Name: expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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Este trabajo fue financiado por donaciones desde el Instituto Nacional de General médica ciencia (NIGMS) en el NIH (2P 20 GM103480-06 y 1R01GM123081 a losa), los fondos Fundación de investigación médica de Otis Glebe, NE LB606 y puesta en marcha de la Universidad de Nebraska Medical Centro.

Todo en vivo los procedimientos descritos a continuación fueron aprobados por el Comité de IACUC en la Universidad de Nebraska Medical Center.
1. preparar las soluciones estándar Electrospinning
<ol><li>En un tubo de vidrio de 20 mL, se disuelven 2 g de poly(ε-caprolactone) (PCL, Mw = 80 kDa) en una solvente mezcla de diclorometano (DCM) y N, N-dimetilformamida (DMF) con una ración de 4:1 (v/v) a una concentración de 10% (p/v). PRECAUCIÓN: Mango DCM y DMF en una campana bi...

<ol>
	<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+electrospun+nanofibers+for+wound+healing.">Recent advances in electrospun nanofibers for wound healing.</a> Nanomedicine. 12 (11), 1335-1352 (2017).</li><li>Khandalavala, K., Jiang, J., Shuler, F. D., Xie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+Nanofiber+Scaffolds+with+Gradations+in+Fiber+Organization.">Electrospun Nanofiber Scaffolds with Gradations in Fiber Organization.</a> Journal of Visualized Experiments. (98), e52626 (2015).</li><li>Xie, J., Li, X., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Put+electrospun+nanofibers+to+work+for+biomedical+research.">Put electrospun nanofibers to work for biomedical research.</a> Macromolecular Rapid Communication. 29 (22), 1775-1792 (2008).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber+membranes+with+controllable+microwells+and+structural+cues+and+their+use+in+forming+cell+microarrays+and+neuronal+networks.">Nanofiber membranes with controllable microwells and structural cues and their use in forming cell microarrays and neuronal networks.</a> Small. 7 (3), 293-297 (2011).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radially+aligned,+electrospun+nanofibers+as+dural+substitutes+for+wound+closure+and+tissue+regeneration+applications.">Radially aligned, electrospun nanofibers as dural substitutes for wound closure and tissue regeneration applications.</a> ACS. 4 (9), 5027-5036 (2010).</li><li>Xie, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Aligned-to-random"+nanofiber+scaffolds+for+mimicking+the+structure+of+the+tendon-to-bone+insertion+site.">"Aligned-to-random" nanofiber scaffolds for mimicking the structure of the tendon-to-bone insertion site.</a> Nanoscale. 2 (6), 923-926 (2010).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+3D+Nanofiber+Scaffolds:+Cell+Penetration.">Expanded 3D Nanofiber Scaffolds: Cell Penetration.</a> Neovascularization, and Host Response. Advanced Healthcare Materials. 5 (23), 2993-3003 (2016).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+Two-Dimensional+Electrospun+Nanofiber+Membranes+in+the+Third+Dimension+by+a+Modified+Gas-Foaming+Technique.">Expanding Two-Dimensional Electrospun Nanofiber Membranes in the Third Dimension by a Modified Gas-Foaming Technique.</a> ACS Biomaterials Science &amp; Engineering. 10 (1), 991-1001 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CO2-expanded+nanofiber+scaffolds+maintain+activity+of+encapsulated+bioactive+materials+and+promote+cellular+infiltration+and+positive+host+response.">CO2-expanded nanofiber scaffolds maintain activity of encapsulated bioactive materials and promote cellular infiltration and positive host response.</a> Acta Biomaterialia. 68, 237-248 (2018).</li><li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanofiber-based+sutures+induce+endogenous+antimicrobial+peptide.">Nanofiber-based sutures induce endogenous antimicrobial peptide.</a> Nanomedicine. 12 (10), 2597-2609 (2017).</li><li>Dhand, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bio-inspired+crosslinking+and+matrix-drug+interactions+for+advanced+wound+dressings+with+long-term+antimicrobial+activity.">Bio-inspired crosslinking and matrix-drug interactions for advanced wound dressings with long-term antimicrobial activity.</a> Biomaterials. 138, 153-168 (2017).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+sustained+delivery+of+25-hydroxyvitamin+D3+for+production+of+antimicrobial+peptides.">Local sustained delivery of 25-hydroxyvitamin D3 for production of antimicrobial peptides.</a> Pharmaceutical Research. 32 (9), 2851-2862 (2015).</li><li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1&#945;,+25-dihydroxyvitamin+D3-eluting+nanofibrous+dressings+induce+endogenous+antimicrobial+peptide+expression.">1&#945;, 25-dihydroxyvitamin D3-eluting nanofibrous dressings induce endogenous antimicrobial peptide expression.</a> Nanomedicine (Lond). 13 (12), 1417-1432 (2018).</li><li>Ma, B., Xie, J., Jiang, J., Shuler, F. D., Bartlett, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+nanofiber+scaffolds+for+orthopedic+tissue+repair+and+regeneration.">Rational design of nanofiber scaffolds for orthopedic tissue repair and regeneration.</a> Nanomedicine. 8 (9), 1459-1481 (2013).</li></ol>

Transformación de esteras de nanofibras electrospun 2D tradicional en andamios 3D ampliados fue investigado por CO2 despresurización. Nanofibras 2D tradicionales esteras son exitosamente ampliado vía subcritical CO2 líquido. Son los pasos críticos fabricar nanofibras 2D esteras bajo una condición optimizada y cortar las esteras sin deformar los bordes (por ej., usando afiladas tijeras quirúrgicas). Este CO2-nanofibras ampliado andamios tienen muchos benef...

El concepto de desarrollar un andamio sintético que puede ser implantado a pacientes para ayudar en la regeneración y reparación del tejido es uno que ha calado en el campo de la medicina regenerativa durante décadas. El andamio sintético ideal sirve para inducir la migración de células de tejido sano circundante, proporciona una arquitectura de vascularización de soportes siembra, adherencia, señalización, proliferación y diferenciación celular, permite la oxigenación adecuada y entrega de nutrición y promueve la actividad inmune del host para asegurar el éxito después de la implantación1. Además, puede utilizarse como un portador para incrustar las moléculas antimicrobianas para ayudar en la cicatrización1,3,6,7,8,9. La capacidad para controlar la liberación temporal de estas moléculas biológicas desde el andamio sintético es otro atributo deseable que se considera cuando ingeniería andamios1.
Electrospinning ha sido una técnica bien utilizada para la producción de nanofibras andamios1,2,3,4,5,6. Intentos anteriores de crear un andamio de nanofibras como el que aquí se han realizado en diversos grados de éxito. Sin embargo, andamios tradicionales nanofibras tienen limitadas habilidades para lograr estas metas. Andamios de nanofibras tradicionales han sido principalmente dos dimensiones esteras1,3. Estos andamios no expandidos se embalan denso con tamaños de poro pequeño; Esto limita la infiltración de la célula, la migración y la diferenciación como no promueve un ambiente bastante similar a las encontradas en vivo1,7,8,9. Por esta razón, se han establecido nuevas técnicas de preparación de andamio de nanofibras electrospun 3D para enmendar los defectos inherentes que vienen con esteras de nanofibras 2D. Estas técnicas resultan en andamios 3D; sin embargo, ha limitado aplicabilidad debido a los métodos de producción que requieren de soluciones acuosas y procedimientos de la liofilización. Este proceso da como resultado la distribución aleatoria de las nanofibras sin organización restringida, grosor adecuado o porosidad deseada para proporcionar las señales de nanotopographic adecuados que son necesarias para la proliferación y migración celular. Estos factores dan como resultado en los andamios de nanofibras electrospun 3D anteriores que carecen de adecuada mímica de la vida los tejidos1,7,8,9.
Se han realizado más recientes intentos de desarrollar un andamio 3D, ampliado con mejor biomimética de matriz extracelular (ECM) con un tratamiento de solución acuosa de Sodio borohidruro (NaBH4) y moldes prediseñados para ayudar en mejor control de la forma de la que resulte del andamio7,8. Sin embargo, este método no es ideal ya que requiere el uso de soluciones acuosas, las reacciones químicas y la liofilización que puede interferir con polímeros y cualquier biomoléculas encapsuladas que son solubles en agua. Los aditivos utilizados también pueden causar efectos secundarios durante la regeneración de tejido8,9. El método de expansión de2 CO descrito en este artículo mucho reduce el tiempo de procesamiento, elimina la necesidad de soluciones acuosas y preserva la cantidad y funcionalidad de moléculas biológicamente activas en mayor medida que los anteriormente métodos establecidos9.
En estudios previos, antibióticos, plata, 1α, 25 dihidroxivitamina D3y péptido antimicrobiano LL-37 fueron cargados en los andamios de nanofibras individualmente y en combinación para investigar el potencial de estos andamios para liberar agentes más ayuda en la cicatrización de9,10,12,13. Con el fin de demostrar que este método de expansión de andamio de nanofibras, Coumarine 6, un colorante fluorescente, se cargarán en el andamio para demostrar el potencial de incrustación del andamio con varios compuestos deseados. Este método de fabricación de andamio de nanofibras ampliado junto con moléculas bioactivas encapsuladas tiene gran potencial en la regeneración de los tejidos, la cicatrización de heridas, la creación de modelos 3D del tejido y la entrega tópica de fármacos.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440744</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethlyformamide</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D-199-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>AC61093-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coumarin 6</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>546283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotating Steel Drum</td>
			<td>customized</td>
			<td></td>
			<td>This serves as a collector during electrospinning.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-831-200</td>
			<td>Coaxial spinning requires two single syringe pumps.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolver</td>
			<td>Lab Net International</td>
			<td>H5600</td>
			<td>Adjustable lab rotator for mixing solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (27G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26426</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypodermic Needle (21G x 1 1/2&#34;)</td>
			<td>EXCELINT International Co</td>
			<td>26416</td>
			<td>This is part of the example customized coaxial nozzel shown.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Voltage DC Power Supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscope</td>
			<td>FEI</td>
			<td>Nova 2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Imager 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LL 37 ELISA Kit</td>
			<td>Hycult Biotech</td>
			<td>HK321-02</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

expansion of two-dimension electrospun nanofiber mats into three-dimension scaffolds

Electrospinning ha sido la tecnología preferida en la producción de un andamio sintético, funcional debido a la biomimética matriz extracelular y el control de la facilidad de la composición, estructura y diámetro de las fibras. Sin embargo, a pesar de estas ventajas, nanofibras electrospun tradicionales andamios vienen con limitaciones incluyendo desorganizan orientación de nanofibras, baja porosidad, tamaño de poro pequeño y tapetes principalmente dos dimensiones. Como tal, hay una gran necesidad para el desarrollo de un nuevo proceso para la fabricación de andamios de nanofibras electrospun que pueden superar las limitaciones. En este documento, se describe un método novedoso y simple. Una estera de nanofibras 2D tradicional se transforma en un andamio 3D con el espesor deseado, distancia de brecha, porosidad y señales nanotopographic para permitir la siembra de células y la proliferación a través de la despresurización de subcritical CO2 líquido. Además de proporcionar un andamio para la regeneración de los tejidos que se produzca, este método también ofrece la posibilidad de encapsular moléculas bioactivas como péptidos antimicrobianos para la entrega local de la droga. El CO2 ampliado nanofibras andamios tienen gran potencial en la regeneración de los tejidos, la cicatrización de heridas, tejido 3D modelado y administración de fármacos tópicos.

La eficacia de la expansión de esteras de nanofibras electrospun 2D tradicional en 3D andamios por despresurización de subcritical CO2 líquido fue demostrada en diferentes capacidades: el grueso de los andamios se incrementó de 1 mm cuando no se trata de 2,5 mm y 19,2 mm con CO2 tratamientos uno y dos, respectivamente (Figura 3A-C). La porosidad, una característica de la arquitectura fundamental para la siembra de c...

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Expansion of Two-dimension Electrospun Nanofiber Mats into Three-dimension Scaffolds

Este artículo demuestra la técnica de expansión de una estera de nanofibras electrospun (2D) tradicional, dos dimensiones en un andamio de tres dimensiones (3D) a través de la despresurización de subcritical CO2 líquido. Estos andamios aumentados son 3D, cerca mímica celular nanotopographic señales y preservar las funciones de las moléculas biológicas encapsuladas dentro de las nanofibras.

Extensión de esteras de nanofibras Electrospun de dos dimensiones en tres dimensiones andamios

Electrospinning has been the preferred technology in producing a synthetic, functional scaffold due to the biomimicry to extracellular matrix and the ease ...

Este protocolo reportó la transformación de nanofibremembranas tradicionales de electrospun de 2D a 3D, a través de la despresurización del fluido de CO2 subcrítico que no se realizó previamente. Este método elimina muchos problemas asociados con enfoques anteriores, incluyendo el uso de soluciones acuosas y reacciones químicas, procesos de pasos múltiples, pérdida de actividad de moléculas biológicas encapsuladas y limitaciones de polímeros hidrófobos. Demostrando este procedimiento está Shixuan Chen, un postdoctorado de mi laboratorio.En un tubo de vidrio de 20 mililitros, disolver dos gramos de PCL en una mezcla de disolvente de diclorometano y DMF, con una relación de cuatro a uno a una concentración del 10 por ciento. Coloque el tubo de vidrio en un rotador de laboratorio hasta que la solución se despeje. La solución puede mezclarse durante la noche.Para configurar el Aparato de Electrospinning, primero, agregue la solución PCL a una jeringa de 20 mililitros con una aguja contundente de calibre 21 conectada. Asegúrese de que no haya aire en la jeringa y tubos disociados. Coloque un tambor de acero giratorio con el colector de tierra a 12 centímetros de la punta de la aguja.Con clips de cocodrilo, conecte la fuente de alimentación de alta tensión de corriente directa a la aguja y asegúrese de que el colector esté conectado a tierra. Para los 20 mililitros de solución PCL, establezca el parámetro de la bomba de jeringa utilizando un diámetro de 20,27 milímetros y un caudal de 0,5 mililitros por hora. Compruebe si las gotas se están formando en la punta de la aguja.Aplicar un potencial eléctrico de 20 kilovoltas entre la hilera y un colector de tierra situado a 20 centímetros de distancia de la hilera. Recoger las alfombrillas de nanofibra alineadas en un tambor, girando a 2.000 RPM. Recoger las alfombrillas de nanofibra PCL una vez que alcanzan un espesor de aproximadamente un milímetro.Sumerja las alfombrillas de nanofibra PCL en nitrógeno líquido durante cinco minutos. Mantenga las alfombrillas de nanofibra PCL en nitrógeno líquido y las alfombrillas de nanofibra PCL punzonadas con un punzón de 0,5 milímetros de diámetro. Coloque las alfombrillas de nanofibra PCL en nitrógeno líquido durante cinco minutos.Corte las esteras en cuadrados de un centímetro por un centímetro utilizando tijeras quirúrgicas afiladas mientras se sumerge en nitrógeno líquido para evitar la deformación de los bordes. Coloque la estera cortada en un tubo centrífugo de 30 mililitros con aproximadamente un gramo de hielo seco. Tapa firmemente la tapa y deja que el hielo seco se convierta en dióxido de carbono líquido.Una vez que el líquido se ha formado en el tubo, libere rápidamente la presión abriendo la tapa. Retire y observe el andamio hinchado del tubo. Coloque el andamio en un nuevo tubo centrífugo con hielo seco, y repita util se logra el espesor del deseo.Esterilice los andamios de nanofibra expandido en óxido de etileno antes de la incubación con las células. La eficacia de la expansión de las esteras tradicionales de nanofibra de electrospun 2D en andamios 3D a través de la despresurización del líquido de CO2 subcrítico se muestra a la izquierda después del segundo tratamiento. El espesor del andamio aumentó de un milímetro cuando no se trata a 2,5 milímetros con un tratamiento de CO2, a 19,2 milímetros con dos tratamientos de CO2.La porosidad de los andamios aumentó del 79,5 por ciento para las esteras no tratadas, al 92,1 por ciento después del primer tratamiento, al 99,0 por ciento después del segundo tratamiento. Esto es significativo porque el grado de penetración celular en un andamio, y por lo tanto su eficacia para inducir la regeneración, depende en gran medida de la porosidad. Las imágenes SEM revelan que la estructura fibular densamente empaquetada de las esteras 2D no tratadas se transformó en estructuras ordenadas y estratificadas con nanofibras alineadas después de la expansión con CO2.En Vevo los estudios se llevaron a cabo mediante la implantación subcutánea de andamios de nanofibra expandido por CO2 con agujeros de matriz cuadrada a ratas. Esto permite la migración celular y la proliferación dentro de los agujeros, así como una mayor infiltración dentro de las capas de nanofibra que se crearon durante la expansión. De la semana uno a cuatro postimplantación, los andamios expandidos mostraron un aumento significativo en el número de vasos sanguíneos formados, y células gigantes multinucleadas en comparación con una estera de nano fibra tradicional.Después de este procedimiento, diferentes moléculas incluyendo factores de crecimiento, compuestos de amino-modulación, agentes hemostáticos y agentes antimicrotubulares pueden ser incorporados en las esteras de nano fibra y expandidos en fluido de CO2 subcrítico. Estos andamios de nanofibra expandido funcionalizados podrían utilizarse para explorar nuevas preguntas en otros campos científicos, como la hemostasia, la prevención y el tratamiento de infecciones, la inmunología y la regeneración y reparación de tejidos. Los disolventes orgánicos son tóxicos y deben manipularse en una capucha química.Además, se debe utilizar un recipiente que pueda soportar la alta presión del fluido de CO2 subcrítico para la expansión.

Research

JoVE Journal

Genetics

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinjection of CRISPR/Cas9 Protein into Channel Catfish, Ictalurus punctatus, Embryos for Gene Editing

Microinyección de la proteína CRISPR/Cas9 en bagre de canal, Ictalurus punctatus, embriones de Gene Editing

The complete genome of the channel catfish, Ictalurus punctatus, has been sequenced, leading to greater opportunities for studying channel catfish gene ...

Investigación

Genética

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy como un abordaje quirúrgico a la entrega del Local de la droga en los oídos interiores de ratones adultos y Neonatal

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Testing the Role of Multicopy Plasmids in the Evolution of Antibiotic Resistance

Prueba el papel de Multicopy plásmidos en la evolución de resistencia a los antibióticos

Multicopy plasmids are extremely abundant in prokaryotes but their role in bacterial evolution remains poorly understood. We recently showed that the ...

A Simple, Rapid, and Quantitative Assay to Measure Repair of DNA-protein Crosslinks on Plasmids Transfected into Mammalian Cells

Una prueba Simple, rápida y cuantitativa a medida reparación de vínculos cruzados de proteínas DNA en plásmidos Transfected en las células de mamífero

The purpose of this method is to provide a flexible, rapid, and quantitative technique to examine the kinetics of DNA-protein crosslink (DPC) repair in ...

Lentiviral Vector Platform for the Efficient Delivery of Epigenome-editing Tools into Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Disease Models

Plataforma de vectores lentivirales para la entrega eficiente de las herramientas de edición de epigenoma en humanos inducida por modelos de enfermedad derivados de células madre pluripotentes

The use of hiPSC-derived cells represents a valuable approach to study human neurodegenerative diseases. Here, we describe an optimized protocol for the ...

Generation of Tumor Organoids from Genetically Engineered Mouse Models of Prostate Cancer

Generación de organoides tumorales a partir de modelos de ratón de ingeniería genética del cáncer de próstata

Methods based on homologous recombination to modify genes have significantly furthered biological research. Genetically engineered mouse models (GEMMs) ...

Introducing a Gene Knockout Directly Into the Amastigote Stage of Trypanosoma cruzi Using the CRISPR/Cas9 System

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Introducción de un Knockout Gene Directamente en la etapa de Amastigote de Trypanosoma cruzi usando el sistema CRISPR/Cas9

Trypanosoma cruzi is a pathogenic protozoan parasite that causes Chagas&#8217; disease mainly in Latin America. In order to identify a novel drug target ...

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Drosophila S2 cells are an important tool in studying mitosis in tissue culture, providing molecular insights into this fundamental cellular process in a ...

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Caracterización de los miRNAs asociados funcionalmente en el glioblastoma y su ingeniería en clústeres artificiales para la terapia génica

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Uso de embriones congelados descongelados para la producción de alta eficiencia de ratones modificados genéticamente

The use of genetically modified (GM) mice has become crucial for understanding gene function and deciphering the underlying mechanisms of human diseases. ...