Name: induction of mouse lung injury by endotracheal injection of bleomycin
Uploaded: 2019-04-30T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin at JoVE.com

Detta arbete stöddes av ett bidrag RF-2011-02352331 från Ministero Italiano della Salute (till Armando Gabrielli).

Alla djur vårds-och försöks förfaranden godkändes av det italienska hälsoministeriet (bemyndigande n. 456/2016-PR) och genomfördes enligt förklaringen från Helsingfors konventionerna.
1. möss
<ol><li>Efter att ha köpt dem, låt mössen att vänja sig i minst 7 dagar före injektionen. Obs: möss var inhysta i djuret anläggningen under patogen-fria förhållanden, upprätthölls under konstant temperatur och luftfuktighet på en 12 h ljus/mörker cykel, och fick fri tillgång t...

<ol>
	<li>Iudici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Where+are+we+going+in+the+management+of+interstitial+lung+disease+in+patients+with+systemic+sclerosis?.">Where are we going in the management of interstitial lung disease in patients with systemic sclerosis?.</a> Autoimmunity Reviews. 14 (7), 575-578 (2015).</li><li>Moore, B. B., Hogaboam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+pulmonary+fibrosis.">Murine models of pulmonary fibrosis.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (2), L152-L160 (2008).</li><li>Mouratis, M. A., Aidinis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+pulmonary+fibrosis+with+bleomycin.">Modeling pulmonary fibrosis with bleomycin.</a> Current Opinion in Pulmonary Medicine. 17 (5), 355-361 (2011).</li><li>Moeller, A., Ask, K., Warburton, D., Gauldie, J., Kolb, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bleomycin+animal+model:+a+useful+tool+to+investigate+treatment+options+for+idiopathic+pulmonary+fibrosis?.">The bleomycin animal model: a useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis?.</a> International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 40 (3), 362-382 (2008).</li><li>Moore, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+fibrotic+lung+disease.">Animal models of fibrotic lung disease.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (2), 167-179 (2013).</li><li>Schrier, D. J., Kunkel, R. G., Phan, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+strain+variation+in+murine+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.">The role of strain variation in murine bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> American Review of Respiratory Disease. 127 (1), 63-66 (1983).</li><li>Phan, S. H., Kunkel, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+cytokine+production+in+bleomycin-induced+pulmonary+fibrosis.">Lung cytokine production in bleomycin-induced pulmonary fibrosis.</a> Experimental Lung Research. 18 (1), 29-43 (1992).</li><li>Capelli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+manipulated+whole+human+umbilical+cord+is+a+rich+source+of+clinical-grade+human+mesenchymal+stromal+cells+expanded+in+human+platelet+lysate.">Minimally manipulated whole human umbilical cord is a rich source of clinical-grade human mesenchymal stromal cells expanded in human platelet lysate.</a> Cytotherapy. 13 (7), 786-801 (2011).</li><li>Beeravolu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+Characterization+of+Mesenchymal+Stromal+Cells+from+Human+Umbilical+Cord+and+Fetal+Placenta.">Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55224 (2017).</li><li>Moroncini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stromal+cells+from+human+umbilical+cord+prevent+the+development+of+lung+fibrosis+in+immunocompetent+mice.">Mesenchymal stromal cells from human umbilical cord prevent the development of lung fibrosis in immunocompetent mice.</a> PLoS One. 13 (6), e0196048 (2018).</li><li>Shahzeidi, S., Jeffery, P. K., Laurent, G. J., McAnulty, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+type+I+procollagen+mRNA+transcripts+in+the+lungs+of+mice+during+the+development+of+bleomycin-induced+fibrosis.">Increased type I procollagen mRNA transcripts in the lungs of mice during the development of bleomycin-induced fibrosis.</a> European Respiratory Journal. 7 (11), 1938-1943 (1994).</li><li>Lee, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+hMSCs+improve+myocardial+infarction+in+mice+because+cells+embolized+in+lung+are+activated+to+secrete+the+anti-inflammatory+protein+TSG-6.">Intravenous hMSCs improve myocardial infarction in mice because cells embolized in lung are activated to secrete the anti-inflammatory protein TSG-6.</a> Cell Stem Cell. 5 (1), 54-63 (2009).</li><li>Scotton, C. J., Chambers, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bleomycin+revisited:+towards+a+more+representative+model+of+IPF?.">Bleomycin revisited: towards a more representative model of IPF?.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 299 (4), L439-L441 (2010).</li><li>Cai, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+intratracheal+intubation+to+study+the+pathology+and+physiology+of+mouse+lung.">Noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung.</a> Journal of Visualized Experiments. (81), e50601 (2013).</li><li>Thomas, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endotracheal+intubation+in+mice+via+direct+laryngoscopy+using+an+otoscope.">Endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope.</a> Journal of Visualized Experiments. (86), e50269 (2014).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Dutta, S., Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Men+and+mice:+Relating+their+ages.">Men and mice: Relating their ages.</a> Life Sciences. 152, 244-248 (2016).</li><li>Sueblinvong, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predisposition+for+disrepair+in+the+aged+lung.">Predisposition for disrepair in the aged lung.</a> American Journal of Medical Sciences. 344 (1), 41-51 (2012).</li><li>Moodley, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+umbilical+cord+mesenchymal+stem+cells+reduce+fibrosis+of+bleomycin-induced+lung+injury.">Human umbilical cord mesenchymal stem cells reduce fibrosis of bleomycin-induced lung injury.</a> American Journal of Pathology. 175 (1), 303-313 (2009).</li><li>How, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+mediate+the+release+of+interferon+gamma-induced+protein+10+and+alleviate+bleomycin-induced+lung+inflammation+and+fibrosis.">Induced pluripotent stem cells mediate the release of interferon gamma-induced protein 10 and alleviate bleomycin-induced lung inflammation and fibrosis.</a> Shock. 39 (3), 261-270 (2013).</li><li>Lee, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TSG-6+as+a+biomarker+to+predict+efficacy+of+human+mesenchymal+stem/progenitor+cells+(hMSCs)+in+modulating+sterile+inflammation+in+vivo.">TSG-6 as a biomarker to predict efficacy of human mesenchymal stem/progenitor cells (hMSCs) in modulating sterile inflammation in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (47), 16766-16771 (2014).</li></ol>

Endotrakeal administration är den förmåns väg för att leverera exogena agenter i lungorna. Sedan flera år, direkt injektion av bleomycin i luftstrupen har använts i stor utsträckning för att inducera pulmonell fibros13 och, nyligen, mer avancerade, noninvasiv teknik har utvecklats för att uppnå detta14,15 ,16.
Den metod som beskrivs här ger flera meningsfulla förd...

Lungfibros är en progressiv patologisk process som kännetecknas av överdriven avsättning av extracellulära matrix komponenter, främst typ I kollagen, i lungan interstitium, vilket leder till försämrad lungfunktion. Det är kännetecknande för flera mänskliga lungsjukdomar med en annan etiologi och representerar en dålig klinisk prognostisk faktor. Eftersom nuvarande terapier är ganska begränsade1, musmodeller fortsätter att vara ett viktigt verktyg både för ytterligare utredning av de patogena mekanismer som påverkar uppkomsten och utvecklingen av sjukdomen och för att utveckla nya antifibrotiska strategier2,3.
Hittills har administrationen av bleomycin varit den vanligaste modellen av experimentellt inducerad pulmonell fibros4. Förutom flera leverera metoder (inklusive intravenös, intraperitoneal, subkutan, och inhalational), intratrakeal eller endotrakeal injektioner av bleomycin har dykt upp som de mest använda rutterna4,5. Den metod som vi beskriver här har utvecklats för att undvika skållning effekten av bleomycin på trakeal slemhinnan. I själva verket, genom att exteriorizing luftstrupen och visualisera det genom ett operativsystem Mikroskop, är det möjligt att uppnå instillation av hela volymen av bleomycin lösning direkt i den nedre luftvägarna utan några spill i de övre luftvägarna. När nödvändig kirurgisk expertis och instrumentering finns tillgängliga, möjliggör denna metod för säker, robust och reproducerbar induktion av lunginflammation och fibros, som rapporteras nedan.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1024px;" width="1023">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">C57BL/6 mice</td>
			<td style="width:236px;">Charles River</td>
			<td style="width:239px;">Jax Mice Stock n. 000664</td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">2,2,2-Tribromoethanol (Avertin)&#160;</td>
			<td style="width:236px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:239px;">T48402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Barraquer Micro Needle Holder</td>
			<td style="width:236px;">Lawton</td>
			<td style="width:239px;">62-3755</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Bleomycin sulfate</td>
			<td style="width:236px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>B1141000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">B&#252;rker chamber</td>
			<td style="width:236px;">Brand&#160;</td>
			<td style="width:239px;">718905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">Culture Flasks&#160;</td>
			<td style="width:236px;">EuroClone</td>
			<td style="width:239px;">ET7076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Disposable razors</td>
			<td style="width:236px;">Unigloves</td>
			<td style="width:239px;">4080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Dissecting Forceps</td>
			<td style="width:236px;">Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td style="width:239px;">BD311R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">DPBS</td>
			<td style="width:236px;">Gibco</td>
			<td style="width:239px;">14190-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Heating pad</td>
			<td style="width:236px;">2Biological Instruments</td>
			<td style="width:239px;">557023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Isoflurane Vet</td>
			<td style="width:236px;">Merial Italia</td>
			<td>N01AB06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Operating Microscope</td>
			<td style="width:236px;">Carl Zeiss</td>
			<td style="width:239px;">Model OPM 16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;">TrypLE Select Enzyme</td>
			<td style="width:236px;">Gibco</td>
			<td style="width:239px;">12563-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Vannas Micro Scissors</td>
			<td style="width:236px;">Aesculap Surgical Instruments</td>
			<td style="width:239px;">OC498R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:369px;">Vicryl Plus 4/0 Absorbable Suture, FS-2 needle 19 mm</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon</td>
			<td style="width:239px;">VCP392ZH</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of mouse lung injury by endotracheal injection of bleomycin

Pulmonell fibros är ett kännetecken för flera mänskliga lungsjukdomar med en annan etiologi. Eftersom nuvarande terapier är ganska begränsade, musmodeller fortsätter att vara ett viktigt verktyg för att utveckla nya antifibrotiska strategier. Här erbjuder vi en effektiv metod för att undersöka in vivo antifibrotisk aktivitet av mänskliga mesenkymala stromaceller som erhållits från hela navelsträngen (Huc-msc) i förmildrande bleomycin-inducerad lungskada. C57BL/6 möss får en enda endotrakeal injektion av bleomycin (1,5 U/kg kroppsvikt) följt av en dubbel infusion av hUC-MSC (2,5 x 105) i svans venen, 24 h och 7 dagar efter bleomycin administrering. Vid offer vid dag 8, 14, eller 21, inflammatoriska och fibrotiska förändringar, kollagen innehåll, och hUC-MSC närvaro i explanterad lungvävnad analyseras. Injektionen av bleomycin i mus luftstrupen tillåter direkt inriktning av lungorna, vilket leder till omfattande lunginflammation och fibros. Den systemiska administreringen av en dubbel dos av hUC-MSC resulterar i tidig avtrutning av den bleomycin-inducerad lungskada. Intravenöst infunderas hUC-MSC är transitivt enympade i mus lungorna, där de utövar sin anti-inflammatorisk och antifibrotisk aktivitet. Sammanfattningsvis har detta protokoll framgångsrikt tillämpats för prekliniska tester av hUC-MSC i en experimentell musmodell av mänsklig lungfibros. Emellertid, denna teknik kan lätt utvidgas både för att studera effekten av olika endotrakeellt administrerade ämnen på patofysiologin i lungorna och att validera nya antiinflammatoriska och antifibrotiska systemiska terapier.

Lung skada inducerades av en enda endotrakealinjektion av 1,5 U/kg kroppsvikt av bleomycinsulfat i 100 μL steril saltlösning. Kontrolldjuren fick en endotrakeal injektion med en likvärdig volym saltlösning. Två skott av hUC-MSC (2,5 x 105 i 200 μl av steril saltlösning) infunderas i musen svans ven, 24 h och 7 dagar efter bleomycin administrering. Kontrolldjuren fick en intravenös infusion av en likvärdig volym steril saltlösning. Möss offrades för lung explantat oc...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin at JoVE.com

Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin

Här presenterar vi en effektiv metod för att undersöka den antifibrotiska aktiviteten av intravenöst infunderade humana mesenkymala stromaceller som erhållits från hela navelsträngen efter induktion av lungskada av en endotrakeal injektion av bleomycin i C57BL /6 möss. Detta protokoll kan lätt utvidgas till prekliniska tester av andra Therapeutics.

Induktion av mus lung skada genom endotrakeal injektion av bleomycin

Pulmonary fibrosis is a hallmark of several human lung diseases with a different etiology. Since current therapies are rather limited, mouse models ...

Detta protokoll kan framgångsrikt tillämpas både för att inducera viktiga inflammatoriska och fibrotic svar i båda lungorna genom endotracheal injektion av Bleomycin och att validera nya antiinflammatoriska och anti-fibrotic systemiska terapier genom svansen ven infusion. Den största fördelen med denna teknik är att direktinsprutning av Bleomycin i mustraka säkerställer snabb inriktning av lungorna utan några spill i den övre luftvägarna möjliggör säker, robust och reproducerbar induktion av lunginflammatoriska och fibros. Demonstrera förfarandet kommer att Dr.Fiorenza Orlando, en veterinär läkare från vår samarbetande laboratorium.Till att börja, placera den sövda musen som ligger på rygg på en kirurgisk plattform. Fint sätta fast sina ben med kirurgiska band remsor för att hålla den på plats. För att hyper förlänga halsen av musen, placera ett stöd som dental bomull rulle under sin livmoderhalscancer region.Använd sedan ett rakblad för att försiktigt raka halsen. Använd ett par anatomiska forceps för att nypa huden. Använd ett par ring hanteras böjda trubbig sax för att göra ett kort snitt ungefär en halv centimeter i längd i korrespondens till musen sternohyoid muskel.Använd bomullspinnar för att stoppa blödningen. Sedan exteriorize luftstrupen genom trubbig dissektion och försiktigt rengöra den från fett och andra vävnader. Rotera den kirurgiska plattformen för att orientera musen med huvudet mot operatören vilket gör att operatören under injektionen kan vinkla sprutan ordentligt.För att visualisera luftstrupen, placera musen under ett fungerande mikroskop. Justera belysning och ställ förstoring mellan 1 och 1,2 justera sedan fokus och skärpa. Luftstrupen kan lätt särskiljas som ett vitt genomskinligt rör med väl synliga luftrörsringar.Försiktigt pipetter för att blanda Bleomycin-lösningen och aspirera 100 mikroliter till en 0,5 milliliter spruta med en 25 gauge nål undvika bubbla bildning. När luftstrupen är tydligt visualiseras, noggrant punktera den med nålspetsen i 30 graders vinkel. Injicera långsamt 100 mikroliter bleomycin direkt i lumen i luftstrupen.Efter att ha väntat några sekunder för hela volymen att resa ner nålen, ta bort den från luftstrupen. Observera några sekunder apné som uppstår när nålen är korrekt insatt i luftstrupen som anger att hela vätskevolymen har inhalerats. Kassera sprutan och nålen på ett säkert sätt.Stäng den subkutana fascian och hudsåret med en 5-0 resorberbar sutur och låt djuret återhämta sig. Efter sövning musen igen och när medvetslöshet har bekräftats, placera musen under en steril huva. Använd en ansiktsmask med ett kontinuerligt flöde av 1,5%isofluran för att upprätthålla skonsam anestesi under hela experimentet.För att främja vasodilatation och möjliggöra enklare injektion, blöta svansen i varmt vatten i två minuter. Blanda en suspension av mänskliga navelsträng mesenchymala stromal celler genom att försiktigt pipetting att undvika cell klumpbildning. Aspirera 200 mikroliter i en en milliliter spruta med en 26 gauge nål undvika bubbla bildning.Håll svansen i spetsen och försiktigt räta ut den. Leta sedan upp svansens laterala ven. Skrapa försiktigt svansen med en skalpell och torka av den med 70%etanol.Med utgångspunkt från den distala delen av svansen, stick nålen i venen i en 15 graders vinkel. Långsamt infusera 200 microliters av mänskliga navelsträngen mesenchymala stromal celler. För att övervaka framgångsrik intravenös infusion, observera vätskan som kommer in i venen utan motstånd och brist på extravasering.Efter att ha väntat några sekunder tills hela volymen färdas ner nålen, ta bort den från venen. Sedan kort tillämpa tryck på posten såret med en steril gasväv för att förhindra blödning och låta djuret att återhämta sig. Kassera sprutan och nålen på ett säkert sätt efter infusionen.Efter Bleomycin injektion, lung histopatologiska förändringar bedömdes av Hematoxylin och Eosin och Picrosirius Red färgning bekräftar omfattande inflammatorisk infiltration och fibros jämfört med normala lung arkitektur efter saltlösning injektion. Bleomycin-inducerad lungcancer inflammation och fibros var till stor del försvagas av mänskliga navelsträng mesenchymala stromal cell infusion men inte genom saltlösning. Kollagen nedfall mättes av hydroxyproline analys.Efter Bleomycin injektion, hydroxyproline nivåer ökade successivt från dag åtta till dag 14 och 21. Medan tillsats av mänskliga navelsträngen mesenchymala stromal celler avsevärt minskat effekterna av Bleomycin. Uttryck nivåer av Col1A1 typ en kollagen gen i hela lung mRNA visade också en progressiv ökning vid dag åtta, 14 och 21 som delvis reducerades av mänskliga navelsträngen mesenchymal stromal cell behandling.Immunostaining med specifika antikroppar visade att infunderas mänskliga navelsträngen mesenkymala stromal celler snabbt och effektivt nått mus lungor, även om endast ett fåtal celler upptäcktes. Dessa data tyder på en snabb förskjutning av cellerna från platsen skada trots den långvariga skyddande effekten. Användningen av ett driftmikroskop säkerställer högt förtroende för framgång genom att operatören kan korrekt övervaka korrekt placering av nålen i mustrakean före installationen, vilket minimerar risken för att skada den.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Transuretral Induktion av Mouse Urinvägsinfektion

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

Preparation of Mouse Pituitary Immunogen for the Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis

Beredning av Mouse Hypofys Immunogen för induktion av Experimentell Autoimmun Hypophysitis

Autoimmune hypophysitis is a chronic inflammation of the pituitary gland caused or accompanied by autoimmunity1.  It has traditionally been considered a ...

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

Isolering av Dendritiska Mouse lungceller

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

Pseudomonas aeruginosa Induced Lung Injury Model

In order to study human acute lung injury and pneumonia, it is important to develop animal models to mimic various pathological features of this disease. ...

Modeling Mucosal Candidiasis in Larval Zebrafish by Swimbladder Injection

Modellering Mucosal candidiasis i larvZebraFish genom Swimbladder Injektion

Early defense against mucosal pathogens consists of both an epithelial barrier and innate immune cells. The immunocompetency of both, and their ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

Induktion av förlamning och visuella systemet skada hos möss av T celler specifika för Neuromyelitis Optica Autoantigen akvaporin-4

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

A Multimodal Imaging Approach Based on Micro-CT and Fluorescence Molecular Tomography for Longitudinal Assessment of Bleomycin-Induced Lung Fibrosis in Mice

En Multimodal Imaging strategi baserad på Micro-CT och fluorescens molekylär tomografi för längsgående bedömning av Bleomycin-inducerad lungfibros hos möss

Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a fatal lung disease characterized by the progressive and irreversible destruction of lung architecture, which ...

Assessment of the Cytotoxic and Immunomodulatory Effects of Substances in Human Precision-cut Lung Slices

Bedömning av den cytotoxiska och immunmodulerande effekter av ämnen i Human Precision-cut Lung skivor

Respiratory diseases in their broad diversity need appropriate model systems to understand the underlying mechanisms and enable development of new ...

A Model of Self-limited Acute Lung Injury by Unilateral Intra-bronchial Acid Instillation

En modell av självbegränsade akuta lung skador genom ensidig Intrabronkial syra instillation

Selective intra-bronchial instillation of hydrochloric acid (HCl) to the murine left mainstem bronchus causes acute tissue injury with histopathologic ...

Studying Effects of Cigarette Smoke on Pseudomonas Infection in Lung Epithelial Cells

Studying Effects of Cigarette Smoke on Pseudomonas Infection in Lung Epithelial Cells

Studera effekter av cigarettrök på Pseudomonas infektion i lungepitelceller

Cigarette smoking is the major etiological cause for lung emphysema and chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Cigarette smoking also promotes ...