Name: induction of mouse lung injury by endotracheal injection of bleomycin
Uploaded: 2019-04-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin at JoVE.com

이 작품은 보조금 RF-2011-02352331 장관 이탈리아어 델라 살루트 (아르만도 가브리엘리)에서 지원되었다.

모든 동물 관리 및 실험 절차는 이탈리아 보건부(승인 n. 456/2016-PR)의 승인을 받았으며 헬싱키 선언에 따라 수행되었습니다.
1. 생쥐
<ol><li>그들을 구입 한 후, 쥐에 대 한 적응 을 허용 적어도 7 주사 전에 일. 참고: 마우스는 병원균이 없는 조건하에서 동물 시설에 보관되었고, 12시간 의 빛/어두운 주기에서 일정한 온도및 습도 하에서 유지되었고, 물과 표준 펠릿 식품에 무?...

<ol>
	<li>Iudici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Where+are+we+going+in+the+management+of+interstitial+lung+disease+in+patients+with+systemic+sclerosis?.">Where are we going in the management of interstitial lung disease in patients with systemic sclerosis?.</a> Autoimmunity Reviews. 14 (7), 575-578 (2015).</li><li>Moore, B. B., Hogaboam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+pulmonary+fibrosis.">Murine models of pulmonary fibrosis.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (2), L152-L160 (2008).</li><li>Mouratis, M. A., Aidinis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+pulmonary+fibrosis+with+bleomycin.">Modeling pulmonary fibrosis with bleomycin.</a> Current Opinion in Pulmonary Medicine. 17 (5), 355-361 (2011).</li><li>Moeller, A., Ask, K., Warburton, D., Gauldie, J., Kolb, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bleomycin+animal+model:+a+useful+tool+to+investigate+treatment+options+for+idiopathic+pulmonary+fibrosis?.">The bleomycin animal model: a useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis?.</a> International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 40 (3), 362-382 (2008).</li><li>Moore, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fibrotic+lung+disease.">Animal models of fibrotic lung disease.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (2), 167-179 (2013).</li><li>Schrier, D. J., Kunkel, R. G., Phan, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+strain+variation+in+murine+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.">The role of strain variation in murine bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> American Review of Respiratory Disease. 127 (1), 63-66 (1983).</li><li>Phan, S. H., Kunkel, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+cytokine+production+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.">Lung cytokine production in bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> Experimental Lung Research. 18 (1), 29-43 (1992).</li><li>Capelli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+manipulated+whole+human+umbilical+cord+is+a+rich+source+of+clinical-grade+human+mesenchymal+stromal+cells+expanded+in+human+platelet+lysate.">Minimally manipulated whole human umbilical cord is a rich source of clinical-grade human mesenchymal stromal cells expanded in human platelet lysate.</a> Cytotherapy. 13 (7), 786-801 (2011).</li><li>Beeravolu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Characterization+of+Mesenchymal+Stromal+Cells+from+Human+Umbilical+Cord+and+Fetal+Placenta.">Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55224 (2017).</li><li>Moroncini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stromal+cells+from+human+umbilical+cord+prevent+the+development+of+lung+fibrosis+in+immunocompetent+mice.">Mesenchymal stromal cells from human umbilical cord prevent the development of lung fibrosis in immunocompetent mice.</a> PLoS One. 13 (6), e0196048 (2018).</li><li>Shahzeidi, S., Jeffery, P. K., Laurent, G. J., McAnulty, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+type+I+procollagen+mRNA+transcripts+in+the+lungs+of+mice+during+the+development+of+bleomycin-induced+fibrosis.">Increased type I procollagen mRNA transcripts in the lungs of mice during the development of bleomycin-induced fibrosis.</a> European Respiratory Journal. 7 (11), 1938-1943 (1994).</li><li>Lee, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+hMSCs+improve+myocardial+infarction+in+mice+because+cells+embolized+in+lung+are+activated+to+secrete+the+anti-inflammatory+protein+TSG-6.">Intravenous hMSCs improve myocardial infarction in mice because cells embolized in lung are activated to secrete the anti-inflammatory protein TSG-6.</a> Cell Stem Cell. 5 (1), 54-63 (2009).</li><li>Scotton, C. J., Chambers, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bleomycin+revisited:+towards+a+more+representative+model+of+IPF?.">Bleomycin revisited: towards a more representative model of IPF?.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 299 (4), L439-L441 (2010).</li><li>Cai, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+intratracheal+intubation+to+study+the+pathology+and+physiology+of+mouse+lung.">Noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50601 (2013).</li><li>Thomas, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endotracheal+intubation+in+mice+via+direct+laryngoscopy+using+an+otoscope.">Endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope.</a> Journal of Visualized Experiments. (86), e50269 (2014).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Dutta, S., Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Men+and+mice:+Relating+their+ages.">Men and mice: Relating their ages.</a> Life Sciences. 152, 244-248 (2016).</li><li>Sueblinvong, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predisposition+for+disrepair+in+the+aged+lung.">Predisposition for disrepair in the aged lung.</a> American Journal of Medical Sciences. 344 (1), 41-51 (2012).</li><li>Moodley, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+reduce+fibrosis+of+bleomycin-induced+lung+injury.">Human umbilical cord mesenchymal stem cells reduce fibrosis of bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Pathology. 175 (1), 303-313 (2009).</li><li>How, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+mediate+the+release+of+interferon+gamma-induced+protein+10+and+alleviate+bleomycin-induced+lung+inflammation+and+fibrosis.">Induced pluripotent stem cells mediate the release of interferon gamma-induced protein 10 and alleviate bleomycin-induced lung inflammation and fibrosis.</a> Shock. 39 (3), 261-270 (2013).</li><li>Lee, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TSG-6+as+a+biomarker+to+predict+efficacy+of+human+mesenchymal+stem/progenitor+cells+(hMSCs)+in+modulating+sterile+inflammation+in+vivo.">TSG-6 as a biomarker to predict efficacy of human mesenchymal stem/progenitor cells (hMSCs) in modulating sterile inflammation in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (47), 16766-16771 (2014).</li></ol>

엔도트라클 투여는 외인성 물질을 폐로 전달하기 위한 우선경로이다. 몇 년 이후, 기관에 bleomycin의 직접 주입은 널리 폐 섬유증을 유도하기 위해 사용되어왔다13, 최근, 더 진보, 비 침습적 기술은이 달성하기 위해 개발되었다14,15 ,16.
여기에 설명된 메서드는 몇 가지 잠재적제한 사항에 ?...

폐 섬유증은 세포외 매트릭스 성분의 과도한 침착을 특징으로하는 진보적 인 병리학 적 과정으로, 주로 I 형 콜라겐, 폐 간질에서, 폐 기능 장애를 유발한다. 그것은 다른 병인학을 가진 몇몇 인간적인 폐 질병의 특징이고 나쁜 임상 예후 요인을 나타냅니다. 현재 치료법은 다소제한적이기 때문에 마우스 모델은 질병의 발병 및 진행에 영향을 미치는 병원성 메커니즘의 추가 조사와 새로운 항섬유성 개발을 위한 필수 도구가 되고 있습니다. 전략2,3.
현재까지, 블리오마이신의 투여는 실험적으로 유도된 폐섬유증4의 가장 일반적으로적용된 모델이다. 여러 전달 방법 (정맥 내, 복강 내, 피하 및 흡입 포함) 외에, 출혈 내 또는 안내 주사는 가장 자주 사용되는 경로로 등장했다4,5. 본 명세서에서 설명하는 방법은 기관 점막에 대한 블리오마이신의 스케일링 효과를 피하기 위해 개발되었다. 실제로, 기관을 외부화하고 작동 현미경을 통해 시각화함으로써, 상부 기도에 유출되지 않고 하부 기도로 직접 블레마이신 용액의 전체 부피의 점안을 달성 할 수있다. 필요한 외과 전문 지식과 계측을 사용할 수 있을 때, 이 방법은 아래에 보고된 바와 같이 폐 염증 및 섬유증의 안전하고 견고하며 재현 가능한 유도를 가능하게 합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1024px;" width="1023">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">C57BL/6 mice</td>
			<td style="width:236px;">Charles River</td>
			<td style="width:239px;">Jax Mice Stock n. 000664</td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:239px;">T48402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Barraquer Micro Needle Holder</td>
			<td style="width:236px;">Lawton</td>
			<td style="width:239px;">62-3755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Bleomycin sulfate</td>
			<td style="width:236px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>B1141000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">B&#252;rker chamber</td>
			<td style="width:236px;">Brand&#160;</td>
			<td style="width:239px;">718905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">Culture Flasks&#160;</td>
			<td style="width:236px;">EuroClone</td>
			<td style="width:239px;">ET7076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Disposable razors</td>
			<td style="width:236px;">Unigloves</td>
			<td style="width:239px;">4080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Dissecting Forceps</td>
			<td style="width:236px;">Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td style="width:239px;">BD311R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">DPBS</td>
			<td style="width:236px;">Gibco</td>
			<td style="width:239px;">14190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Heating pad</td>
			<td style="width:236px;">2Biological Instruments</td>
			<td style="width:239px;">557023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Isoflurane Vet</td>
			<td style="width:236px;">Merial Italia</td>
			<td>N01AB06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Operating Microscope</td>
			<td style="width:236px;">Carl Zeiss</td>
			<td style="width:239px;">Model OPM 16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">TrypLE Select Enzyme</td>
			<td style="width:236px;">Gibco</td>
			<td style="width:239px;">12563-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Vannas Micro Scissors</td>
			<td style="width:236px;">Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td style="width:239px;">OC498R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Vicryl Plus 4/0 Absorbable Suture, FS-2 needle 19 mm</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon</td>
			<td style="width:239px;">VCP392ZH</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of mouse lung injury by endotracheal injection of bleomycin

폐 섬유증은 다른 병인학을 가진 몇몇 인간적인 폐 질병의 특징입니다. 현재 치료는 오히려 제한되기 때문에, 마우스 모형은 새로운 항섬유성 전략을 개발하기 위한 필수적인 공구가 계속됩니다. 여기서 우리는 전체 탯줄(hUC-MSC)으로부터 수득된 인간 중간엽 기질 세포의 생체 내 항섬유활성을 감쇠하는 블리오마이신 유발 폐 손상을 조사하는 효과적인 방법을 제공한다. C57BL/6 마우스는 블리오마이신(1.5 U/kg 체중)의 단일 endotracheal 주사를 받은 다음, 꼬리 정맥에 hUC-MSC(2.5 x 10 5)를 이중 으로 주입한 후, 24시간 및 7일 후에 블리오마이신 투여 후 7일 후에 투여한다. 8일, 14일 또는 21일에 희생시, 염증 및 섬유성 변화, 콜라겐 함량 및 이식된 폐 조직에서의 hUC-MSC 존재를 분석한다. 마우스 기관에 bleomycin의 주입은 광대한 폐 염증 및 섬유증으로 이끌어 내는 폐의 직접적인 표적으로 허용합니다. hUC-MSC의 이중 투여의 전신 투여는 블리오마이신 유발 폐 손상의 조기 블로닝을 초래한다. 정맥 주입 된 hUC-MSC는 마우스 폐로 일시적으로 이식되어 항 염증 및 항 섬유 활성을 발휘합니다. 결론적으로, 이 프로토콜은 인간 폐 섬유증의 실험마우스 모델에서 hUC-MSC의 전임상 시험을 성공적으로 적용하였다. 그러나, 이 기술은 폐의 병리생리학에 상이한 내측질 투여 물질의 효과를 연구하고 새로운 항염증 및 항섬유성 전신 요법을 검증하기 위해 둘 다 쉽게 확장될 수 있다.

폐 손상은 멸균 식염수 100 μL에서 1.5 U/kg의 황산염의 단일 내막주포로 유도되었다. 대조군 동물은 동일한 양의 식염수의 내막 주사제 주사를 받았다. hUC-MSC(2.5 x 105 에서 멸균 식염수 200 μL)의 2샷을 마우스 꼬리 정맥에 주입하였고, 24시간 및 7일 후에 블리오마이신 투여 후 7일 동안 주입하였다. 대조군 동물은 동일한 양의 멸균 식염수를 정맥 주사를 받았다. 마우스...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin at JoVE.com

Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin

여기에서 우리는 C57BL에 있는 bleomycin의 내적 주입에 의하여 폐 상해의 유도다음 전체 탯줄에서 장악된 정맥 주입된 인간 중간엽 기질 세포의 항섬유성 활성을 조사하는 효과적인 방법을 제시합니다. /6 마우스. 이 프로토콜은 다른 치료제의 전임상 시험으로 쉽게 확장될 수 있다.

Bleomycin의 내시경 주입에 의한 마우스 폐 손상의 유도

Pulmonary fibrosis is a hallmark of several human lung diseases with a different etiology. Since current therapies are rather limited, mouse models ...

이 프로토콜은 성공적으로 Bleomycin의 내트라큐트 주입에 의해 두 폐에서 중요한 염증 및 섬유성 반응을 유도하고 꼬리 정맥 주입에 의한 새로운 항 염증 및 항 섬유 성 전신 요법을 검증하기 위해 성공적으로 적용 될 수있다. 이 기술의 주요 장점은 마우스 기관으로 Bleomycin을 직접 주입하면 상부 기도에서 유출없이 폐를 신속하게 표적으로 하여 폐 염증 및 섬유증의 안전하고 견고하며 재현 가능한 유도를 한다는 것입니다. 절차를 시연하는 것은 우리의 협력 실험실에서 수의학 의사 인 Fiorenza 올랜도 박사가 될 것입니다.시작하려면 마취 된 마우스가 수술 플랫폼에 등에 누워 있는 것을 배치하십시오. 수술 용 테이프 스트립으로 다리를 섬세하게 고정하여 제자리에 고정하십시오. 마우스의 목을 하이퍼확장하려면 자궁 경부 부위 아래에 치과 용 면롤과 같은 지지체를 배치하십시오.그런 다음 면도날을 사용하여 목을 부드럽게 면도합니다. 해부학 적 집게 한 켤레를 사용하여 피부를 꼬집습니다. 마우스 스테인로이드 근육에 대응하여 길이의 약 반 센티미터를 짧게 절개하기 위해 구부러진 무딘 가위를 다루는 링 한 쌍을 사용합니다.면 봉을 사용하여 출혈을 막습니다. 그런 다음 무딘 해부에 의해 기관을 외부화하고 부드럽게 지방 과 다른 조직에서 청소. 수술 플랫폼을 회전하여 주사기를 제대로 각도로 전환할 수 있는 수술용 작업자가 작업자쪽으로 머리를 향하도록 합니다.기관을 시각화하려면 작동 현미경 아래에 마우스를 배치합니다. 조명을 조정하고 1과 1.2 사이의 배율을 설정한 다음 초점과 선명도를 조정합니다. 기관체는 명확하게 보이는 기관 고리가있는 흰색 반투명 튜브로 쉽게 구별 될 수 있습니다.부드럽게 파이펫은 Bleomycin 용액과 흡면 100 마이크로 리터를 0.5 밀리리터 주사기에 25 게이지 바늘로 거품 형성을 피합니다. 기관체가 명확하게 시각화되면 30도 각도로 바늘 끝으로 조심스럽게 구멍을 뚫습니다. 천천히 기관지의 루멘에 직접 Bleomycin의 100 마이크로 리터를 주입.전체 부피가 바늘 아래로 이동하기 위해 몇 초를 기다린 후 기관에서 제거하십시오. 바늘이 기관체에 올바르게 삽입될 때 발생하는 몇 초 의 무호흡증을 관찰하여 전체 액체 부피가 흡입되었음을 나타냅니다. 주사기와 바늘을 안전하게 버리십시오.피하 근막과 피부 상처를 5-0 흡수가능한 봉합사로 닫고 동물이 회복할 수 있도록 합니다. 마우스를 다시 마취한 후 의식이 확인되지 않은 후, 마우스를 멸균 후드 아래에 놓습니다. 실험 전반에 걸쳐 부드러운 마취를 유지하기 위해 1.5 %의 연속 흐름이있는 얼굴 마스크를 사용합니다.혈관 확장을 촉진하고 쉽게 주입할 수 있도록 하려면 꼬리를 따뜻한 물에 2분 간 담급니다. 인간 탯줄 중간엽 기질 세포의 현탁액을 부드럽게 배관하여 세포 덩어리 형성을 피하십시오. 200 마이크로리터를 1밀리리터 주사기에 26게이지 바늘로 거품 형성을 피합니다.끝에 꼬리를 잡고 부드럽게 곧게 펴십시오. 그런 다음 꼬리의 측면 정맥을 찾습니다. 꼬리를 메스로 부드럽게 긁어 70%에탄올로 닦으십시오.꼬리의 말단 부분에서 시작하여 바늘을 15도 각도로 정맥에 삽입하십시오. 천천히 인간의 탯줄 중간엽 기질 세포의 200 마이크로 리터를 주입. 성공적인 정맥 주입을 모니터링하려면 저항과 사치부족 없이 정맥에 들어가는 액체를 관찰하십시오.전체 부피가 바늘 아래로 이동할 때까지 몇 초를 기다린 후 정맥에서 제거하십시오. 그런 다음 출혈을 방지하고 동물이 회복 할 수 있도록 멸균 거즈로 엔트리 상처에 압력을 간략하게 적용하십시오. 주입 후 주사기와 바늘을 안전하게 폐기하십시오.Bleomycin 주입 후, 폐 조직 병리학 적 변화는 식염수 주입 후 정상적인 폐 아키텍처에 비해 광범위한 염증 성 침투 및 섬유증을 확인하는 헤마톡시린과 에오신과 피코시리우스 레드 염색에 의해 평가되었다. Bleomycin 유도폐 염증 및 섬유증은 주로 인간 탯줄 중간엽 기질 세포 주입에 의해 감쇠되었지만 식염수에 의해 감쇠되었다. 콜라겐 증착은 하이드록시프린 분석에 의해 측정되었다.Bleomycin 주입 에 따라, 하이드록시프린 수준은 점진적으로 8 일째에서 14 및 21로 증가했습니다. 인간 탯줄 중간엽 기질 세포의 첨가는 Bleomycin의 효력을 현저하게 감소했습니다. 전체 폐 mRNA에서 Col1A1 형 1형 콜라겐 유전자의 발현 수준은 또한 인간 탯줄 중간엽 기질 세포 처리에 의해 부분적으로 감소된 일 8, 14 및 21일에 점진적인 증가를 보여주었습니다.특정 항체를 이용한 면역 염색은 몇몇 세포만 검출되었지만 인간 탯줄 중간엽 기질 세포를 신속하고 효과적으로 마우스 폐에 주입했다는 것을 보여주었습니다. 이 데이터는 장기간보호 효과에도 불구하고 사이트 부상에서 세포의 급속한 탈구를 건의합니다. 작동 현미경의 사용은 운전자가 정확하게 설치하기 전에 마우스 기관에 바늘의 정확한 배치를 모니터링 할 수 있도록하여 성공의 높은 자신감을 보장, 따라서 손상의 위험을 최소화.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

마우스 요로 감염의 Transurethral 유도

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

연구

면역학 및 감염병학

Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis

실험 면역 Hypophysitis의 유도를위한 마우스 뇌하수체 Immunogen의 준비

Autoimmune hypophysitis is a chronic inflammation of the pituitary gland caused or accompanied by autoimmunity1.  It has traditionally been considered a ...

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

마우스 폐에 돌기 세포의 분리

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

녹농균 유발 폐 손상 모델

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Swimbladder 주입에 의해 애벌레 Zebrafish의 점막 칸디다증 모델링

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

마비 및 비주얼 시스템 부상 Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4에 대 한 T 세포 관련 하 여 쥐에서의 유도

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

A Multimodal Imaging Approach Based on Micro-CT and Fluorescence Molecular Tomography for Longitudinal Assessment of Bleomycin-Induced Lung Fibrosis in Mice

Multimodal 접근을 이미징 Bleomycin 유도 폐 섬유 증 생쥐에서의 경도 평가 대 한 마이크로-CT와 형광 분자 단층에 따라

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a fatal lung disease characterized by the progressive and irreversible destruction of lung architecture, which ...

Assessment of the Cytotoxic and Immunomodulatory Effects of Substances in Human Precision-cut Lung Slices

세포 독성의 평가 인간의 정밀 컷 폐 분할 영역에서 물질의 Immunomodulatory 효과

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new ...

A Model of Self-limited Acute Lung Injury by Unilateral Intra-bronchial Acid Instillation

일방적인 기관내 산 성 증착에 의한 자가 제한 급성 폐 손상의 모델

Selective intra-bronchial instillation of hydrochloric acid (HCl) to the murine left mainstem bronchus causes acute tissue injury with histopathologic ...

Studying Effects of Cigarette Smoke on Pseudomonas Infection in Lung Epithelial Cells

Studying Effects of Cigarette Smoke on Pseudomonas Infection in Lung Epithelial Cells

폐 상피 세포에 있는 슈도모나스 감염에 담배 연기의 효력 공부

Cigarette smoking is the major etiological cause for lung emphysema and chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Cigarette smoking also promotes ...