Name: wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration
Uploaded: 2019-03-07T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Denna studie stöddes av nationella försvarsdepartementet (MAB-105-070; MAB-106-077; MAB-107-032; MAB-107-065), ministeriet för vetenskap och teknik (de flesta 107-2320-B016-016), Tri-Service General Hospital, nationella försvar vårdcentral, Taiwan (TSGH-c‑106-046; TSGH-C‑106-115; TSGH-C107-041), och Cheng-Hsin General Hospital och National Defense Medical Center samarbete (CH-NDMC-107-8).

Fettvävnader erhölls från ortopediska operationer som har intygats av institutionella i styrelsen av Tri-Service allmänt sjukhus, Taipei, Taiwan, R.O.C. förfaranden som berör animaliska ämnen har godkänts av utskottet djur vård på nationell Försvar Medical Center, Taiwan (R.O.C).
1. blöt Spinning Process
<ol><li>
Lösning förberedelse
	<ol>
<li>Lös upp 5 g gelatin pulver i 100 mL dubbeldestillerat vatten att få koncentration av 5% (w/v) lösning.</li>
		<li>R?...

<ol>
	<li>Bagnall, A. M., Jones, L., Duffy, S., Riemsima, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+fixation+surgery+for+acute+traumatic+spinal+cord+injury.">Spinal fixation surgery for acute traumatic spinal cord injury.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. 1, 004725 (2008).</li><li>Fehlings, M. G., Perrin, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+and+timing+of+early+decompression+for+cervical+spinal+cord+injury:+update+with+a+review+of+recent+clinical+evidence.">The role and timing of early decompression for cervical spinal cord injury: update with a review of recent clinical evidence.</a> Injury. 36, 13-26 (2005).</li><li>Yang, L., Jones, N. R., Stoodley, M. A., Blumbergs, P. C., Brown, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitotoxic+model+of+post-traumatic+syringomyelia+in+the+rat.">Excitotoxic model of post-traumatic syringomyelia in the rat.</a> Spine. 26, 1842-1849 (2001).</li><li>Rolls, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+faces+of+chondroitin+sulfate+proteoglycan+in+spinal+cord+repair:+a+role+in+microglia/macrophage+activation.">Two faces of chondroitin sulfate proteoglycan in spinal cord repair: a role in microglia/macrophage activation.</a> PLoS Medicine. 5, 1262-1277 (2008).</li><li>Properzi, F., Asher, R. A., Fawcett, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroitin+sulphate+proteoglycans+in+the+central+nervous+system:+changes+and+synthesis+after+injury.">Chondroitin sulphate proteoglycans in the central nervous system: changes and synthesis after injury.</a> Biochemical Society Transactions. 31, 335-336 (2003).</li><li>Fawcett, J. W., Asher, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glial+scar+and+central+nervous+system+repair.">The glial scar and central nervous system repair.</a> Brain Research Bulletin. 49, 377-391 (1999).</li><li>Yang, Z., Mo, L., Duan, H., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chitosan/collagen+substrates+on+the+behavior+of+rat+neural+stem+cells.">Effects of chitosan/collagen substrates on the behavior of rat neural stem cells.</a> Science China Life Sciences. 53, 215-222 (2010).</li><li>Chawla, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Fibrous Materials. , (1998).</li><li>Pickering, K. L., Aruan Efendy, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+recent+developments+in+natural+fibre+composites+and+their+mechanical+performance.">A review of recent developments in natural fibre composites and their mechanical performance.</a> Composites Part A-Applied Science and Manufacturing. 83, 98-112 (2016).</li><li>Lundgren, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+fibers+made+from+proteins.">Synthetic fibers made from proteins.</a> Advances in Protein Chemistry. 5, 305-351 (1954).</li><li>Radishevskii, M. B., Serkov, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coagulation+mechanism+in+wet+spinning+of+fibres.">Coagulation mechanism in wet spinning of fibres.</a> Fibre Chemistry. 37, 266-271 (2005).</li><li>Yannas, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collagen+and+gelatin+in+the+solid+state.">Collagen and gelatin in the solid state.</a> Journal of Macromolecular Science Part C Polymer Reviews. 7, 49-106 (1972).</li><li>Baer, E., Cassidy, J. J., Hiltner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+structure+of+collagen+composite+Systems:+lessons+from+biology.">Hierarchical structure of collagen composite Systems: lessons from biology.</a> Pure and Applied Chemistry. 6, 961-973 (2009).</li><li>Harrington, W. F., Von Hippel, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+structure+of+collagen+and+gelatin.">The structure of collagen and gelatin.</a> Advances in Protein Chemistry. 16, 1-138 (1961).</li><li>Veis, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Macromolecular Chemistry of Gelatin. , (1994).</li><li>Freyman, T. M., Yannas, I. V., Gibson, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+materials+as+porous+scaffolds+for+tissue+engineering.">Cellular materials as porous scaffolds for tissue engineering.</a> Progress in Materials Science. 46, 273-282 (2001).</li><li>Michalczyk, K., Ziman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nestin+structure+and+predicted+function+in+cellular+cytoskeletal+organization.">Nestin structure and predicted function in cellular cytoskeletal organization.</a> Histology and Histopathology. 20, 665-671 (2005).</li></ol>

Vi presenterade utvecklingen av gelatin-baserade biomaterial med hjälp av en enkel våt spinning teknik som kan tillämpas i studien av naturliga polymerer för vävnadsregeneration. Detta arbete visade möjligheten att gelatin tillverkning som en bra proteinkälla utan tillsats av andra källor, i syfte att optimera egenskaperna för gelatin själv. Utvecklingen av gelatin-baserade biomaterial genomfördes helt i rumstemperatur (22-26 ° C). En skonsam lösning beredning är ett kritiskt steg i protokollet, som är att...

Den senaste utvecklingen i vävnadsregenerering innebär att tillämpningen av vävnadsteknik, som utgör en utmaning för förbättring av nya terapeutiska strategier i medicinska behandlingar. Till exempel utgör begränsad potential av nervsystemet regenerering, följande skada eller sjukdom, ett betydande hälsoproblem över hela världen. På grund av komplexiteten i patofysiologiska processer som är associerade med nervsystemet, användning av traditionella autograft eller genomförandet av stabilisering kirurgi har visat sig erbjuda fördelar i funktionella resultat, men det finns inga starka bevis för effekterna av spinal fixering kirurgi1,2. Vävnaden på det skadade området är förlorat och ersättas med hypertrophically inducerad astrocyter3, så småningom bilda en tät gliaceller ärr4,5. Denna matris fungerar som en barriär att block återvinning av nerv funktion6,7 och är således avsevärt hindrar regenerering. Därför lämpligt gap fyllnadsmaterial förväntas förhindra förlust av vävnad och minska bildningen av ärr-associerade bindväv genom att upprätthålla integriteten i det skadade området, samt genom att ge direkt ersättning av neurala celler och kretsar att främja axon regenerering.
Polymera biomaterial har föredragits som ställningar för vävnad förnyelse terapi, baserat på regleringen av cell eller axon beteende och vävnad progression genom naturliga extracellulär matrix (ECM) stöd. Formatet fiber anses vanligen som en byggsten för olika material, på grund av dess endimensionella struktur8. Fibrerna kan i allmänhet erhållas genom smälta extrudering eller våt spinning metod; men är storleken och kostnaden för utrustningen och det är svårighet att utföra dessa metoder utmanande. Dessutom har majoriteten av det arbete som relaterade till polymer fibrer fokuserat på syntetiska eller komposit material. Naturliga polymerer som en källa av biomaterial erbjuda bättre biokompatibilitet egenskaper för den mänskliga kroppen. Är dock relativt svårare än av syntetisk polymer källor9för att få anpassningen av naturlig polymer fibrer. Omvandling av en naturlig polymer som en rik källa av protein till biomaterial fibrer är därför en viktig strategi — inte bara kan biomaterial fibrerna vara direkt isolerad från råvaran, därmed undvika en onödig omvandling till monomerer, men den protein fibrer har också en bra utseende och goda egenskaper10.
I detta sammanhang beskriver vi en billig bearbetningsmetod för tillverkning av naturlig polymer fibrer genom grundläggande begreppet våta spinning, som kan genomföras på laboratorieskala för vävnadsteknik. Våta spinning utförs av extrudering och koagulering av en polymer lösning till en lämplig polymer nonsolvent. En lämplig, viskös lösning dopade till koagulering medium orsakar polymermolekylerna att upplösa. Genom fas övergången, filament sedan förlora deras löslighet och fälls ut i form av en fast polymer fas11. Hänvisning till detta begrepp, utökade vi sedan utvecklingen av gelatin till formuläret tube av en molding process, som anses lämplig för vävnad förnyelse program. Dessutom intimt, kan vi också utveckla någon form av material från gelatin fibrer (t.ex. gelatin conduit rullas upp från flera gelatin fibrer), för andra önskat program.
Gelatin, en biologiskt nedbrytbar naturlig polymer, bildas från denaturerad och hydrolyserat kollagen, inklusive alla semicrystalline, amorft eller trippel spiralformade tillstånd av kollagen12. Det är väl känt att kollagen är det väsentliga strukturella proteinet i alla bindväv ryggradsdjur och ryggradslösa djur13,14, som liknar proteinstruktur huvudsakliga ECM som inducerar nerv tillväxt och, samtidigt, ersätter en stor mängd glykosaminoglykan utsöndras under ryggmärgsskador. Därför, användningen av gelatin som en källa skulle vara ett utmärkt val för alla medicinska fordon. Förutom att vara en billig källa, gelatin är också biologiskt nedbrytbara och cytocompatible och kliniskt visat sig vara en temporär defekt filler15. Utvecklats till en tub form, Visa in vitro- och in vivo tester som beskrivs här att gelatin har en utmärkt biokompatibilitet och lämplighet för framtida vävnad tekniska tillämpningar. Odlade med mänskliga fett stamceller, gelatin rör förbättra celldifferentiering i neurala stamceller med positiva nestin färgning som neurala cell markör. Dessutom förväntas gelatin som gap fyllnadsmaterial, som produceras av den metod som fastställts i denna studie vara lätthanterligt och säkert och till stor nytta för vävnad ingenjörer som utvecklar för närvarande korrelat naturliga polymerer för förstärkningen av vävnad strategier för förnyelse.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Solution preparation:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin type B (porcine)</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 10733</td>
			<td>500 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wet spinning process:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>Model M312</td>
			<td>Minipuls*3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic tube connector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14011</td>
			<td>1 box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>Sterican</td>
			<td>5A06258541</td>
			<td>26Gx1/2&#34;(0.45 x 12mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00010</td>
			<td>2.5 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycaprolactone CAPA 6500</td>
			<td>Perstorp</td>
			<td>24980-41-4</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane&#160;</td>
			<td>Scharlau</td>
			<td>CL03421000</td>
			<td>1 L vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pasteur pipette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-678-20A</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (Introcan Certo)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>1B03258241</td>
			<td>24Gx3/4&#34;(0.7 x 19mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Morphology of the gelatin tube:</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion sputter coater machine&#160;</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>e1010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning electron microscopy</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>S-3000N</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cultivation of cells on the gelatin tube:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>488625</td>
			<td>100 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>923119</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31600-034</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Keratinocyte-SFM medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10744-019</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T25 culture flask</td>
			<td>TPP</td>
			<td>90025</td>
			<td>VENT type</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>1209938</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immunocytochemistry:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospate-buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>654471</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid glacial</td>
			<td>Ferak</td>
			<td>Art. -Nr. 00697</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40 surfactant (Tergitol solution)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>056K0151</td>
			<td>500 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal goat serum</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>S-1000-20</td>
			<td>20 mL vial, concentrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-23927</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-mouse-fluorescein isothiocyanate (secondary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>SC-2099</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td>Anaspec</td>
			<td>AS-83218</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vivo biocompatibility test:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tiletamine+zolazepam&#160;</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>BC91</td>
			<td>5 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer korea</td>
			<td>KR03227</td>
			<td>10 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen</td>
			<td>Astar</td>
			<td>1406232</td>
			<td>2 mL vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine solution</td>
			<td>Everstar</td>
			<td>HA161202</td>
			<td>4 L barrel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>China Chemical &#38; Pharmaceutical</td>
			<td>18P909</td>
			<td>1 g vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissor</td>
			<td>Shinetec instruments</td>
			<td>ST-B021</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

wet-spinning-based molding process of gelatin for tissue regeneration

Denna artikel presenterar en billig metod för att fabricera gelatin, som en naturlig polymer, i monofilament fibrer eller annan lämplig form. Genom den våta spinning metod, tillverkas gelatin fibrer av slät extrudering i en lämplig koagulering medium. För att öka den funktionella ytan av dessa gelatin fibrer och deras förmåga att härma funktionerna i vävnader, kan gelatin formas i en tub form genom att hänvisa till detta begrepp. Granskas av in vitro- och in vivo tester, visar gelatin rören stor potential för tillämpning i vävnadsteknik. Egenskap av lämplig lucka fyllnadsmaterial, gelatin rör kan användas för att ersätta vävnaden i det skadade området (t.ex. i nervös eller kardiovaskulära systemet), samt för att främja regenerering genom att tillhandahålla en direkt ersättning av stamceller och neurala kretsar. Detta protokoll innehåller detaljerade anvisningar för att skapa ett biomaterial baserat på en naturlig polymer, och dess genomförande förväntas till stor nytta för utvecklingen av korrelat naturliga polymerer, som bidra till att förverkliga strategier för regenerering av vävnad.

I denna studie utvecklade vi framgångsrikt gelatin i fibrerna (figur 2A) och rör (figur 2B, C) genom användarvänlig våt spinning konceptet. Dessa gelatin-baserade material kan utnyttjas som någon medicinsk verktyg, beroende på deras former. Med tanke på att funktionell yta och ram av sådana material är mer lämplig för vävnadsregeneration, undersökte vi biokompatibiliteten av gelatin...

Watch this Scientific Journal Video about Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration at JoVE.com

Wet-spinning-based Molding Process of Gelatin for Tissue Regeneration

Vi utvecklade och beskriva ett protokoll baserat på begreppet våta spinning, för byggandet av gelatin-baserade biomaterial som används för tillämpningen av vävnadsteknik.

Våt-spinning-baserade gjutprocessen av Gelatin för vävnadsregeneration

This article presents an inexpensive method to fabricate gelatin, as a natural polymer, into monofilament fibers or other appropriate forms. Through the ...

Detta protokoll förbättrar ett grundläggande koncept av våt-spinning att utveckla ett material från en enda fiber band i olika remsor som kan användas för alla föredragna medicinsk ansökan. Denna teknik är enkel, billig, och kräver inte tillsats av syntetiska polymerer för anpassning av de naturliga polymerer i en resurs av protein för material av intresse. Denna teknik kan utvidgas till biomaterial utveckling för att döda kall terapi såsom centrala eller perifera nervsystemet behandling, blodkärl ersättning, eller direkt urinvägarna återuppbyggnad.Denna metod är avsedd för medicinsk tillämpning inklusive som en strategi för vävnad neuralisering eller regenerativ medicin. Denna teknik kan enkelt genomföras av nybörjare. Observera att efter flera formning upprepningar, kvaliteten på lösningen bör alltid kontrolleras för att upprätthålla en optimal formation.För att bilda den våta spinnröret, först dränka en 24 gauge med tre kvarts tum perifer venkateter i nyberedda gelatin lösning i tre sekunder, följt av nedsänkning i nyberedda aceton lösning för en minut. Upprepa dessa steg 20 gånger. Efter den sista aceton nedsänkning, låt gjuten röret torka i fem minuter vid rumstemperatur, och använda en hemostat att försiktigt överföra gelatin röret från katetern i ett glas Pasteur pipetter med 2,5%polycaprolone dichlorometan lösning för en övernattning under-huva inkubation vid rumstemperatur.Nästa morgon, sterilisera gelatinet i två timmar under ultraviolett ljus innan kort nedsänkt röret i 75%etanol. Tvätta sedan röret två gånger med stamcellsmedium för att avlägsna restanolen. För att odla gelatinröret med cellkulturen, ersätta supinate slutet av mänskliga fettceller från en odlingskolv med en milliliter på 0,25%Trypsin-EDTA för en 3,5 minuters inkubation vid 37 grader Celsius och 5%koldioxid.När cellerna har lossnat, arrestera reaktionen med en milliliter av fetala nötkreatur serum och överföra cell suspensionen i en microcentrifug röret. Samla in cellerna genom centrifugeringen och resuspend pelleten i en milliliter av stamcellsmedium. Placera sedan gelatinröret i en brunn av en sex-brunnsplatta som innehåller tre milliliter stamcellsmedium.Efter att ha räknat cellerna, frö fyra gånger 10 till den fjärde av mänskliga fettceller i röret för en två veckors inkubation i cellkulturen inkubatorn. Efter att ha bekräftat lämplig nivå av sedering genom bristande svar på tå nypa i en hona åtta veckor gamla Sprague Dawley råtta, raka håret från trapezius området och sterilisera den exponerade huden med povidone-jod lösning. Täck råttan med sterila kirurgiska draperier för att minska den bakteriella kontamineringen av operationsstället och använd kirurgisk sax för att göra ett grunt, två centimeter långt hudangrepp.Placera gelatinröret direkt i lagret mellan fascian och muskeln och använd en sutur i nylon för att stänga såret. Sterilisera sedan snittet med povidone-jodlösning. Framkalla råttan via en intramuskulär injektion av ketoprofen och cefazolin och underhåll djuret under aseptiska förhållanden i sju dagar.Detta användarvänliga våtspinnkoncept kan användas för att utveckla gelatin till fibrer och rör. Morfologiska observationer av gelatinröret genom att skanna elektronmikroskopi avslöjar en inte särskilt slät yta med en större än 200 mikrometer innerdiameter och en tjocklek på cirka 20 mikrometer. Färgning av en mänsklig adipose stamcellskultur gelatin röret för neurala cell markör uttryck visar en positiv färgning för markören tillsammans med flera upptäckta kärnor tyder på att cellerna kan tränga in och följa gelatin röret och differentiera till neurala stamceller.Implantation av gelatinröret i fasciaskiktet bekräftar dess säkerhet och biokompatibilitet, eftersom ingen indikation på rodnad, svullnad eller andra inflammationssymtom observeras inom den lokala vävnaden och röret omges av välutvecklad bindväv. Samtidigt försöker detta förfarande av två punkt ett, säkerställa nedsänkning av formen i den specifika beläggningstiden i varje lösning är mycket viktigt att bygga upp en exakt rörform. Efter detta förfarande, våra experiment använder djurmodell av mänskliga sjukdomar kan utföras för att noggrant undersöka resultatet av biomaterial för vävnad regenerering strategi.Efter dess utveckling banade denna teknik vägen för forskare att utveckla enkla korrelativa naturpolymerer till någon typ av material för en bestämd medicinsk tillämpning. Under normal användning skick, den polycaprolactone dichlormetan lösningen anses presentera minimal miljöfara, men glöm inte att utföra några steg med denna kemikalie i en lämplig biosäkerhet skåp.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Use of Human Perivascular Stem Cells for Bone Regeneration

Användning av mänskliga perivaskulär stamceller för benuppbyggnad

Human perivascular stem cells (PSCs) can be isolated in sufficient numbers from multiple tissues for purposes of skeletal tissue engineering1-3. PSCs are ...

Expression, Isolation, and Purification of Soluble and Insoluble Biotinylated Proteins for Nerve Tissue Regeneration

Expression, isolering och rening av lösliga och olösliga Biotinylerade Proteiner för Nerve Tissue Regeneration

Recombinant protein engineering has utilized Escherichia coli (E. coli) expression systems for nearly 4 decades, and today E. coli is still the most ...

Rapid and Low-cost Prototyping of Medical Devices Using 3D Printed Molds for Liquid Injection Molding

Snabb och billig Prototyping för medicintekniska produkter Använda 3D Tryckt Formar för Liquid Injection Molding

Biologically inert elastomers such as silicone are favorable materials for medical device fabrication, but forming and curing these elastomers using ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Ingenjörs 3D Cellularized kollagengeler för kärlvävnad Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Adapting the Electrospinning Process to Provide Three Unique Environments for a Tri-layered In Vitro Model of the Airway Wall

Anpassning av Electro processen med att ge tre unika miljöer för en Tri-lager<em&gt; In Vitro</em&gt; Modell av Airway Wall

Electrospinning is a highly adaptable method producing porous 3D fibrous scaffolds that can be exploited in in vitro cell culture. Alterations to ...

Qualitative Characterization of the Aqueous Fraction from Hydrothermal Liquefaction of Algae Using 2D Gas Chromatography with Time-of-flight Mass Spectrometry

Kvalitativ karakterisering av den vattenhaltiga fraktionen från Hydrothermal Förvätskning av Alger Använda 2D gaskromatografi med Time-of-flight-masspektrometri

Two-dimensional gas chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry is a powerful tool for identifying and quantifying chemical components in ...

Alternating Magnetic Field-Responsive Hybrid Gelatin Microgels for Controlled Drug Release

Alternerande magnetfält-Responsive Hybrid Gelatin Mikrogeler för kontrollerad läkemedelsdosering

Magnetically-responsive nano/micro-engineered biomaterials that enable a tightly controlled, on-demand drug delivery have been developed as new types of ...

A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries

En parkopplad pärla och Magnet matris för gjutning mikrobrunnar med variabel konkav geometrier

A spheroid culture is a useful tool for understanding cellular behavior in that it provides an in vivo-like three-dimensional environment. Various ...

Three-dimensional Tissue Engineered Aligned Astrocyte Networks to Recapitulate Developmental Mechanisms and Facilitate Nervous System Regeneration

Tredimensionella vävnadstekniska justerad Astrocyten nätverk att Recapitulate utvecklingsmässiga mekanismer och underlätta nervsystemet regenerering

Neurotrauma and neurodegenerative disease often result in lasting neurological deficits due to the limited capacity of the central nervous system (CNS) to ...

Novel Process for 3D Printing Decellularized Matrices

Romanen processen för 3D utskrift cell-lösa matriser

3D bioprinting aims to create custom scaffolds that are biologically active and accommodate the desired size and geometry. A thermoplastic backbone can ...