Name: preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits
Uploaded: 2019-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

ويعرب المؤلفون عن امتنانهم للتمويل من خلال برنامج البحوث الموجهة التابع لوزارة الدفاع. W81XWH-16-1-0582) إلى ABB و RS. ويعترف المؤلفون أيضا بالتمويل من خلال جمعيه القلب الامريكيه (17IRG33410888) ، ووزارة الدفاع CDMRP (W81XWH-16-1-0580) والمعاهد الوطنية للصحة (1R21EB023551-01 ؛ 1R21EB023551-01A1 ؛ 1R21EB023551-01) إلى ABB.

أجريت الدراسات المتعلقة بالماشية بموافقه جامعه تكساس في أوستن ومركز أوثيالث للعلوم في اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الماشية في هيوستن (IACUC) ، ومكتب استعراض الرعاية الحيوانية والاستخدام التابع لجيش الولايات المتحدة البحوث الطبية والعتاد القيادة مكتب حماية البحوث ، ووفقا للمبادئ التوج...

لقد قدمنا نموذجا قبل السريرية للحث علي نقص ترويه الأطراف الخلفية في الأرانب مع مرض السكري والدهون. في العديد من الدراسات ، هناك غموض في التقنية المستخدمة لخلق نقص ترويه الأطراف الخلفية في الأرانب. في الفئران ، وشده والانتعاش من نقص التروية الأطراف الخلفية تعتمد إلى حد كبير علي موقع ربط وت?...

مرض الشرايين المحيطي (PAD) هو اضطراب الجهاز العصبي المشترك الذي يؤدي تطور تشكيل البلاك تصلب الشرايين إلى تضييق الاوعيه الدموية في أطراف الجسم. الزيادة الاخيره في عوامل الخطر لتصلب الشرايين, بما في ذلك مرض السكري, السمنة, والخمول, وقد ادي إلى زيادة انتشار امراض الاوعيه الدموية1. حاليا, ويقدر ان 12% – 20% من السكان عموما أكثر من 60 سنوات من العمر لديه مرض الشرايين المحيطيه2. ومن النتائج الرئيسية للمرض الشرياني المحيطي هو تطور نقص التروية المحيطي ، الأكثر شيوعا في الأطراف السفلية. في الحالات الشديدة ، يمكن للمرضي تطوير نقص ترويه الأطراف الحرجة ، وهي الحالة التي يوجد فيها الم مستمر بسبب عدم تدفق الدم. المرضي الذين يعانون من نقص ترويه الأطراف الحرجة لديهم احتمال 50 ٪ من وجود طرف واحد بتر في غضون سنه واحده من التشخيص. وعلاوة علي ذلك ، المرضي الذين يعانون من مرض السكري لديهم نسبه اعلي من امراض الشرايين المحيطيه والنتائج الأكثر فقرا بعد التدخلات لعلاج التقطير3،4. تشمل العلاجات الحالية للاقفار المحيطي التدخلات عن بعد مثل استئصال التصلب والدعامات أو المجازة الجراحية. ومع ذلك ، بالنسبة لكثير من المرضي هذه العلاجات فقط توفر فوائد قصيرة الأجل والعديد منها ليست صحية بما فيه الكفاية للإجراءات الجراحية الرئيسية. في هذا العمل ، ونحن وصف نموذج الحيوانية قبل السريرية لاختبار العلاجات الجديدة التي تستهدف امراض الاوعيه الدموية الطرفية التي تتضمن توليد نقص التروية الطرفية في الأرانب من خلال ربط الجراحية في سياق حاله مرض السكري.
وقد استخدم نموذج نقص التروية الأطراف الخلفية في الأرانب كنموذج الفسيولوجية لمرض الاوعيه الدموية الانسدادي والسلائف قبل السريرية للدراسات البشرية لأكثر من نصف قرن5,6. الأرانب غالبا ما تكون الأنواع المفضلة للدراسات علي الاسكيميه الطرفية بسبب العضلات المتقدمة للعضلات الكاحل والعجل ، علي النقيض من النماذج الحيوانية الكبيرة الشائعة التي هي حوافر (الماشية مع حوافر). وقد تناولت العديد من الاستعراضات الاخيره استخدام هذا النموذج وغيرها في نمذجة مرض الاوعيه الدموية الطرفية في البشر7,8. واستخدمت نماذج مماثله باستخدام نقص ترويه الأطراف الخلفية في الأرانب في الدراسات قبل السريرية لعوامل النمو9 ،10،11،12،13،14، 15،16،17،18،19،20، العلاج الجيني21،22،23، 24،25،26،27،28،29،30،31،32، 33،34،35،36،37،38،39،40،41، 42،43،44، والخلايا الجذعية45،46، 47 ، 48 ،49،50 ،51لعلاج الاوعيه الدموية العلاجية في الأطراف. للأسف, التجارب السريرية التي تلت هذه الدراسات الحيوانية الناجحة لم تظهر فوائد كبيره للمرضي52.
أحد التفسيرات المقترحة للسبب في هذا الفشل الانتقالي هو ان حاله الاسكيميه الطرفية في المرضي البشرية هي واحده التي تشمل مقاومه للإشارات الوعائية53،54،55، 56 , 57 , 58 , 59وقد أظهرت العديد من الدراسات وجود عيوب في مسارات الإشارات الوعائية في مرض السكري وارتفاع السكر في الاوعيه. السكري والدهون يؤدي إلى فقدان هيباران كبريتات بروتينيه وزيادة في الانزيمات التي قطع هيباران كبريتات ، وتقديم اليه محتمله للمقاومة لتولد الاوعيه العلاجية/الشرايين مع عوامل النمو60 , 61. التالي ، يجب ان تتضمن السمة الرئيسية لنموذج للاقفار المحيطي جانبا من المقاومة العلاجية بحيث يمكن تقييم العلاجات في سياق حاله المرض الموجودة في المرضي البشريين.
في هذا العمل ، ونحن وصف نموذج أرنب من نقص التروية الطرفية من خلال ربط الجراحية من الشرايين الفخذية. يتم تضمين الرصاص في الفترة مع التحريض من مرض السكري وفرط الدهون في النموذج. قارننا هذا النموذج إلى نموذج آخر يتضمن نظام غذائي اعلي من الدهون دون مرض السكري ، ووجدت ان النموذج مع مرض السكري وانخفاض مستوي فرط الدهون كان أكثر فعاليه في الحد من نمو الاوعيه الدموية. نموذجنا يجمع بين التطورات التي تم استخدامها من قبل مجموعات منفصلة ، بهدف توفير طريقه عمليه وموحده لتحقيق نتائج متسقة في البحوث المتعلقة بامراض الاوعيه الدموية المحيطيه.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1537468 / 1531434</td>
			<td>250 mL bag / 1000 mL irrigation btl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309695</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>23-245684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-800-9689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>VEDC207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxalone</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-891-6051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1471-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alloxan Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Equipment</td>
			<td>Toshiba</td>
			<td>Infinix-i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Injector</td>
			<td>Medrad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ab Alexa 594</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit Ab Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-SMA Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril</td>
			<td>Bayer Animal Health</td>
			<td>724089904201</td>
			<td>Enrofloxacin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Chemistry Panel</td>
			<td>IDEXX</td>
			<td>2616</td>
			<td>Rabbit Panel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Cuff</td>
			<td>WelchAllyn</td>
			<td></td>
			<td>Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Monitor</td>
			<td>Vmed Technology</td>
			<td></td>
			<td>Vmed Vet-Dop2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>6023287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>42023017905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Sulfate</td>
			<td>CB Minerals</td>
			<td></td>
			<td>Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Scrub</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-4598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>C298-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear Vein Catheter</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>SR-OX165</td>
			<td>Surflo IV catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal tube</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001A67WH2</td>
			<td>Accu-Chek Aviva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer Test Strips</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>788222</td>
			<td>Accu-Chek Aviva Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guidewire</td>
			<td>Boston Scientific</td>
			<td>39122-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000CQZI3Q</td>
			<td>Oster #40 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Cincinnati Subzero</td>
			<td>273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td>Gaymar T/Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td>Curved Mosquito Hemostat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insertion Tool</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>MAP550</td>
			<td>metal wire insertion tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>HPB Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Novalin R &#38; Novalin N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>942674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G28954</td>
			<td>3F Check Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1100734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>856440301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringers</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>239936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine/Prilocaine cream</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>761240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligaloop</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH117 / CH116</td>
			<td>White Mini / Yellow Mini</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mazola Corn Oil</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B0049IIVCI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medrad Syringe</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>346920</td>
			<td>150 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal ball sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>K891H</td>
			<td>4-0 silk C-1 30&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14019-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1215470</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitroglycerin</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>927528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECAM Antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-562</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Pump</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pigtail Catheter</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>1310-21-0053</td>
			<td>3F pigtail</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129271</td>
			<td>4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129031</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>Butler</td>
			<td>7233-41</td>
			<td>3-0 taper RB-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>104373</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Chow (Alfalfa)</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>5321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Restrainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10718-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Cutters</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>#15 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>A183H</td>
			<td>4-0 silk ties 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ball</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1598K23</td>
			<td>3-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drapes</td>
			<td>Gepco</td>
			<td>8204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Versaflow VF-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visipaque contrast media</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>509055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlaner Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17012-13</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits

مرض الاوعيه الدموية الطرفية هو مشكله سريريه واسعه النطاق التي تؤثر علي الملايين من المرضي في جميع انحاء العالم. ومن النتائج الرئيسية لمرض الاوعيه الدموية المحيطيه هو تطور نقص التروية. في الحالات الشديدة ، يمكن للمرضي تطوير نقص التروية الحرجة في الأطراف التي يعانون من الم مستمر وزيادة خطر بتر الأطراف. تشمل العلاجات الحالية للاقفار المحيطي جراحه المجازة أو التدخلات عن بعد مثل راب الاوعيه الدموية مع الدعامات أو استئصال الشرايين لاستعاده تدفق الدم. ومع ذلك ، فان هذه العلاجات غالبا ما تفشل في استمرار تطور امراض الاوعيه الدموية أو ريسينسيس أو يتم بطلان بسبب سوء الصحة العامة للمريض. نهج المحتملة الواعدة لعلاج نقص التروية الطرفية ينطوي علي استقراء العلاج الدوائي للسماح للمريض لتطوير الاوعيه الدموية التبعي. هذه الشبكة التي شكلت حديثا يخفف نقص التروية الطرفية عن طريق استعاده الانصهار إلى المنطقة المصابة. يستخدم النموذج قبل السريرية الأكثر شيوعا لنقص التروية المحيطي إنشاء نقص ترويه الأطراف الخلفية في الأرانب الصحية من خلال ربط الشريان الفخذي. في الماضي ، ومع ذلك ، كان هناك انقطاع قوي بين نجاح الدراسات قبل السريرية وفشل التجارب السريرية فيما يتعلق بعلاجات الاسكيميه الطرفية. الحيوانية الصحية عاده ما يكون التجدد الوعائي قويه استجابه لنقص التروية المستحثة جراحيا, علي النقيض من انخفاض الاوعيه الدموية والتجدد في المرضي الذين يعانون من الاسكيميه الطرفية المزمنة. هنا ، ونحن وصف نموذج الحيوانية الأمثل للاقفار المحيطي في الأرانب التي تشمل فرط الدهون ومرض السكري. وقد خفض هذا النموذج تشكيل الضمانات والانتعاش ضغط الدم بالمقارنة مع نموذج مع اتباع نظام غذائي اعلي الكولسترول. التالي ، قد يوفر النموذج ارتباطا أفضل مع المرضي البشريين الذين يعانون من تولد الاوعيه الخطرة من الاعتلالات المشتركة التي تصاحب امراض الاوعيه الدموية الطرفية.

بعد التحريض علي مرض السكري والبدء في النظام الغذائي الكولسترول 0.1 ٪ ، وكان الكولسترول الكلي للأرانب مع السكري والكولسترول النظام الغذائي 123.3 ± 35.1 mg/dL (ن = 6 الأرانب الذكور) متوسط النقاط الزمنيه الاجماليه والأرانب. وكان مستوي BGL لهذه الأرانب 248.3 ± 50.4 mg/dL (ن = 6 الأرانب الذكور). ي?...

Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

ونحن وصف العملية الجراحية المستخدمة للحث علي نقص التروية المحيطي في الأرانب مع فرط الدهون ومرض السكري. هذه الجراحة بمثابه نموذج قبل السريرية للظروف التي تعاني منها في مرض الشريان المحيطي في المرضي. ويوصف أيضا تصوير الاوعيه كوسيلة لقياس مدي نقص التروية المقدمة والانتعاش من الانصهار.

نموذج قبل السريرية من نقص التروية الأطراف هند في الأرانب السكري

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

ومن شأن العلاج التجديدي لمرض الشرايين الطرفية أن تكون مفيدة للغاية وهذا النموذج الحيواني قد تكون قادرة على اختبار أفضل ما إذا كانت العلاجات التجريبية يمكن أن تعمل في المرضى الإنسان. ويهدف الإجراء لدينا إلى طرح نموذج محسن. واحد أن يكرر بدقة أكثر المقاومة العلاجية التي تواجهها في المرضى الذين يعانون من مرض السكري أو فرط الدهون.يمكن استخدام هذا النموذج الحيواني لاختبار علاجات جديدة لاقفوية المحيطية ويوفر نموذج ما قبل السريرية التي قد عرضت للخطر neovascularization لاقفوية. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة مخلب هند في تخدير أربعة إلى ستة أشهر من العمر الأرانب السكري وفرطlipidemic، واستخدام مشرط مع شفرة رقم 15 لجعل شق طويل من أربعة إلى خمسة سنتيمترات فقط الجانبية إلى الجانب الأيمن من القصبة الهوائية واستخدام تشريح حادة لفضح الشريان السباتي المشترك الصحيح. استخدم واسحب Weitlaner الصغيرة لفتح الشق وعزل الشريان السباتي بعناية من الوريد الوداجي والعصب المبهم.عندما يكون الشريان السباتي قد انفصل تماما عن العصب والوريد الوداجي، وضع خياطة الحرير 4-O في نهايات القريبة وصاف من الشريان المكشوف وربطة عنق قبالة نهاية فص من السباتي مع عقدة الجراح وأربعة عقدة مربعة. على الطرف القريب، استخدم ربطة عنق سيليكون الأوعية الدموية للسماح لتشدّد أو تخفيف الوعاء، حسب الحاجة. بعد ذلك، تطبيق ما يقرب من 0.5 ملليلتر من 1٪ ليدوكاين على طول الشريان السباتي المكشوفة والأعصاب لتعزيز توسع الأوعية والحد من تهيج الأعصاب.إدارة 500 وحدة دولية من heparin IV.Place أداة إدخال سلك أربعة بوصة في الشريان. تغذية 0.014 بوصة من قبل 185 سم دليل من خلال أداة الإدراج إلى التشعب الأبهري في قمة الحرقفي في الشريان الأورطي التنازلي، وتقدم ثلاثة قسطرة أنجيوغرافيا ذيل الخنزير الفرنسي على السلك. تقدم قسطرة ذيل الخنزير إلى سمين قريبين إلى التشعب الأبهري عند قمة الحرقف في الشريان الأورطي التنازلي ، ووضع طرف القسطرة بين الجزء القطني السابع والبظرية الأولى.اختبار موقع القسطرة عن طريق حقن يدويا 2-4 ملليلتر من عامل التباين. بمجرد تأكيد تحديد المواقع الصحيحة ، قم بإعطاء حقن داخل المفاصل من 100 ميكروغرام من النتروجليسرين من خلال القسطرة لزيادة توسع الأوعية. ثم إدارة 0.8 إلى ملليلتر واحد من 1٪ ليدوكاين من خلال القسطرة للمساعدة في توسع الأوعية وطرد القسطرة مع المالحة heparinized.إرفاق أنابيب لحقن أنجيوغرافيك الآلي إلى القسطرة، ويجري التأكد من إزالة أي الهواء من الخط. استخدم الحقن الآلي في الأوعية الدموية لتوصيل تسعة ملليلترات من متوسط التباين من خلال القسطرة بمعدل ثلاثة ملليلترات في الثانية، وإجراء تصوير الأوعية الرقمية للطرح بمعدل ستة إطارات في الثانية. حدد الصور التسلسلية وتغيير صورة تخطيط الأوعية باستخدام الإعداد ناقص 40٪ لتقليل مظهر العظام والتقاط صورة كاملة من تخبط السفينة مع النقيض.لعزل الشريان الفخذي، استخدم شفرة مشرط رقم 15 لإجراء شق جلدي طولي على الشريان الفخذي الأيمن، مع التأكد من أن الشق يمتد دون المستوى من الرباط الأربيني وينتهي في المنطقة القريبة من الرضفة. استخدم التشريح الحاد لفضح الشريان الفخذي وفتح الشق مع وراورس Weitlaner. تطبيق ما يقرب من 0.5 ملليلتر من 1٪ الليدوكائين محليا للحد من تهيج الأعصاب وتعزيز توسع الأوعية.مواصلة تشريح حادة من الأنسجة لتحرير طول الشريان الفخذي جنبا إلى جنب مع جميع فروعه، بما في ذلك شرسوفي السفلية، الفخذ العميق، محيط الجانبي والشرايين شرسوفية سطحية. تشريح على طول الشرايين الزهق والنافية، فضلا عن الشريان الحرقفي الخارجي، ترطيب المنطقة دوريا مع المالحة للحماية من تلف الأنسجة. قم بفصل الشريان الفخذي بعناية عن الوريد الفخذي والأعصاب ووضع خيطين حريريين من 4 إلى O على الشريان الفخذي مع مساحة كافية بين الغرز للسماح بانقطع الشريان.ثم استخدام مقص ميتزنباوم الصغيرة لقطع بين ربطات العنق من الشريان الرباط. استئصال الشريان الفخذي من حيث الشريان ينم عن ثنائية لتشكيل الشرايين الصافرة وpopliteal، والعمل بشكل قريب، ربط قبالة أي فروع جانبية لاستخراج بقية الشريان الفخذي إلى أسفل الشريان شرسوفي. لتكرار تصوير الأوعية، استخدم ورقة سيلاستيك مع كرة من الفولاذ المقاوم للصدأ مثبتة ثلاثة ملليمترات.لإرفاق الكرة الفولاذ المقاوم للصدأ في الجزء العلوي من العضلات رباعية مع 4-O خياطة الحرير. سحب الجلد على الكرة عندما يكون في مكان. إدارة حقن داخل المفاصل من 100 ميكروغرام من النتروجليسرين من خلال القسطرة لزيادة توسع الأوعية.إذا لزم الأمر، وإدارة آخر 0.8 إلى ملليلتر واحد من 1٪ ليدوكاين من خلال القسطرة للمساعدة في توسع الأوعية وتدفق مع المالحة heparinized. استخدم الحقن التلقائي في نفس الإعدادات لحقن تسعة ملليلترات أخرى من وسيط التباين. ثم قم بإجراء تصوير آخر للأوعية، كما هو موضح.في نهاية العملية، قم بإزالة القسطرة من الشريان الأيمن وربط الشريان باستخدام خياطة الحرير 4-O في مكانها حول الشريان. ثم أغلق الطبقات العضلية والخامتونية بـ 4-O بوليلوكسانون أو 3-O بوليجلاكاتين 910 خياطة على إبرة مفتق في نمط خياطة مستمر وإغلاق الجلد باستخدام 4-O بوليلوكسانون أو 4-O بوليجلاكاتين 910 خياطة على إبرة القطع العكسية في نمط خياطة تحت الجلد المستمر المدفون. في الحيوانات غير السكري، حتى مع ارتفاع نسبة الكوليسترول، هناك زيادة في انتعاش ضغط الدم في الطرف الإقفاري والأوعية الدموية في تصوير الأوعية في النقطة النهائية مقارنة مع الحيوانات السكري.من الناحية النسيجية ، لوحظت التغيرات في بنية العضلات بما يتفق مع الوذمة والضرر الإقفاري كفقدان أو اضطراب في ألياف العضلات. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدام الكبت المناعي لPECAM واحد وألفا العضلات الملساء actin لتحديد عدد وحجم الأوعية في أقسام الأنسجة. ويمكن إضافة أساليب التصوير الأخرى، مثل دوبلر الموجات فوق الصوتية، والتصوير دوبلر بالليزر، والتصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء، والتصوير بالرنين المغناطيسي لمزيد من الرصد لرضخ الطرف الإقفاري.مع هذا الدمج للمقاومة العلاجية، نموذجنا يحاكي بدقة أكبر نقص التروية في حالة المرض، مما يؤدي إلى التقدم في تقييم علاجات جديدة لمرض الشرايين المحيطية.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

نقل الجينات لقصور القلب الدماغية في نموذج ما قبل السريرية

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

التقييم الطولي للهند ماوس الاطراف فقدان العظام بعد اصابة النخاع الشوكي به الرواية ، في الجسم الحي ، منهجية

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

A معدلة غيري مكاني الخنازير هند أطرافهم نموذج زرع أوعية دموية لبالحركة المجمع زرع الطعم الخيفي (VCA) بحوث

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

وما قبل السريرية الفئران نموذج من الانبثاث الكبدي

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

مثلي هند الاطراف زرع في ماوس

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² and Tau Neuropathology

تقييم التناوب العفوي، التعرف على الكائن الرواية وتسلسل الأطراف في الماوس المعدلة وراثيا نماذج من اميلويد β وتاور الاعتلال العصبي

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

نموذج زراعة الأنسجة فيفو السابقين لمضاعفات فيبروفاسكولار في اعتلال الشبكية السكري التكاثري

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

تقييم تكوين الأوعية العلاجية في نموذج مورين من نقص التروية الخلفية

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

إنشاء نموذج العين الجافة الشديدة باستخدام استئصال الددريوادادينال الكامل في الأرانب

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

اتخاذ الخطوة التالية: تقويم العظام العصبية هند نموذج لزرع الأطراف لتعظيم الانتعاش الوظيفي في الفئران

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...