Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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Ce travail a été soutenu par des subventions de la National Institute of General Medical Science (NIGM) aux NIH (2P 20 GM103480-06 et 1R01GM123081 à J.X.), les fonds Otis Glebe Medical Research Foundation, NE LB606 et le démarrage de l’University of Nebraska Medical Centre.

Toutes les procédures en vivo décrites ci-dessous ont été approuvés par le Comité IACUC à l’University of Nebraska Medical Center.
1. préparer les Solutions Standard électrofilage
<ol><li>Dans un tube de verre de 20 mL, dissoudre 2 g de poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) dans un mélange de solvants de dichlorométhane (DCM) et N, N-diméthylformamide (DMF) avec une ration de 4:1 (v/v) à une concentration de 10 % (p/v). Attention : Poignée DCM et DMF sous une ...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

Ou comment transformer tapis de nanofibres électrofilées 2D traditionnelle élargies échafaudages 3D via CO2 dépressurisation a été étudiée. Tapis de nanofibres 2D traditionnels sont avec succès développé via sous-critique CO2 fluides. Les étapes essentielles sont à fabriquer des tapis de nanofibres 2D sous une condition optimisée et couper les tapis sans déformer les bords (e.g., en utilisant sharp ciseaux chirurgicaux). Cette CO2-échafaudages d...

Le concept de développer un échafaud synthétique qui peut être implanté sur des patients à l’aide à la régénération et la réparation des tissus est celui qui a imprégné le domaine de la médecine régénérative pendant des décennies. L’échafaud synthétique idéale sert à induire la migration cellulaire des tissus sains avoisinants, fournit une architecture pour la vascularisation de cellule ensemencement, adhérence, signalisation, la prolifération et la différenciation, de supports, permettant une oxygénation adéquate et livraison de la nutrition et favorise l’activité immunitaire de l’hôte pour assurer le succès après implantation1. En outre, il peut être utilisé comme support pour l’enrobage des molécules antimicrobiennes pour aider à la cicatrisation de1,3,6,7,8,9. La capacité de contrôler la libération temporelle de ces molécules biologiques de l’échafaud synthétique est un autre attribut souhaitable que l'on considère quelle ingénierie échafaudages1.
Électrofilage a été une technique bien exploitée pour la production de nanofibres Échafaudages1,2,3,4,5,6. Les tentatives précédentes pour créer un échafaudage de nanofibres comme celle examinée ici ont été réalisées à des degrés divers de succès. Cependant, nanofibres traditionnels échafaudages ont limité les capacités pour atteindre ces objectifs. Échafaudages de nanofibres traditionnels ont été généralement deux dimensions tapis1,3. Ces échafaudages nonexpanded sont densément emballés avec la taille des petits pores ; Cela limite l’infiltration cellulaire, migration et différenciation car il ne favorise pas un environnement suffisamment semblable à ceux trouvés dans vivo1,7,8,9. Pour cette raison, de nouvelles techniques de préparation d’échafaudage nanofibres électrofilées 3D ont été établis en vue de modifier les failles qui viennent avec des nattes de nanofibres 2D. Ces techniques entraînent des échafaudages 3D ; Cependant, ils ont limité l’applicabilité en raison des méthodes de production nécessitant des solutions aqueuses et de lyophilisation des procédures. Ce traitement entraîne la distribution aléatoire de la nanofibres sans organisation restreinte, épaisseur appropriée et/ou porosité désirée pour offrir les nanotopographic adéquate des repères qui sont nécessaires à la prolifération et la migration cellulaire. Ces facteurs se traduisent par les précédente échafaudages de nanofibres électrofilées 3D qui n’ont pas mimétisme adéquate de la vie tissus1,7,8,9.
Plus récentes tentatives visant à développer un échafaudage élargi, 3D avec le meilleur "biomimétisme" de la matrice extracellulaire (mec) ont été réalisées à l’aide d’un traitement en solution borohydrure (NaBH4) sodium aqueux et moules prédéfinis afin d’aider à mieux contrôler la forme de l’échafaudage7,8. Toutefois, cette méthode n’est pas idéale car il nécessite l’utilisation de solutions aqueuses, les réactions chimiques et lyophilisation qui peut-être interférer avec les polymères et les biomolécules encapsulé qui sont solubles dans l’eau. Les additifs utilisés peuvent également provoquer des effets secondaires au cours de la régénération de tissus8,9. La méthode d’expansion de CO2 , décrite dans cet article, considérablement réduit le temps de traitement, élimine le besoin de solutions aqueuses et préserve le montant et la fonctionnalité de molécules biologiquement actives à une plus grande mesure que l’été méthodes établies9.
Dans des études antérieures, antibiotiques, argent, 1α, 25 dihydroxyvitamine D3et peptide antimicrobien LL-37 ont été chargés dans les échafaudages de nanofibres, individuellement ou en combinaison pour étudier le potentiel de ces échafaudages de libérer des agents à mieux aider à la cicatrisation9,10,12,13. Aux fins de démontrer cette méthode d’expansion échafaudage nanofibres, Coumarine 6, un colorant fluorescent, seront chargées dans l’échafaudage pour démontrer le potentiel d’incorporation de l’échafaud avec divers composés désirés. Cette méthode de fabrication d’échafaudage nanofibres élargi en conjonction avec des molécules bioactives encapsulés un grand potentiel dans la régénération des tissus, la cicatrisation des plaies, la création de modèles 3D de tissu et l’administration topique de médicaments.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

Électrofilage a été la technologie de choix dans la production d’un échafaud synthétique, fonctionnel en raison de la "biomimétisme" à la matrice extracellulaire et le contrôle de la facilité de composition, structure et diamètre des fibres. Cependant, malgré ces avantages, nanofibres électrofilées traditionnels échafaudages viennent avec des limitations notamment désorganisé nanofibres orientation, faible porosité, petits pores et des tapis principalement à deux dimensions. Par conséquent, il y a un grand besoin pour développer un nouveau procédé de fabrication d’échafaudages de nanofibres électrofilées qui peuvent surmonter les limitations ci-dessus. Ici, une méthode nouvelle et simple est décrite. Un tapis de nanofibres 2D traditionnel se transforme en un échafaudage 3D avec l’épaisseur désirée, la distance de gap, porosité et nanotopographic repères permettant l’ensemencement de la cellule et la prolifération par l’intermédiaire de la dépressurisation du sous-critique CO2 fluide. En plus de fournir un échafaudage pour la régénération des tissus de se produire, cette méthode fournit également la possibilité d’encapsuler des molécules bioactives, tels que des peptides antimicrobiens pour la livraison de drogue local. Les CO2 élargi nanofibres Échafaudages tenir grand potentiel dans la régénération des tissus, la cicatrisation des plaies, modélisation 3D tissus et la livraison de médicaments topiques.

L’efficacité d’élargir pour tapis de nanofibres électrofilées 2D traditionnelle en échafaudages 3D par l’intermédiaire de dépressurisation du sous-critique CO2 liquide a été démontrée en différentes capacités : l’épaisseur des échafaudages est passée de 1 mm lorsqu’elle n’est pas traité à 2,5 mm et 19,2 mm avec une ou deux CO2 traitements, respectivement (Figure 3 a-C). La porosité-a la ca...

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Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

Cet article illustre la technique d’élargir une natte de nanofibres électrofilées (2D) traditionnel, de deux-dimension en échafaudage tridimensionnels (3D) par le biais de la dépressurisation du sous-critique CO2 fluide. Ces échafaudages augmentés sont en 3D, indices étroitement mimiques nanotopographic cellulaires et préserver les fonctions des molécules biologiques encapsulés dans les nanofibres.

Expansion de nanofibres Électrofilées dimension deux nattes en trois dimensions les échafaudages

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

Ce protocole a rapporté la transformation des nanofibremembranes électrospun traditionnels de 2D à 3D, par la dépressurisation du fluide subcritical de CO2 qui n’a pas été réalisé précédemment. Cette méthode élimine de nombreux problèmes associés aux approches antérieures, y compris l’utilisation de solutions aqueuse et de réactions chimiques, les processus à plusieurs étapes, la perte d’activité des molécules biologiques encapsulées et les limitations des polymères hydrophobes. Shixuan Chen, postdoc de mon labo, démontre cette procédure.Dans un tube de verre de 20 mililitres, dissoudre deux grammes de PCL dans un mélange solvant de dichloromethane et de DMF, avec un rapport de quatre pour un à une concentration de 10 pour cent. Placez le tube de verre dans un rotateur de laboratoire jusqu’à ce que la solution devienne claire. La solution peut se mélanger pendant la nuit.Pour configurer l’appareil d’électrospinning, d’abord, ajoutez la solution PCL à une seringue de 20 millilitres avec une aiguille émoussée de calibre 21 attachée. Assurez-vous qu’il n’y a pas d’air dans la seringue et que le tube est dissocié. Placez un tambour en acier rotatif avec le collecteur de sol à 12 centimètres de la pointe de l’aiguille.À l’aide de pinces alligator, connectez l’alimentation à haute tension à courant direct à l’aiguille et assurez-vous que le collecteur est cloué au sol. Pour les 20 millilitres de solution PCL, définissez le paramètre de la pompe à seringues à l’aide d’un diamètre de 20,27 millimètres et d’un débit de 0,5 millilitres par heure. Vérifiez si les gouttelettes se forment au bout de l’aiguille.Appliquez un potentiel électrique de 20 kilovolts entre le spinneret et un collecteur au sol situé à 20 centimètres du spinneret. Recueillir les tapis de nanofibres alignés dans un tambour, en tournant à 2000 RPM. Recueillir les tapis de nanofibres PCL une fois qu’ils atteignent une épaisseur d’environ un millimètre.Plonger les tapis de nanofibres PCL dans de l’azote liquide pendant cinq minutes. Gardez les tapis de nanofibres PCL dans de l’azote liquide et poinçonner les tapis de nanofibres PCL avec un poinçon de 0,5 millimètre de diamètre. Placez les tapis de nanofibres PCL dans de l’azote liquide pendant cinq minutes.Couper les nattes en un centimètre par un centimètre carrés à l’aide de ciseaux chirurgicaux pointus tout en étant immergés dans de l’azote liquide pour éviter la déformation des bords. Placer le tapis coupé dans un tube de centrifugeuse de 30 millilitres avec environ un gramme de glace sèche. Bien caler le couvercle et laisser la glace sèche se transformer en dioxyde de carbone liquide.Une fois que le liquide s’est formé dans le tube, relâchez rapidement la pression en ouvrant le bouchon. Retirez et observez l’échafaudage soufflé du tube. Placez l’échafaudage dans un nouveau tube de centrifugeuse avec de la glace sèche, et répétez en utilisant l’épaisseur du désir est atteint.Stériliser les échafaudages de nanofibres élargis dans l’oxyde d’éthylène avant l’incubation avec les cellules. L’efficacité de l’expansion des tapis de nanofibres électrospun 2D traditionnels en échafaudages 3D par dépressurisation du fluide sous-critique de CO2 est montrée sur la gauche après le deuxième traitement. L’épaisseur de l’échafaudage est passée d’un millimètre lorsqu’il n’est pas traité à 2,5 millimètres avec un traitement au CO2, à 19,2 millimètres avec deux traitements au CO2.La porosité des échafaudages est passée de 79,5 p. 100 pour les tapis non traités à 92,1 p. 100 après le premier traitement, à 99,0 p. 100 après le deuxième traitement. Ceci est significatif parce que le degré de pénétration cellulaire dans un échafaudage, et donc son efficacité à induire la régénération, dépend en grande partie de la porosité. Les images sem révèlent que la structure fibulaire densément emballée des nattes 2D non traitées ont été transformées en structures ordonnées et superposées avec des fibres nano alignées après expansion avec du CO2.Dans les études vevo ont été réalisées par implantation sous-cutanée d’échafaudages nano-fibres élargies au CO2 avec des trous carrés pour les rats. Cela permet la migration cellulaire et la prolifération dans les trous, ainsi que d’autres infiltrations dans les couches de fibres nano qui ont été créés au cours de l’expansion. De la première à la quatrième semaine après l’implantation, les échafaudages élargis ont montré une augmentation significative du nombre de vaisseaux sanguins formés, et des cellules géantes multinucléées par rapport à un tapis nano fibreux traditionnel.Après cette procédure, différentes molécules, y compris les facteurs de croissance, les composés amino-modulants, les agents hémostatiques et les agents anti-microtubulaires peuvent être incorporées dans les nano nattes de fibres et étendues dans le fluide sous-critique de CO2. De tels échafaudages de nano fibres élargies fonctionnalisés pourraient être utilisés pour explorer de nouvelles questions dans d’autres domaines scientifiques, tels que l’hémostase, la prévention et le traitement de l’infection, l’immunologie et la régénération et la réparation des tissus. Les solvants organiques sont toxiques et doivent être manipulés dans une hotte chimique.En outre, un récipient qui peut supporter la haute pression du fluide sous-critique de CO2 devrait être employé pour l’expansion.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection de protéine CRISPR/Cas9 dans des embryons de barbue de rivière, Ictalurus punctatus, pour Gene Editing

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Recherche

Génétique

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy comme une approche chirurgicale pour la livraison de drogue Local dans l’oreille interne de souris adultes et néonatales

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

Analyse le rôle des plasmides multi-copies dans l’évolution de la résistance aux antibiotique

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

Un test Simple, Rapid et Quantitative à la mesure de réparation d’ADN-protéine Crosslinks sur des plasmides transfectés dans des cellules de mammifères

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Vecteur lentiviral plate-forme pour la livraison efficace des outils d’édition épigénome dans l’homme induit des modèles de maladies dérivées de cellules souches pluripotentes

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

Génération d'organoïdes tumoraux à partir de modèles de souris génétiquement modifiés du cancer de la prostate

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Characterization of Functionally Associated miRNAs in Glioblastoma and their Engineering into Artificial Clusters for Gene Therapy

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