Name: preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits
Uploaded: 2019-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Forfatterne anerkender taknemmeligt finansiering gennem Department of Defense Congressionally instrueret Research program (DOD CDMRP; W81XWH-16-1-0582) til ABB og RS. Forfatterne anerkender også finansiering gennem American Heart Association (17IRG33410888), DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) og de nationale institutter for sundhed (1R21EB023551-01; 1R21EB024147-01A1; 1R01HL141761-01) til ABB.

Undersøgelser, der involverer dyr blev udført med godkendelse af University of Texas i Austin og UTHealth Science Center i Houston institutionel Animal Care og use Committee (IACUC), dyrepasning og brug Review Office (ACURO) af den amerikanske hær Medicinsk forskning og materiel kommando kontoret for forskning beskyttelse, og i overensstemmelse med NIH retningslinjer for dyrepasning.
1. induktion af diabetes og hyperlipidæmi
<ol><li>Overgang New Zealand kaniner (4 – 6 måneder gamle) f...

Vi har præsenteret en præklinisk model for inducerende bagekstremitet iskæmi i kaniner med diabetes og hyperlipidæmi. I mange undersøgelser, der er tvetydighed til den teknik, der anvendes til at skabe bagekstremitet iskæmi i kaniner. I mus, sværhedsgraden og nyttiggørelse fra bagekstremitet iskæmi er meget afhængig af placeringen af ligation og teknik, der anvendes til at inducere iskæmi. Betydningen af den teknik, der præsenteres i dette arbejde er, at det giver mulighed for konsekvent induktion af iskæmi,...

Perifer arteriel sygdom (PAD) er en fælles kredsløbssygdomme, hvor progression af aterosklerotisk plaque dannelse fører til en forsnævring af blodkar i lemmer af kroppen. Den nylige stigning i risikofaktorer for åreforkalkning, herunder diabetes, fedme, og inaktivitet, har ført til stigende prævalens af vaskulær sygdom1. I øjeblikket anslås det, at 12%-20% af den almindelige befolkning over 60 år har perifer arteriel sygdom2. En væsentlig konsekvens af perifer arteriel sygdom er udviklingen af perifer iskæmi, mest almindeligt forekommende i de nedre lemmer. I svære tilfælde, patienter kan udvikle kritisk ekstremitet iskæmi, en tilstand, hvor der er konstant smerte på grund af manglende blodgennemstrømning. Patienter med kritisk ekstremitet iskæmi har en 50% sandsynlighed for at have en lemmer amputeret inden for et år af diagnosen. Desuden har patienter med diabetes en højere incidens af perifer arteriel sygdom og dårligere resultater efter interventioner for revaskularisering3,4. Nuværende behandlinger for perifer iskæmi omfatter perkutane interventioner såsom atherektomi og stent eller kirurgisk bypass. Men, for mange patienter disse behandlinger kun giver kortsigtede fordele og mange er ikke sundt nok til større kirurgiske procedurer. I dette arbejde, beskriver vi en præklinisk dyremodel til afprøvning af nye behandlinger rettet mod Perifer vaskulær sygdom, der inkorporerer dannelsen af perifer iskæmi i kaniner gennem kirurgisk ligation i forbindelse med diabetisk sygdom tilstand.
Bagekstremiteten iskæmi model i kaniner har været anvendt som en fysiologisk model for obstruktiv vaskulær sygdom og prækliniske forløber for humane undersøgelser i over et halvt århundrede5,6. Kaniner er ofte en foretrukken art for undersøgelser af perifer iskæmi på grund af den udviklede muskulatur i anklen og kalve musklen, i modsætning til almindelige store dyremodeller, der er hovdyr (dyr med hove). Flere nylige anmeldelser har behandlet brugen af denne model og andre i modellering Perifer vaskulær sygdom hos mennesker7,8. Lignende modeller, der anvender bagekstremitetsiskæmi hos kaniner, blev anvendt i prækliniske studier af vækstfaktorer9,10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20, genterapi21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34,35,36,37,38,39,40,41, 42,43,44og stamceller45,46,47,48,49 , 50 ,51til terapeutisk neovascularisering i arme og ben. Desværre, de kliniske forsøg, der fulgte disse vellykkede dyreforsøg viste ikke betydelige fordele for patienter52.
En foreslået forklaring på årsagen til denne translationel fiasko er, at tilstanden af perifer iskæmi i humane patienter er en, der omfatter resistens over for angiogene signaler53,54,55, 56 af , 57 af , 58 af , 59. flere undersøgelser har vist defekter i angiogene signalering veje i diabetes og hyperglykæmi. Diabetes og hyperlipidæmi føre til et tab af dermatansulfat sulfat proteoglycaner og en stigning i enzymer, der skærer dermatansulfat sulfat, præsenterer en potentiel mekanisme for resistens over for terapeutisk angiogenese/arteriogenesis med vækstfaktorer60 , 61. et centralt element i en model for perifer iskæmi bør derfor omfatte et aspekt af terapeutisk resistens, således at terapier kan evalueres i forbindelse med den sygdomstilstand, der findes hos humane patienter.
I dette arbejde beskriver vi en kanin model af perifer iskæmi gennem kirurgisk ligation af femorale arterier. En bly-in periode med induktion af diabetes og hyperlipidæmi er indarbejdet i modellen. Vi sammenlignede denne model med en anden model, der inkorporerer en højere fedt diæt uden diabetes og fandt, at modellen med diabetes og lavere niveau af hyperlipidæmi var mere effektiv til at reducere blodkar vækst. Vores model kombinerer fremskridt, der er blevet brugt af separate grupper, med det formål at give en praktisk og standardiseret metode til at opnå konsistente resultater i Perifer vaskulær sygdom forskning.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1537468 / 1531434</td>
			<td>250 mL bag / 1000 mL irrigation btl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309695</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>23-245684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-800-9689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>VEDC207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxalone</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-891-6051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1471-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alloxan Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Equipment</td>
			<td>Toshiba</td>
			<td>Infinix-i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Injector</td>
			<td>Medrad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ab Alexa 594</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit Ab Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-SMA Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril</td>
			<td>Bayer Animal Health</td>
			<td>724089904201</td>
			<td>Enrofloxacin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Chemistry Panel</td>
			<td>IDEXX</td>
			<td>2616</td>
			<td>Rabbit Panel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Cuff</td>
			<td>WelchAllyn</td>
			<td></td>
			<td>Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Monitor</td>
			<td>Vmed Technology</td>
			<td></td>
			<td>Vmed Vet-Dop2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>6023287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>42023017905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Sulfate</td>
			<td>CB Minerals</td>
			<td></td>
			<td>Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Scrub</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-4598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>C298-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear Vein Catheter</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>SR-OX165</td>
			<td>Surflo IV catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal tube</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001A67WH2</td>
			<td>Accu-Chek Aviva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer Test Strips</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>788222</td>
			<td>Accu-Chek Aviva Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guidewire</td>
			<td>Boston Scientific</td>
			<td>39122-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000CQZI3Q</td>
			<td>Oster #40 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Cincinnati Subzero</td>
			<td>273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td>Gaymar T/Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td>Curved Mosquito Hemostat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insertion Tool</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>MAP550</td>
			<td>metal wire insertion tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>HPB Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Novalin R &#38; Novalin N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>942674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G28954</td>
			<td>3F Check Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1100734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>856440301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringers</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>239936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine/Prilocaine cream</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>761240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligaloop</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH117 / CH116</td>
			<td>White Mini / Yellow Mini</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mazola Corn Oil</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B0049IIVCI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medrad Syringe</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>346920</td>
			<td>150 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal ball sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>K891H</td>
			<td>4-0 silk C-1 30&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14019-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1215470</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitroglycerin</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>927528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECAM Antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-562</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Pump</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pigtail Catheter</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>1310-21-0053</td>
			<td>3F pigtail</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129271</td>
			<td>4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129031</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>Butler</td>
			<td>7233-41</td>
			<td>3-0 taper RB-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>104373</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Chow (Alfalfa)</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>5321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Restrainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10718-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Cutters</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>#15 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>A183H</td>
			<td>4-0 silk ties 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ball</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1598K23</td>
			<td>3-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drapes</td>
			<td>Gepco</td>
			<td>8204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Versaflow VF-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visipaque contrast media</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>509055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlaner Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17012-13</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits

Perifer vaskulær sygdom er et udbredt klinisk problem, der påvirker millioner af patienter over hele verden. En væsentlig konsekvens af Perifer vaskulær sygdom er udviklingen af iskæmi. I svære tilfælde, patienter kan udvikle kritisk ekstremitetiskæmi, hvor de oplever konstante smerter og en øget risiko for lemmer amputation. Nuværende behandlinger for perifer iskæmi omfatter bypass kirurgi eller perkutane interventioner såsom ballonudvidelse med stent eller atherektomi at genoprette blodgennemstrømningen. Men, disse behandlinger ofte undlader at den fortsatte progression af vaskulær sygdom eller restenose eller er kontraindiceret på grund af den samlede dårlige helbred af patienten. En lovende potentiel tilgang til behandling af perifer iskæmi indebærer induktion af terapeutisk neovaskularisering at give patienten mulighed for at udvikle sikkerhed vaskulatur. Dette nydannede netværk Linderer perifer iskæmi ved at genskabe perfusion til det berørte område. Den hyppigst anvendte prækliniske model for perifer iskæmi udnytter skabelsen af bagekstremitet iskæmi i raske kaniner gennem femoral arterie ligation. I fortiden, dog har der været en stærk afbrydelse mellem succes prækliniske undersøgelser og svigt af kliniske forsøg vedrørende behandlinger for perifer iskæmi. Sunde dyr har typisk robust vaskulær regenerering som reaktion på kirurgisk induceret iskæmi, i modsætning til den reducerede vaskularisering og regenerering hos patienter med kronisk perifer iskæmi. Her beskriver vi en optimeret dyremodel for perifer iskæmi i kaniner, der omfatter hyperlipidæmi og diabetes. Denne model har reduceret sikkerhed dannelse og blodtryk opsving i forhold til en model med en højere kolesterol kost. Således kan modellen give bedre korrelation med humane patienter med kompromitteret angiogenese fra de fælles co-morbiditeter, der ledsager Perifer vaskulær sygdom.

Efter induktion af diabetes og initiering af 0,1% kolesterol kost, det totale kolesterol for kaniner med diabetes og kolesterol kost var 123,3 ± 35,1 mg/dL (n = 6 hankaniner) gennemsnitlige samlede tidspunkter og kaniner. BGL-niveauet for disse kaniner var 248,3 ± 50,4 mg/dL (n = 6 hankaniner). Et tidsforløb for blodkemi og benblodtryks forhold i en typisk kanin er vist i figur 3 i forhold til kaniner under en højere kolesterol diæt (1% kolesterol). Hos ikke-diabetik...

Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Vi beskriver en kirurgisk procedure, der anvendes til at inducere perifer iskæmi hos kaniner med hyperlipidæmi og diabetes. Denne operation fungerer som en præklinisk model for tilstande oplevet i perifer arterie sygdom hos patienter. Angiografi er også beskrevet som et middel til at måle omfanget af indførte iskæmi og genvinding af perfusion.

Præklinisk model af Hind Ekstremitets iskæmi i diabetisk kaniner

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

En regenerativ behandling for perifer arteriel sygdom ville være yderst gavnligt, og denne dyremodel kan være i stand til bedre at teste, om eksperimentelle behandlinger kunne arbejde hos menneskelige patienter. Vores procedure har til formål at fremlægge en forbedret model. En, der mere præcist replikerer den terapeutiske resistens hos patienter med diabetes eller hyperlipidæmi.Denne dyremodel kan bruges til at teste nye behandlingsformer for perifer iskæmi og giver en præklinisk model, der har kompromitteret neovascularization til iskæmi. Efter at have bekræftet en manglende reaktion på bagpote knivspids i en bedøvet fire til seks måneder gamle diabetisk og hyperlipidemic kanin, bruge en skalpel med en række 15 klinge til at gøre en fire til fem centimeter lang snit lige lateral til højre side af luftrøret og bruge stump dissektion at afsløre den rigtige fælles halspulsåren. Brug små Weitlaner retractors til at åbne snittet og omhyggeligt isolere halspulsåren fra halspulsåren og vagus nerve.Når halspulsåren er helt adskilt fra nerve og halspulsåre, placere en 4-O silke sutur på den proksimale og distale ender af den eksponerede arterie og binde den distale ende af carotis med en kirurgs knude og fire firkantede knuder. På den proksimale ende, bruge en vaskulær silikone slips for at give mulighed for stramning eller løsning af fartøjet, efter behov. Dernæst anvende ca 0,5 milliliter af 1% lidocain langs den eksponerede halspulsåren og nerve til at fremme vasodilatation og reducere nerveirritation.Administrere 500 internationale enheder af heparin IV.Placer en fire-tommer wire indsættelse værktøj i arterien. Før en 0,014 tommer med 185 centimeter guidewire gennem indføringsværktøjet til aorta bifurcation på iliaca-toppen i den faldende aorta, og fremfør en tre fransk pigtail angiografisk kateter over wiren. Fremfør pigtail kateteret til to centimeter proksimale til aorta bifurcation på iliaca crest i den faldende aorta, positionering spidsen af kateteret mellem den syvende lænde og den første sakrale ryghvirvel.Kateterets placering afprøves ved manuelt at injicere to til fire milliliter kontrastmiddel. Når korrekt positionering er bekræftet, administreres en intraarteriel injektion af 100 mikrogram nitroglycerin gennem kateteret for at øge vasodilationen. Derefter administreres 0,8 til en milliliter 1% lidocain gennem kateteret for at hjælpe med vasodilatation og skyl kateteret med hepariniseret saltvand.Fastgør slangen til den automatiske angiografiske injektor til kateteret, og sørg for at fjerne luft fra linjen. Brug den automatiserede angiografiske injektor til at levere ni milliliter kontrastmedium gennem kateteret ved tre milliliter pr. sekund og udfør digital subtraktionspergiografi med seks billeder pr. sekund. Vælg de serielle billeder og ændre billedet af angiogram ved hjælp af minus 40%indstilling for at minimere forekomsten af knogle og fange et komplet billede af fartøjet perfusion med kontrast.For at isolere lårpulsåren, bruge en række 15 skalpel klinge til at gøre en langsgående hud snit over højre lårpulsåren, og sørg for, at snittet strækker sig ringere fra inguinal ledbånd og ender på området bare proksimale til patella. Brug stump dissektion til at udsætte lårpulsåren og åbne snittet med Weitlaner retraktorer. Påfør ca 0,5 milliliter 1% lidocain lokalt for at reducere nerveirritation og fremme vasodilatation.Fortsæt stump dissektion af væv til at frigøre hele længden af lårpulsåren sammen med alle dens grene, herunder ringere epigastrisk, dyb femorale, lateral circumflex og overfladiske epigastriske arterier. Dissekere langs popliteal og saphenous arterier, samt den eksterne iliaca arterie, periodisk fugtgivende området med saltvand for at beskytte mod vævsskader. Forsigtigt adskille lårpulsåren fra lårbensvenen og nerve og placere to 4-O silke suturer på lårpulsåren med lige nok plads mellem suturerne til at tillade arterien at blive afskåret.Brug derefter små Metzenbaum saks til at skære mellem de to bånd af den ligated arterie. Punktafgifter lårpulsåren, hvorfra arterien bifurcates til at danne saphenous og popliteal arterier, arbejder proximately, binde off enhver side grene til punktafgifter resten af lårpulsåren til lige under den epigastriske arterie. For gentagen angiografi, bruge en silastisk ark med en monteret tre millimeter rustfrit stål bold.At fastgøre bolden i rustfrit stål i den øverste del af quadriceps musklen med 4-O silkesuturer. Træk huden over bolden, når den er på plads. Der skal gives en intraarteriel injektion med 100 mikrogram nitroglycerin gennem kateteret for at øge vasodilatationen.Hvis det er nødvendigt, administreres en anden 0,8 til en milliliter 1% lidocain gennem kateteret for at hjælpe med vasodilatation og flugter med hepariniseret saltvand. Brug den automatiske angiografiske injektor ved de samme indstillinger til at injicere yderligere ni milliliter kontrastmedium. Derefter udføre en anden angiogram, som vist.Ved afslutningen af proceduren, fjerne kateteret fra højre arterie og binde arterien ved hjælp af 4-O silke sutur allerede på plads omkring arterien. Luk derefter muskel- og underlagene med 4-O polydioxanon eller 3-O polyglactin 910 suturer på en koniske nål i et kontinuerligt suturmønster og luk huden ved hjælp af 4-O polydioxanon eller 4-O polyglactin 910 suturer på en omvendt skærenål i et nedgravet kontinuerligt subcuticular suturmønster. Hos ikke-diabetiske dyr, selv med højere kolesterol, der er en øget inddrivelse af blodtrykket i iskæmisk lemmer og vaskularisering i angiogram på det sidste tidspunkt i forhold til diabetiske dyr.Histologisk, ændringer i muskelstruktur i overensstemmelse med ødem og iskæmisk skade er observeret som et tab eller afbrydelse af muskelfibre. Endvidere kan immunstaining for PECAM en og alpha glat muskel actin bruges til at identificere antallet og størrelsen af fartøjerne i vævssektionerne. Andre billeddannelsesmetoder, såsom Doppler ultralyd, laser Doppler imaging, infrarød termografi, og MR kan tilføjes til yderligere overvågning af den iskæmiske lemmer reperfusion.Med denne inkorporering af terapeutisk resistens efterligner vores model mere præcist iskæmi i en syg tilstand, hvilket fremmer vurderingen af nye behandlingsformer for perifer arteriel sygdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluering af Mouse Hind Limb knogletab Efter Rygmarvsskader med Roman, In vivo, Metodologi

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

En modificeret Heterotop Svin Hind Limb Transplant Model for Translationel vaskulariserede Composite allotransplantation (VCA) Forskning

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

Et præklinisk musemodel af levermetastaser

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Ortotopisk Hind Limb Transplantation i Mus

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² and Tau Neuropathology

Vurdering af Spontan Alternation, Novel Objektgenkendelse og Limb Clasping i Transgene Musemodeller af Amyloid-P og Tau Neuropatology

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

En Ex Vivo vævskultur Model for Fibrovascular komplikationer i proliferativ diabetisk retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Vurdering af terapeutisk angiogenese i en murine model af baglemmer iskæmi

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Etablering af en alvorlig tør øjen model ved hjælp af komplet Dacryoadenektomi i kaniner

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Tager det næste skridt: en neurale coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model at maksimere funktionel helbredelse i Rat

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...