Name: preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits
Uploaded: 2019-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Forfatterne takknemlig erkjenner finansiering gjennom Department of Defense Congressionally regissert Research program (DOD CDMRP; W81XWH-16-1-0582) til ABB og RS. Forfatterne erkjenner også finansiering gjennom American Heart Association (17IRG33410888), DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) og National Institutes of Health (1R21EB023551-01; 1R21EB024147-01A1; 1R01HL141761-01) til ABB.

Studier innvolvere dyrene var utført med det anerkjennelse av det universitet av Texas for Austin og det UTHealth vitenskap senter for Houston institusjonell dyr bekymre og bruk komité (IACUC), det dyr bekymre og bruk anmelde kontor (ACURO) av det Amerika hæren Medisinsk forskning og materiell Command Office of Research beskyttelse, og i samsvar med NIH retningslinjer for dyr omsorg.
1. induksjon av diabetes og hyperlipidemi
<ol><li>Overgangen New Zealand kaniner (4-6 måneder gammel) fra...

Vi har forevist en prekliniske modell for inducing bakben armen iskemi inne kanin med diabetes og hyperlipidemi. I mange studier, det er tvetydighet i teknikken brukes til å lage bakben lem iskemi i kaniner. I mus, alvorlighetsgraden og utvinningen fra hind lem iskemi er svært avhengig av plasseringen av ligation og teknikk som brukes til å indusere iskemi. Betydningen av teknikken som presenteres i dette arbeidet er at det gir mulighet for konsistent induksjon av iskemi som ikke helt tilbake etter 8 uker i diabetiker...

Perifer arteriell sykdom (PAD) er en vanlig sirkulasjons forstyrrelse der progresjon av aterosklerotiske plakk formasjon fører til en innsnevring av blodkar i lemmer av kroppen. Den nylige økningen i risikofaktorer for aterosklerose, inkludert diabetes, fedme, og inaktivitet, har ført til økt utbredelse av vaskulær sykdom1. Foreløpig er det anslått at 12%-20% av befolkningen generelt over 60 år har perifer arteriell sykdom2. En stor konsekvens av perifer arteriell sykdom er utviklingen av perifere iskemi, oftest funnet i nedre lemmer. I alvorlige tilfeller, pasienter kan utvikle kritiske lem iskemi, en tilstand der det er konstant smerte på grunn av mangel på blodstrøm. Pasienter med kritiske lem iskemi har en 50% sannsynlighet for å ha en lem amputert innen ett år etter diagnose. Videre, pasienter med diabetes har en høyere forekomst av perifer arteriell sykdom og dårligere utfall etter intervensjoner for revaskularisering3,4. Nåværende terapier for perifere iskemi inkluderer perkutan intervensjoner som atherektomi og stenting eller kirurgisk bypass. Men for mange pasienter disse behandlingene bare gi kortsiktige fordeler og mange er ikke frisk nok for store kirurgiske prosedyrer. I dette arbeidet, beskriver vi en prekliniske dyr modell for testing av nye behandlinger rettet mot perifer vaskulær sykdom som inkorporerer generering av perifere iskemi i kaniner gjennom kirurgiske ligation i sammenheng med diabetiker sykdom staten.
Den hind lem-modellen i kaniner har blitt brukt som en fysiologisk modell for obstruktiv vaskulær sykdom og prekliniske forløper til menneskelige studier i over et halvt århundre5,6. Kanin er ofte en foretrakk Art for studier opp på periferisk iskemi på grunn av det bebygget muskulaturen av ankelen og kalv muskelen, inne kontrasten å vanlig stor dyr modeller det er hjortevilt (dyrene med hover). Flere nylige vurderinger har adressert bruken av denne modellen og andre i modellering perifer vaskulær sykdom hos mennesker7,8. Lignende modeller som bruker hind lem iskemi i kaniner ble brukt i prekliniske studier av vekstfaktorer9,10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20, genterapi21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34,35,36,37, 38, 39, 40,41, 42,43,44og stamceller45,46,47,48,49,50 ,51for terapeutiske neovascularization i lemmer. Dessverre viste de kliniske studiene som fulgte disse vellykkede dyre studiene ikke betydelige fordeler for pasienter52.
En foreslått forklaring på årsaken til dette translational svikt er at tilstanden til perifere iskemi i menneskelige pasienter er en som inkluderer motstand mot angiogenic signaler53,54,55, 56 for alle , 57 for alle , 58 for alle , 59. flere studier har vist defekter i angiogenic signalering trasé i diabetes og hyperglykemi. Diabetes og hyperlipidemi føre til tap av heparan sulfat proteoglycans og en økning i enzymer som kutter heparan sulfat, presentere en potensiell mekanisme for resistens mot terapeutisk angiogenese/arteriogenesis med vekstfaktorer60 , 61. således, en viktig funksjon i en modell for perifere iskemi bør inkludere et aspekt av terapeutisk motstand slik at behandling kan evalueres i sammenheng med sykdommen staten stede i menneskelige pasienter.
I dette arbeidet beskriver vi en kanin modell av perifere iskemi gjennom kirurgiske ligation av lår arteriene. En innledende periode med induksjon av diabetes og hyperlipidemi er innlemmet i modellen. Vi sammenlignet denne modellen til en annen modell som inkorporerer en høyere fett diett uten diabetes og fant at modellen med diabetes og lavere nivå av hyperlipidemi var mer effektiv i å redusere blod fartøy vekst. Vår modell kombinerer fremskritt som har blitt brukt av separate grupper, med mål om å gi en praktisk og standardisert metode for å oppnå konsistente resultater i perifer vaskulær sykdom forskning.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1537468 / 1531434</td>
			<td>250 mL bag / 1000 mL irrigation btl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309695</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>23-245684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-800-9689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>VEDC207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxalone</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-891-6051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1471-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alloxan Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Equipment</td>
			<td>Toshiba</td>
			<td>Infinix-i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Injector</td>
			<td>Medrad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ab Alexa 594</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit Ab Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-SMA Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril</td>
			<td>Bayer Animal Health</td>
			<td>724089904201</td>
			<td>Enrofloxacin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Chemistry Panel</td>
			<td>IDEXX</td>
			<td>2616</td>
			<td>Rabbit Panel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Cuff</td>
			<td>WelchAllyn</td>
			<td></td>
			<td>Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Monitor</td>
			<td>Vmed Technology</td>
			<td></td>
			<td>Vmed Vet-Dop2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>6023287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>42023017905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Sulfate</td>
			<td>CB Minerals</td>
			<td></td>
			<td>Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Scrub</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-4598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>C298-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear Vein Catheter</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>SR-OX165</td>
			<td>Surflo IV catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal tube</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001A67WH2</td>
			<td>Accu-Chek Aviva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer Test Strips</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>788222</td>
			<td>Accu-Chek Aviva Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guidewire</td>
			<td>Boston Scientific</td>
			<td>39122-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000CQZI3Q</td>
			<td>Oster #40 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Cincinnati Subzero</td>
			<td>273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td>Gaymar T/Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td>Curved Mosquito Hemostat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insertion Tool</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>MAP550</td>
			<td>metal wire insertion tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>HPB Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Novalin R &#38; Novalin N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>942674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G28954</td>
			<td>3F Check Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1100734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>856440301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringers</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>239936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine/Prilocaine cream</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>761240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligaloop</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH117 / CH116</td>
			<td>White Mini / Yellow Mini</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mazola Corn Oil</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B0049IIVCI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medrad Syringe</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>346920</td>
			<td>150 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal ball sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>K891H</td>
			<td>4-0 silk C-1 30&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14019-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1215470</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitroglycerin</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>927528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECAM Antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-562</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Pump</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pigtail Catheter</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>1310-21-0053</td>
			<td>3F pigtail</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129271</td>
			<td>4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129031</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>Butler</td>
			<td>7233-41</td>
			<td>3-0 taper RB-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>104373</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Chow (Alfalfa)</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>5321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Restrainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10718-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Cutters</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>#15 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>A183H</td>
			<td>4-0 silk ties 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ball</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1598K23</td>
			<td>3-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drapes</td>
			<td>Gepco</td>
			<td>8204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Versaflow VF-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visipaque contrast media</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>509055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlaner Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17012-13</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits

Perifer vaskulær sykdom er et utbredt klinisk problem som rammer millioner av pasienter over hele verden. En viktig konsekvens av perifer vaskulær sykdom er utviklingen av iskemi. I alvorlige tilfeller, pasienter kan utvikle kritiske lem iskemi der de opplever konstant smerte og økt risiko for lem amputasjon. Nåværende terapier for perifere iskemi inkluderer bypass kirurgi eller perkutan intervensjoner som angioplastikk med stenting eller atherektomi å gjenopprette blodstrømmen. Men disse behandlingene ofte ikke til fortsatt progresjon av vaskulær sykdom eller restenosis eller er kontraindisert på grunn av den generelle dårlige helsen til pasienten. En lovende potensiell tilnærming til å behandle perifere iskemi innebærer induksjon av terapeutiske neovascularization å tillate pasienten å utvikle sikkerhet blodkar. Dette nyopprettede nettverket lindrer perifere iskemi ved å gjenopprette til det berørte området. De mest brukte prekliniske modell for perifere iskemi utnytter etableringen av hind lem iskemi i friske kaniner gjennom lårarterien ligation. I det siste, men det har vært en sterk frakobling mellom suksessen til prekliniske studier og svikt i kliniske studier om behandlinger for perifere iskemi. Friske dyr vanligvis har robust vaskulær gjenfødelse som svar på kirurgisk indusert iskemi, i motsetning til den reduserte vascularity og regenerering hos pasienter med kroniske perifere iskemi. Her beskriver vi en optimalisert dyremodell for perifere iskemi i kaniner som inkluderer hyperlipidemi og diabetes. Denne modellen har redusert sikkerhet formasjon og blodtrykk utvinning i forhold til en modell med en høyere kolesterol diett. Således kan modellen gi bedre korrelasjon med menneskelige pasienter med kompromittert angiogenese fra felles Co-morbidities som følger perifer vaskulær sykdom.

Etter induksjon av diabetes og initiering av 0,1% kolesterol diett, den totale kolesterol for kaniner med diabetes og kolesterol diett var 123,3 ± 35,1 mg/dL (n = 6 hann kaniner) gjennomsnitt samlet tid poeng og kaniner. Den BGL nivå for disse kaniner var 248,3 ± 50,4 mg/dL (n = 6 mannlige kaniner). En tid kurs for blod kjemikalier og Ben blodtrykk prosenter i en typisk kanin er vist i Figur 3 i forhold til kaniner under et høyere kolesterol diett (1% kolesterol). I i...

Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Vi beskriver en kirurgisk prosedyre som brukes til å indusere perifere iskemi i kaniner med hyperlipidemi og diabetes. Denne operasjonen fungerer som en prekliniske modell for tilstander opplevd i perifer arteriesykdom hos pasienter. Angiografi er også beskrevet som et middel for å måle omfanget av innførte iskemi og gjenvinning av.

Prekliniske modell av hind lem iskemi i diabetiker kaniner

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

En regenerativ behandling for perifer arteriell sykdom ville være svært gunstig, og denne dyremodellen kan være i stand til å bedre teste om eksperimentelle behandlinger kan fungere hos menneskelige pasienter. Vår prosedyre tar sikte på å legge frem en forbedret modell. En som mer nøyaktig replikerer den terapeutiske resistensen som oppstår hos pasienter med diabetes eller hyperlipidemi.Denne dyremodellen kan brukes til å teste nye behandlinger for perifer iskemi og gir en preklinisk modell som har kompromittert neovaskularisering til iskemi. Etter å ha bekreftet mangel på respons på bakre poteklemme i en bedøvet fire til seks måneder gammel diabetiker og hyperlipidemisk kanin, bruk en skalpell med et nummer 15 blad for å gjøre et fire til fem centimeter langt snitt bare lateral til høyre side av luftrøret og bruk sløvhet for å avsløre riktig vanlig halspulsåren. Bruk små Weitlaner-retractors for å åpne snittet og forsiktig isolere halspulsåren fra halsvenen og vagusnerven.Når halspulsåren er fullstendig skilt fra nerve og halsvene, legg en 4-O silkesutur på de proksimale og distale endene av den eksponerte arterien og bind av den distale enden av halshuggingen med kirurgens knute og fire firkantede knuter. På den proksimale enden, bruk et vaskulært silikonbånd for å tillate stramming eller løsning av fartøyet etter behov. Deretter påfør ca 0,5 milliliter med 1% lidokain langs den eksponerte halspulsåren og nerven for å fremme vasodilatasjon og redusere nerveirritasjon.Administrer 500 internasjonale enheter heparin IV.Plasser et fire tommers trådinnsettingsverktøy i arterien. Mate en 0,014 tommer med 185 centimeter ledevaier gjennom innsettingsverktøyet til aortabifurcation på iliac crest i synkende aorta, og avansere en tre fransk pigtail angiografisk kateter over ledningen. Videreføre pigtail kateteret til to centimeter proksimal til aorta bifurcation på iliac crest i synkende aorta, plassere spissen av kateteret mellom den syvende lumbal og den første sakral vertebra.Test plasseringen av kateteret ved å injisere to til fire milliliter kontrastmiddel manuelt. Når riktig posisjonering er bekreftet, administrer en intraarterial injeksjon på 100 mikrogram nitroglyserin gjennom kateteret for å øke vasodilatasjonen. Administrer deretter 0,8 til en milliliter med 1% lidokain gjennom kateteret for å hjelpe med vasodilatasjon og skyll kateteret med heparinisert saltvann.Fest slangen for den automatiserte angiografiske injektoren til kateteret, og pass på å fjerne luft fra linjen. Bruk den automatiserte angiografiske injektoren til å levere ni milliliter kontrastmedium gjennom kateteret med tre milliliter per sekund og utføre digital subtraksjons angiografi med seks rammer per sekund. Velg seriebildene og endre bildet av angiogrammet ved hjelp av minus 40% innstilling for å minimere utseendet på bein og fange et komplett bilde av fartøyets perfusjon med kontrast.For å isolere lårarterien, bruk et nummer 15 skalpellblad for å lage et langsgående hudsnitt over høyre lårarterie, og pass på at snittet strekker seg dårligere fra inngangsleddet og slutter på området bare proksimalt til patella. Bruk sløv disseksjon for å eksponere lårarterien og åpne snittet med Weitlaner-retractors. Påfør ca. 0,5 milliliter med 1% lidokain lokalt for å redusere nerveirritasjon og fremme vasodilatasjon.Fortsett den stumpe disseksjonen av vevet for å frigjøre hele lengden av lårarterien sammen med alle grenene, inkludert de dårligere epigastriske, dype lårbenet, lateral circumflex og overfladiske epigastriske arterier. Disseker langs popliteal og salte arterier, samt den ytre iliac arterien, periodisk hydrere området med saltvann for å beskytte mot vevsskade. Separer lårarterien forsiktig fra lårvenen og nerven og legg to 4-O silkesuturer på lårarterien med akkurat nok plass mellom suturene slik at arterien kan avkuttes.Bruk deretter små Metzenbaum saks for å kutte mellom de to båndene i den ligatede arterien. Avgift lårarterien fra der arterien bifurcates å danne saphenous og popliteal arterier, arbeider proksimalt, binde av noen sidegrener for å avgiftsdirektoratet resten av lårarterien til like under epigastrisk arterie. For gjentatt angiografi, bruk et silastic ark med en montert tre millimeter rustfritt stål ball.For å feste rustfritt stål ballen inn i den øvre delen av quadriceps muskelen med 4-O silke suturer. Trekk huden over ballen når den er på plass. Administrer en intraarterial injeksjon på 100 mikrogram nitroglyserin gjennom kateteret for å øke vasodilatasjonen.Administrer om nødvendig ytterligere 0,8 til én milliliter med 1 % lidokain gjennom kateteret for å hjelpe til med vasodilatasjon og skyll med heparinisert saltvann. Bruk den automatiserte angiografiske injektoren med samme innstillinger for å injisere ytterligere ni milliliter kontrastmedium. Utfør deretter et annet angiogram, som vist.På slutten av prosedyren fjerner kateteret fra høyre arterie og binder av arterien ved hjelp av 4-O silkesuturen som allerede er på plass rundt arterien. Lukk deretter muskel- og subkubanelagene med 4-O polydioksanon eller 3-O polyglactin 910-suturer på en konisk nål i et kontinuerlig suturmønster og lukk huden ved hjelp av 4-O polydioksanon eller 4-O polyglactin 910-suturer på en omvendt skjærenål i et begravet kontinuerlig subkubanesugmønster. Hos ikke-diabetiske dyr, selv med høyere kolesterol, er det økt utvinning av blodtrykket i iskemisk lem og vaskularitet i angiogrammer på det siste tidspunktet sammenlignet med diabetiske dyr.Histologisk observeres endringer i muskelstrukturen i samsvar med ødem og iskemisk skade som tap eller forstyrrelse av muskelfibrene. Videre kan immunstaining for PECAM en og alfa glatt muskel actin brukes til å identifisere antall og størrelse på karene i vevseksjonene. Andre bildemetoder, som Doppler ultralyd, laser Doppler imaging, infrarød termografi, og MR kan legges til for videre overvåking av iskemisk lem reperfusjon.Med denne inkorporeringen av terapeutisk resistens etterligner vår modell mer nøyaktig iskemi i en syk tilstand, og fremmer vurderingen av nye terapier for perifer arteriell sykdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Langsgående Evaluering av Mouse Hind Limb Bone tap etter ryggmargsskade bruke Novel, In vivo Methodology

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

En modifisert Heterotop Svine Hind Limb Transplant Modell for Translasjonell vaskualisert Composite Allotransplantation (VCA) Forskning

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

En Preklinisk Murine Modell av levermetastaser

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotopic Hind Limb Transplantasjon i Mus

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² and Tau Neuropathology

Vurdering av spontan veksling, novel objektgjenkjenning og limb Clasping i transgene musemodeller av Amyloid-P og Tau Neuropathology

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

En Ex Vivo vev kultur modell for Fibrovascular komplikasjoner i proliferativ diabetisk retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Vurdering av terapeutiske angiogenese i en murine modell av Hindlimb bentap ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Etablering av en alvorlig tørr øye modell bruke komplett Dacryoadenectomy i kaniner

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Tar neste trinn: en neural coaptasjon ortotopisk hind lem transplantasjon modell for å maksimere funksjonell utvinning i rotte

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...