Name: wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration
Uploaded: 2019-03-07T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Denne studien ble støttet av det nasjonale Forsvarsdepartementet (MAB-105-070; MAB-106-077; MAB-107-032; Mab-107-065), departementet for vitenskap og teknologi (de fleste 107-2320-B016-016), Tri-Service General Hospital, nasjonale forsvar Medical Center, Taiwan (TSGH-C106-046; TSGH-C106-115; TSGH-C107-041), og Cheng-Hsin General Hospital og National Defense Medical Center samarbeid (CH-NDMC-107-8).

Fett vev ble Hentet fra lever slik den institusjonelle gjennomgang styret for Tri-Service General Hospital, Taipei, Taiwan, R.O.C. prosedyrer som involverer dyr fag er godkjent av dyr omsorg komiteen på nasjonalt Forsvar Medical Center, Taiwan (R.O.C).
1. fukt Spinning prosessen
<ol><li>
Løsning forberedelse
	<ol>
<li>Oppløse 5 g av gelatin pulver i 100 mL dobbel-destillert vann å få 5% (w/v) løsning konsentrasjon.</li>
		<li>Rør blandingen langsomt ved 60-70 ° C ove...

<ol>
	<li>Bagnall, A. M., Jones, L., Duffy, S., Riemsima, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+fixation+surgery+for+acute+traumatic+spinal+cord+injury.">Spinal fixation surgery for acute traumatic spinal cord injury.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. 1, 004725 (2008).</li><li>Fehlings, M. G., Perrin, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+and+timing+of+early+decompression+for+cervical+spinal+cord+injury:+update+with+a+review+of+recent+clinical+evidence.">The role and timing of early decompression for cervical spinal cord injury: update with a review of recent clinical evidence.</a> Injury. 36, 13-26 (2005).</li><li>Yang, L., Jones, N. R., Stoodley, M. A., Blumbergs, P. C., Brown, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitotoxic+model+of+post-traumatic+syringomyelia+in+the+rat.">Excitotoxic model of post-traumatic syringomyelia in the rat.</a> Spine. 26, 1842-1849 (2001).</li><li>Rolls, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+faces+of+chondroitin+sulfate+proteoglycan+in+spinal+cord+repair:+a+role+in+microglia/macrophage+activation.">Two faces of chondroitin sulfate proteoglycan in spinal cord repair: a role in microglia/macrophage activation.</a> PLoS Medicine. 5, 1262-1277 (2008).</li><li>Properzi, F., Asher, R. A., Fawcett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroitin+sulphate+proteoglycans+in+the+central+nervous+system:+changes+and+synthesis+after+injury.">Chondroitin sulphate proteoglycans in the central nervous system: changes and synthesis after injury.</a> Biochemical Society Transactions. 31, 335-336 (2003).</li><li>Fawcett, J. W., Asher, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glial+scar+and+central+nervous+system+repair.">The glial scar and central nervous system repair.</a> Brain Research Bulletin. 49, 377-391 (1999).</li><li>Yang, Z., Mo, L., Duan, H., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chitosan/collagen+substrates+on+the+behavior+of+rat+neural+stem+cells.">Effects of chitosan/collagen substrates on the behavior of rat neural stem cells.</a> Science China Life Sciences. 53, 215-222 (2010).</li><li>Chawla, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fibrous Materials. , (1998).</li><li>Pickering, K. L., Aruan Efendy, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+recent+developments+in+natural+fibre+composites+and+their+mechanical+performance.">A review of recent developments in natural fibre composites and their mechanical performance.</a> Composites Part A-Applied Science and Manufacturing. 83, 98-112 (2016).</li><li>Lundgren, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+fibers+made+from+proteins.">Synthetic fibers made from proteins.</a> Advances in Protein Chemistry. 5, 305-351 (1954).</li><li>Radishevskii, M. B., Serkov, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coagulation+mechanism+in+wet+spinning+of+fibres.">Coagulation mechanism in wet spinning of fibres.</a> Fibre Chemistry. 37, 266-271 (2005).</li><li>Yannas, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+and+gelatin+in+the+solid+state.">Collagen and gelatin in the solid state.</a> Journal of Macromolecular Science Part C Polymer Reviews. 7, 49-106 (1972).</li><li>Baer, E., Cassidy, J. J., Hiltner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+structure+of+collagen+composite+Systems:+lessons+from+biology.">Hierarchical structure of collagen composite Systems: lessons from biology.</a> Pure and Applied Chemistry. 6, 961-973 (2009).</li><li>Harrington, W. F., Von Hippel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+collagen+and+gelatin.">The structure of collagen and gelatin.</a> Advances in Protein Chemistry. 16, 1-138 (1961).</li><li>Veis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Macromolecular Chemistry of Gelatin. , (1994).</li><li>Freyman, T. M., Yannas, I. V., Gibson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+materials+as+porous+scaffolds+for+tissue+engineering.">Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering.</a> Progress in Materials Science. 46, 273-282 (2001).</li><li>Michalczyk, K., Ziman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nestin+structure+and+predicted+function+in+cellular+cytoskeletal+organization.">Nestin structure and predicted function in cellular cytoskeletal organization.</a> Histology and Histopathology. 20, 665-671 (2005).</li></ol>

Vi presentert utviklingen av gelatin-baserte biologisk materiale ved hjelp av en enkel våt spinning teknikk som kan brukes i studiet av naturlige polymerer for vev gjenfødelse. Dette arbeidet viste at gelatin fabrikasjon som en stor proteinkilde uten tilsetning av andre kilder, med sikte på å optimalisere egenskapene av seg selv. Utviklingen av gelatin-baserte biologisk materiale ble helt gjennomført i romtemperatur (22-26 ° C). En mild løsning forberedelse er en avgjørende skritt i protokollen, som opprettholder...

Den nyeste utviklingen i vev gjenfødelse omfatter bruk av vev utvikling, som representerer en utfordring for forbedring av nye strategier i medisinske behandlinger. For eksempel utgjør begrenset potensialet i nervesystemet gjenfødelse, følgende skade eller sykdom, et betydelig helseproblem over hele verden. Komplekse patofysiologiske prosesser knyttet nervesystemet, bruk av tradisjonelle autograft eller implementering av stabilisering kirurgi har vist seg å tilby fordeler i funksjonelle resultater, men det er ingen sterke bevis for effekten av spinal fiksering kirurgi1,2. Vevet på den skadede delen er tapt og erstattet hypertrophically indusert astrocyttene3til slutt danne en tett glial arr4,5. Denne matrisen fungerer som en barriere som blokker utvinning av nerve funksjon6,7 og er dermed et stort hinder gjenfødelse. Derfor en egnet gapet fyllmasse forventes å hindre tap av vev og redusere dannelsen av arr-assosiert bindevev opprettholde integriteten til den skadede delen og gir direkte utskifting av neural celler og krets å fremme axon regenerering.
Polymere biologisk materiale er foretrukket som stillaser for vev regenerasjon terapi, basert på regulering av cellen eller axon atferd og vev progresjon gjennom naturlig ekstracellulær matrix (EFM) støtte. Fiber formatet regnes vanligvis som en byggestein for ulike materialer, på grunn av sin endimensjonal struktur8. Fibrene kan vanligvis oppnås ved smelte ekstrudering eller våt spinning metoden; men er størrelsen og utstyret og vanskeligheter for å utføre disse metodene utfordrende. Dessuten, har fleste av arbeidet knyttet til polymer fiber vært fokusert på syntetisk eller komposittmaterialer. Naturlig polymerer som biomateriale tilbyr bedre biocompatibility egenskaper for kroppen. Likevel, for å få justeringen av naturlige polymer fiber er relativt vanskeligere enn Syntetisk polymer kilder9. Derfor konvertering av en naturlig polymer som en rik kilde til protein i biomateriale fiber er en viktig strategi, ikke bare kan biomateriale fiber være direkte isolert fra råstoff, dermed unngår en unødvendig transformasjon til monomerer, men protein fiber har også et godt utseende og gode egenskaper10.
I denne forbindelse, beskriver vi en billig behandlingsmetode for produksjon av naturlig polymer fiber gjennom de grunnleggende konseptene for våt spinning, som kan gjennomføres på laboratoriet skala tissue engineering. Våt spinning utføres av ekstrudering og koagulering av en polymer løsning til en egnet polymer nonsolvent. En passende, tyktflytende løsning dopet i koagulering medium fører til polymer molekyler å oppløse. Gjennom fase overgangen, filamenter deretter mister deres løselighet og er utløst i form av en solid polymer fase11. Henvise til dette konseptet, utvidet vi så utviklingen av skjemaet rør av en molding prosess, som er riktig for vev gjenfødelse program. Dessuten, egentlig, vi kan også utvikle en figur av materiale fra gelatin fiber (f.eks gelatin kanal rullet av flere gelatin fiber), andre ønsket programmer.
Gelatin, en naturlig biologisk nedbrytbart polymer er dannet av utarmet og hydrolyzed kollagen, inkludert noen semicrystalline, amorf eller trippel spiralformede stat kollagen12. Det er velkjent at kollagen er essensielle strukturelle proteinet i alle bindevev av virveldyr og virvelløse dyr13,14, som ligner på protein oppbygning viktigste ECM som induserer nerve vekst og samtidig, erstatter en stor mengde glycosaminoglycan utskilles i løpet av ryggmargsskade. Derfor ville bruk av som være et godt valg for alle medisinske kjøretøy. Foruten å være en billig kilde, gelatin er også biologisk nedbrytbart og cytocompatible og klinisk bevist å være en midlertidig feil filler15. Utviklet til en tube, viser i vitro og in vivo tester beskrevet her at gelatin har en utmerket biocompatibility og egnethet for fremtidige vev utvikling programmer. Kultivert med menneskelige adipose stamceller, gelatin rør forbedre celledifferensiering i nevrale stamceller ved hjelp av positivt nestin flekker som en neural celle markør. Videre er gelatin som fyller gapet materiale, som produseres av metoden i denne studien forventet å være håndterlig og trygt og stor nytte vev ingeniører som utvikler for tiden correlative naturlig polymerer for styrking av vev gjenfødelse strategier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Solution preparation:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin type B (porcine)</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 10733</td>
			<td>500 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wet spinning process:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>Model M312</td>
			<td>Minipuls*3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic tube connector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14011</td>
			<td>1 box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Sterican</td>
			<td>5A06258541</td>
			<td>26Gx1/2&#34;(0.45 x 12mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00010</td>
			<td>2.5 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone CAPA 6500</td>
			<td>Perstorp</td>
			<td>24980-41-4</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane&#160;</td>
			<td>Scharlau</td>
			<td>CL03421000</td>
			<td>1 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pasteur pipette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-678-20A</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (Introcan Certo)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>1B03258241</td>
			<td>24Gx3/4&#34;(0.7 x 19mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Morphology of the gelatin tube:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion sputter coater machine&#160;</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>e1010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscopy</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>S-3000N</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cultivation of cells on the gelatin tube:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>488625</td>
			<td>100 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>923119</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31600-034</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Keratinocyte-SFM medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10744-019</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T25 culture flask</td>
			<td>TPP</td>
			<td>90025</td>
			<td>VENT type</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>1209938</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immunocytochemistry:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospate-buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>654471</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid glacial</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00697</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40 surfactant (Tergitol solution)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>056K0151</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal goat serum</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>S-1000-20</td>
			<td>20 mL vial, concentrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-23927</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-mouse-fluorescein isothiocyanate (secondary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-2099</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td>Anaspec</td>
			<td>AS-83218</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vivo biocompatibility test:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tiletamine+zolazepam&#160;</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>BC91</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer korea</td>
			<td>KR03227</td>
			<td>10 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen</td>
			<td>Astar</td>
			<td>1406232</td>
			<td>2 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine solution</td>
			<td>Everstar</td>
			<td>HA161202</td>
			<td>4 L barrel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>China Chemical &#38; Pharmaceutical</td>
			<td>18P909</td>
			<td>1 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissor</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration

Denne artikkelen presenterer en rimelig metode for å dikte gelatin, som en naturlig polymer monofilament fiber eller andre passende former. Gjennom den våte spinning metoden, er gelatin fiber produsert av glatt ekstrudering i et egnet koagulering medium. For å øke funksjonelle overflaten av disse gelatin fiber og deres evne til å etterligne funksjoner i vev, kan gelatin støpes inn i en rørform ved å henvise til dette konseptet. Gelatin rør undersøkt av i vitro og in vivo tester, og viser et stort potensial for programmet i vev engineering. Fungerer som en egnet fylle gapet materiale, gelatin rør kan brukes til å erstatte vevet i den skadede delen (f.eks i nervøs eller kardiovaskulære systemet), samt å fremme regenerering av skaffer en direkte erstatning av stamceller og nevrale kretser. Denne protokollen gir en detaljert fremgangsmåte for å opprette en biomateriale basert på en naturlig polymer, og gjennomføringen forventes å ha stor nytte utviklingen av correlative naturlig polymerer, som bidrar til å realisere vev gjenfødelse strategier.

I denne studien utviklet vi lykkes gelatin i fiber (figur 2A) og rør (figur 2B, C) gjennom brukervennlig våt spinning konseptet. Disse gelatin-baserte materialer kan benyttes som en medisinsk verktøy, avhengig av figurene. Tatt i betraktning at funksjonelle overflaten og rammen av slike materialer er mer egnet for vev gjenfødelse, undersøkt vi biokompatibilitet av gelatin rør av utføre i v...

Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration

Vi utviklet og beskrive en protokoll basert på våt spinning konseptet, for bygging av gelatin-baserte biologisk materiale brukes for anvendelse av vev engineering.

Våt-spinning-baserte Molding prosessen med Gelatin for vev gjenfødelse

This article presents an inexpensive method to fabricate gelatin, as a natural polymer, into monofilament fibers or other appropriate forms. Through the ...

Denne protokollen forbedrer et grunnleggende konsept for våtspinne for å utvikle et materiale fra en enkelt fiberstripe til ulike strimler som kan brukes til enhver foretrukket medisinsk applikasjon. Denne teknikken er enkel, billig, og krever ikke tilsetning av syntetiske polymerer for tilpasning av de naturlige polymerene til en ressurs av protein for materialer av interesse. Denne teknikken kan utvides til biomateriale utvikling for å drepe kald terapi som sentral eller perifer nervesystemet behandling, blodkar erstatning, eller direkte urinveis rekonstruksjon.Denne metoden er ment for medisinsk anvendelse, inkludert som en strategi for vev neuralisering eller regenerativ medisin. Denne teknikken kan enkelt implementeres av nybegynnere. Merk at etter flere støperepetisjoner bør kvaliteten på løsningen alltid kontrolleres for å opprettholde en optimal formasjon.For å danne det våte spinnrøret, senk først en 24-gauge med tre kvart tommers perifert venekateter i nylaget gelatinløsning i tre sekunder, etterfulgt av nedsenking i nylaget acetonløsning i ett minutt. Gjenta disse trinnene 20 ganger. Etter den siste aceton nedsenking, la det støpte røret tørke i fem minutter ved romtemperatur, og bruk en hemostat til å forsiktig overføre gelatinrøret fra kateteret til en glass Pasteur pipette med 2,5% polycaprolactone diklormetanløsning for en overnatting under panser inkubasjon ved romtemperatur.Neste morgen steriliser gelatinen i to timer under ultrafiolett lys før du kort senker røret i 75% etanol. Vask deretter røret to ganger med stamcellemedium for å fjerne gjenværende etanol. For å dyrke gelatinrøret med cellekulturen, erstatt den supinate enden av menneskelige fettstamceller fra en kulturkolbe med en milliliter på 0,25% Trypsin-EDTA for en 3,5 minutters inkubasjon ved 37 grader Celsius og 5% karbondioksid.Når cellene har løsnet, arrester reaksjonen med en milliliter fosterbovinserum og overfør cellefjæringen til et mikrocentrifugerør. Samle cellene ved sentrifugering og resuspend pellet i en milliliter stamcelle medium. Legg deretter gelatinrøret i en brønn av en seksbrønns plate som inneholder tre milliliter stamcellemedium.Etter å ha talt cellene, frø fire ganger 10 til den fjerde av menneskelige fettstamceller inn i røret for en to ukers inkubasjon i cellekulturinkubatoren. Etter å ha bekreftet riktig nivå av sedasjon ved mangel på respons på tåklemme i en kvinnelig åtte uker gammel Sprague Dawley rotte, barber håret fra trapezius-området og steriliser den eksponerte huden med povidon-jodløsning. Dekk rotten med sterile kirurgiske gardiner for å redusere bakteriell forurensning av operasjonsstedet og bruk kirurgisk saks for å lage et grunt, to centimeter langt hudsnitt.Plasser gelatinrøret direkte inn i laget mellom fascia og muskelen og bruk en nylonsutur for å lukke såret. Steriliser deretter snittet med povidon-jodoppløsning. Indusere rotten via en intramuskulær injeksjon av ketoprofen og cefazolin og opprettholde dyret under aseptiske forhold i syv dager.Dette brukervennlige våtspinnekonseptet kan brukes til å utvikle gelatin til fibre og rør. Morfologiske observasjoner av gelatinrøret ved å skanne elektronmikroskopi avslører en ikke veldig glatt overflate med en større enn 200 mikrometer indre diameter og en tykkelse på ca 20 mikrometer. Farging av en menneskelig fett stamcellekultur gelatinrør for nevrale cellemarkøruttrykk viser en positiv farging for markøren sammen med flere oppdagede kjerner som tyder på at cellene kan trenge inn og holde seg til gelatinrøret og differensiere til nevrale stamceller.Implantasjon av gelatinrøret i fascialaget bekrefter sikkerhet og biokompatibilitet, da ingen indikasjon på rødhet, hevelse eller andre betennelsessymptomer observeres i det lokale vevet og røret er omgitt av velutviklet bindevev. Mens du prøver denne prosedyren av to punkt en, sikre nedsenking av formen i den spesifikke beleggtiden i hver løsning er svært viktig for å bygge opp en presis rørform. Etter denne prosedyren bruker våre eksperimenter dyremodell av menneskelig sykdom kan utføres for å nøyaktig undersøke utfallet av biomaterialene for vevregenereringsstrategi.Etter utviklingen banet denne teknikken vei for forskere i å utvikle enkle korrelative naturpolymerer til alle typer materiale for en bestemt medisinsk applikasjon. Under normal bruk tilstand, polycaprolactone dichloromethane løsningen anses å presentere minimal miljøfare, men ikke glem å utføre noen trinn med dette kjemikaliet i en passende biosikkerhet kabinett.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

Bruk av menneskelige perivaskulær stamceller for Bone Regeneration

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

Expression, Isolation, and Purification of Soluble and Insoluble Biotinylated Proteins for Nerve Tissue Regeneration

Expression, Isolation, og Rensing av løselig og uløselig Biotinylated Proteiner for nervevev Regeneration

Recombinant protein engineering has utilized Escherichia coli (E. coli) expression systems for nearly 4 decades, and today E. coli is still the most ...

Rapid and Low-cost Prototyping of Medical Devices Using 3D Printed Molds for Liquid Injection Molding

Rask og Rimelig Prototyping av medisinsk utstyr Bruk av 3D Trykt Stanse for Liquid Injection Molding

Biologically inert elastomers such as silicone are favorable materials for medical device fabrication, but forming and curing these elastomers using ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Ingeniør 3D Cellularized Kollagen Geleer til Vaskulær Tissue Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Tilpasning av electro prosess for å gi tre unike miljøer for en Tri-lag<em&gt; In Vitro</em&gt; Modell av Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Qualitative Characterization of the Aqueous Fraction from Hydrothermal Liquefaction of Algae Using 2D Gas Chromatography with Time-of-flight Mass Spectrometry

Kvalitativ Karakterisering av den vandige fraksjon fra Hydrothermal kondensering av Alger Bruke 2D gasskromatografi med Time-of-flight massespektrometri

Two-dimensional gas chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry is a powerful tool for identifying and quantifying chemical components in ...

Alternating Magnetic Field-Responsive Hybrid Gelatin Microgels for Controlled Drug Release

Vekslende magnetfelt-Responsive Hybrid Gelatin mikrogeler for kontrollert legemiddeldosering

Magnetically-responsive nano/micro-engineered biomaterials that enable a tightly controlled, on-demand drug delivery have been developed as new types of ...

A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries

En sammenkoblet perle og Magnet matrise for Molding Microwells med variabel konkave geometrier

A spheroid culture is a useful tool for understanding cellular behavior in that it provides an in vivo-like three-dimensional environment. Various ...

Three-dimensional Tissue Engineered Aligned Astrocyte Networks to Recapitulate Developmental Mechanisms and Facilitate Nervous System Regeneration

Tredimensjonale vev utvikling justert astrocytter nettverk å Recapitulate utviklingsmessige mekanismer og tilrettelegge nervesystemet gjenfødelse

Neurotrauma and neurodegenerative disease often result in lasting neurological deficits due to the limited capacity of the central nervous system (CNS) to ...

Novel Process for 3D Printing Decellularized Matrices

Romanen prosessen for 3D utskriften Decellularized matriser

3D bioprinting aims to create custom scaffolds that are biologically active and accommodate the desired size and geometry. A thermoplastic backbone can ...