Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado por concede do Instituto Nacional de General Medical ciência (NIGMS) no NIH (2P 20 GM103480-06 e 1R01GM123081 para J.X.), os fundos de Otis Glebe Medical Research Foundation, NE LB606 e inicialização de medicina da Universidade de Nebraska Centro.

Todos na vivo os procedimentos descritos abaixo foram aprovados pelo Comité IACUC no centro médico da Universidade de Nebraska.
1. prepare as soluções para o padrão eletrofiação
<ol><li>Em um tubo de vidro de 20 mL, dissolver 2 g de poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) em uma solvente mistura de diclorometano (DCM) e N, N-dimetilformamida (DMF) com uma ração de 4:1 (v/v) em uma concentração de 10% (p/v). Cuidado: Punho DCM e DMF em um capuz ventilado para evitar a ...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

Transformando electrospun 2D tradicionais esteiras de nanofibras expandidos andaimes 3D através de CO2 despressurização foi investigada. Esteiras de nanofibras 2D tradicional são expandido com sucesso através de subcrítica CO2 líquido. Os passos críticos são para fabricar esteiras de nanofibras 2D sob uma condição otimizada e cortar as esteiras sem deformar as bordas (EG., utilizando tesouras cirúrgicas em ponto). Esta CO2-andaimes de nanofibras expa...

O conceito de desenvolvimento de um andaime sintético que pode ser implantado em pacientes para auxiliar na regeneração e reparo tecidual é aquele que tem permeado o campo da medicina regenerativa para décadas. O andaime sintético ideal serve para induzir a migração de células do tecido saudável circundante, fornece uma arquitetura para vascularização de suportes de semeadura, adesão, sinalização, proliferação e diferenciação, célula, permite a adequada oxigenação e entrega de nutrição e promove a atividade imunológica do hospedeiro para garantir o sucesso após a implantação1. Além disso, ele pode ser usado como um portador para a incorporação de moléculas antimicrobianas para auxiliar na ferida cura1,3,6,7,8,9. A capacidade de controlar o lançamento temporal destas moléculas biológicas do cadafalso sintético é outro atributo desejável que é considerado quando engenharia moldes1.
Eletrofiação tem sido uma técnica bem-utilizada para a produção de nanofibras andaimes1,2,3,4,5,6. Tentativas anteriores para criar um andaime de nanofibras como o discutido aqui tem sido feitas em diferentes graus de sucesso. No entanto, nanofibras tradicionais andaimes limitaram habilidades para atingir esses objetivos. Andaimes de nanofibras tradicionais têm sido principalmente esteiras bidimensional1,3. Estes andaimes nonexpanded são densamente com tamanhos de poros pequenos; Isso limita a infiltração celular, migração e diferenciação como ele não promove um ambiente bastante semelhante àquelas encontradas na vivo1,7,8,9. Por esta razão, novas técnicas de preparação de andaime de nanofibras electrospun 3D foram criadas para alterar as falhas inerentes que vêm com esteiras de nanofibras 2D. Estas técnicas resultam em 3D andaimes; no entanto, eles têm limitada aplicabilidade devido aos métodos de produção que exigem soluções aquosas e procedimentos de liofilização. Esse processamento resulta na distribuição aleatória das nanofibras sem organização restrita, espessura adequada, e/ou porosidade desejada para fornecer as pistas de nanotopographic adequados que são necessárias para a proliferação e migração celular. Esses fatores resultam nos andaimes de nanofibras 3D electrospun anterior que a falta de adequada mimetismo de vida tecidos1,7,8,9.
Mais recentes tentativas de desenvolver um andaime expandido, 3D com melhor biomimetismo da matriz extracelular (ECM) foram realizadas usando um tratamento da solução (NaBH4) boro-hidreto de sódio aquoso e moldes pré-concebidos para ajudar a controlar melhor o forma da resultante andaime7,8. No entanto, esse método não é o ideal, como exige o uso de soluções aquosas, reações químicas e de liofilização que pode interferir com polímeros e qualquer biomoléculas encapsuladas que são solúveis em água. Os aditivos usados também podem causar efeitos colaterais durante a regeneração de tecido8,9. O método de expansão de2 CO descrito neste artigo grandemente reduz o tempo de processamento, elimina a necessidade de soluções aquosas e preserva a montante e a funcionalidade de moléculas biologicamente ativas em maior medida do que o anteriormente estabelecidos métodos9.
Em estudos anteriores, antibióticos, prata, 1 α, 25 dihidroxivitamina D3e peptídeo antimicrobiano LL-37 foram carregados os andaimes de nanofibras individualmente e em conjunto para investigar o potencial destes andaimes para liberar agentes para mais ajuda na ferida cura9,10,12,13. Com a finalidade de demonstrar este método de expansão de andaime de nanofibras, Coumarine 6, um corante fluorescente, serão carregados no cadafalso para demonstrar o potencial de incorporação o andaime com vários compostos desejados. Este método de fabricação de andaime de nanofibras expandido em conjunto com moléculas bioativas encapsulados possui grande potencial na regeneração dos tecidos, cicatrização de feridas, a criação de modelos 3D de tecido e a entrega tópica de drogas.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

Eletrofiação tem sido a tecnologia preferencial em produzir um andaime devido o biomimetismo a matriz extracelular e o controle de facilidade de composição, estrutura e diâmetro de fibras sintético, funcional. No entanto, apesar dessas vantagens, electrospun tradicional nanofibras andaimes vêm com limitações incluindo desorganizado orientação de nanofibras, baixa porosidade, tamanho dos poros pequenos e esteiras principalmente bidimensionais. Como tal, há uma grande necessidade para o desenvolvimento de um novo processo para fabricar andaimes de nanofibras de electrospun que podem superar as limitações acima. Neste documento, um método simples e romance é descrito. Uma esteira de nanofibras 2D tradicional é transformada em um andaime 3D com a espessura desejada, distância, porosidade e pistas de nanotopographic para permitir a propagação de células e proliferação através da despressurização subcrítico CO2 líquido. Além de fornecer um andaime para regeneração de tecidos ocorrer, esse método também fornece a oportunidade para encapsular moléculas bioativas, tais como peptídeos antimicrobianos para entrega de drogas local. Os CO2 expandida nanofibras andaimes segurar grande potencial na regeneração de tecidos, cicatrização de feridas, tecido 3D modelagem e entrega de droga tópica.

A eficácia da expansão electrospun 2D tradicional nanofibras esteiras em andaimes 3D através de despressurização subcrítico CO2 líquido foi demonstrada em diferentes capacidades: a espessura dos andaimes aumentou de 1 mm, quando não tratada a 2,5 mm e 19,2 mm com CO2 tratamentos 1 e 2, respectivamente (Figura 3A-C). A porosidade-a característica da arquitetura crítica para a propagação de célula-também aume...

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Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

Este artigo demonstra a técnica de expansão de uma esteira de nanofibras tradicional, duas dimensões (2D) electrospun em um andaime de três dimensões (3D) através da despressurização subcrítico CO2 líquido. Estes andaimes aumentadas são 3D, pistas perto imitar nanotopographic celular e preservar as funções de moléculas biológicas encapsuladas dentro de nanofibras.

Expansão de duas dimensões Electrospun nanofibras esteiras em três dimensões andaimes

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

Este protocolo relatou a transformação de nanofibremembranos eletrofibremsos tradicionais de 2D para 3D, via despressurização do fluido de CO2 subcrático que não foi realizado anteriormente. Este método elimina muitas questões associadas a abordagens anteriores, incluindo o uso de soluções aquosas e reações químicas, processos de múltiplas etapas, perda de atividade de moléculas biológicas encapsuladas e limitações de polímeros hidrofóbicos. Demonstrando este procedimento está Shixuan Chen, um pós-doutor do meu laboratório.Em um tubo de vidro de 20 mililitre, dissolva dois gramas de PCL em uma mistura de solvente de diclorometano e DMF, com uma proporção de quatro para um a uma concentração de 10%. Coloque o tubo de vidro em um rotador de laboratório até que a solução fique clara. A solução pode se misturar durante a noite.Para configurar o aparelho de eletropinning, primeiro, adicione a solução PCL a uma seringa de 20 mililitros com uma agulha sem medida de 21. Certifique-se de que não há ar na seringa e tubos dissociados. Coloque um tambor de aço rotativo com o coletor de terra a 12 centímetros da ponta da agulha.Usando clipes de jacaré, conecte a fonte de alimentação de alta tensão de corrente direta à agulha e certifique-se de que o coletor esteja aterrado. Para os 20 mililitros da solução PCL, defina o parâmetro da bomba de seringa usando um diâmetro de 20,27 milímetros e uma taxa de fluxo de 0,5 mililitros por hora. Verifique se as gotículas estão se formando na ponta da agulha.Aplique um potencial elétrico de 20 quilovolts entre o spinneret e um coletor de terra localizado a 20 centímetros de distância do spinneret. Colete os tapetes de nanofibra alinhados em um tambor, girando a 2.000 RPM. Colete os tapetes de nanofibra PCL uma vez que atingem uma espessura de aproximadamente um milímetro.Mergulhe os tapetes de nanofibra PCL em nitrogênio líquido por cinco minutos. Mantenha os tapetes de nanofibra PCL em nitrogênio líquido, e soque tapetes de nanofibra PCL com um soco de 0,5 milímetros de diâmetro. Coloque os tapetes de nanofibra PCL em nitrogênio líquido por cinco minutos.Corte os tapetes em um centímetro por quadrados de um centímetro usando uma tesoura cirúrgica afiada enquanto submerso em nitrogênio líquido para evitar a deformação das bordas. Coloque o tapete cortado em um tubo de centrífuga de 30 mililitros com aproximadamente um grama de gelo seco. Tampa firmemente a tampa, e permite que o gelo seco se transforme em dióxido de carbono líquido.Uma vez que o líquido tenha se formado no tubo, solte rapidamente a pressão abrindo a tampa. Retire e observe o andaime inchado do tubo. Coloque o andaime em um novo tubo de centrífuga com gelo seco, e repita a espessura do desejo.Esterilize os andaimes de nanofibra expandidos em óxido de etileno antes da incubação com células. A eficácia da expansão dos tradicionais tapetes de nanofibra eletrospun 2D em andaimes 3D via despressurização do fluido de CO2 subcrático é mostrada à esquerda após o segundo tratamento. A espessura do andaime aumentou de um milímetro quando não tratado para 2,5 milímetros com um tratamento de CO2, para 19,2 milímetros com dois tratamentos de CO2.A porosidade dos andaimes aumentou de 79,5% para os tapetes não tratados, para 92,1% após o primeiro tratamento, para 99,0% após o segundo tratamento. Isso é significativo porque o grau de penetração celular em um andaime, e, portanto, sua eficácia para induzir a regeneração, é em grande parte dependente da porosidade. As imagens da SEM revelam que a estrutura fibular densamente embalada de tapetes 2D não tratados foi transformada em estruturas ordenadas e em camadas com nano fibras alinhadas após a expansão com CO2.Em Vevo os estudos foram realizados por implantação subcutânea de andaimes de nano fibra expandidos de CO2 com buracos quadrados para ratos. Isso permite a migração celular e a proliferação dentro dos buracos, bem como uma infiltração adicional dentro das camadas de nano fibra que foram criadas durante a expansão. Da semana um ao quatro pós-implantação, os andaimes expandidos mostraram um aumento significativo no número de vasos sanguíneos formados, e células gigantes multinucleadas quando comparadas a um tapete tradicional de nano fibra.Após este procedimento, diferentes moléculas, incluindo fatores de crescimento, compostos amino-moduladores, agentes hemostáticos e agentes anti-microtubulares podem ser incorporados nos tapetes de nano fibra e expandidos em fluido co2 subcrítico. Esses andaimes de nano fibra expandidos funcionalizados poderiam ser usados para explorar novas questões em outros campos científicos, como hemostasia, prevenção e tratamento de infecção, imunologia e regeneração e reparação tecidual. Solventes orgânicos são tóxicos, e devem ser manuseados em uma capa química.Além disso, um recipiente que possa suportar a alta pressão do fluido de CO2 subcrático deve ser usado para a expansão.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjeção de proteína CRISPR/Cas9 em bagre do canal, Ictalurus punctatus, embriões para Gene Editing

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Genética

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy como uma abordagem cirúrgica para entrega de drogas para o ouvido interno de ratos adultos e Neonatal

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

Testando o papel de plasmídeos multicópia na evolução da resistência aos antibióticos

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

Um ensaio simples, rápido e quantitativo para medida de reparação de ADN-proteína ligações cruzadas em plasmídeos transfectadas em células de mamíferos

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Vetor de Lentivirus de plataforma para a entrega eficiente de ferramentas de edição de Epigenoma em humanos induzida por modelos de doenças derivadas de células-tronco pluripotentes

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

Geração de organóides tumorais de modelos de camundongo geneticamente modificados de câncer de próstata

Methods based on homologous recombination to modify genes have significantly furthered biological research. Genetically engineered mouse models (GEMMs) ...

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

Introduzindo um nocaute genético diretamente no estágio Amastigote do Trypanosoma cruzi usando o sistema crispr/Cas9

Trypanosoma cruzi is a pathogenic protozoan parasite that causes Chagas&#8217; disease mainly in Latin America. In order to identify a novel drug target ...

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Use of Drosophila S2 Cells for Live Imaging of Cell Division

Uso de células de Drosophila S2 para imagens ao vivo da divisão celular

Drosophila S2 cells are an important tool in studying mitosis in tissue culture, providing molecular insights into this fundamental cellular process in a ...

Characterization of Functionally Associated miRNAs in Glioblastoma and their Engineering into Artificial Clusters for Gene Therapy

Caracterização de miRNAs funcionalmente associadas em glioblastoma e sua engenharia em clusters artificiais para terapia gênica

The biological relevance of microRNAs (miRNAs) in health and disease significantly relies on specific combinations of many simultaneously deregulated ...

Use of Freeze-thawed Embryos for High-efficiency Production of Genetically Modified Mice

Uso de embriões congelados para produção de ratos geneticamente modificados

The use of genetically modified (GM) mice has become crucial for understanding gene function and deciphering the underlying mechanisms of human diseases. ...