01GM123081 til J.X.), Otis Glebe Medical Research Foundation, NE LB606 og start midlerne fra University of Nebraska Medical Center.

Alle i vivo procedurer skitseret nedenfor blev godkendt af IACUC Komité ved University of Nebraska Medical Center.
1. forberede løsninger til Standard Electrospinning
<ol><li>I en 20 mL glasrør, 2 g poly(ε-caprolactone) opløses (PCL, Mw = 80 kDa) i et opløsningsmiddel blanding af dichlormethan (DCM) og N, N-dimethylformamid (DMF) med en 4:1 ration (v/v) i en koncentration på 10% (w/v). Forsigtig: Håndtag DCM og DMF i et velventileret hood at undgå udsættelse for røg. U...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

Omdanne traditionelle 2D electrospun nanofiber måtter til udvidet 3D stilladser via CO2 trykreduktion blev undersøgt. Traditionelle 2D nanofiber mats er med held udvidet via subkritiske CO2 væske. De kritiske trin er at fremstille 2D nanofiber måtter under en optimeret betingelse og skåret måtter uden deformering kanterne (fx., ved hjælp af skarpe kirurgisk saks). Denne CO2-udvidet nanofiber stilladser har mange fordele over traditionelle 2D måtter herun...

Konceptet for at udvikle en syntetisk stillads, der kan implanteres i patienter til støtte i væv reparation og regeneration er en, der har gennemsyret feltet regenerativ medicin i årtier. Den ideelle syntetiske stillads tjener til at fremkalde celle migration fra de omkringliggende raske væv, giver en arkitektur for celle såning, vedhæftning, signalering, spredning og differentiering, understøtter vascularization, giver mulighed for tilstrækkelig iltning og ernæring levering, og fremmer vært immun aktivitet for at sikre succes efter implantation1. Derudover kan det bruges som bærestof for indlejring antimikrobiel molekyler til at bistå med sårheling1,3,6,7,8,9. Muligheden for at styre tidsmæssige frigivelsen af disse biologiske molekyler fra den syntetiske stillads er en anden ønskeligt attribut, der anses for Hvornår engineering scaffolds1.
Electrospinning har været et godt udnyttet teknik til at producere nanofiber stilladser1,2,3,4,5,6. Tidligere forsøg på at oprette en nanofiber stillads som diskuteret her har været gjort til varierende grader af succes. Traditionelle nanofiber stilladser har dog begrænsede evner til at nå disse mål. Traditionelle nanofiber stilladser har været for det meste to-dimensionelle måtter1,3. Disse nonexpanded stilladser er tæt pakket med små pore størrelser; Dette begrænser celle infiltration, migrering og differentiering, da det ikke fremmer et miljø svarer nok til dem, der findes i vivo1,7,8,9. Derfor er der etableret nyere teknikker af 3D electrospun nanofiber stillads forberedelse for at ændre de iboende fejl, der kommer med 2D nanofiber måtter. Disse teknikker resultere i 3D stilladser; de har imidlertid begrænset anvendelighed på grund af produktionsmetoder, der kræver vandige opløsninger og frysetørring procedurer. Denne behandling resulterer i tilfældig fordeling af nanofibers uden begrænset organisation, korrekt tykkelse og/eller ønskede porøsitet at give tilstrækkelig nanotopographic stikord, der er nødvendige for celle migration og spredning. Disse faktorer resulterer i de tidligere 3D electrospun nanofiber stilladser, der mangler passende mimicry af levende væv1,7,8,9.
Nyere forsøg på at udvikle en udvidet, 3D stillads med bedre Biomimetik af ekstracellulære matrix (ECM) har udført ved hjælp af en vandig natrium ved (Kristian4) løsning behandling og foruddesignede forme til at støtte bedre kontrol over den form af den resulterende stillads7,8. Men, denne metode er ikke ideel, da det kræver brug af vandige opløsninger, kemiske reaktioner og frysetørring, der kan forstyrre polymerer og enhver indkapslede biomolekyler, der er vandopløselige. De anvendte tilsaetningsstoffer kan også forårsage bivirkninger i væv revitalisering8,9. CO2 ekspansion metode beskrevet i denne artikel i høj grad reducerer behandlingstiden, eliminerer behovet for vandige opløsninger, og bevarer beløb og funktionalitet af biologisk aktive molekyler i højere grad end de tidligere etablerede metoder9.
I tidligere undersøgelser, antibiotika, sølv, 1α, 25 dihydroxyvitamin D3og antimikrobielle peptid blev LL-37 indlæst i nanofiber stilladser individuelt og i kombination til at undersøge potentialet i disse stilladser til at frigive midler til yderligere støtte i sårheling9,10,12,13. Med henblik på at påvise denne metode nanofiber stillads ekspansion, indlæses Coumarine 6, et fluorescerende farvestof, stillads at demonstrere potentialet i indlejring skafottet med forskellige ønskede forbindelser. Denne metode af udvidet nanofiber stillads fabrikation sammenholdt med indkapslede bioaktive molekyler rummer et stort potentiale i væv revitalisering, sårheling, oprettelsen af 3D væv modeller og aktuel leveringen af narkotika.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

Electrospinning har været den foretrukne teknologi i producerer en syntetisk, funktionelle stillads på grund af Biomimetik ekstracellulære matrix og lette kontrollen af sammensætning, struktur og diameter af fibre. Men på trods af disse fordele, traditionelle electrospun nanofiber stilladser kommer med begrænsninger herunder uorganiseret nanofiber orientering, lav porøsitet, lille porestørrelse og hovedsagelig todimensional måtter. Som sådan, er der et stort behov for at udvikle en ny proces for at fabrikere electrospun nanofiber stilladser, der kan overvinde de ovennævnte begrænsninger. Heri, er en roman og enkel metode skitseret. En traditionel 2D nanofiber mat er omdannet til en 3D stillads med ønskede tykkelse, hul afstand, porøsitet og nanotopographic signaler til celle såning og spredning gennem trykreduktion subkritiske CO2 væske. Ud over at give et stillads til vævsregeneration at forekomme, giver denne metode også mulighed for at indkapsle bioaktive molekyler såsom antimikrobielle peptider for lokale medicinafgivelse. CO2 udvidet nanofiber stilladser hold stort potentiale i væv revitalisering, sårheling, 3D væv modellering og aktuelt stof levering.

Effekten af ekspanderende traditionelle 2D electrospun nanofiber måtter til 3D stilladser via trykreduktion subkritiske CO2 væske blev demonstreret i forskellige kapaciteter: tykkelsen af stilladser steg fra 1 mm når ubehandlet til 2,5 mm og 19.2 mm med ét og to CO2 behandlinger, henholdsvis (figur 3A-C). Porøsitet-en karakteristisk arkitektur kritisk for celle såning-også steget i en måde, der svarer til den øg...

Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

Denne artikel viser teknik for at udvide en traditionel, to-dimension (2D) electrospun nanofiber mat i en tre-dimentional (3D) stillads gennem trykreduktion subkritiske CO2 væske. Disse augmented stilladser er 3D, nøje efterligne cellulære nanotopographic stikord, og bevare funktionerne af biologiske molekyler indkapslet i nanofibers.

Udvidelse af to-dimension Electrospun Nanofiber måtter i tre-dimension stilladser

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

Denne protokol rapporterede omdannelse af traditionelle elektrospun nanofibremembraner fra 2D til 3D, via depressurisering af subkritisk CO2-væske, som ikke blev realiseret tidligere. Denne metode eliminerer mange problemer i forbindelse med tidligere tilgange, herunder brug af vandige løsninger og kemiske reaktioner, flere trin processer, tab af aktivitet af indkapslede biologiske molekyler, og begrænsninger af hydrofobe polymerer. Demonstration af denne procedure er Shixuan Chen, en postdoc fra mit laboratorium.I en 20 mililiter glasrør, opløse to gram PCL i et opløsningsmiddel blanding af dichlormethan og DMF, med en fire til en ratio ved en koncentration på 10 procent. Sæt glasrøret i en laboratorierotator, indtil opløsningen bliver klar. Opløsningen kan blandes i løbet af natten.For at opsætte elektrospinningsapparatet skal du først tilsætte PCL-opløsningen til en 20 millilitersprøjte med en 21 gauge stump nål fastgjort. Sørg for, at der ikke er luft i sprøjten, og dissocieret slange. Placer en roterende ståltromle med jordopsamleren 12 centimeter fra nålespidsen.Ved hjælp af alligatorclips skal du tilslutte den direkte højspændingsstrømforsyning til nålen og sikre, at opsamleren er jordet. For de 20 milliliter PCL-opløsning skal du indstille sprøjtepumpens parameter med en diameter på 20,27 millimeter og en strømningshastighed på 0,5 milliliter i timen. Kontroller, om dråberne dannes på spidsen af nålen.Påfør et elektrisk potentiale på 20 kilovolts mellem spinneret og en jordsamler placeret 20 centimeter væk fra spinneret. Opsaml de justerede nanofibermåtter i en tromle, der roterer ved 2.000 omdr./min. Saml PCL nanofiber måtter, når de når en tykkelse på ca. en millimeter.Nedsænk PCL nanofiber måtterne i flydende nitrogen i fem minutter. Hold PCL nanofiber måtter i flydende nitrogen, og punch PCL nanofiber måtter med en 0,5 millimeter diameter punch. Placer PCL nanofiber måtterne i flydende nitrogen i fem minutter.Skær måtterne i en centimeter med en centimeter kvadrater ved hjælp af skarpe kirurgiske saks, mens nedsænket i flydende nitrogen for at undgå deformation af kanterne. Den afskårne måtte anbringes i et centrifugerør på 30 milliliter med ca. et gram tøris. Stramt hætte låget, og lad tørisen til at skifte til flydende kuldioxid.Når væsken er dannet i røret, hurtigt frigive trykket ved at åbne hætten. Fjern og observere puffed stillads fra røret. Placer stilladset i et nyt centrifugerør med tøris, og gentag util ønsketykkelsen opnås.Steriliser de udvidede nanofiber stilladser i ethylenoxid før inkubation med celler. Effektiviteten af at udvide traditionelle 2D-elektrospun nanofiber måtter i 3D stilladser via depressurisering af subkritisk CO2-væske vises til venstre efter den anden behandling. Stilladsets tykkelse steg fra en millimeter, når den ikke blev behandlet, til 2,5 millimeter med en CO2-behandling til 19,2 millimeter med to CO2-behandlinger.Stilladsernes porøsitet steg fra 79,5 procent for de ubehandlede måtter til 92,1 procent efter den første behandling til 99,0 procent efter den anden behandling. Dette er signifikant, fordi graden af celleindtrængning i et stillads, og dermed dens effektivitet til at fremkalde regenerering, er i høj grad afhængig af porøsitet. SEM-billeder viser, at den tætpakkede fibularstruktur af ubehandlede 2D-måtter blev omdannet til bestilte, lagdelte strukturer med afstemte nanofibre efter udvidelse med CO2.I Vevo blev undersøgelser udført ved subkutan implantation af CO2-ekspanderede nanofiberstilladser med firkantede huller til rotter. Dette giver mulighed for cellulær migration og spredning i hullerne, samt yderligere infiltration inden for nano fiber lag, der blev skabt under ekspansion. Fra uge et til fire post-implantation, de udvidede stilladser viste en betydelig stigning i antallet af dannede blodkar, og flerkernede gigantiske celler i forhold til en traditionel nano fiber måtten.Efter denne procedure, forskellige molekyler, herunder vækstfaktorer, amino-modulerende forbindelser, hæmostatiske midler, og anti-mikrotublære midler kan indarbejdes i nano fiber måtter og udvides i subkritiske CO2 væske. Sådanne funktionaliserede ekspanderede nano fiber stilladser kunne bruges til at udforske nye spørgsmål i andre videnskabelige områder, såsom hæmostase, forebyggelse og behandling af infektion, immunologi, og væv regenerering og reparation. Organiske opløsningsmidler er giftige og bør håndteres i en kemisk hætte.Desuden bør der anvendes en beholder, der kan holde det høje tryk af subkritisk CO2-væske til udvidelsen.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Mikroinjektion af CRISPR/Cas9 Protein i kanal havkat, Ictalurus punctatus, embryoner til Gene Editing

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy som en kirurgisk tilgang til lokale Drug Delivery indre ører af voksne og Neonatal mus

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

Test af flerkopiværktøj plasmider rolle i udviklingen af antibiotikaresistens

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

En enkel, hurtig og kvantitative analysen til foranstaltning reparation af DNA-protein krydsbindinger på plasmider transfekteret i pattedyrceller

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Lentiviral vektor Platform for effektiv levering af Epigenome-redigeringsværktøjer i menneskelige induceret pluripotente stamceller-afledt sygdomsmodeller

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

Generation af tumor Organoider fra genetisk manipulerede musemodeller af prostata cancer

Methods based on homologous recombination to modify genes have significantly furthered biological research. Genetically engineered mouse models (GEMMs) ...

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introduktion af et gen knockout direkte i den Amastigote fase af Trypanosoma cruzi ved hjælp af Crispr/Cas9 system

Trypanosoma cruzi is a pathogenic protozoan parasite that causes Chagas&#8217; disease mainly in Latin America. In order to identify a novel drug target ...

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Brug af Drosophila S2-celler til levende billeddannelse af celle division

Drosophila S2 cells are an important tool in studying mitosis in tissue culture, providing molecular insights into this fundamental cellular process in a ...

Characterization of Functionally Associated miRNAs in Glioblastoma and their Engineering into Artificial Clusters for Gene Therapy

Karakterisering af funktionelt associerede miRNAs i glioblastoma og deres ingeniørarbejde i kunstige klynger til genterapi

The biological relevance of microRNAs (miRNAs) in health and disease significantly relies on specific combinations of many simultaneously deregulated ...

Use of Freeze-thawed Embryos for High-efficiency Production of Genetically Modified Mice

Anvendelse af fryseoptøede embryoner til højeffektiv produktion af genetisk modificerede mus

The use of genetically modified (GM) mice has become crucial for understanding gene function and deciphering the underlying mechanisms of human diseases. ...