Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים של לאומי המכון כללי רפואי למדע (NIGMS) ב- NIH (20 P 2 GM103480-06 ו- 1R01GM123081 כדי J.X.), את הכספים אוטיס גלאבה קרן למחקר רפואי, NE LB606 ו אתחול הרפואי אוניברסיטת נברסקה מרכז.

כל ויוו ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי ועדת IACUC במרכז הרפואי של אוניברסיטת נברסקה.
1. מכינים את הפתרונות עבור Electrospinning רגיל
<ol><li>שפופרת זכוכית 20 מ"ל, לפזר 2 גר' poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) בתערובת ממס של דיכלורומתאן (DCM) ו- N, N-dimethylformamide (DMF) עם קצבה 4:1 (v/v)-ריכוז של 10% (w/v). התראה: ?...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

להפוך electrospun דו-ממדית מסורתית nanofiber מחצלות המורחב פיגומים תלת-ממד באמצעות CO2 לחצים נחקר. Nanofiber דו-ממדית מסורתית מחצלות בהצלחה המורחב באמצעות subcritical נוזל2 CO. השלבים הקריטיים הם לפברק 2D nanofiber מחצלות תחת תנאי ממוטבת ואחתוך מחצלות ללא עיוות בקצוות (למשל., באמצעות מספריי...

הרעיון של פיתוח לפיגום סינתטי, זה יכול להיות מושתל לתוך חולים כדי לסייע רקמות תיקון והתחדשות הוא זה יש חילחלו השדה רפואה רגנרטיבית במשך עשרות שנים. לגרדום סינטטי אידיאלי מגישה לזירוז נדידת תאים שבסביבה רקמה בריאה, מספקת ארכיטקטורה התא זריעה אדהזיה, איתות, התפשטות, בידול, תומך vascularization, מאפשר חמצון נאותה, תזונה משלוח, ומקדם את הפעילות החיסונית המארח כדי להבטיח הצלחה לאחר ההשתלה1. בנוסף, זה יכול לשמש כנשא להטבעת מולקולות מיקרוביאלית לסייע1,3,6,7,8,9ריפוי הפצע. היכולת לשלוט על שחרורו הזמני של מולקולות אלה ביולוגי מן לגרדום סינתטי הוא תכונה רצויה אחרת הנחשב מתי הנדסה פיגומים1.
Electrospinning כבר טכניקה היטב שימוש להפקת nanofiber פיגומים1,2,3,4,5,6. ניסיונות קודמים כדי ליצור לפיגום nanofiber כמו האחד והנכון עשו בדרגות שונות של הצלחה. עם זאת, nanofiber מסורתיים פיגומים מוגבלת יכולות כדי להשיג מטרות אלה. פיגומים nanofiber המסורתיים היו בעיקר מחצלות מימדי1,3. פיגומים אלו nonexpanded, בצפיפות מלאים גדלים הנקבובית קטן; זה מגביל תא הסתננות, הגירה, בידול כמו זה אינו מקדם סביבה די דומות לאלה שנמצאו ויוו8,7,1,9. מסיבה זו, הוקמו טכניקות חדשות של 3D electrospun nanofiber לגרדום הכנה לתקן את הפגמים הכרוכים שמגיעים עם מחצלות 2D nanofiber. טכניקות אלה לגרום פיגומים תלת-ממד; עם זאת, הם מוגבלת ישימות בשל שיטת ייצור הדורשים פתרונות מימית, ליופיליזציה הליכים. זה עיבוד תוצאות התפלגות אקראית nanofibers בלי הארגון מוגבלת, עובי נכונה, ו/או נקבוביות הרצוי כדי לספק הותאם nanotopographic נאותה הנחוצים נדידת תאים והתפשטות. גורמים אלה התוצאה הקודמת 3D electrospun פיגומים nanofiber חסרי נאותה חיקוי של חיים רקמות1,7,8,9.
ניסיונות מאוחרים יותר בפיתוח של לגרדום המורחב, 3D עם ביומימטיקה טוב יותר של מטריצה חוץ-תאית (ECM) בוצעו באמצעות טיפול פתרון המימית סודיום borohydride (NaBH4) בתבניות מוגדרות מראש כדי לסייע שליטה טובה יותר של צורת וכתוצאה מכך לגרדום7,8. עם זאת, שיטה זו אינה האידיאלי כפי שהוא דורש את השימוש של פתרונות מימית, תגובות כימיות ליופיליזציה שעלולות לפגוע פולימרים כל מולקולות שעברו אנקפסולציה שאינם מסיסים במים. ותוספים עלול לגרום גם לתופעות לוואי במהלך8,התחדשות רקמות9. השיטה הרחבה2 CO שתואר במאמר זה מאוד מפחית את זמן העיבוד, מבטלת את הצורך פתרונות מימית, ושומר את הכמות ואת הפונקציונליות של מולקולות פעילים ביולוגית במידה רבה יותר מאשר בעבר הקים שיטות9.
מחקרים קודמים, אנטיביוטיקה, כסף, 1α, 25 dihydroxyvitamin D3ו פפטיד מיקרוביאלית LL-37 היו נטען לתוך פיגומים nanofiber בנפרד, בשילוב לחקור את הפוטנציאל של פיגומים אלו לשחרר סוכנים סיוע נוספת ב9,10,12,13ריפוי הפצע. לצורך הדגמת שיטת nanofiber לגרדום הרחבה, Coumarine 6, הפלורסנט, ייטען לתוך לגרדום הטמון הטבעה לגרדום עם תרכובות שונות הרצוי. שיטה זו של ייצור לגרדום nanofiber המורחב בשיתוף עם מולקולות ביו במארז בעל פוטנציאל התחדשות רקמות, ריפוי פצעים, היצירה של רקמת תלת-ממד מודלים ו מסירת תרופות אקטואלי.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

Electrospinning כבר הטכנולוגיה המועדפת בהפקת לפיגום סינתטי, פונקציונלי בשל ביומימטיקה מטריצה חוץ-תאית, הפקד נוחות של הרכב, מבנה בקוטר של סיבים. עם זאת, למרות היתרונות הללו, nanofiber electrospun מסורתיים פיגומים באים עם מגבלות כולל מאורגן nanofiber התמצאות, נקבוביות נמוכה, גודל הנקבוביות קטן ו מחצלות בעיקר דו מימדי. בתור שכזה, יש צורך גדול לפיתוח תהליך חדש עבור בדיית פיגומים nanofiber electrospun זה יכול להתגבר על המגבלות הנ. במסמך זה, התווה שיטה פשוטה הרומן. מזרן nanofiber דו-ממדית מסורתית הופכת לפיגום 3D עם עובי הרצוי, המרחק, נקבוביות nanotopographic רמזים כדי לאפשר תא זריעה והתפשטות דרך ירידת נוזלים2 CO subcritical. בנוסף עשו איתו התחדשות רקמות להתרחש, שיטה זו מספקת גם את ההזדמנות כדי לתמצת מולקולות ביו כגון פפטידים מיקרוביאלית למשלוח סמים מקומי. CO2 מורחבת nanofiber פיגומים החזק פוטנציאל התחדשות רקמות, ריפוי פצעים, מידול תלת-ממד רקמות ו תרופות אקטואלי.

היעילות של הרחבת electrospun דו-ממדית מסורתית nanofiber מחצלות לתוך פיגומים תלת-ממד באמצעות לחצים של נוזל2 CO subcritical הודגם בתפקידים שונים: העובי של פיגומים עלה מ 1 מ"מ כאשר מטופל-2.5 מ מ, 19.2 מ"מ עם אחד ושני CO2 טיפולים, בהתאמה (איור 3 א-ג). המאפיין נקבובי?...

Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

מאמר זה מדגים את הטכניקה של הרחבת שטיחון nanofiber המסורתי, נמצא תחת ניהול דו-מימד (2D) electrospun לתוך גרדום (3D) 3-מימד דרך ירידת נוזלים2 CO subcritical. פיגומים אלו רבודה תלת-ממד, רמזים nanotopographic הסלולר מחקים מקרוב, לשמר את הפונקציות של מולקולות וחיסונים אנקפסולציה בתוך nanofibers.

ההתרחבות של דו-מימד Electrospun Nanofiber מחצלות שלוש-מימד פיגומים

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

פרוטוקול זה דיווח על הטרנספורמציה של ננו-פיברמברנות אלקטרוספון מסורתיות מ- 2D ל- 3D, באמצעות דיפרסוריזציה של נוזל CO2 תת-קרקעי שלא מומש קודם לכן. שיטה זו מבטלת בעיות רבות הקשורות לגישות קודמות, כולל שימוש בפתרונות מים ותגובות כימיות, תהליכים מרובי שלבים, אובדן פעילות של מולקולות ביולוגיות אנקפסולציה, ומגבלות של פולימרים הידרופוביים. הוכחת הליך זה הוא Shixuan חן, פוסטדוק מהמעבדה שלי.בצינור זכוכית 20 mililitre, להמיס שני גרם של PCL בתערובת ממס של dichloromethane ו DMF, עם יחס של ארבעה לאחד בריכוז של 10 אחוזים. מניחים את צינור הזכוכית לתוך מסובב מעבדה עד שהפתרון מתבהר. הפתרון עשוי להתערבב במהלך הלילה.כדי להקים את מנגנון Electrospinning, הראשון, להוסיף את פתרון PCL למזרק 20 מיליליטר עם מחט קהה 21 מד מחובר. ודא שאין אוויר במזרק, וצנרת נותק. מניחים תוף פלדה מסתובב עם אספן הקרקע 12 ס"מ מקץ המחט.באמצעות קליפים תנין, לחבר את אספקת החשמל במתח גבוה זרם ישיר למחט, ולהבטיח כי האספן מקורקע. עבור 20 מיליליטר של פתרון PCL, הגדר את הפרמטר של משאבת המזרק בקוטר של 20.27 מילימטרים, וקצב זרימה של 0.5 מיליליטר לשעה. בדוק אם הטיפות נוצרות בקצה המחט.החל פוטנציאל חשמלי של 20 קילו-וולט בין ספינרט ואספן קרקע הממוקם 20 ס"מ מן spinneret. לאסוף את מחצלות nanofiber מיושר בתוף, מסתובב ב 2, 000 סל"ד. לאסוף את מחצלות nanofiber PCL ברגע שהם מגיעים לעובי של כמילימטר אחד.לטבול את מחצלות nanofiber PCL בחנקן נוזלי במשך חמש דקות. שמור את מחצלות nanofiber PCL בחנקן נוזלי, ו אגרוף מחצלות Nanofiber PCL עם אגרוף בקוטר 0.5 מילימטר. מניחים את מחצלות nanofiber PCL לתוך חנקן נוזלי במשך חמש דקות.חותכים את המחצלות לס"מ אחד על ידי ריבועים סנטימטר אחד באמצעות מספריים כירורגיים חדים בעוד שקוע חנקן נוזלי, כדי למנוע עיוות של הקצוות. מניחים את המחצלת החתוכה בצינור צנטריפוגה 30 מיליליטר עם גרם אחד של קרח יבש. מכסים היטב את המכסה, ומאפשרים לקרח היבש להפוך לפחמן דו חמצני נוזלי.לאחר הנוזל נוצר בצינור, לשחרר במהירות את הלחץ על ידי פתיחת הכובע. מוציאים ומתבוננים בפיגום המנופח מהצינור. מניחים את הפיגום בצינור צנטריפוגה חדש עם קרח יבש, וחוזרים על עצמם באמצעות עובי התשוקה מושגת.לעקר את פיגומים nanofiber המורחבת תחמוצת אתילן לפני הדגירה עם תאים. האפקטיביות של הרחבת מחצלות אלקטרוספון ננופייבר 2D המסורתית לתוך פיגומים 3D באמצעות דיפרסוריזציה של נוזל CO2 תת-קרן מוצג בצד שמאל לאחר הטיפול השני. עובי הפיגום עלה ממילימטר אחד כאשר לא טופל ל 2.5 מילימטרים עם טיפול CO2 אחד, ל 19.2 מילימטרים עם שני טיפולי CO2.נקבוביות הפיגומים עלתה מ-79.5% עבור המחצלות הלא מטופלות, ל-92.1% לאחר הטיפול הראשון, ל-99.0% לאחר הטיפול השני. זה משמעותי כי מידת החדירה של התא לתוך פיגום, ולכן היעילות שלה כדי לגרום להתחדשות, תלוי במידה רבה נקבוביות. תמונות SEM חושפות כי המבנה הסיבי הצפוף של מחצלות דו-ממדיות לא מטופלות הפך למבנים מסודרים ושכבתיים עם סיבי ננו מיושרים לאחר התרחבות עם CO2.ב Vevo מחקרים בוצעו על ידי השתלה תת עורית של פיגומים CO2-מורחב ננו סיבים עם חורים מרובעים כדי חולדות. זה מאפשר הגירה סלולרית והתפשטות בתוך החורים, כמו גם חדירה נוספת בתוך שכבות סיבים ננו שנוצרו במהלך ההתפשטות. מהשבוע הראשון עד הרביעי שלאחר ההשתלה, הפיגומים המורחבים הראו עלייה משמעותית במספר כלי הדם שנוצרו, ותאי ענק רב-גרעיניים בהשוואה לשטיח סיבים ננו מסורתי.בעקבות הליך זה, מולקולות שונות כולל גורמי גדילה, תרכובות אפנון אמינו, סוכנים המוסטטיים, וסוכנים אנטי מיקרוטובולריים ניתן לשלב לתוך מחצלות סיבים ננו והורחב נוזל CO2 subcritical. פיגומים ננו סיבי ננו מורחבים פונקציונליים כאלה יכולים לשמש כדי לחקור שאלות חדשות בתחומים מדעיים אחרים, כגון hemostasis, מניעה וטיפול בזיהום, אימונולוגיה, התחדשות ותיקון רקמות. ממיסים אורגניים הם רעילים, ויש לטפל בהם במכסה המנוע הכימי.יתר על כן, מיכל שיכול לסבול את הלחץ הגבוה של נוזל CO2 subcritical יש להשתמש עבור ההרחבה.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection CRISPR/Cas9 החלבון לתוך ערוץ שפמנון, Ictalurus punctatus, העוברים עבור ג'ין עריכה

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy כמו הגישה כירורגי של משלוח סמים מקומי לתוך האוזן הפנימית של עכברים בוגרים ו Neonatal

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

בוחן את התפקיד של פלסמידים Multicopy באבולוציה של עמידות לאנטיביוטיקה

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

הנועד פשוטה, מהירה, כמותית למדוד תיקון של חלבון-דנ א Crosslinks על פלסמידים Transfected בתרבית של תאים

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

וקטור lentiviral פלטפורמה למסירה יעיל של כלי עריכת Epigenome לתוך האדם המושרה מודלים המחלה נגזר תאי גזע Pluripotent

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

הדור של אורגנואידים גידול מ מהונדסים גנטית עכבר מודלים של סרטן הערמונית

Methods based on homologous recombination to modify genes have significantly furthered biological research. Genetically engineered mouse models (GEMMs) ...

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

היכרות גנטית הסתרה ישירות לתוך השלב Amastigote של טריאנוסומה cruzi באמצעות מערכת CRISPR/Cas9

Trypanosoma cruzi is a pathogenic protozoan parasite that causes Chagas&#8217; disease mainly in Latin America. In order to identify a novel drug target ...

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

שימוש ב- Drosophila ילה S2 תאים עבור הדמיה חיה של חטיבת התא

Drosophila S2 cells are an important tool in studying mitosis in tissue culture, providing molecular insights into this fundamental cellular process in a ...

Characterization of Functionally Associated miRNAs in Glioblastoma and their Engineering into Artificial Clusters for Gene Therapy

אפיון של miRNAs הקשורים פונקציונלית ב גלינובלסטומה וההנדסה שלהם לאשכולות מלאכותיים עבור טיפול גנטי

The biological relevance of microRNAs (miRNAs) in health and disease significantly relies on specific combinations of many simultaneously deregulated ...

Use of Freeze-thawed Embryos for High-efficiency Production of Genetically Modified Mice

השימוש של עוברים הקפאת-הפשפה לייצור יעילות גבוהה של עכברים ששונו גנטית

The use of genetically modified (GM) mice has become crucial for understanding gene function and deciphering the underlying mechanisms of human diseases. ...