Name: evaluation of host-pathogen responses and vaccine efficacy in mice
Uploaded: 2019-02-22T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice at JoVE.com

وأيد 1R01AI125560-01 وبدء الأموال من "جامعة ولاية أوهايو" هذا العمل.

أجريت جميع التجارب مع الحيوانات الحية بعد بروتوكول أقرته "الدولة ولاية أوهايو جامعة إياكوك" وفقا للمبادئ التوجيهية إياكوك. واستخدمت الفئران C57BL/6 في جميع التحصينات والالتهابات. وتستخدم الفئران الذكور والإناث على حد سواء في كل مجموعة وفقا للمبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة. العدد من ?...

كما سيسمح البروتوكول شاملة الموضحة هنا لدراسة الحصانة التي يسببها اللقاح للإصابة السعال الديكي (ب) تقييم الاستجابات المضيف لمجموعة متنوعة من العوامل الممرضة الأخرى. البروتوكول يناقش أساليب تقديم التحصينات، وتحديد التالي فعالية لقاح الممرض التحدي، وتشريح موازية لوظيفة المناعة. في ?...

اللقاحات تمثل واحدة من أعظم إنجازات الصحة العامة القرن العشرين، ومع ذلك لا تزال لا نفهم تماما الآليات التي تحفز اللقاحات ناجحة الحصانة الواقية. تحديد تواقيع الجزيئية (مثلاً.، علامات خلية التنشيط، والتوسع في المخططات الخلوية، وأنماط التعبير الجيني) التي يسببها بعد التطعيم يوفر مجموعة كبيرة معلومات للتنبؤ وتوليد نجاعة الاستجابة المناعية. تعقد استجابات المضيف الممرض لا يمكن تكرارها على نحو كاف تستخدم في المختبر نظم الثقافة الخلية1. في فيفو لقاح نماذج مصممة لتقييم أنواع الخلايا المناعية متعددة داخل البلد المضيف في الوقت ذاته. وهذا يوفر ميزة عندما وصف تجهيز مستضد لقاح والعرض التقديمي وإفراز سيتوكين التفاضلية، وتوسيع نطاق من الخلايا المناعية. ينص البروتوكول على وصف هنا طريقة مفصلة لتحديد فعالية اللقاحات عن طريق تقييم الاستجابات المناعية النظمية والمحلية والتحديد الكمي لعبء الممرض في الأنسجة للفائدة. المثال المتوفرة هنا اختبارات كفاءة لقاحاً تجريبيا لمسببات المرض بورديتيلا السعال الديكي (السعال الديكي (ب)).
باء-السعال الديكي هو بكتيريا سلبية الغرام الذي هو عامل المسببة للمرض الرئوي السعال الديكي (السعال الديكي)2،3. اتصال وثيق مع الأفراد المصابين (أعراض أو أعراض) يؤدي إلى انتقال العدوى، والاستعمار، والمرض. على الرغم من التغطية العالمية للقاحات هامة4، السعال الديكي يعتبر مرض مكافحتها في العديد من الدول في أنحاء العالم، ويشكل سببا رئيسيا للطفولة التي يمكن الوقاية منها وفاة5،،من67، 8-في عام 2015، باء-السعال الديكي والسعال الديكي وأدرجت في "المعهد الوطني للحساسية" والأمراض المعدية (نييد) الناشئة قائمة مسببات المرض/الأمراض المعدية، وإذ تشدد على الحاجة إلى تطوير لقاح أفضل أن يمنح الحصانة الواقية طويلة الأمد.
حاليا، منطقة نشطة للتحقيق للتحكم في ظهور السعال الديكي تطوير لقاح السعال الديكي اللاخلوي الجيل التالي (aPV) مع مزيج أمثل من رواية مأمونية ومولدات المضادات لتقليد الاستجابة المناعية بأسرها-الخلية السعال الديكي لقاح (شلل)9. أننا باستخدام بروتوكول وصف، ذكرت مؤخرا أن تعديل الحالي وافقت إدارة الأغذية والعقاقير aPV بإضافة adjuvant الرواية، عامل الاستعمار بورديتيلا A (بكفا)، أسفر عن تخفيض أكثر كفاءة من السعال الديكي (ب) الحمولة البكتيرية من ماوس الرئتين10،11. ورافق هذه الحماية زيادة انحراف المستحثة الشب Th1/Th2 استجابة مناعية إلى مزيد من الحماية الشخصية محصنة Th1/Th1710. هذا البروتوكول مفصل وشامل، تمكين المحقق للحصول على معلومات القصوى من خلال التقييم المتزامنة للمضيف والاستجابات المناعية لمجموعة متنوعة من العوامل الممرضة.
البروتوكول هو موضح هنا فيما يلي الجدول الزمني لقاح الممثل، هو مبين في الشكل 1، لكفالة الاستجابات المناعية المضيف الأمثل.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:933px;" width="933">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">2L induction chamber</td>
			<td style="width:175px;">Vet Equip</td>
			<td style="width:119px;">941444</td>
			<td style="width:307px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Fluriso</td>
			<td style="width:175px;">Vet One</td>
			<td style="width:119px;">V1 501017</td>
			<td>any brand is appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Bordet Gengou Agar Base</td>
			<td style="width:175px;">BD bioscience</td>
			<td style="width:119px;">248200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Casein</td>
			<td style="width:175px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">C-7078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Casamino acids</td>
			<td style="width:175px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">J851-500G</td>
			<td>Strainer Scholte (SS) media components</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">L-Glutamic acid</td>
			<td style="width:175px;">Research Products Int</td>
			<td style="width:119px;">G36020-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">L-Proline</td>
			<td style="width:175px;">Research Products Int</td>
			<td style="width:119px;">P50200-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP358-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Potassium Phosphate monobasic</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP362-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Potassium Chloride</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Magnesium Chloride hexahydrate</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">M2670-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Calcium Chloride</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">C75-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Tris base</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP153-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:333px;">L-cysteine HCl</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP376-100</td>
			<td>SS media suplements</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Ferrous Sulfate heptahydrate</td>
			<td style="width:175px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">F-7002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Niacin</td>
			<td style="width:175px;">Research Products Int</td>
			<td style="width:119px;">N20080-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Glutathione</td>
			<td style="width:175px;">Research Products Int</td>
			<td style="width:119px;">G22010-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:333px;">Ascorbic acid</td>
			<td style="width:175px;">Research Products Int</td>
			<td style="width:119px;">A50040-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:175px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11875093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">FBS</td>
			<td style="width:175px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">F2442-500mL</td>
			<td>&#160;any US source, non-heat inactivated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">gentamicin</td>
			<td style="width:175px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15710064</td>
			<td style="width:307px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">B-mercaptoethanol</td>
			<td style="width:175px;">Fisher&#160;</td>
			<td style="width:119px;">BP176-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">15mL dounce tissue grinder</td>
			<td style="width:175px;">Wheaton</td>
			<td>357544</td>
			<td>any similar brand is appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Cordless Hand Homogenizer</td>
			<td style="width:175px;">Kontes/Sigma&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Z359971-1EA</td>
			<td>any similar brand is appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:333px;">Instruments - scissors, curve scissors, forceps, fine forceps, triangle spreaders</td>
			<td style="width:175px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any brand is appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">3mL syringes</td>
			<td style="width:175px;">BD bioscience</td>
			<td style="width:119px;">309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">15mL conical tubes</td>
			<td style="width:175px;">Fisher&#160;</td>
			<td style="width:119px;">339651</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">1.5mL microfuge tubes</td>
			<td style="width:175px;">Denville</td>
			<td style="width:119px;">C2170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">70um cell strainers</td>
			<td style="width:175px;">Fisher&#160;</td>
			<td style="width:119px;">22363548</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">60mm plates</td>
			<td style="width:175px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">130181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">48-well tissue culture plates</td>
			<td style="width:175px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td>08-772-1C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:333px;">1mL insulin syringe 28G1/2</td>
			<td style="width:175px;">Fisher Scientific/Excel Int.</td>
			<td style="width:119px;">14-841-31</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Mouse IFN-gamma ELISA Ready-SET-Go! Kit</td>
			<td style="width:175px;">Invitrogen / eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">50-173-21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:333px;">Mouse IL-17 ELISA Ready-SET-Go! Kit</td>
			<td style="width:175px;">Invitrogen / eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">50-173-77</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:333px;">Mouse IL-5 ELISA Ready-SET-Go! Kit</td>
			<td style="width:175px;">Invitrogen / eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">50-172-09</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of host-pathogen responses and vaccine efficacy in mice

اللقاحات معجزة طبية قرنال 20. قد قلل جداً من معدلات الاعتلال والوفيات الناجمة عن الأمراض المعدية، وأسهم في زيادة ملفتة للنظر في متوسط العمر المتوقع العالم. ومع ذلك، تحديد فعالية اللقاح لا يزال يمثل تحديا. ظهور أدلة تشير إلى أن اللقاح اللاخلوي الحالية (aPV) السعال الديكي بورديتيلا (باء-السعال الديكي) الحث على الحصانة دون الحد الأمثل. ولذلك، تحديا كبيرا هو تصميم لقاح الجيل القادم الذي يستحث الحصانة الواقية دون الآثار الجانبية السلبية للقاح كامل الخلية (شلل). هنا يمكننا وصف بروتوكول التي استخدمت لاختبار فعالية واعدة، ورواية أخرى الأعشاب يشوه الاستجابات المناعية للنمط الظاهري Th1/Th17 واقية ويعزز تصريح أفضل من السعال الديكي باء- التحدي من الجهاز التنفسي مورين. توضح هذه المقالة بروتوكول للماوس التحصين والتلقيح البكتيري والأنسجة الحصاد وتحليل الاستجابات المناعية. باستخدام هذا الأسلوب، داخل نموذجنا، نحن قد شرحت بنجاح الآليات الحاسمة بلقاح السعال الديكي اللاخلوي واعدة، والجيل القادم. يمكن تطبيق هذا الأسلوب لأي نموذج من نماذج الأمراض المعدية من أجل تحديد فعالية لقاح.

يظهر نموذج وصف أسلوب لتقييم كفاءة اللقاح والاستجابات المناعية خلال التفاعلات المضيف الممرض. ويصور الشكل 1 الجدول الزمني الممثل اللقاحات المستخدمة لتحصين وتصيب الفئران وحصاد الأنسجة لتحليل. يوضح الشكل 2 إعداد نظام التخدير المستخدمة للحث ...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice at JoVE.com

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice (Video) | JoVE

هنا نقدم بروتوكولا أنيقة في فيفو التقييم للقاح الاستجابات المناعية فعالية والمضيف. هذا البروتوكول يمكن تكييفها لنماذج اللقاح تلك الدراسة الفيروسية، البكتيرية، أو مسببات الأمراض الطفيلية.

تقييم استجابات المضيف الممرض ونجاعة اللقاح في الفئران

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

ويتيح البروتوكول تقييم استجابات المضيف لمجموعة متنوعة من مسببات الأمراض وتركيبات اللقاحات. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بتقييم العبء البكتيري والاستجابات المناعية في الجسم الحي ، باستخدام نموذج حيواني قابل للتهكم. إظهار هذا الإجراء هو (كايسي يونت) طالب دراسات عليا من مختبريللتحصين، تأكد من عدم الاستجابة لقرصة إصبع القدم في فأرة تخدير عمرها ستة إلى اثني عشر أسبوعاً، وحمّل حقنة إنسولين ميليلتر واحدة، مجهزة بإبرة قياس 28.5 مع 0.1 ملليلتر من اللقاح الذي يهمك. عقد الحقنة في زاوية 45 درجة، مع شطبة تواجه لأعلى، وإدراج الإبرة ما يقرب من خمسة ملليمترات في deltoid من الفأر، وحقن اللقاح. إبقاء الإبرة في إدخالها في العضلات لمدة خمس إلى عشر ثوان، ثم تدوير الحقنة 180 درجة، بحيث يتم مواجهة شطبة لأسفل لإنشاء ختم، ومنع تسرب اللقاح، قبل سحب الإبرة ببطء من موقع الحقن.ثم العودة إلى قفص الماوس ، مع الرصد ، حتى الشفاء التام. بعد حوالي أسبوعين من التعزيز، تصيب الفئران المحصنة. فهم الماوس تخدير بواسطة scruff من الصدر الظهري، وراء ريش الكتف والرقبة، ووضع الماوس تستقيم للوصول إلى الأنف.باستخدام 200 ميكرولتر ماصة تلميح، وتطبيق ببطء 20-25 ميكرولترات من inoculum البكتيرية التي تهم كل نار من الحيوان، وعقد الماوس حتى تم استنشاق كامل inoculum. ثم تسليم حجم متساو من برنامج تلفزيوني عقيمة لمجموعة واحدة من الفئران كتحكم سلبي. عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة، ضع جانبًا بطنيًا مصابًا بالماوس على لوحة تشريح، واضمن الأطراف.الرطب الجسم مع 70٪ الإيثانول، واستخدام ملقط لشبك الجلد تحت البطن في وسط الحوض. باستخدام مقص حاد، وجعل قطع عمودي يصل إلى الفك السفلي، وتشريح الجلد من الجدار البريتوني. نقل الجلد إلى جانبي الذبيحة لخلق حقل دون عائق لحصاد الأعضاء العقيمة، وفهم الصفاق سليمة تحت القفص الصدري، في أو بالقرب من الكبد.قطع الصفاق نحو القفص الصدري لفضح الجهاز الهضمي السفلي، ونقل القولون إلى اليسار للكشف عن الطحال. باستخدام ملقط منحني، فهم الطحال، وتشريح بعيدا النسيج الضام مع مقص. ثم ضع الطحال في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر يحتوي على 3 ملليلتر من RPMI ، ومصل الأبقار الجنينية 5٪ على الجليد.استخدام ملقط لتحقيق الاستقرار في القفص الصدري في عملية xyphoid، وقطع فتح الحجاب الحاجز. يجب أن تفرغ الرئتين، وتسقط نحو العمود الفقري. قطع القفص الصدري على الجانبين لإزالة الصدر، وقطع الشرايين الرئوية والأوردة لعزل وإزالة الفص المتفوق من الرئة اليمنى.إصلاح الفص في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر من 10٪ محايد buffered formalin في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة على الأقل، وعزل الفصوص المتبقية من الرئتين اليمنى واليسرى. ثم ضع الفصوص في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر ، يحتوي على ملليلترين من 1٪casein في PBS على الجليد. استخدام أنبوب ملليلتر واحد مع طرف لجمع الدم ملء تجويف الصدر، ونقل الدم إلى ما قبل المسمى 1.5 ملليلتر microcentrifuge أنبوب على الجليد.إزالة الغدد النوتية، تحت اللسان، والغدد دونماكسية والغدد الليمفاوية التي تغطي القصبة الهوائية، وفتح وإزالة الأغشية الواقية المحيطة القصبة الهوائية. باستخدام ملقط ومقص ناعم، يفصل عن المريء بعناية، وأي نسيج الضام الأخرى من أعلى الترقوة إلى أسفل الفك السفلي. استخدم ملقطًا لعقد القصبة الهوائية، وقطع القصبة الهوائية في أعلى الترقوة.سحب أسفل القصبة الهوائية لتحقيق أقصى قدر من المرونة، وقطع القصبة الهوائية في الجزء السفلي من الفك السفلي، والحق فوق الحنجرة، وعزل حوالي سنتيمتر واحد من الأنسجة. ثم ضع الجهاز في أنبوب 1.5 ملليلتر microcentuge يسمى مسبقًا ، يحتوي على 0.3 ملليلتر من 1٪ casein في PBS على الجليد. الآن بدوره الماوس للوصول واضحة للأنف، ورش الرأس مع 70٪ الإيثانول.قبض يدويا على الحيوان مباشرة وراء الجمجمة، واستخدام مقص لقطع بعيدا اللحم الناعم من خطم، بدءا من أسفل الأنف والتحرك صعودا. إزالة الفراء والجلد، وشعيرات من جميع أنحاء الأنف، وإدراج نصائح من زوج منحنى من مقص في nares مع المنحنيات وأشار إلى أسفل. قطع فتح ممر الأنف نحو العينين، وخلق تشكيل V-تشبه.ثم استخدام ملقط غرامة لجمع الحاجز الأنفي، والأنسجة الرخوة داخل تشكيل، ووضع الأنسجة في ما قبل المسمى 1.5 ملليلتر microcentrifuge أنبوب يحتوي على 0.3 ملليلتر من 1٪ الكانين في برنامج تلفزيوني، على الجليد. لمعالجة أنسجة الرئة، نقل كامل محتويات أنبوب عينة الرئة إلى 15 ملليلتر التجانس Dounce العقيمة، واستخدام آفة تجانس الأنسجة. افصل العينة حتى لا تبقى جسيمات كبيرة من الأنسجة ، وإعادة التعليق المتجانس إلى أنبوب 15 ملليلتر الأصلي.إزالة aliquot 0.3 ملليلتر لطلاء وحدات تشكيل مستعمرة، وجمع بقية التجانس عن طريق الطرد المركزي. Aliquot 0.5 ملليلتر من السوبر في أنابيب الريف الصغرى المسماة مسبقا للتخزين في 20 درجة مئوية حتى تحليل التعبير السيتوكين من قبل إليزا. ثم، تخفيف تسلسليا 0.1 milliliter aliquots من تعليق الرئة جانبا متجانسة في 0.9 ملليلتر من PBS العقيمة لكل تخفيف، واستخدام موزع مثلث معقمة لوحة 0.1 ملليلتر من كل تخفيف مختارة تجريبيا على ما قبل المسمى 10٪ بورديت-جينغو بالإضافة إلى لوحات الستريبتوميسين.هنا، تظهر الكثافة البصرية التمثيلية 600 القياسات والحسابات لتحقيق تعليق بكتيري واحد الكثافة البصرية، لإعداد مائة ضعف فيولوم البكتيريا المخففة ليتم تسليمها إلى الفئران. بعد سبعة أيام من تحفيز مستضد اللقاح، خلايا الطحال المحصنة من مجموعة اللقاح المركبة تنتج إنترفيرون غاما، وIL17، في حين انخفضت بشكل كبير تنظيم IL5، وتعزيز مساعد T، واحد T مساعد 17 الاستقطاب من الاستجابة المناعية خلال عدوى السعال الديكي B. مستعمرة تشكيل وحدة تعداد من البكتيريا التي تم استردادها من قضايا الجهاز التنفسي من الماوس المصاب السعال الديكي B يمكن استخدامها لتقييم الآثار الوقائية للقاح الفائدة.العمل بأسرع وبأقصى قدر ممكن من الكفاءة من أجل تجنب نخر الأنسجة، وتخزين الأنسجة المعزولة على الجليد للحفاظ على صلاحية البكتيريا المستعادة. يمكن إجراء عملية استئصال الخلايا والحمض النووي والحمض النووي الريبي ELISpot لتقييم الخلايا المناعية، وإنتاج التحليلات، وتمكين التحليلات اللاجينية والنسخية. عند العمل مع العوامل المعدية مثل السعال الديكي البوردتيلا، من المهم أن نتذكر أن ارتداء معدات الوقاية الشخصية المناسبة، والعمل في خزانة السلامة الحيوية المعتمدة من أجل منع انتقال الأمراض.هذا البروتوكول تفاصيل تعداد CFU من الجهاز التنفسي، وتحديدا البلعوم الأنفي. لمعالجة الأسئلة في مجال اللقاح والأمراض المعدية حول استهداف الاستعمار البكتيري في الأنف.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging (Video) | JoVE

استخدام اعتراض البصرية لدراسة التفاعلات المرضي المضيف الحيوي للخلية الحية التصوير

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions (Video) | JoVE

استخدام نموذج لوصف EpiAirway طويل الأجل المضيف الممرض التفاعلات

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

A Comparative Approach to Characterize the Landscape of Host-Pathogen Protein-Protein Interactions

A Comparative Approach to Characterize the Landscape of Host-Pathogen Protein-Protein Interactions (Video) | JoVE

A المنهج المقارن لتوصيف المشهد من المضيف الممرض البروتين البروتين التفاعلات

Significant efforts were gathered to generate  large-scale comprehensive protein-protein interaction network maps. This is  instrumental to understand the ...

Protective Efficacy and Pulmonary Immune Response Following Subcutaneous and Intranasal BCG Administration in Mice

Protective Efficacy and Pulmonary Immune Response Following Subcutaneous and Intranasal BCG Administration in Mice (Video) | JoVE

الحماية فعالية والرئوي الاستجابة المناعية بعد تحت الجلد والطريق الأنفي BCG الإدارة في الفئران

Despite global coverage of intradermal BCG vaccination, tuberculosis remains one of the most prevalent infectious diseases in the world. Preclinical data ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages (Video) | JoVE

عزل السالمونيلا تيفيموريوم-التي تحتوي على فاجوسوميس من الضامة

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo (Video) | JoVE

بروتوكول نفطة شفط لدراسة الخلية تي البشرية استدعاء الاستجابات في فيفو

Cutaneous antigen-recall models allow for studies of human memory responses in vivo. When combined with skin suction blister (SB) induction, this model ...

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay (Video) | JoVE

وصف الاستجابات ايستب الغلوبولين المناعي تعتمد على الغدة الصعترية، والغدة الصعترية مستقلة في الفئران باستخدام مقايسة الممتز المرتبط بالانزيم

Antibodies, also termed as immunoglobulins (Ig), secreted by differentiated B lymphocytes, plasmablasts/plasma cells, in humoral immunity provide a ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice (Video) | JoVE

تقييم الاستجابات الخاصة بفيروس زيكا تي خلية في أجهزة إيمونوبريفيليجيد من الفئران المصابة Ifnar1-/-

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...

Infection of Zebrafish Larvae with Aspergillus Spores for Analysis of Host-Pathogen Interactions

Infection of Zebrafish Larvae with Aspergillus Spores for Analysis of Host-Pathogen Interactions (Video) | JoVE

عدوى يرقات حمار وحشي مع جراثيم أسبيرغيلوس لتحليل التفاعلات المضيفة الممرضة

Invasive aspergillosis (IA) is one of&#160;the most common fungal infections among immunocompromised individuals. Despite the availability of antifungal ...

Label-Free Quantitative Proteomics Workflow for Discovery-Driven Host-Pathogen Interactions

Label-Free Quantitative Proteomics Workflow for Discovery-Driven Host-Pathogen Interactions (Video) | JoVE

خالية من التسمية تدفق عمل البروتوميات الكمية للتفاعلات المُضيفة-الممرضة مدفوعة بالإكتشاف

The technological achievements of mass spectrometry (MS)-based quantitative proteomics opens many undiscovered avenues for analyzing an organism&#8217;s ...