Name: preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits
Uploaded: 2019-06-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Författarna erkänner tacksamt finansiering genom Department of Defense Kongressialt riktat forsknings program (DOD CDMRP; W81XWH-16-1-0582) till ABB och RS. Författarna erkänner också finansiering genom American Heart Association (17IRG33410888), den DOD CDMRP (W81XWH-16-1-0580) och de nationella instituten för hälsa (1R21EB023551-01; 1R21EB024147-01A1; 1R01HL141761-01) till ABB.

Studier som involverar djur utfördes med godkännande av University of Texas i Austin och UTHealth Science Center vid Houston institutionella djur vård och användning kommittén (IACUC), djur vård och användning Review Office (ACURO) i USA: s armé Medicinsk forskning och materiel lednings kontor för forsknings skydd, och i enlighet med NIH rikt linjer för djur vård.
1. induktion av diabetes och hyperlipidemi
<ol><li>Över gång den nya Zeeland kaniner (4-6 månader gamla) från en k...

Vi har presenterat en preklinisk modell för att inducera bakextremiteterna ischemi hos kaniner med diabetes och hyperlipidemi. I många studier, det finns tvetydighet till den teknik som används för att skapa bakre extremiteterna ischemi hos kaniner. Hos möss, svårighets grad och återhämtning från bakre extremiteterna ischemi är starkt beroende av platsen ligering och teknik som används för att inducera ischemi. Betydelsen av den teknik som presenteras i detta arbete är att det möjliggör en konsekvent induk...

Perifer arteriell sjukdom (PAD) är en vanlig cirkulations rubbning där utvecklingen av aterosklerotisk plack bildas leder till en förträngning av blod kärl i armar och ben i kroppen. Den senaste tidens ökning av riskfaktorer för åder förkalkning, inklusive diabetes, fetma, och inaktivitet, har lett till ökad förekomst av vaskulär sjukdom1. För närvarande, det uppskattas att 12%-20% av den allmänna befolkningen över 60 år gammal har perifer arteriell sjukdom2. En stor konsekvens av perifer arteriell sjukdom är utvecklingen av perifer iskärl, vanligast förekommande i de nedre extremiteterna. I svåra fall, patienter kan utveckla kritisk lem ischemia, ett tillstånd där det finns ständig smärta på grund av brist på blod flödet. Patienter med kritisk lem ischemi har en 50% sannolikhet för att ha en lem amputerade inom ett år av diagnos. Dessutom, patienter med diabetes har en högre incidens av perifer arteriell sjukdom och sämre resultat efter interventioner för revaskularisering3,4. Nuvarande terapier för perifer ischemi inkluderar perkutan interventioner såsom aterektomi och stentning eller kirurgiska bypass. Emellertid, för många patienter dessa behandlingar ger bara kortsiktiga fördelar och många är inte friska nog för större kirurgiska ingrepp. I detta arbete, beskriver vi en preklinisk djur modell för att testa nya behandlingar som riktar sig mot perifer kärl sjukdom som omfattar uppkomsten av perifer ischemi hos kaniner genom kirurgisk ligering i samband med diabetes sjukdomen tillstånd.
Bakbenen ischemi modell i kaniner har använts som en fysiologisk modell för obstruktiv vaskulär sjukdom och prekliniska föregångare till studier på människa i över ett halvt sekel5,6. Kaniner är ofta en föredragen art för studier på perifer ischemi på grund av den framkallade muskulaturn av vristen och vadmuskeln, i kontrast till vanligt stort djur modellerar som är hovdjur (djur med hovar). Flera nya recensioner har behandlat användningen av denna modell och andra i modellering perifer kärl sjukdom hos människor7,8. Liknande modeller som använder Hind lem ischemi hos kaniner användes i prekliniska studier av tillväxtfaktorer9,10,11,12,13,14, 15,16,17,18,19,20, gen terapi21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33,34,35,36,37,38,39,40,41, 42,43,44ochstamceller45,46,47,48, 49,50 ,51för terapeutisk neovaskularisering i armar och ben. Tyvärr visade de kliniska prövningar som följde dessa framgångs rika djur studier inte signifikanta fördelar för patienter52.
En föreslagen förklaring av orsaken till detta translationella misslyckande är att villkoret för perifer isaniska hos människa patienter är en som inkluderar resistens mot angiogena signaler53,54,55, 56 , 57 , 58 , 59. flera studier har visat defekter i angiogena signal vägar vid diabetes och hyperglykemi. Diabetes och hyperlipidemi leda till en förlust av heparansulfater sulfat proteoglykaner och en ökning av enzymer som skär heparansulfater sulfat, presentera en potentiell mekanism för resistens mot terapeutiska angiogenes/arteriogenes med tillväxtfaktorer60 , 61. således, ett viktigt inslag i en modell för perifer ismoischemia bör omfatta en aspekt av terapeutisk resistens så att terapier kan utvärderas i samband med sjukdoms tillstånd som finns hos människa patienter.
I detta arbete, beskriver vi en kanin modell av perifer ischemi genom kirurgisk ligering av femorala artärer. En inledande period med induktion av diabetes och hyperlipidemi införlivas i modellen. Vi jämförde denna modell med en annan modell som innehåller en högre fett diet utan diabetes och fann att modellen med diabetes och lägre nivå av hyperlipidemi var mer effektivt för att minska blod kärlens tillväxt. Vår modell kombinerar framsteg som har använts av separata grupper, med målet att tillhandahålla en praktisk och standardiserad metod för att uppnå konsekventa resultat i perifer kärl sjukdom forskning.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1537468 / 1531434</td>
			<td>250 mL bag / 1000 mL irrigation btl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309695</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>23-245684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G Needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Dextrose</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-800-9689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acepromazine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>VEDC207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alfaxalone</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-891-6051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alginate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1471-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alloxan Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Equipment</td>
			<td>Toshiba</td>
			<td>Infinix-i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angiography Injector</td>
			<td>Medrad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Mouse Ab Alexa 594</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit Ab Alexa 488</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td>Secondary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-SMA Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5694</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baytril</td>
			<td>Bayer Animal Health</td>
			<td>724089904201</td>
			<td>Enrofloxacin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Chemistry Panel</td>
			<td>IDEXX</td>
			<td>2616</td>
			<td>Rabbit Panel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Cuff</td>
			<td>WelchAllyn</td>
			<td></td>
			<td>Flexiport Disposable BP Cuff-infant size 7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Monitor</td>
			<td>Vmed Technology</td>
			<td></td>
			<td>Vmed Vet-Dop2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>6023287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>42023017905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Sulfate</td>
			<td>CB Minerals</td>
			<td></td>
			<td>Food and Pharmaceutical Grade USP and FCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Scrub</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-888-4598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher-Scientific</td>
			<td>C298-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ear Vein Catheter</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>SR-OX165</td>
			<td>Surflo IV catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endotracheal tube</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Sheridan Brand, Depends on Rabbit Size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B001A67WH2</td>
			<td>Accu-Chek Aviva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucometer Test Strips</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>788222</td>
			<td>Accu-Chek Aviva Plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guidewire</td>
			<td>Boston Scientific</td>
			<td>39122-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Clippers</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000CQZI3Q</td>
			<td>Oster #40 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Cincinnati Subzero</td>
			<td>273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad Pump</td>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td>Gaymar T/Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td>Curved Mosquito Hemostat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insertion Tool</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>MAP550</td>
			<td>metal wire insertion tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>HPB Pharmacy</td>
			<td></td>
			<td>Novalin R &#38; Novalin N</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringes</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>942674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Introducer</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G28954</td>
			<td>3F Check Flo Performer Introducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1100734</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>856440301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactated Ringers</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>186662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>239936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine/Prilocaine cream</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>761240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligaloop</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH117 / CH116</td>
			<td>White Mini / Yellow Mini</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mazola Corn Oil</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B0049IIVCI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medrad Syringe</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>346920</td>
			<td>150 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal ball sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>K891H</td>
			<td>4-0 silk C-1 30&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14019-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Henry Schein Medical</td>
			<td>1215470</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitroglycerin</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>927528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECAM Antibody</td>
			<td>Novus Biologicals</td>
			<td>NB600-562</td>
			<td>Primary Antibody for IHC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion Pump</td>
			<td>Masterflex</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pigtail Catheter</td>
			<td>Merit Medical Systems</td>
			<td>1310-21-0053</td>
			<td>3F pigtail</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129271</td>
			<td>4-0 taper RB-1 (needle comes on suture)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polydioxanone (PDS II) suture</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>129031</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>Butler</td>
			<td>7233-41</td>
			<td>3-0 taper RB-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin 910 (Vicryl) suture</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>104373</td>
			<td>4-0 reverse cutting FS-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Chow (Alfalfa)</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>5321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit Restrainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10718-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib Cutters</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>#15 blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Sutures</td>
			<td>Ethicon-Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>A183H</td>
			<td>4-0 silk ties 18&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Ball</td>
			<td>McMaster-Carr</td>
			<td>1598K23</td>
			<td>3-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Drapes</td>
			<td>Gepco</td>
			<td>8204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Pump</td>
			<td>DRE Veterinary</td>
			<td></td>
			<td>Versaflow VF-300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visipaque contrast media</td>
			<td>McKesson Medical-Surgical</td>
			<td>509055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weitlaner Retractor</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17012-13</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preclinical model of hind limb ischemia in diabetic rabbits

Perifer vaskulär sjukdom är ett omfattande kliniskt problem som drabbar miljon tals patienter över hela världen. En stor konsekvens av perifer vaskulär sjukdom är utvecklingen av isärare. I svåra fall, patienter kan utveckla kritisk lem ischemi där de upplever ständig smärta och en ökad risk för extremiteterna amputation. Nuvarande terapier för perifer ischemi inkluderar bypass kirurgi eller perkutan interventioner såsom angioplastik med stentning eller aterektomi att återställa blod flödet. Emellertid, dessa behandlingar Miss lyckas ofta med den fortsatta utvecklingen av vaskulär sjukdom eller restenos eller är kontraindicerat på grund av den totala dåliga hälsan hos patienten. En lovande potentiell metod för att behandla perifera ischemi innebär induktion av terapeutisk kärl nybildning att tillåta patienten att utveckla säkerheter vaskulatur. Detta nybildade nätverk lindrar perifer ischemi genom att återställa per fusion till det drabbade området. Den mest använda prekliniska modellen för perifer ischemi utnyttjar bildandet av bakre extremiteterna ischemi hos friska kaniner genom femorala artär ligation. I det förflutna, dock, det har varit en stark koppling mellan framgången för prekliniska studier och misslyckandet i kliniska prövningar om behandlingar för perifer ischemia. Friska djur har vanligt vis robust vaskulär förnyelse som svar på kirurgiskt inducerad ischemia, i motsats till den reducerade vaskularitet och förnyelse hos patienter med kronisk perifer ischemia. Här beskriver vi en optimerad djur modell för perifer ischemi hos kaniner som inkluderar hyperlipidemi och diabetes. Denna modell har minskat säkerheter bildning och blod tryck återhämtning i jämförelse med en modell med en högre kolesterol diet. Således, modellen kan ge bättre korrelation med mänskliga patienter med nedsatt angiogenes från de gemensamma samtidiga morbidities som åtföljer perifer kärl sjukdom.

Efter induktion av diabetes och initiering av 0,1% kolesterol diet, det totala kolesterolet för kaniner med diabetes och kolesterol diet var 123,3 ± 35,1 mg/dL (n = 6 manliga kaniner) genomsnittliga totala tid punkter och kaniner. BGL-nivån för dessa kaniner var 248,3 ± 50,4 mg/dL (n = 6 hankaniner). En tid kurs för blod kemiska sammansättningar och ben blod tryck nyckeltal i en typisk kanin visas i figur 3 i jämförelse med kaniner under en högre kolesterol diet...

Watch this Scientific Journal Video about Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits at JoVE.com

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Vi beskriver ett kirurgiskt ingrepp som används för att inducera perifer ischemi hos kaniner med hyperlipidemi och diabetes. Denna kirurgi fungerar som en preklinisk modell för tillstånd som upplevs i perifer artärsjukdom hos patienter. Angiografi beskrivs också som ett sätt att mäta omfattningen av introducerade ischemi och återhämtning av per fusion.

Prekliniska modell av hind lem ischemia i diabetiska kaniner

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

En regenerativ behandling för perifer arteriell sjukdom skulle vara mycket fördelaktigt och detta djur modell kan bättre testa om experimentella behandlingar kan fungera i mänskliga patienter. Vårt förfarande syftar till att lägga fram en förbättrad modell. En som mer exakt replikerar den terapeutiska resistens som uppstått hos patienter med diabetes eller hyperlipidemi.Denna djurmodell kan användas för att testa nya terapier för perifer ischemi och ger en preklinisk modell som har äventyrat kärlikrensning till ischemi. Efter att ha bekräftat en brist på svar på hind paw nypa i en sövd fyra till sex månader gammal diabetiker och hyperlipidemic kanin, använd en skalpell med ett antal 15 blad för att göra en fyra till fem centimeter långt snitt bara laterala till höger sida av luftstrupen och använda trubbig dissekering att exponera rätt gemensamma halspulsådern. Använd små Weitlaner upprullningsdon för att öppna snittet och försiktigt isolera halspulsådern från halsvenen och vagusnerven.När halspulsådern har helt separerats från nerv och halsvenen, placera en 4-O silke sutur på proximala och distala ändarna av den exponerade artären och binda av den distala änden av halspulsådern med en kirurg knut och fyra kvadrat knop. På den proximala änden, använd en kärlssil silikon slips för att möjliggöra åtdragning eller lossnande av kärlet, efter behov. Därefter applicerar du cirka 0,5 milliliter 1%lidokain längs den exponerade halspulsådern och nerven för att främja vasodilatation och minska nervirritation.Administrera 500 internationella enheter av heparin IV.Placera en fyra-tums tråd insättningsverktyg i artären. Mata en 0,014 tum med 185 centimeters ledare genom införingsverktyget till aorta bifurkationen vid höftskölden i den fallande aortan, och för fram en tre franska pigtail angiographic kateter över tråden. För fram pigtailkatetern till två centimeter proximal till den aorta bifurkationen vid höftskölden i den fallande aortan, placera spetsen på katetern mellan den sjunde ländryggen och den första korskota.Testa kateterns placering genom att manuellt injicera två till fyra milliliter kontrastmedel. När korrekt positionering är bekräftad, administrera en intraarteriell injektion av 100 mikrogram nitroglycerin genom katetern för att öka vasodilatation. Administrera sedan 0,8 till en milliliter på 1%lidokain genom katetern för att assistera med vasodilatation och spola katetern med hepariniserad koksaltlösning.Fäst slangen för den automatiserade angiografiska injektorn på katetern, var noga med att ta bort eventuell luft från linjen. Använd den automatiserade angiografiska injektorn för att leverera nio milliliter kontrastmedel genom katetern på tre milliliter per sekund och utföra digital subtraktionsangiografi med sex bildrutor per sekund. Välj de seriella bilderna och ändra bilden av angiogrammet med hjälp av minus 40%-inställningen för att minimera utseendet på ben och fånga en fullständig bild av kärlperfusionen med kontrast.För att isolera lårbensartären, använd ett nummer 15 skalpell blad för att göra en längsgående hud snitt över höger lårbensartär, se till att snittet sträcker sig inferiorly från inguinal ligament och slutar på området bara proximala till patella. Använd trubbig dissektion för att exponera lårbensartären och öppna snittet med Weitlaner upprullningsdon. Applicera ungefär 0,5 milliliter 1%lidokain lokalt för att minska nervirritation och främja vasodilatation.Fortsätt den trubbiga dissektionen av vävnaderna för att frigöra hela längden av lårbensartären tillsammans med alla dess grenar, inklusive den underlägsna epigastrisk, djup femorala, laterala cirkumflex och ytliga epigastrisk artärer. Dissekera längs popliteal och saphenous artärer, liksom den externa höftartären, periodvis återfuktar området med saltlösning för att skydda mot vävnadsskador. Separera försiktigt lårbensartären från lårbensvenen och nerven och placera två 4-O silkessyturer på lårbensartären med precis tillräckligt med utrymme mellan suturerna för att artären ska kunna avskiljas.Använd sedan små Metzenbaum saxar för att skära mellan de två banden av den ligerade artären. Punktskatt lårbensartären varifrån artären bifurcates att bilda saphenous och popliteal artärer, arbetar proximately, binda bort någon sida grenar till punktskatt resten av lårbensartären till strax under epigastric artär. För upprepa angiografi, använd en silastic plåt med en monterad tre millimeter rostfritt stål kula.Att fästa den rostfria stålkulan i den övre delen av quadricepsmuskeln med 4-O silkessuturer. Dra huden över bollen när den är på plats. Administrera en intraarteriell injektion av 100 mikrogram nitroglycerin genom katetern för att öka vasodilatation.Om det behövs, administrera ytterligare 0,8 till en milliliter av 1%lidokain genom katetern för att bistå med vasodilatation och spola med hepariniserad saltlösning. Använd den automatiserade angiografiska injektorn vid samma inställningar för att injicera ytterligare nio milliliter kontrastmedel. Utför sedan ett annat angiogram, som visats.I slutet av förfarandet, ta bort katetern från höger artär och binda av artären med hjälp av 4-O silkes sutur redan på plats runt artären. Stäng sedan muskel- och subkutikallagren med 4-O polydioxanon eller 3-O polyglactin 910 suturer på en kona nål i ett kontinuerligt suturmönster och stäng huden med hjälp av 4-O polydioxanon eller 4-O polyglactin 910 suturer på en omvänd skärnål i ett nedgrävt kontinuerligt subkutikulär suturmönster. Hos icke-diabetiker djur, även med högre kolesterol, det finns en ökad återhämtning av blodtrycket i den ischemiska extremiteten och kärllighet i angiogrammen vid den slutliga tidpunkt jämfört med diabetiker djur.Histologiskt, förändringar i muskelstrukturen överensstämmer med ödem och ischemisk skada observeras som en förlust eller störningar av muskelfibrerna. Vidare kan immunfärgning för PECAM en och alfa glattmuskel aktin användas för att identifiera antalet och storleken på kärlen i vävnadssektionerna. Andra bildframställningsmetoder, såsom Doppler ultraljud, laser Doppler imaging, infraröd termografi, och MRT kan läggas till för ytterligare övervakning av den ischemiska delen reperfusion.Med denna inkorporering av terapeutiska resistens, vår modell mer exakt härmar ischemi i ett diseased tillstånd, föra fram bedömningen av nya terapier för perifera kranskärlens sjukdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Genöverföring för ischemisk hjärtsvikt I en preklinisk modell

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Längsgående Utvärdering av Mouse bakbenen benförlust efter ryggmärgsskada med Novel, In vivo, Metodik

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

En modifierad Heterotopisk Svinbakbenstrans modell för Translational vaskulariserad Composite allotransplantation (VCA) Forskning

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

A Preclinical Murine Model of Hepatic Metastases

En Prekliniska mus modell av levermetastaser

Numerous murine models have been developed to study human cancers and advance the understanding of cancer treatment and development. Here, a preclinical, ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotopic bakbenen Transplantation i musen

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² and Tau Neuropathology

Bedömning av spontan växelverkan, nyckelfunktionsgenkänning och limbindning i transgena musmodeller av Amyloid-P och Tau Neuropathology

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Ett Ex Vivo vävnadsodling modell för fibrovaskulär komplikationer i proliferativ diabetesretinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Bedömning av terapeutisk angiogenes i en murin modell av Hindlimb ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Fastställande av en svår torr ögon modell med fullständig Dacryoadenektomi hos kaniner

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

Taking the Next Step: a Neural Coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model to Maximize Functional Recovery in Rat

Ta nästa steg: en neural coaptation Orthotopic Hind Limb Transplant Model för att maximera funktionell återhämtning i Rat

Limb transplant in particular and vascularized composite allotransplant (VCA) in general have wide therapeutic promise that have been stymied by current ...