Name: in vitro differentiation model of human normal memory b cells to long-lived plasma cells
Uploaded: 2019-01-20T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Differentiation Model of Human Normal Memory B Cells to Long-lived Plasma Cells at JoVE.com

بتأييد هذا العمل بمنح من "الإنكا الفرنسية" (المعهد الوطني للسرطان دو) معهد (PLBIO15-256) ووكالة الاستخبارات الوطنية (التعادل-تخطي) وسرطان إيتمو (ملم وترينيداد وتوباغو).

البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية وفقا "إعلان هلسنكي" واتفاق مركز مستشفى جامعة مونبلييه "الموارد البيولوجية".
1-في المختبر عادي خلية البلازما تمايز النموذجي
ملاحظة: يتم تكوين أجهزة الكمبيوتر من خلال ثقافة أربع خطوات11،،من<sup cl...

في الإنسان، جهاز كمبيوتر هي خلايا نادرة مع مراحل التمايز تجري في الأماكن التشريحية التي تعوق توصيف كامل البيولوجية. وقد وضعنا ب في المختبر لنموذج التمايز الكمبيوتر باستخدام نظم الاستزراع متعدد خطوة حيث يتم بعد ذلك تطبيق تركيبات مختلفة من السيتوكينات وجزيئات التنشيط بغية إعادة إنتاج الت?...

التفريق بين الخلايا ب إلى خلايا البلازما (أجهزة كمبيوتر) ضروري للحصانة humoral وحماية البلد المضيف ضد العدوى1. ب للكمبيوتر التمايز يرتبط بتغييرات كبيرة في قدرات النسخ والايض لاستيعاب لإفراز الأجسام المضادة. وقد درست عوامل النسخ التي تتحكم ب للتمايز الكمبيوتر على نطاق واسع وكشف شبكات الحصرية بما في ذلك النسخ المحددة ب والكمبيوتر عوامل (TFs)2. في الخلايا ب، وهي PAX5، و BCL6، و BACH2 TFs أولياء الأمور من الخلية بهويه2،3. سوف إخماد جينات الخلية بتحريض IRF4، PRDM1 ترميز BLIMP1 و XBP1 PC TF وحمل منسقة إفراز جسم خلية برنامج النسخي3،4،5. هذه التغييرات النسخي منسقة ترتبط بتفعيل النسخ الجينات Ig جنبا إلى جنب مع التحول من شكل غشاء زمنياً بشكل يفرز الغلوبولين المناعي السلسلة الثقيلة2،3، 4-ب إلى التمايز الكمبيوتر مرتبط بتحريض المورثات المشتركة في هيولى ووظائف المتزامن مع تنشيط استجابة (الاستعراض) البروتين تكشفت المعروفة للعب دور رئيسي في جهاز الكمبيوتر باستيعاب التوليف جهاز غولجي ويفرز المناعية6،7. TF XBP1 يلعب دوراً رئيسيا في هذا التكيف الخلوي8،،من910.
ب خلايا وأجهزة الكمبيوتر هي الجهات الفاعلة الرئيسية من الحصانة humoral. فهم البيولوجية العمليات التي تتحكم في الإنتاج وبقاء خلايا البلازما العادية أمر حاسم في التدخلات العلاجية التي بحاجة إلى ضمان فعالية الاستجابات المناعية ومنع المناعة الذاتية أو نقص المناعة. أجهزة الكمبيوتر هي خلايا نادرة مع التمايز المراحل المبكرة التي تجري في المواقع التشريحية التي تعوق توصيف كامل البيولوجية، وبخاصة في الإنسان. تستخدم نظم الاستزراع متعدد خطوة، أبلغنا ب في المختبر نموذج التمايز PC. يستنسخ هذا النموذج بتمايز الخلية متسلسلة والنضج التي تحدث في أجهزة مختلفة في الجسم الحي11،،من1213. في خطوة أولى، يتم تنشيط أولاً لمدة أربعة أيام قبل تركيبة يجند وأوليجوديوكسينوكليوتيديس وسيتوكين CD40 خلايا الذاكرة ب وتفرق في بريبلاسمابلاستس (بريببس). في خطوة ثانية، هي التي يسببها بريبلاسمابلاستس تفرق في بلاسمابلاستس (PBs) عن طريق إزالة التحفيز CD40L وأوليجوديوكسينوكليوتيديس وتغيير تركيبة سيتوكين. في خطوة ثالثة، هي التي يسببها بلاسمابلاستس تفرق في أوائل أجهزة الكمبيوتر عن طريق تغيير تركيبة سيتوكين11،12. خطوة الرابعة وقدم للحصول على أجهزة الكمبيوتر ناضجة تماما باستزراع هذه أجهزة مبكرة مع نخاع العظام الخلايا اللحمية مكيفة المتوسطة أو تحديد عوامل النمو13. أجهزة الكمبيوتر هذه ناضجة يمكن البقاء على قيد الحياة منذ عدة أشهر في المختبر وإفراز كميات عالية من الغلوبولين المناعي (الشكل 1). من المثير للاهتمام، ولدينا نموذج في المختبر يجمل التغييرات النسخي المنسقة وفي النمط الظاهري ب مختلف مراحل الكمبيوتر التي يمكن أن يكون تم اكتشافها في المجراة11،،من1213،14 ،15. أجهزة الكمبيوتر هي الخلايا النادرة ونموذجنا التمايز في المختبر يسمح للدراسة ب البشرية إلى التمايز PC.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:817px;" width="818">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">anti-CD2 magnetic beads</td>
			<td style="width:139px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">11159D</td>
			<td style="width:344px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-CD138-APC</td>
			<td style="width:139px;">Beckman-Coulter&#160;</td>
			<td style="width:119px;">B49219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-CD19-APC</td>
			<td style="width:139px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">555415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-CD20-PB</td>
			<td style="width:139px;">Beckman-Coulter&#160;</td>
			<td style="width:119px;">B49208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-CD27-PE</td>
			<td style="width:139px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">555441</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-CD38-PE</td>
			<td style="width:139px;">Beckman-Coulter&#160;</td>
			<td style="width:119px;">A07779</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-histidine</td>
			<td style="width:139px;">R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CpG ODN(PT)</td>
			<td style="width:139px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>T*C*G*T*C*G*T*T*T*T*G*T*C* 
			G*T*T*T*T*G*T*C*G*T*T</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">human Transferin</td>
			<td style="width:139px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">T3309</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">IFN-&#945;</td>
			<td style="width:139px;">Merck</td>
			<td>Intron A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IMDM</td>
			<td style="width:139px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">31980-022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recombinan Human CD40L-hi</td>
			<td style="width:139px;">R&#38;D Systems</td>
			<td>2706-CL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recombinant Human APRIL</td>
			<td style="width:139px;">R&#38;D Systems</td>
			<td>5860-AP-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recombinant Human IL-10</td>
			<td style="width:139px;">R&#38;D Systems</td>
			<td>217-IL-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recombinant Human IL-15</td>
			<td style="width:139px;">Peprotech</td>
			<td>200-15-10ug</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Recombinant Human IL-2 Protein</td>
			<td style="width:139px;">R&#38;D Systems</td>
			<td>202-IL-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Recombinant Human IL-6</td>
			<td style="width:139px;">Peprotech</td>
			<td>200-06</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro differentiation model of human normal memory b cells to long-lived plasma cells

تفرز كميات كبيرة من الأجسام المضادة خلايا البلازما (أجهزة الكمبيوتر) وتطوير من الخلايا ب أنه قد تم تنشيط. أجهزة الكمبيوتر هي نادرة الخلايا الموجودة في نخاع العظام أو الغشاء المخاطي وضمان حصانة humoral. نظراً لتردد منخفض والموقع، دراسة لأجهزة الكمبيوتر من الصعب في الإنسان. أبلغنا أ ب للكمبيوتر نموذج التمايز في المختبر باستخدام مجموعات مختارة من الجزيئات السيتوكينات والتنشيط التي تسمح بإعادة إنتاج التمايز الخلية متسلسلة تحدث المجراة في. في هذا النموذج في المختبر، ذاكرة الخلايا ب (MBCs) سوف تفرق في ما قبل بلاسمابلاستس (بريببس)، بلاسمابلاستس (PBs)، أوائل أجهزة الكمبيوتر، وأخيراً، إلى المعمرة أجهزة الكمبيوتر، مع النمط الظاهري إغلاق لنظرائهم في الأشخاص الأصحاء. بنينا المعلوماتية الحيوية وصول مفتوح أيضا أدوات لتحليل المعلومات الأكثر بروزا من جيب البيانات المتصلة بالتمييز بين أجهزة الكمبيوتر. يمكن استخدام هذه الموارد لدراسة ب البشرية إلى التمييز بين أجهزة الكمبيوتر، وفي الدراسة الحالية، ونحن التحقيق في تنظيم التعبير الجيني عوامل جينية خلال ب البشرية إلى التمييز بين أجهزة الكمبيوتر.

ويمثل الإجراء العام للتمايز الكمبيوتر العادي في المختبر في الشكل 1. باستخدام بروتوكول المعروضة هنا، ونحن يمكن أن تولد كمية كافية من الخلايا التي لا يمكن الحصول عليها مع السابقين فيفو العينات البشرية. على الرغم من أن قد تم التحقيق دور الشبكة المعقدة من عوا...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Differentiation Model of Human Normal Memory B Cells to Long-lived Plasma Cells at JoVE.com

In Vitro Differentiation Model of Human Normal Memory B Cells to Long-lived Plasma Cells

تستخدم نظم الاستزراع متعدد خطوة، نحن تقرير خلية بفي المختبر إلى خلية البلازما تمايز النموذجي.

في المختبر التمايز نموذج الذاكرة البشرية العادية ب الخلايا إلى خلايا البلازما المعمرة

Plasma cells (PCs) secrete large amounts of antibodies and develop from B cells that have been activated. PCs are rare cells located in the bone marrow or ...

خلايا البلازما هي خلايا نادرة مع 30 مراحل التمايز التي تجري في المواقع التشريحية التي تضعف التوصيف البيولوجي الكامل، وخاصة في الإنسان. لدينا في المختبر B2 نموذج تمايز الخلايا البلازما يستنسخ تمايز الخلية التسلسلية والنضج التي تحدث في الأجهزة المختلفة في الجسم الحي. هذا النموذج في المختبر يلخص التغيرات المنسّقة النسخي و النمط الظاهري لمراحل خلايا البلازما B2 المختلفة التي يمكن اكتشافها في الجسم الحي.كما قمنا ببناء أدوات المعلوماتية الحيوية المفتوحة لتحليل أبرز المعلومات من بيانات الاستكشاف المتعلقة بتمايز خلايا البلازما. إثبات الإجراء سيكون هوغس دي Boussac، وهو ما بعد الدكتوراه من مختبري. للبدء، الحصول على خلايا الدم الطرفية من المتطوعين الأصحاء لتنقية الذاكرة الخلية B.تمييع 7.5 ملليلتر من الدم مع 24.5 ملليلتر من 1640 1640 1640 متوسطة. بعد ذلك، أضف 12.5 ملليلتر من تدرج كثافة درجة حرارة الغرفة إلى أنبوب مخروطي معقم يبلغ 50 ملليلتر. تراكب بلطف تدرج الكثافة مع 32 ملليلتر من الدم المخفف، مع التأكد من تقليل اختلاط المرحلتين.جهاز طرد مركزي لمدة 20 دقيقة في 500 مرة الجاذبية مع الفرامل قبالة. جمع خلايا أحادية النوى الدم الطرفية من البلازما المخففة وكثافة واجهة الانحدار. نقل الخلايا إلى أنبوب 50 ملليلتر معقمة وملء أنبوب يصل إلى 45 ملليلتر مع هانك حل الملح المتوازن.جهاز طرد مركزي في 500 مرة الجاذبية لمدة خمس دقائق. إزالة بعناية فائقة والحفاظ على بيليه. ثم، إضافة 45 ملليلتر من 1640 1640 متوسطة، وتستكمل مع 10٪ FCS.جهاز طرد مركزي في 500 مرة الجاذبية لمدة خمس دقائق. إزالة بعناية فائقة والحفاظ على بيليه. إضافة 30 ملليلتر من برنامج تلفزيوني، تستكمل مع 2٪ FCS.استخدم الخرز المغناطيسي المضاد للقرص المضغوط لإزالة الخلايا الإيجابية CD2 عن طريق إضافة أربعة خرزات لخلية هدف واحدة. احتضان أربع درجات مئوية لمدة 30 دقيقة. باستخدام مغناطيس لتطبيق فصل الخلية، قم بفصل الخلايا المنضمة للخرز عن الخلايا غير المنضمة.جمع الخلايا غير المنضمة واحتضان لهم مع المضادة لCPC CD19 ومضادات CD27 PE لمدة خمس عشرة دقيقة في أربع درجات مئوية. غسل الخلايا مرتين في برنامج تلفزيوني يحتوي على مصل الماعز 10٪. ثم، استخدم فارز الخلية لتنقية خلايا الذاكرة B إلى نقاء 95٪.بعد ذلك، أضف ليغاند CD40 قابل للذوبان ومضادة للبولي هيستيدين أحادية النسيلة لتنشيط الخلية B الذاكرة. لوحة الخلايا B الذاكرة النقية في لوحات ثقافة ستة بئر لمدة أربعة أيام مع إنترلوكين-2، interleukin-10 وإنرلوكين-15. للحصول على التنميط التعبير الجيني، استخدم فارز الخلية لتنقية CD38-سالبة CD20-سالبة preplasmablasts في اليوم الرابع.في اليوم الرابع، عد الخلايا وطبقها في لوحات 12-جيدا ثقافة في كثافة خلية من 250، 000 خلية لكل ملليلتر عن طريق إضافة ملليلتر اثنين من تعليق الخلية في كل بئر. للحث على التمايز، وإزالة oligonucleotides CPG والذوبان CD40 ليغاند وإضافة ثقافة جديدة المتوسطة التي تحتوي على كوكتيل السيتوكين جديدة بما في ذلك interleukin-2، إنترلوكين-6، إنترلوكين-10 وانتلوكين-15. ثقافة الخلايا لثلاثة أيام في 37 درجة مئويّة.بالنسبة لتحديد صورة التعبير الجيني، استخدم فارز الخلية لتنقية الأرومية البلازما CD38-positive، CD20-negative في اليوم السابع. في اليوم السابع، عد الخلايا. لوحة الخلايا في لوحات ثقافة 12-جيدا في كثافة الخلية من 500،000 الخلايا في البئر، عن طريق إضافة مليلترين من تعليق الخلية إلى كل بئر.ميز البلازما في خلايا البلازما المبكرة باستخدام وسط الثقافة الطازجة التي تحتوي على interleukin-6، interleukin-15، وانترفيرون ألفا لمدة ثلاثة أيام في 37 درجة مئوية. بالنسبة لتحديد صورة التعبير الجيني، استخدم فارز الخلية لتنقية خلايا البلازما المبكرة CD20-سالبة، وD38-positive، وD138 إيجابية في وقت مبكر من البلازما في اليوم 10. أولاً، الخلايا التهيّة الثقافية لخمسة أيام مع ثقافة متوسطة.استخدام مرشح 0.2 ميكرولتر لتصفية عظمى ثقافة الخلية stromal للحصول على خلية ال stromal مشروطة المتوسطة وتجميد حتى جاهزة للاستخدام. بعد ذلك ، ثقافة خلايا البلازما في وقت مبكر في لوحات ثقافة 12-well ، وذلك باستخدام خلية السترومال المتوسطة التي تم الحصول عليها سابقًا مع interleukin-6 و APRIL بكثافة الخلايا من 500،000 خلية في البئر ، عن طريق إضافة ميليلترين من تعليق الخلايا إلى كل بئر. احتضان في 37 درجة مئوية، وتجديد الخلية القوية مكيفة المتوسطة كل أسبوع.ثم, قياس إفراز الغلوبولين المناعي من تدفق خلايا البلازما فرز الخلايا. زراعة خلايا البلازما بكثافة مليون خلية لكل ملليلتر لمدة 24 ساعة وحصاد الثقافة فائقة. باستخدام مجموعة ELISA ، وقياس G المناعية ، والغلوبولين المناعي A.First ، وإطلاق GenomicScape الوصول المفتوح أداة المعلوماتية الحيوية على شبكة الإنترنت.في قائمة بيانات الاستعراض، حدد مجموعة البيانات المسماة خلايا B البشرية إلى خلايا البلازما. يمكن تصور ملف تعريف التعبير الجيني لجين فريد أو قائمة من الجينات باستخدام أداة تقرير التعبير/Coexpression في أدوات التحليل. بعد ذلك، حدد أدوات التحليل webSAM لتحميل أداة SAM.اختيار خلايا B الإنسان إلى مجموعة البيانات خلايا البلازما وحدد مجموعة من العينات للمقارنة. استخدم عوامل التصفية المختلفة المتوفرة لتطبيق خيارات التصفية ذات الأهمية. لمقارنة ملفات تعريف التعبير الجيني مع أداة SAM، قم بتعديل خيارات التصفية بما في ذلك تغيير الطي، وعدد التباديل، ومعدل الاكتشاف الزائف، ونوع المقارنة.وسيحسب البرنامج التحليل ويوفر جينات معبّر عنها بشكل تفاضلي بين المجموعات المختارة. في هذه الدراسة، يتم التحقيق في التغيرات التعبير من العوامل اللاجينية في تمايز الخلايا البلازما العادية. باستخدام تحليل سام متعدد الفئات، وينظر إلى 71 الجينات التي أعرب عنها بشكل تفاضلي كبير بين الخلايا B الذاكرة، وpreplasmablasts, البلازماblasts, خلايا البلازما في وقت مبكر وخلايا البلازما نخاع العظم مع معدل اكتشاف زائف من أقل من 5٪ تتميز مرحلة الخلية ب الذاكرة من قبل overexpression من 23 الجينات لاعب اللاجينية, بما في ذلك 39.13٪ من acetylferases هيستون, 30.43٪ من ميثيل ميثيل ، 21.74٪ من الهستون ديميثيلاسيس، 4.35٪ من بروتينات الميثيل الملزمة، و 4.35٪ من الهستون ديسيتيلاس.14 الجينات لاعب اللاجينية هي overexed بشكل كبير في مرحلة preplasmablast، بما في ذلك 50٪ من ميثيل ترانسفيراسيس هيستون، 14.28٪ من الحمض النووي DNA methyltransferases، 21.43٪ من deacetylases هيستون، 7.14٪ من الهستون demethylases، و 17.14٪ من اسيتيلفيرانس هيستون. وبعد هذا الإجراء، يمكن إجراء عدة تحليلات لتحديد وفهم التعديلات في بنية الكروماتين والهندسة أثناء هذه التمايزات في خلايا البلازما B2. هذا النموذج التمايز في المختبر سيسمح لتوليد ما يكفي من الخلايا لإكمال هذا التحليل الجزيئي للكشف عن كل من المسارات المشاركة في هذا النمذجة بأكملها وتأثيرها النسخي المصب خلال تمايز خلية البلازما B2.هذه المعرفة المستمدة من هذا البحث يمكن أن ترشد وترشد الاستراتيجيات التشخيصية والعلاجية لاضطرابات خلايا البلازما، كما هو الحال في حالة المايلوما المتعددة، وهو سرطان بدون علاج نهائي، والتي هناك حاجة ماسة إلى تحسين التشخيص وتحسين الاستراتيجيات العلاجية. وصف وفهم التغيرات الهيكلية والمعمارية إعادة عرض اللاجينية التي تؤثر على الكروماتين خلال B2 تمايز خلية البلازما تكون ذات أهمية خاصة. ويمكن القيام بذلك باستخدام تسلسل الجينات ، ERRBS ، تسلسل ATAC ، IC ، و RNA التسلسل.ويمكن ملاحظة عدم تجانس معتدل في النسبة المئوية لخلايا B المنشطة، والخلايا البلازمية، وخلايا البلازما، اعتمادا على دم المتبرع السليم، المستخدم في تنقية الخلايا ب الذاكرة.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

الفئران نموذج تفعيل CD40 - B من الخلايا

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

جيل من الخلايا المستحثة تي التنظيمية من المرحلة الابتدائية الإنسان خلايا T ساذجة والذاكرة

The development and maintenance of immunosuppressive CD4+ regulatory T cells (Tregs) contribute to the peripheral tolerance needed to remain in ...

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

و<em&gt; في المختبر</em&gt; المشارك عدوى نموذج لدراسة<em&gt; المتصورة المنجلية</em&gt; HIV-1-التفاعلات في الإنسان خلايا الوحيدات المشتقة الابتدائية المناعي

Plasmodium falciparum, the causative agent  of the deadliest form of malaria, and human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) are among the most important ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

على<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج لدراسة عدم تجانس التمايز بلعم الإنسان والاستقطاب

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

Quantitative In vitro Assay to Measure Neutrophil Adhesion to Activated Primary Human Microvascular Endothelial Cells under Static Conditions

كمي<em&gt; في المختبر</em&gt; الفحص لقياس التصاق العدلات إلى تنشيط الخلايا البطانية الاوعية الدموية الدقيقة الإنسان الأساسية بموجب الشروط ثابت

The vascular  endothelium plays an integral part in the inflammatory response. During the  acute phase of inflammation, endothelial cells (ECs) are ...

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

An In vitro Model to Study Immune Responses of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells to Human Respiratory Syncytial Virus Infection

Human respiratory syncytial  virus (HRSV) infections present a broad spectrum of disease severity, ranging  from mild infections to life-threatening ...

Generation of Recombinant Human IgG Monoclonal Antibodies from Immortalized Sorted B Cells

الجيل المؤتلف الإنسان مفتش حيدة النسيلة من مخلد خلايا التصنيف B

Finding new methods for generating human monoclonal antibodies is an active research field that is important for both basic and applied sciences, ...

Isolation of Viral Replication Compartment-enriched Sub-nuclear Fractions from Adenovirus-infected Normal Human Cells

العزلة الفيروسية النسخ المتماثل حجرة التخصيب النووي الكسور الفرعية من اتش المصابة الخلايا الطبيعية الإنسان

During infection of human cells by adenovirus (Ad), the host cell nucleus is dramatically reorganized, leading to formation of nuclear microenvironments ...

The Isolation, Differentiation, and Quantification of Human Antibody-secreting B Cells from Blood: ELISpot as a Functional Readout of Humoral Immunity

عزل، التمايز، والكمي للالإنسان الأجسام المضادة إفراز خلايا B من الدم: ELISPOT باعتبارها قراءات الوظيفية للالخلطية الحصانة

The hallmark of humoral immunity is to generate functional ASCs, which synthesize and secrete Abs specific to an antigen (Ag), such as a pathogen, and are ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

التمايز في المختبر من خلايا CD4 الإنسان + FOXP3 + المستحثة تنظيم الخلايا التائية (iTregs) من خلايا CD4 + T السذاجة باستخدام بروتوكول تحتوي على TGF-β-