Name: wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration
Uploaded: 2019-03-07T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Denne undersøgelse blev støttet af Ministeriet for National Defense (MAB-105-070; MAB-106-077; MAB-107-032; Mab-107-065), Ministeriet for videnskab og teknologi (de fleste 107-2320-B016-016), Tri-Service General Hospital, nationalt forsvar Medical Center, Taiwan (TSGH-C106-046; TSGH-C106-115; TSGH-C107-041), og Cheng-Hsin General Hospital og National Defense Medical Center samarbejde (CH-NDMC-107-8).

De fedtvæv blev indhentet fra ortopædisk kirurgi, som attesteret af de institutionelle Review Board i Tri-Service General Hospital, Taipei, Taiwan, R.O.C. procedurer, der involverer dyr emner er blevet godkendt af Animal Care Udvalget på nationalt Defense Medical Center, Taiwan (R.O.C).
1. våd Spinning proces
<ol><li>
Løsning forberedelse
	<ol>
<li>Opløses 5 g gelatine pulver i 100 mL dobbeltdestilleret vand at få 5% (w/v) opløsningens koncentration.</li>
		<li>Bland...

<ol>
	<li>Bagnall, A. M., Jones, L., Duffy, S., Riemsima, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+fixation+surgery+for+acute+traumatic+spinal+cord+injury.">Spinal fixation surgery for acute traumatic spinal cord injury.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. 1, 004725 (2008).</li><li>Fehlings, M. G., Perrin, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+and+timing+of+early+decompression+for+cervical+spinal+cord+injury:+update+with+a+review+of+recent+clinical+evidence.">The role and timing of early decompression for cervical spinal cord injury: update with a review of recent clinical evidence.</a> Injury. 36, 13-26 (2005).</li><li>Yang, L., Jones, N. R., Stoodley, M. A., Blumbergs, P. C., Brown, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitotoxic+model+of+post-traumatic+syringomyelia+in+the+rat.">Excitotoxic model of post-traumatic syringomyelia in the rat.</a> Spine. 26, 1842-1849 (2001).</li><li>Rolls, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+faces+of+chondroitin+sulfate+proteoglycan+in+spinal+cord+repair:+a+role+in+microglia/macrophage+activation.">Two faces of chondroitin sulfate proteoglycan in spinal cord repair: a role in microglia/macrophage activation.</a> PLoS Medicine. 5, 1262-1277 (2008).</li><li>Properzi, F., Asher, R. A., Fawcett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroitin+sulphate+proteoglycans+in+the+central+nervous+system:+changes+and+synthesis+after+injury.">Chondroitin sulphate proteoglycans in the central nervous system: changes and synthesis after injury.</a> Biochemical Society Transactions. 31, 335-336 (2003).</li><li>Fawcett, J. W., Asher, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glial+scar+and+central+nervous+system+repair.">The glial scar and central nervous system repair.</a> Brain Research Bulletin. 49, 377-391 (1999).</li><li>Yang, Z., Mo, L., Duan, H., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chitosan/collagen+substrates+on+the+behavior+of+rat+neural+stem+cells.">Effects of chitosan/collagen substrates on the behavior of rat neural stem cells.</a> Science China Life Sciences. 53, 215-222 (2010).</li><li>Chawla, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fibrous Materials. , (1998).</li><li>Pickering, K. L., Aruan Efendy, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+recent+developments+in+natural+fibre+composites+and+their+mechanical+performance.">A review of recent developments in natural fibre composites and their mechanical performance.</a> Composites Part A-Applied Science and Manufacturing. 83, 98-112 (2016).</li><li>Lundgren, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+fibers+made+from+proteins.">Synthetic fibers made from proteins.</a> Advances in Protein Chemistry. 5, 305-351 (1954).</li><li>Radishevskii, M. B., Serkov, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coagulation+mechanism+in+wet+spinning+of+fibres.">Coagulation mechanism in wet spinning of fibres.</a> Fibre Chemistry. 37, 266-271 (2005).</li><li>Yannas, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+and+gelatin+in+the+solid+state.">Collagen and gelatin in the solid state.</a> Journal of Macromolecular Science Part C Polymer Reviews. 7, 49-106 (1972).</li><li>Baer, E., Cassidy, J. J., Hiltner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+structure+of+collagen+composite+Systems:+lessons+from+biology.">Hierarchical structure of collagen composite Systems: lessons from biology.</a> Pure and Applied Chemistry. 6, 961-973 (2009).</li><li>Harrington, W. F., Von Hippel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+collagen+and+gelatin.">The structure of collagen and gelatin.</a> Advances in Protein Chemistry. 16, 1-138 (1961).</li><li>Veis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Macromolecular Chemistry of Gelatin. , (1994).</li><li>Freyman, T. M., Yannas, I. V., Gibson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+materials+as+porous+scaffolds+for+tissue+engineering.">Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering.</a> Progress in Materials Science. 46, 273-282 (2001).</li><li>Michalczyk, K., Ziman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nestin+structure+and+predicted+function+in+cellular+cytoskeletal+organization.">Nestin structure and predicted function in cellular cytoskeletal organization.</a> Histology and Histopathology. 20, 665-671 (2005).</li></ol>

Vi præsenterede udviklingen af gelatine-baseret Biomaterialer ved hjælp af en simpel våd spinning teknik, der kan anvendes i studiet af naturlige polymerer til væv revitalisering. Dette arbejde viste muligheden for gelatine fabrikation som en stor proteinkilde uden tilsætning af andre kilder, med formålet at optimere egenskaber af gelatine, selv. Udviklingen af gelatine-baseret Biomaterialer blev udelukkende udført i stuetemperatur (22-26 ° C). En blid løsning forberedelse er et kritisk skridt i protokollen, som...

Den seneste udvikling i væv revitalisering indebærer anvendelse af vævsmanipulering, som repræsenterer en udfordring for forbedring af nye terapeutiske strategier i medicinske behandlinger. For eksempel, udgør begrænset potentiale af nervesystemet regenerering, følgende skade eller sygdom, en væsentlig sundhedsproblem på verdensplan. På grund af kompleksiteten af patofysiologiske processer forbundet med nervesystemet, brug af traditionelle autograft eller gennemførelsen af stabilisering kirurgi har vist sig at tilbyde fordele i funktionelle resultater, men der er ingen stærke beviser for virkningerne af spinal fiksering kirurgi1,2. Væv på det beskadigede område er mistet og erstattet med hypertrophically induceret astrocytter3, til sidst danner en tæt glial ar4,5. Denne matrix fungerer som en barriere at blokke genopretning af nerve funktion6,7 og er således stærkt hindrer regenerering. Derfor, en passende fylde hullet materiale forventes at forhindre tab af væv og reducere dannelsen af ar-associerede bindevæv ved at opretholde integriteten af det beskadigede område, samt ved at give direkte udskiftning af neurale celler og kredsløb at fremme axon regenerering.
Polymere biomaterialer har været foretrukne som stilladser for væv revitalisering terapi, baseret på reguleringen af celle eller axon adfærd og væv progression gennem naturlige ekstracellulære matrix (ECM) støtte. Formatet fiber er almindeligvis betragtes som en byggesten for forskellige materialer, på grund af dens endimensional struktur8. Fibrene kan generelt fås ved at smelte ekstrudering eller våde spinning metode; men den store størrelse og omkostningerne ved udstyr og vanskeligheder ved at udføre disse metoder er udfordrende. Derudover har flertal af for arbejdet i forbindelse med polymer fibre været fokuseret på syntetiske eller komposit materialer. Naturlige polymerer som en kilde til biomateriale tilbyde bedre biokompatibilitet egenskaber for den menneskelige krop. Ikke desto mindre, for at få tilpasningen af naturlige polymer fibre er relativt mere vanskeligt end af syntetisk polymer kilder9. Konvertering af en naturlig polymer som en rig kilde til protein i biomateriale fibre er derfor en vigtig strategi — ikke kun kan biomateriale fibre blive direkte isoleret fra råvarer, således at man undgår en unødig transformation til monomerer, men den protein fibre har også et godt udseende og positiv egenskaber10.
I denne forbindelse, beskriver vi en billig forarbejdningsmetode til fremstilling af naturlige polymer fibre gennem det grundlæggende koncept af våde spinning, der kan implementeres på laboratoriet skala for vævsmanipulering. Våd spinning er udført af ekstrudering og koagulation af en polymer løsning til en egnet polymer nonsolvent. En passende, tyktflydende løsning doteret til koagulation medie forårsager polymer molekyler til at opløse. Gennem overgang fase glødetrådenes derefter mister deres opløselighed og er fældet i form af en solid polymer fase11. Henviser til dette begreb, udvidet vi derefter udvikling af gelatine i formen tube af en støbeprocessen, som anses for korrekt for væv revitalisering ansøgning. Derudover uløseligt, kan vi også udvikle enhver form af materialet fra gelatine fibre (fx gelatine conduit rullet op fra flere gelatine fibre), for andre ønskede applikationer.
Gelatine, biologisk nedbrydeligt naturlige polymerer, er dannet af denatureret og hydrolyseret kollagen, herunder eventuelle semicrystalline, amorf eller tredobbelt spiralformet tilstand af kollagen12. Det er velkendt, at kollagen er den væsentlige strukturelle protein i alle bindevævet af hvirveldyr og hvirvelløse dyr13,14, der svarer til protein struktur af de vigtigste ECM, der inducerer nerve vækst og samtidig erstatter en stor mængde af glykosaminoglykan udskilles i løbet af rygmarvsskader. Derfor ville brugen af gelatine som en kilde være et godt valg for enhver medicinsk køretøj. Udover at være en billig kilde, gelatine er også biologisk nedbrydeligt og cytocompatible og klinisk bevist at være en midlertidig fejl fyldstof15. Udviklet sig til en tube form, vise in vitro og in vivo prøver beskrevet her, at gelatine har en fremragende biokompatibilitet og egnethed for fremtidige tissue engineering applikationer. Kulturperler med menneskelige adipøst stamceller, gelatine rør forbedre Celledifferentiering af neurale stamceller ved hjælp af positive nestin farvning som neurale celle markør. Derudover forventes gelatine som fylde hullet materiale, som fremstillet ved den metode, der er etableret i denne undersøgelse, at være overskueligt og sikkert og til stor gavn væv ingeniører, der i øjeblikket udvikler korrelationsmaalinger naturlige polymerer til forbedring af væv regenerering strategier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Solution preparation:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin type B (porcine)</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 10733</td>
			<td>500 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wet spinning process:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>Model M312</td>
			<td>Minipuls*3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic tube connector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14011</td>
			<td>1 box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Sterican</td>
			<td>5A06258541</td>
			<td>26Gx1/2&#34;(0.45 x 12mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00010</td>
			<td>2.5 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone CAPA 6500</td>
			<td>Perstorp</td>
			<td>24980-41-4</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane&#160;</td>
			<td>Scharlau</td>
			<td>CL03421000</td>
			<td>1 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pasteur pipette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-678-20A</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (Introcan Certo)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>1B03258241</td>
			<td>24Gx3/4&#34;(0.7 x 19mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Morphology of the gelatin tube:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion sputter coater machine&#160;</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>e1010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscopy</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>S-3000N</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cultivation of cells on the gelatin tube:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>488625</td>
			<td>100 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>923119</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31600-034</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Keratinocyte-SFM medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10744-019</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T25 culture flask</td>
			<td>TPP</td>
			<td>90025</td>
			<td>VENT type</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>1209938</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immunocytochemistry:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospate-buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>654471</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid glacial</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00697</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40 surfactant (Tergitol solution)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>056K0151</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal goat serum</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>S-1000-20</td>
			<td>20 mL vial, concentrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-23927</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-mouse-fluorescein isothiocyanate (secondary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-2099</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td>Anaspec</td>
			<td>AS-83218</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vivo biocompatibility test:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tiletamine+zolazepam&#160;</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>BC91</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer korea</td>
			<td>KR03227</td>
			<td>10 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen</td>
			<td>Astar</td>
			<td>1406232</td>
			<td>2 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine solution</td>
			<td>Everstar</td>
			<td>HA161202</td>
			<td>4 L barrel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>China Chemical &#38; Pharmaceutical</td>
			<td>18P909</td>
			<td>1 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissor</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration

Denne artikel præsenterer en billig metode til at fremstille gelatine, som en naturlig polymer i monofilamenter fibre eller i andre passende former. Gennem den våde spinning metode, fremstilles gelatine fibre ved glat ekstrudering i en egnet koagulation medium. For at øge den funktionelle overfladen af disse gelatine fibre og deres evne til at efterligne funktionerne af væv, kan gelatine blive støbt i en tube form ved at henvise til dette begreb. Undersøgt af in vitro- og in vivo test, vise gelatine rør et stort potentiale for anvendelse i vævsmanipulering. Fungerer som en passende fylde hullet materiale, gelatine rør kan bruges til at erstatte væv i det beskadigede område (fx i nervøs eller hjerte-kar-systemet), samt at fremme regenerering af at yde en direkte udskiftning af stamceller og neurale kredsløb. Denne protokol indeholder en detaljeret procedure for at oprette en biomateriale, baseret på en naturlig polymer, og dets gennemførelse forventes at stor gavn udviklingen af korrelationsmaalinger naturlige polymerer, som bidrager til at realisere væv revitalisering strategier.

I denne undersøgelse udviklet vi med succes gelatine i fibre (fig. 2A) og rør (figur 2B, C) gennem begrebet brugervenlige våde spinning. Disse gelatine-baserede materialer kan udnyttes som enhver medicinsk værktøj, afhængigt af deres figurer. I betragtning af at den funktionelle overflade og ramme af sådanne materialer er mere velegnede til vævsregeneration, undersøgte vi biokompatibilit...

Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration

Vi udviklede og beskrive en protokol baseret på begrebet våde spinning for opførelsen af gelatine-baseret Biomaterialer bruges til anvendelsen af vævsmanipulering.

Wet-spinning-baserede Molding proces af gelatine for vævsregeneration

This article presents an inexpensive method to fabricate gelatin, as a natural polymer, into monofilament fibers or other appropriate forms. Through the ...

Denne protokol forbedrer et grundlæggende begreb våd-spinning at udvikle et materiale fra en enkelt fiber strimmel i forskellige strimler, der kan bruges til enhver foretrukken medicinsk anvendelse. Denne teknik er enkel, billig, og kræver ikke tilsætning af syntetiske polymerer til tilpasning af de naturlige polymerer i en ressource af protein til materialer af interesse. Denne teknik kan udvides til biomateriale udvikling for drab kold behandling såsom central eller perifere nervesystem behandling, blodkar udskiftning, eller direkte urinveje rekonstruktion.Denne metode er beregnet til medicinsk anvendelse, herunder som en strategi for væv neuralisering eller regenerativ medicin. Denne teknik kan nemt implementeres af begyndere. Bemærk, at efter flere støbning gentagelser, bør kvaliteten af opløsningen altid kontrolleres for at opretholde en optimal dannelse.For at danne det våde roterende rør, først nedsænkes en 24 gauge med tre kvart tommer perifer venekateter i frisklavet gelatine opløsning i tre sekunder, efterfulgt af nedsænkning i frisklavet acetone opløsning i et minut. Gentag disse trin 20 gange. Efter den sidste acetone nedsænkning, lad det støbte rør tørre i fem minutter ved stuetemperatur, og bruge en hæmostat til omhyggeligt at overføre gelatinerøret fra kateteret til et glas Pasteur pipette med 2,5% polycaprolactone dichlormetan opløsning til en overnatning under-hood inkubation ved stuetemperatur.Den næste morgen, sterilisere gelatine i to timer under ultraviolet lys, før kortvarigt nedsænkning røret i 75% ethanol. Derefter vaskes røret to gange med stamcellemediet for at fjerne den resterende ethanol. For at dyrke gelatinerøret med cellekulturen skal du erstatte den supinate ende af humane fedtstamceller fra en dyrkningskolbe med en milliliter på 0,25%Trypsin-EDTA for en 3,5 minutters inkubation ved 37 grader Celsius og 5 % kuldioxid.Når cellerne er taget af, standses reaktionen med en milliliter føtalt kvægserum, og cellesuspensionen overføres til et mikrocentrifugerør. Cellerne opsamls ved centrifugering og opstimer pellet i en milliliter stamcellemedium. Derefter anbringes gelatinerøret i en brønd af en seks-brønds plade, der indeholder tre milliliter stamcellemedium.Efter optælling af cellerne, frø fire gange 10 til den fjerde af menneskelige fedt stamceller i røret for en to ugers inkubation i cellen kultur inkubator. Efter at have bekræftet det passende niveau af sedation ved manglende reaktion på tå knivspids i en kvindelig otte uger gammel Sprague Dawley rotte, barbere håret fra trapezius området og sterilisere den eksponerede hud med povidone-jod opløsning. Dæk rotten med sterile kirurgiske gardiner for at reducere bakteriel forurening af operationsstedet og bruge kirurgisk saks til at gøre en lavvandet, to centimeter lang hud snit.Placer gelatinerøret direkte ind i laget mellem fascia og musklen og brug en nylonsutur til at lukke såret. Derefter steriliseres snittet med povidone-jodopløsning. Inducere rotten via en intramuskulær injektion af ketoprofen og cefazolin og vedligeholde dyret under aseptiske forhold i syv dage.Denne brugervenlige våde spinning koncept kan bruges til at udvikle gelatine i fibre og rør. Morfologiske observationer af gelatinerøret ved scanning af elektronmikroskopi afslører en ikke særlig glat overflade med en indre diameter på mere end 200 mikrometer og en tykkelse på ca. 20 mikrometer. Farvning af en menneskelig fedt stamcellekultur gelatine rør til neuralcellemarkør udtryk viser en positiv farvning for markøren sammen med flere opdaget kerner tyder på, at cellerne kan trænge ind og overholde gelatine rør og differentiere i neurale progenitor celler.Implantation af gelatinerøret i fascialaget bekræfter dets sikkerhed og biokompatibilitet, da der ikke observeres tegn på rødme, hævelse eller andre inflammationssymptomer i det lokale væv, og røret er omgivet af veludviklet bindevæv. Mens du forsøger denne procedure på to punkt et, sikre nedsænkning af formen i den specifikke belægning tid i hver løsning er meget vigtigt at opbygge en præcis rørform. Efter denne procedure, vores eksperimenter bruger dyremodel af human sygdom kan udføres til præcist at undersøge resultatet af biomaterialer til væv regenerering strategi.Efter sin udvikling, denne teknik banede vejen for forskere i at udvikle enkle korrelerende natur polymerer i enhver form for materiale til en besluttet medicinsk anvendelse. Under normal brug tilstand, polycaprolactone dichlormethan opløsning anses for at udgøre minimal miljøfare, men glem ikke at udføre nogen skridt med dette kemikalie i en passende biosikkerhed kabinet.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

Brug af menneskelige perivaskulær stamceller til Bone Regeneration

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

Expression, Isolation, and Purification of Soluble and Insoluble Biotinylated Proteins for Nerve Tissue Regeneration

Ekspression, isolation og oprensning af opløselige og uopløselige Biotinylerede Proteiner til nervevæv Regeneration

Recombinant protein engineering has utilized Escherichia coli (E. coli) expression systems for nearly 4 decades, and today E. coli is still the most ...

Rapid and Low-cost Prototyping of Medical Devices Using 3D Printed Molds for Liquid Injection Molding

Hurtig og Lavprisselskaber Prototyping af Medical Devices Brug 3D Trykt støbeforme til flydende Injection Molding

Biologically inert elastomers such as silicone are favorable materials for medical device fabrication, but forming and curing these elastomers using ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Engineering 3D Cellularized kollagengeler for Vascular Tissue Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Tilpasning af Electrospinning proces med at give tre unikke miljøer for en Tri-lags<em&gt; In vitro</em&gt; Model af Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Qualitative Characterization of the Aqueous Fraction from Hydrothermal Liquefaction of Algae Using 2D Gas Chromatography with Time-of-flight Mass Spectrometry

Kvalitativ Karakterisering af den vandige fraktion fra Hydrotermisk fortætning af alger ved hjælp af 2D gaskromatografi med Time-of-flight massespektrometri

Two-dimensional gas chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry is a powerful tool for identifying and quantifying chemical components in ...

Alternating Magnetic Field-Responsive Hybrid Gelatin Microgels for Controlled Drug Release

Vekslende magnetfelt-Responsive Hybrid Gelatine Mikrogeler for Controlled Drug frigivelse

Magnetically-responsive nano/micro-engineered biomaterials that enable a tightly controlled, on-demand drug delivery have been developed as new types of ...

A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries

En parret perle og Magnet Array for Molding Microwells med variabel konkave geometrier

A spheroid culture is a useful tool for understanding cellular behavior in that it provides an in vivo-like three-dimensional environment. Various ...

Three-dimensional Tissue Engineered Aligned Astrocyte Networks to Recapitulate Developmental Mechanisms and Facilitate Nervous System Regeneration

Tre-dimensionelle Tissue Engineering justeret Astrocyte netværk for at sammenfatte udviklingsmæssige mekanismer og lette nervesystem regenerering

Neurotrauma and neurodegenerative disease often result in lasting neurological deficits due to the limited capacity of the central nervous system (CNS) to ...

Novel Process for 3D Printing Decellularized Matrices

Roman processen for 3D udskrivning Decellularized matricer

3D bioprinting aims to create custom scaffolds that are biologically active and accommodate the desired size and geometry. A thermoplastic backbone can ...