Name: preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits
Uploaded: 2019-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Les auteurs reconnaissent avec gratitude le financement par l’entremise du programme de recherche dirigé par le ministère de la défense (DOD CDMRP; W81XWH-16-1-0582) à ABB et RS. Les auteurs reconnaissent également le financement par l’entremise de l’American Heart Association (17IRG33410888), du DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) et des instituts nationaux de santé (1R21EB023551-01; 1R21EB024147-01A1; 1R01HL141761-01) à ABB.

Les études impliquant des animaux ont été réalisées avec l’approbation de l’Université du Texas à Austin et du Centre scientifique UTHealth à Houston Comité de soins et d’utilisation des animaux institutionnels (IACUC), le Bureau d’examen des soins et de l’utilisation des animaux (ACURO) de l’armée des États-Unis Bureau de la recherche médicale et du commandement du matériel des protections de la recherche, et conformément aux lignes directrices de la NIH pour les soins aux animaux.
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Nous avons présenté un modèle préclinique pour induire l’ischémie des membres postérieurs chez les lapins atteints de diabète et d’hyperlipidémie. Dans de nombreuses études, il y a ambiguïté à la technique utilisée pour créer l’ischémie des membres postérieurs chez les lapins. Chez la souris, la sévérité et la récupération de l’ischémie des membres postérieurs dépendent fortement de l’emplacement de la ligature et de la technique utilisées pour induire l’ischémie. La signification de...

La maladie artérielle périphérique (PAD) est un trouble circulatoire fréquent dans lequel la progression de la formation de plaque athérosclérotique conduit à un rétrécissement des vaisseaux sanguins dans les membres du corps. L’augmentation récente des facteurs de risque d’athérosclérose, y compris le diabète, l’obésité et l’inactivité, a entraîné une prévalence croissante de la maladie vasculaire1. Actuellement, on estime que 12% – 20% de la population générale âgée de plus de 60 ans a une maladie artérielle périphérique2. Une conséquence majeure de la maladie artérielle périphérique est le développement de l’ischémie périphérique, le plus souvent trouvé dans les membres inférieurs. Dans les cas graves, les patients peuvent développer une ischémie des membres critiques, un État dans lequel il y a une douleur constante due à un manque de flux sanguin. Les patients ayant une ischémie des membres critiques ont une probabilité de 50% d’avoir un membre amputé dans l’année qui a été diagnostiquée. En outre, les patients diabétiques ont une incidence plus élevée de la maladie artérielle périphérique et des résultats plus pauvres suite à des interventions de revascularisation3,4. Les thérapies actuelles pour l’ischémie périphérique comprennent des interventions percutanées telles que l’athérotomie et le stentation ou le contournement chirurgical. Cependant, pour de nombreux patients, ces traitements ne fournissent que des avantages à court terme et beaucoup ne sont pas assez sains pour les interventions chirurgicales majeures. Dans ce travail, nous décrivons un modèle animal préclinique pour tester de nouveaux traitements ciblant les maladies vasculaires périphériques qui incorpore la génération d’ischémie périphérique chez les lapins par ligature chirurgicale dans le contexte de l’état de la maladie diabétique.
Le modèle d’ischémie des membres postérieurs chez les lapins a été utilisé comme modèle physiologique pour les maladies vasculaires obstructives et précurseur préclinique des études humaines pendant plus d’un demi-siècle5,6. Les lapins sont souvent une espèce préférée pour des études sur l’ischémie périphérique due à la musculature développée de la cheville et du muscle de veau, contrairement aux grands modèles animaux communs qui sont des ongulés (animaux avec des sabots). Plusieurs revues récentes ont abordé l’utilisation de ce modèle et d’autres dans la modélisation des maladies vasculaires périphériques chez l’homme7,8. Des modèles similaires utilisant l’ischémie des membres postérieurs chez les lapins ont été utilisés dans des études précliniques de facteurs de croissance9,10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20, thérapie génique21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34,35,36,37,38,39,40,41, 42,43,44et cellules souches45,46,47,48,49,50 ,51pour la néovascularisation thérapeutique dans les membres. Malheureusement, les essais cliniques qui ont suivi ces études animales réussies n’ont pas montré d’avantages significatifs pour les patients52.
On a suggéré une explication de la raison de cet échec translationnel est que la condition de l’ischémie périphérique chez les patients humains est une qui comprend la résistance aux signaux angiogéniques53,54,55, 56 , 57 , 58 , 59. plusieurs études ont montré des défauts dans les voies de signalisation angiogéniques dans le diabète et l’hyperglycémie. Le diabète et l’hyperlipidémie conduisent à une perte de protéoglycanes héparan sulfate et une augmentation des enzymes qui coupent le sulfate d’héparane, présentant un mécanisme potentiel pour la résistance à l’angiogenèse thérapeutique/artério-Genèse avec des facteurs de croissance60 , 61. ainsi, une caractéristique clé d’un modèle pour l’ischémie périphérique devrait inclure un aspect de la résistance thérapeutique afin que les thérapies puissent être évaluées dans le contexte de l’état de la maladie présent chez les patients humains.
Dans ce travail, nous décrivons un modèle de lapin de l’ischémie périphérique par la ligature chirurgicale des artères fémorales. Une période de plomb avec l’induction du diabète et de l’hyperlipidémie est incorporée dans le modèle. Nous avons comparé ce modèle à un autre modèle qui incorpore un régime adipeux plus élevé sans diabète et a constaté que le modèle avec le diabète et le niveau inférieur d’hyperlipidémie était plus efficace pour réduire la croissance des vaisseaux sanguins. Notre modèle combine les progrès qui ont été utilisés par des groupes distincts, dans le but de fournir une méthode pratique et normalisée pour obtenir des résultats cohérents dans la recherche des maladies vasculaires périphériques.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1537468 / 1531434</td>
			<td>250 mL bag / 1000 mL irrigation btl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309695</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>23-245684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-800-9689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>VEDC207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxalone</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-891-6051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1471-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alloxan Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Equipment</td>
			<td>Toshiba</td>
			<td>Infinix-i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Injector</td>
			<td>Medrad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ab Alexa 594</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit Ab Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-SMA Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril</td>
			<td>Bayer Animal Health</td>
			<td>724089904201</td>
			<td>Enrofloxacin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Chemistry Panel</td>
			<td>IDEXX</td>
			<td>2616</td>
			<td>Rabbit Panel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Cuff</td>
			<td>WelchAllyn</td>
			<td></td>
			<td>Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Monitor</td>
			<td>Vmed Technology</td>
			<td></td>
			<td>Vmed Vet-Dop2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>6023287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>42023017905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Sulfate</td>
			<td>CB Minerals</td>
			<td></td>
			<td>Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Scrub</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-4598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>C298-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear Vein Catheter</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>SR-OX165</td>
			<td>Surflo IV catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal tube</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001A67WH2</td>
			<td>Accu-Chek Aviva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer Test Strips</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>788222</td>
			<td>Accu-Chek Aviva Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guidewire</td>
			<td>Boston Scientific</td>
			<td>39122-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000CQZI3Q</td>
			<td>Oster #40 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Cincinnati Subzero</td>
			<td>273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td>Gaymar T/Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td>Curved Mosquito Hemostat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insertion Tool</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>MAP550</td>
			<td>metal wire insertion tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>HPB Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Novalin R &#38; Novalin N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>942674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G28954</td>
			<td>3F Check Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1100734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>856440301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringers</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>239936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine/Prilocaine cream</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>761240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligaloop</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH117 / CH116</td>
			<td>White Mini / Yellow Mini</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mazola Corn Oil</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B0049IIVCI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medrad Syringe</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>346920</td>
			<td>150 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal ball sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>K891H</td>
			<td>4-0 silk C-1 30&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14019-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1215470</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitroglycerin</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>927528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECAM Antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-562</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Pump</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pigtail Catheter</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>1310-21-0053</td>
			<td>3F pigtail</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129271</td>
			<td>4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129031</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>Butler</td>
			<td>7233-41</td>
			<td>3-0 taper RB-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>104373</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Chow (Alfalfa)</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>5321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Restrainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10718-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Cutters</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>#15 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>A183H</td>
			<td>4-0 silk ties 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ball</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1598K23</td>
			<td>3-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drapes</td>
			<td>Gepco</td>
			<td>8204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Versaflow VF-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visipaque contrast media</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>509055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlaner Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17012-13</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits

La maladie vasculaire périphérique est un problème clinique répandu qui touche des millions de patients dans le monde. Une conséquence majeure de la maladie vasculaire périphérique est le développement de l’ischémie. Dans les cas graves, les patients peuvent développer une ischémie des membres critiques dans laquelle ils éprouvent une douleur constante et un risque accru d’amputation des membres. Les thérapies actuelles pour l’ischémie périphérique comprennent la chirurgie de contournement ou des interventions percutanées telles que l’angioplastie avec l’endoprothèse ou l’athérectomie pour rétablir le flux sanguin. Cependant, ces traitements échouent souvent à la progression continue de la maladie vasculaire ou de la resténose ou sont contre-indiqués en raison de la mauvaise santé globale du patient. Une approche potentielle prometteuse pour traiter l’ischémie périphérique implique l’induction de la néovascularisation thérapeutique pour permettre au patient de développer des vasculatures collatérales. Ce réseau nouvellement formé atténue l’ischémie périphérique en rétablissant la perfusion dans la zone touchée. Le modèle préclinique le plus fréquemment utilisé pour l’ischémie périphérique utilise la création d’une ischémie des membres postérieurs chez les lapins sains par ligature de l’artère fémorale. Dans le passé, cependant, il y a eu une forte déconnexion entre le succès des études précliniques et l’échec des essais cliniques concernant les traitements pour l’ischémie périphérique. Les animaux sains ont généralement une régénération vasculaire robuste en réponse à une ischémie induite chirurgicalement, contrairement à la vascularité et à la régénération réduites chez les patients atteints d’ischémie périphérique chronique. Ici, nous décrivons un modèle animal optimisé pour l’ischémie périphérique chez les lapins qui comprend l’hyperlipidémie et le diabète. Ce modèle a réduit la formation collatérale et la récupération de la pression artérielle par rapport à un modèle avec un régime plus élevé de cholestérol. Ainsi, le modèle peut fournir une meilleure corrélation avec les patients humains atteints d’angiogenèse compromise des co-morbidités communes qui accompagnent les maladies vasculaires périphériques.

Après l’induction du diabète et l’initiation du régime de cholestérol à 0,1%, le taux de cholestérol total pour les lapins atteints de diabète et de régime de cholestérol était de 123,3 ± 35,1 mg/dL (n = 6 lapins mâles) en moyenne des points de temps et des lapins. Le taux de BGL pour ces lapins était de 248,3 ± 50,4 mg/dL (n = 6 lapins mâles). Un cours de temps pour les chimies sanguines et les ratios de pression artérielle des jambes chez un lapin typique est illustr...

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Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Nous décrivons une intervention chirurgicale utilisée pour induire une ischémie périphérique chez les lapins atteints d’hyperlipidémie et de diabète. Cette chirurgie agit comme un modèle préclinique pour les conditions rencontrées dans la maladie des artères périphériques chez les patients. L’angiographie est également décrite comme un moyen de mesurer l’étendue de l’ischémie introduite et la récupération de la perfusion.

Modèle préclinique d’ischémie des membres postérieurs chez les lapins diabétiques

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Un traitement régénérateur pour la maladie artérielle périphérique serait extrêmement bénéfique et ce modèle animal pourrait être en mesure de mieux tester si les traitements expérimentaux pourraient fonctionner chez les patients humains. Notre procédure vise à mettre en avant un modèle amélioré. Celui qui reproduit plus précisément la résistance thérapeutique rencontrée chez les patients atteints de diabète ou d’hyperlipidémie.Ce modèle animal peut être utilisé pour tester de nouvelles thérapies pour l’ischémie périphérique et fournit un modèle préclinique qui a compromis la néovascularisation à l’ischémie. Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement de patte postérieure dans un lapin diabétique et hyperlipidique anesthésié de quatre à six mois, utilisez un scalpel avec une lame numéro 15 pour faire une incision de quatre à cinq centimètres de long juste latéralement sur le côté droit de la trachée et utilisez la dissection émoussée pour exposer la bonne artère carotide commune. Utilisez de petits rétracteurs Weitlaner pour ouvrir l’incision et isoler soigneusement l’artère carotide de la veine jugulaire et du nerf vague.Lorsque l’artère carotide a été complètement séparée du nerf et de la veine jugulaire, placez une suture de soie de 4 O aux extrémités proximales et distales de l’artère exposée et attachez l’extrémité distale de la carotide avec le noeud d’un chirurgien et quatre noeuds carrés. À l’extrémité proximale, utilisez une attache en silicone vasculaire pour permettre le serrage ou le desserrage du navire, au besoin. Ensuite, appliquez environ 0,5 millilitres de 1% de lidocaïne le long de l’artère et du nerf carotides exposés pour favoriser la vasodilatation et réduire l’irritation nerveuse.Administrer 500 unités internationales d’héparine IV.Place un outil d’insertion de fil de quatre pouces dans l’artère. Alimentez un fil de guidage de 0,014 pouce sur 185 centimètres à travers l’outil d’insertion jusqu’à la bifurcation aortique à la crête iliaque de l’aorte descendante, et avancez un cathéter angiographique à queue de porc de trois Français sur le fil. Avancez le cathéter à queue de porc à deux centimètres proximal à la bifurcation aortique à la crête iliaque dans l’aorte descendante, positionnant la pointe du cathéter entre la septième vertèbre lombaire et la première vertèbre sacrée.Testez l’emplacement du cathéter en injectant manuellement de deux à quatre millilitres d’agent de contraste. Une fois le positionnement correct confirmé, administrer une injection intraartérale de 100 microgrammes de nitroglycérine par le cathéter pour augmenter la vasodilatation. Administrer ensuite de 0,8 à un millilitre de 1 % de lidocaïne à travers le cathéter pour aider à la vasodilatation et rincer le cathéter avec de la solution saline héparinisée.Fixez le tube de l’injecteur angiographique automatisé au cathéter, en étant sûr d’enlever tout air de la ligne. Utilisez l’injecteur angiographique automatisé pour fournir neuf millilitres de milieu de contraste à travers le cathéter à trois millilitres par seconde et effectuer une angiographie de soustraction numérique à six images par seconde. Sélectionnez les images en série et modifiez l’image de l’angiographie en utilisant moins 40% de réglage pour minimiser l’apparence de l’os et capturer une image complète de la perfusion du navire avec contraste.Pour isoler l’artère fémorale, utilisez une lame de scalpel numéro 15 pour faire une incision longitudinale de la peau sur l’artère fémorale droite, en s’assurant que l’incision s’étend inférieurement du ligament inguinal et se termine à la zone juste proximale à la rotule. Utilisez la dissection émoussée pour exposer l’artère fémorale et ouvrez l’incision avec des rétracteurs Weitlaner. Appliquer environ 0,5 millilitres de 1% de lidocaïne localement pour réduire l’irritation nerveuse et favoriser la vasodilatation.Continuez la dissection émoussée des tissus pour libérer toute la longueur de l’artère fémorale avec toutes ses branches, y compris les artères épigastriques inférieures, fémorales profondes, latérales circonflexes et épigastriques superficielles. Disséquer le long des artères popliteal et saphenous, aussi bien que l’artère iliaque externe, hydratant périodiquement la région avec saline pour se protéger contre des dommages de tissu. Séparez soigneusement l’artère fémorale de la veine fémorale et du nerf et placez deux sutures de soie 4-O sur l’artère fémorale avec juste assez d’espace entre les sutures pour permettre à l’artère d’être sectionnée.Ensuite, utilisez de petits ciseaux Metzenbaum pour couper entre les deux traverses de l’artère ligatée. Exciser l’artère fémorale d’où l’artère bifurque pour former les artères saphenous et popliteal, travaillant proximately, lissant n’importe quelle branche latérale pour exciser le reste de l’artère fémorale juste au-dessous de l’artère épigastrique. Pour répéter l’angiographie, utilisez une feuille silastic avec une boule montée en acier inoxydable de trois millimètres.Pour attacher la boule d’acier inoxydable dans la partie supérieure du muscle quadriceps avec des sutures de soie 4-O. Tirez la peau sur la balle quand elle est en place. Administrer une injection intra-artérielle de 100 microgrammes de nitroglycérine par le cathéter pour augmenter la vasodilatation.Si nécessaire, administrer un autre 0,8 à un millilitre de 1% de lidocaïne à travers le cathéter pour aider à la vasodilatation et rincer avec la solution saline héparinée. Utilisez l’injecteur angiographique automatisé aux mêmes réglages pour injecter neuf millilitres de contraste de plus. Ensuite, effectuez une autre angiographie, comme démontré.À la fin de la procédure, retirer le cathéter de l’artère droite et attacher l’artère à l’aide de la suture de soie 4-O déjà en place autour de l’artère. Ensuite, fermez les couches musculaires et sous-cuticulaires avec 4-O polydioxanone ou 3-O polyglactine 910 sutures sur une aiguille conique dans un modèle de suture continue et fermer la peau en utilisant 4-O polydioxanone ou 4-O polyglactine 910 sutures sur une aiguille de coupe inverse dans un motif subcuticulaire subcuticulaire enterré. Chez les animaux non diabétiques, même avec un taux de cholestérol plus élevé, il ya une récupération accrue de la pression artérielle dans le membre ischémique et la vascularité dans les angiographies au point de temps final par rapport aux animaux diabétiques.Histologiquement, des changements dans la structure musculaire compatibles avec l’oedème et les dommages ischémiques sont observés comme une perte ou une perturbation des fibres musculaires. En outre, l’immunostaining pour PECAM un et alpha actine lisse de muscle peut être employé pour identifier le nombre et la taille des vaisseaux dans les sections de tissu. D’autres méthodes d’imagerie, telles que l’échographie Doppler, l’imagerie doppler au laser, la thermographie infrarouge et l’IRM peuvent être ajoutées pour une surveillance plus continue de la reperfusion ischémique des membres.Avec cette incorporation de la résistance thérapeutique, notre modèle imite plus exactement l’ischémie dans un état maladie, faisant progresser l’évaluation de nouvelles thérapies pour la maladie artérielle périphérique.

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Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Un modèle de Culture tissulaire Ex Vivo pour fibrovasculaire Complications dans la rétinopathie diabétique proliférante

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Évaluation de l'angiogenèse thérapeutique dans un modèle murine de l'ischémie hindlimb

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Établissement d'un modèle d'oeil sec grave utilisant la Dacryoadenectomy complète dans des lapins

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Passer à l’étape suivante : un modèle de transplantation orthotopique orthotopique des membres de l’utérus pour maximiser la récupération fonctionnelle chez les rats

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...