Name: ultrasound imaging of the thoracic and abdominal aorta in mice to determine aneurysm dimensions
Uploaded: 2019-03-08T14:00:00
Duration: 6 min 8 s
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著者の研究は、国立心臓、肺、によって支えられたおよび賞の下で健康の国民の協会の血液研究所血管病 (18SFRN33960001) の R01HL133723 と R01HL139748、アメリカの心臓協会 SFRN の番号します。継手は、AHA ポスドク研究員プログラム (18POST33990468) によってサポートされます。J. c. は、NCATS UL1TR001998 によってサポートされます。本稿の内容は著者の責任と国立衛生研究所の公式見解を必ずしも表さない。

マウスにおける超音波イメージングの大学ケンタッキー機関動物ケアおよび使用委員会の承認を得て実行 (IACUC プロトコル番号: 2018-2967)。イメージング中にイソフルラン 1%-3% 集/ボリュームを使用して、手続きのストレスを軽減し、低体温症を防ぐために暖房のプラットフォーム上に配置、マウスが麻酔しました。目の潤滑剤は、麻酔中に瞬目反射の喪失による角膜の損傷を防ぐために適用されます。
1. 機器のセットアップ
<ol><li>超音波検査機、プラットフォーム、暖房をオンにし、ゲルの暖かい (図 1)。</li>
	<li>超音波プログラムを開きます。研究については、研究の名とマウスの情報などを入力します。</li>
	<li>イソフルラン気化器と O2タンクを確認してください。コンテンツが少ない場合、イソフルラン気化器を記入および/または新しい O2タンクの交換します。</li>
	<li>誘導室および鼻の円錐形へのフィルターを清掃麻酔を接続します。</li>
	<li>誘導室の分岐を開きます。</li>
	<li>O2タンクを入れます。</li>
	<li>オン O2とイソフルラン ノブ 1 L/分と 0% 巻/巻、麻酔気化器, O2箱いっぱいにします。</li>
</ol>2. マウスの作製
<ol><li>O2にマウスを置き-麻酔による不要な心血管の変化を最小限に抑えるためチャンバーを誘導をいっぱい。</li>
	<li>イソフルラン気化器 (1.5%-2.5% の巻/巻) をオンにします。</li>
	<li>後肢の逃避反射の有無を確認します。</li>
	<li>商工会議所から、マウスを削除し、それぞれの目で滅菌眼科用潤滑剤の一滴を配置します。</li>
	<li>麻酔を鼻の円錐形にリダイレクトし、誘導室への流れを閉じます。</li>
	<li>麻酔鼻の円錐形の鼻と暖房プラットフォームに背部にマウスを置きます。</li>
	<li>脱毛クリームを胸や腹部、綿棒を使用してに適用されます。刺激を与えないように脱毛クリーム使用量を最小限に抑えます。</li>
	<li>1 分待つし、すべてのクリームと髪を優しく拭き取る。</li>
	<li>暖かい水との区域に水を引くし、水気クリームを完全に削除します。</li>
	<li>各プラットフォーム上の 4 つの銅のリードのゲルを点在してください。</li>
	<li>心電図 (ECG) 測定のためのリード線にダウン (ダウン手掌) 各足パッドをテープします。これは心電図とマウス麻酔中の呼吸生理が提供されます。</li>
	<li>450-550 ビート/分間心拍数があるか確認します。麻酔大動脈径を変更することができます、心臓機能に影響を与えるので、心拍数が適切な範囲になるよう麻酔の配信率を調整します。</li>
	<li>Prewarmed 超音波ゲルを準備されたサイトに適用されます。</li>
	<li>ホルダーにプローブを接続します。</li>
	<li>最適なスキャンのためのプラットフォームを回転させ、超音波用ジェルとの接触になるまでプローブを下げます。</li>
</ol>3. 胸部大動脈のイメージング
<ol><li>マウスの左側を下に傾けます。</li>
	<li>マウスの胸骨 (図 2A) の右端にプローブを置きます。プローブにリファレンス ・ マーカを尾側向き。 注:プローブにリファレンス ・ マーカ プローブ方向を示します (図 2A ~ D) 超音波装置のモニターのメーカーと一致している.マーカーの形状は、超音波システムごとに異なります。</li>
	<li>胸部下行大動脈の血流を確認するのに色ドップラーを使用します。</li>
	<li>大動脈を明確に示すためステージとプローブの角度を調整する (図 3A, B)。 注:無名が肺動脈と大動脈弁は、右傍胸骨長軸ビューの解剖学的ランドマークに使用できます。したがって、このビューから大動脈のイメージは 1 つのフレーム (図 3A) 無名および肺動脈と大動脈弁を含めることができます。大動脈疾患大動脈拡張や蛇行などにより、1 回のスキャンで大動脈全体をキャプチャすることは困難だ画像は別にキャプチャする必要があります。区切りの画像がある大動脈の測定値の過小評価が発生する可能性は、ステージとプローブの細かい位置が必要です。右傍胸骨長軸ビュー全体の上行大動脈 (図 3C) をイメージングに最適です。ただし、大動脈洞動脈瘤大動脈を中心に、このビューをキャプチャすることは困難が多いです。左傍胸骨長軸ビューは、このビューは、1 つのフレーム (図 3C) の大動脈弓をキャプチャできないが、別の方法として近位の上行大動脈に大動脈基部からキャプチャをできます。左傍胸骨長軸ビュー (図 2B) 胸骨の左の端にプローブを配置します。ステージは平らまたはマウスの右にわずかに傾いたです。右傍胸骨長軸ビューと同じ方法で手順の他の手順を実行します。これらのプローブ位置の長所と短所は表 2のとおりです。大動脈のイメージは、右または左傍胸骨長軸ビューのどちらかで一貫してキャプチャする必要があります。</li>
	<li>イメージの深さと幅のノブを使用して、フレーム レートを高めるため超音波画像をトリミングします。</li>
	<li>焦点深度のつまみを使用して、上行大動脈の背側焦点深度を変更します。</li>
	<li>超音波パラメーターを確認します。このプロトコルの超音波の設定は表 1のとおりです。</li>
	<li>つまみを使用して、X 軸と Y 軸ステージ、最大可能な径と縦大動脈イメージをキャプチャする優しく、プローブを移動します。</li>
	<li>1 つの映画のループを格納します。</li>
</ol>4. 腹部大動脈のイメージング
<ol><li>胸骨剣状突起 (図 2C) 下だけ横方向にプローブを配置します。プローブにリファレンス ・ マーカ マウスの右側に直面する必要があります。腹部大動脈は下大静脈および門脈 (図 3D) の横にある必要があります。</li>
	<li>拍動流を確認するカラードップラーで腹部大動脈を視覚化します。 注:ドップラー角度が血液の流れに垂直な色ドップラー信号は大動脈では表示されません。色ドップラー イメージングに加えて腹部大動脈は下大静脈および門脈からプローブを少し押すことによって区別できます。下大静脈および門脈は、大動脈の開存性を維持しながら圧縮可能。</li>
	<li>フレーム レートが増加する超音波画像をトリミングします。</li>
	<li>腹部大動脈の後壁に焦点深度を変更します。</li>
	<li>尾側腹腔と優れた腸間膜動脈の分岐ポイントを視覚化するプローブを移動します。</li>
	<li>右腎動脈を見つけてそれを目印として使用します。 注:腹部大動脈瘤は、大動脈の蛇行につながる可能性があります、ので垂直に腹部大動脈をイメージするプローブの角度を調整します。内部統制の右腎の分岐点の 1 つのイメージをキャプチャする必要があります。</li>
	<li>腹部大動脈 (図 3D, E) で最大の拡張を示す関心領域のシネ ・ ループをキャプチャします。 注:大動脈瘤の局在は、動物モデルごとに異なります。アンジオテンシン II によるマウスの大動脈拡張 CaCl2またはエラスターゼ高齢者マウスの大動脈の大動脈瘤を引き起こす間、副腎の大動脈では主に発生します。</li>
</ol>5. postscanning のマウスのケアとクリーンアップ
<ol><li>超音波用のジェルを拭き取る、胸部や腹部にぬるま湯、水を引くし、マウスをそっと拭きます。</li>
	<li>マウスを加熱パッドの上に配置されているケージに戻ります。</li>
	<li>イソフルラン気化器と O2タンクをオフに。イソフルラン レベルが低い場合は、気化器を補充します。</li>
	<li>超音波装置、プローブ、および柔らかい布とイソプロピル アルコールまたはグルタルアルデヒド ワイプでプラットフォームをクリーニングします。</li>
	<li>スキャン中に収集されたすべてのファイルをダウンロードします。</li>
	<li>超音波マシンをオフにします。</li>
	<li>彼らは麻酔から回復した後、マウスを動物飼育室に戻ります。</li>
</ol>6. 分析
<ol><li>
胸部大動脈画像の解析
	<ol>
<li>解析ソフトウェアを起動し、超音波データを開きます。補足図 1にイメージ解析ソフトウェア (Vevo ラボ 3.0.0) の例を示します。</li>
		<li>映画のループ (図 4A、C、E、G 、補足図 1) から測定のための 1 つの大動脈の超音波画像を選択します。 注:このプロトコルは通常 1 つの映画のループで 6 ~ 7 ハートビートを検出します。大動脈径は収縮期と心臓拡張期 (図 4A G) の間で異なるため、測定値は心臓のサイクルの一貫した段階で検討する必要があります。収縮 R 波から T 波の終わりが定義されます。一般に、T 波は心電図をマウスで識別するために困難です。したがって、収縮期における大動脈径は目視検査 (図 4私) によって定義された、生理的収縮で測定されるべき。大動脈は最大限に拡大した心臓の相を midsystole にする必要があります。末期は、(図 4私) 心電図の R 波で簡単に定義されます。末期における大動脈の測定は、心臓のサイクルを区別する点では midsystole よりも簡単です。</li>
		<li>大動脈の内腔の中心に線を描きます。この中心線は、ものさし線の大動脈 (図 4B、Dおよび補足図 1) に垂直を確実に使用されます。</li>
		<li>大動脈洞と昇順大動脈弁レベル (図 4B Dと補足図 1) 最大のインナー エッジに管腔の内側の端から中心線を通る垂直線を描画します。</li>
		<li>少なくとも 3 つの別々 のハートビートで大動脈の直径を測定し、測定値の平均を計算します。 注:Vevo2100 システムは、大動脈の寸法の測定のため、Vevo ラボ分析ソフトウェアを使用します。各ボタンの簡単な説明は次のとおりです。測定モード (補足図 1 a): 大動脈測定のためこのモードを選択する必要があります。シネ ・ ループ (補足図 1 b) のスライダー: 超音波フレームはこのスライダーを使用して選択されます。トレース距離 (補足図 1): 中心線はこの関数で描画されます。直線距離 (補足図 1): この関数を用いて大動脈のディメンション。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
腹部大動脈画像の解析
	<ol>
<li>解析ソフトウェアを起動し、超音波データを開きます。</li>
		<li>シネ ・ ループ (図 4E、G) から分析のため大動脈イメージを選択します。 注:胸部大動脈の測定と同様に、心臓のサイクルは腹部大動脈径とエリア影響可能性があります。測定は、心臓のサイクルの一貫した段階で決定する必要があります。</li>
		<li>(図 4F、H) 血管内腔の内側の端に内側の端から最大内腔の直径、線を描きます。</li>
		<li>内腔領域 (図 4F、H) の大動脈の内腔の内側のエッジをトレースします。</li>
		<li>3 つの独立したハートビートの最低で大動脈の計測データを集録し、データの平均を計算します。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

著者が何も情報開示にありません。

このプロトコルは、高周波超音波を用いたマウスで胸部、腹部の大動脈のイメージの獲得のための技術ガイドを提供します。超音波映像大動脈近位大動脈を中心に大動脈の測定の精度を危険にさらす可能性があります、プローブの位置と心臓サイクルなどの潜在的な交絡因子があります。このプロトコルでは、大動脈の寸法を正確に測定するために詳細な手順と画像集録、計測、およびデータ解析のための戦略について説明します。
近位大動脈をイメージング プローブの配置方法はいくつかあります。図 2Aに示すように右傍胸骨長軸ビューは、このプロトコルでは超音波に使用されました。このビューは、大動脈洞から大動脈弓部分に高品質な画像の取得を促進します。超音波の波の干渉のためいない下行大動脈に最適です。このプロトコルは、彼らは主に上行大動脈に大動脈の内腔の拡張を示すために胸部大動脈瘤のほとんどのマウスのモデルに適用されます。マウス18,19,20,21,22,23の上行大動脈の動脈瘤の形成を引き起こす慢性のアンジオテンシン II の注入が含まれます。マルファン症候群のモデルをマウス (fibrillin 1C1041G/+ 、fibrillin 1mgR/mgRマウス) 大動脈と大動脈拡張23,24,25を昇順の両方を表示します。Loeys ディーツ症候群マウスモデル (1 または 2 平滑筋細胞における TGF-β 受容体の生後削除) も大動脈と大動脈18,26,27,28 を昇順で動脈瘤を開発します。.したがって、右傍胸骨長軸ビューは、胸部大動脈瘤手術のこれらのマウスモデルの大動脈の画像に適しています。その一方で、右傍胸骨短軸ビュー直径の過大評価を引き起こす可能性のある大動脈の蛇行により動脈瘤、しばしば複雑なので斜めに大動脈の画像をキャプチャする可能性があります。胸部下行大動脈とは異なり短い軸のビューは、このプロトコルで腹部大動脈のイメージングに使用されました。大動脈の湾曲し蛇行は胸部大動脈に比べて腹部大動脈にささやかなので、短い軸ビューで画像の取得は大動脈径の underestimations を改善します。その異なるプローブを注意して位置を提供別の視野角と大動脈の径は、各画角の異なる可能性がありますが重要です。したがって、信頼性の高い大動脈径測定はプローブの同じ位置を研究内のすべてのイメージに適用することによって強化されます。興味深いことに、三次元 (3 D) 超音波心臓・大動脈の画像がされている最近、29,30,31,32報告。さらに、現在の超音波システムは、四次元画像33として時間をかけて 3 D 映像を取得できます。したがって、これらの 3 D イメージング技術プローブ位置決めの問題解決する大動脈の構造をより正確に説明する可能性があります。
超音波画像は、2 D の明るさモード (B モード) または 1 次元運動モード (M モード) でキャプチャできます。いくつかの記事は、大動脈径の測定の M モードを使用しているが、B モードは望ましい15,34,35,36です。M モードは、時間的・空間的解像度を上げる 2 つの次元でイメージ能力を持っています。ただし、このモードは大動脈が超音波の波に垂直に描画される円筒であるという仮定に依存しています。この前提が当てはまらない動脈瘤の状態で、上行大動脈の湾曲この困難な nonaneurysmal 合衆国でさえ。さらに、大動脈は心臓サイクル37全体の固定位置に残りません。したがって、M モードと underestimations を含む測定誤差があります。
また、心臓のサイクルに影響する大動脈の内腔の直径に注意してくださいすることが重要です。予想通り、収縮期における大動脈径は拡張期 (図 4A H) より大きい大動脈壁の弾力性とひずみに関連付けられています。大動脈の弾力性とひずみは、収縮期と心臓拡張期の大動脈径の差から計算できます。正常大動脈31,34,35,38,,3940と比較して動脈瘤大動脈では、弾力性と歪が減少します。大動脈壁硬化度は、超音波で直接測定できません。脈波速度 (PWV) 動脈瘤大動脈31,35,41,42で増加する報告されたプロキシとしての剛性を評価できます。PWV は、パルス波ドップラー画像と対応する距離を使用して、2 つの動脈サイト間の通過時間によって計算されます。臨床検査とは異なり、大動脈の直径を比較するため、マウスの大動脈の測定のため心臓の相面で厳格な標準化はありません。したがって、心臓フェーズは大動脈の測定に適したは依然として不明です。しかし、信頼性と再現性の比較のために、大動脈径を心周期の定義された段階に測定してください。
このプロトコルは、大動脈の寸法を正確に測定するために大動脈の画像とデータの分析のための詳細な手順を提供します。大動脈の測定では、このプロトコルを使用しては、ex vivo 大動脈径 (図 5A) 実際と一致していた。また間の整合性を確認した- と頚椎の再現性 (図 5B、C)。このプロトコルは、特にプローブの位置と心臓のサイクルのすべてのステップは、正確な測定に必要です。ただし、適切な手順を使用する場合でも超音波イメージ投射の間の成果物は回避されていません。肋骨と肺、呼吸、心臓の脈動の場所は胸部大動脈のイメージの質に影響を与えます。腸内ガスは、腹部画像診断の成果物を可能性があります。したがって、貧しい大動脈画像の場合このプロトコルに従うときに除外基準を定義することをお勧めします。
高解像度超音波装置の出現により、マウスの大動脈の構造に検証できる絶妙な詳細、直列と従来、大動脈瘤の理解に貢献します。超音波イメージング、前述のように、プロトコルは、マウスで大動脈瘤を定量化するため信頼性が高く、再現性のある非侵襲的アプローチです。

大動脈瘤は、胸部や腹部の大動脈の1,2,3,4の永久的な管腔の拡張によって特徴付けられる共通の血管疾患です。拡張と病原性のメカニズムへの洞察力の必要性を強調する大動脈瘤の破裂を防ぐために薬理学的治療法は確立されていません。大動脈瘤のメカニズムを明らかにするには、遺伝的または化学的操作によって生成されたマウス モデルは広く使用されている4,5,6,7,8,をされています。9,10,11,12. マウスの大動脈径の正確な定量化動脈瘤研究の基礎であります。
高周波超音波の開発は、大動脈寸法13,14,15のわずかな違いを検出する画像の空間的および時間的解像度を増加しています。これがマウスの大動脈径の連続測定を有効に、したがって、マウス研究大動脈瘤で大動脈の直径を測定するため、推奨される方法となっています。超音波画像診断単純な手法ですが、正確な測定、データ解析、および解釈の適切な画像を取得する大動脈の解剖学および生理学の知識が必要です。大動脈は、近位胸部16可変曲率脈動円筒器官です。これは一般的に得られる二次元 (2 D) 画像で大動脈の寸法の不正確な決定のための潜在性に貢献します。大動脈の測定の精度が侵害される動脈瘤状態17で大動脈の蛇行によってさらに。大動脈弁狭窄の信頼性と再現性のある測定値を得るためには、このプロトコルはマウス近位胸部および腹部大動脈の直径を測定するための高分解能超音波システムの使用のための実用的なガイドを提供します。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:856px;" width="856">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Name of Reagent</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td style="width:232px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Isothesia (Isoflurane)</td>
			<td style="width:173px;">Henry Schin</td>
			<td style="width:143px;">NDC11695-6776-2</td>
			<td>Anesthetic Agent</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Omnicon F/Air Anesthesia Gas Filter Canister</td>
			<td style="width:173px;">A.M. Bickford Inc.</td>
			<td style="width:143px;">80120</td>
			<td>Scavenging System for Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td style="width:173px;">Dechra</td>
			<td style="width:143px;">NDC17033-211-38</td>
			<td>Lubricating Eye Drops</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Aquasonic&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Parker Laboratories</td>
			<td style="width:143px;">01-08</td>
			<td>Ultrasound Gel</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Nair</td>
			<td style="width:173px;">Nair</td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td>Depilliating Cream</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Transeptic Transducer Cleaning Solution</td>
			<td style="width:173px;">Parker Laboratories</td>
			<td style="width:143px;">341-09-25</td>
			<td>Cleaning spray for probes</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:143px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Vevo 2100</td>
			<td style="width:173px;">VisualSonics</td>
			<td style="width:143px;">Vevo 2100</td>
			<td>Ultrasound Machine</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">Vevo LAB 3.0.0</td>
			<td style="width:173px;">VisualSonics</td>
			<td style="width:143px;">Vevo LAB 3.0.0</td>
			<td>Ultrasound Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:308px;">MS-550D</td>
			<td style="width:173px;">VisualSonics</td>
			<td style="width:143px;">MS-550D</td>
			<td>Ultrasound Probe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">EX3 Vaporizer</td>
			<td style="width:173px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:143px;">EX 3</td>
			<td>Analogue Anestheic Vaporizer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:308px;">Heating Pad</td>
			<td style="width:173px;">Sunbeam</td>
			<td style="width:143px;">E12107</td>
			<td>Heating Pad</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ultrasound imaging of the thoracic and abdominal aorta in mice to determine aneurysm dimensions

現代的な高解像度超音波機器マウス大動脈の測定を容易にするための十分な解像度があります。これらの楽器は、大動脈瘤のマウス ・ モデルにおける大動脈の寸法を測定に広く使用されています。大動脈瘤は、大動脈の永久的な拡張術は昇順と腹部領域で最も頻繁に発生すると定義されます。超音波による大動脈の寸法の連続測定、開発や生体内で大動脈瘤の進行を評価するプリンシパルのアプローチです。多く報告された研究は、プライマリ エンドポイントとして大動脈の直径を測定する超音波を使用するプローブの位置と心臓のサイクル、データ集録、解析、および解釈の精度に影響を与えるなどの交絡因子があります。このプロトコルの目的は、信頼性と再現性のある方法で大動脈の直径を測定する超音波の使用に関する実用的なガイドを提供することです。このプロトコルでは、マウスや器具の準備、適切な超音波画像とデータ解析の獲得を紹介しています。

周囲脳槽部近位の胸部、腹部の大動脈の代表的超音波断層像はそれぞれ図 3、および図 3Cに表示されます。上行大動脈肺動脈の隣にある、アーチの領域に 3 つの支店を持つ曲がり管を形作る: 腕頭動脈、左総頚動脈、左鎖骨下動脈 (図 3A)。腹部大動脈、下大静脈 (図 3D) 背側検出します。図 3B ,図 3図 3Aと図 3のD、通常直径に比べて深い狭窄と胸部および腹部大動脈瘤の治療の代表的な画像が表示されます。 H、それぞれ。すべての超音波画像は、末期で捕獲されました。
代表的な胸部および腹部大動脈の超音波画像は、midsystole と終了-拡張期 (図 4A, C, E, G) で捕獲されました。図 4B、D、F、Hの測定を示す代表的な画像が掲載されています。上行大動脈の中央に緑色の線は、大動脈洞を標準化し、昇順大動脈径 (図 4B, D) に使われました。行は、大動脈洞 (黄色の線) で内腔の 2 つのインナー エッジと最大昇順大動脈径 (赤い線) と緑色の線に垂直に描かれました。胸部および腹部大動脈の内腔の直径は収縮期と拡張期 (図 4A H) 間違っていた。最大大動脈径 (赤)、腹部大動脈の内腔領域 (緑) が、(図 4F, H) を測定します。モニター心電図の代表的なイメージは、図 4は私に表示されます。心周期は、正確な測定のために考慮する必要があります。エンド拡張期と収縮期はそれぞれ白のドットとピンクのラインで示されます。
このプロトコルの再現性と精度を検証するため、パイロット研究を行った。代表的な胸部大動脈超音波と ex vivo 画像は図 5のとおりです。昇順大動脈径にこれらのイメージ間で測定径で大きな違いはなかった (超音波: 1.67 ミリメートル対前のヴィヴォ: 1.65 mm)。大動脈洞は、元の参照してくださいすることは困難だったので生体画像、大動脈洞直径は前のヴィヴォ計測していません。このプロトコルの間と頚椎の再現性は、図 5B は、Cに表示されます。潜在的な変動を決定するには、超音波イメージングされた 2 つの観測者によっては単独で実行すなわち経験豊富な循環器専門医と同じマウス (を使用して 2 つの別の日にこのテクニックを学んでいる nonexperienced の学部生n = 5)。すべてのドットは図 5B、C、専攻間のないことを示す平均 ± 1.96 SD の間に位置していた- またはこのプロトコルの頚椎変性。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59013/59013fig1.jpg"> 図 1:ワークステーション セットアップします。ワークステーションには、誘導の麻酔、麻酔清掃フィルター、温水のプラットフォーム、超音波ゲル、ゲルより暖かいための部屋が含まれています。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59013/59013fig2.jpg"> 図 2:近位胸部および腹部大動脈イメージング用プローブ配置の例です。(A) 右の配置と (B) をプローブ大動脈、昇順とアーチの領域、および (C) 腹部大動脈の短い軸のビューの左傍胸骨長軸ビュー。超音波システムの (D) の代表的なモニター イメージ。黒い矢印は、プローブ上の参照のマーカーを示します。黄色の矢印は、参照マーカーの側を表します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59013/59013fig3.jpg"> 図 3:胸部、腹部の大動脈の代表的超音波断層像。(A) 出血、(B) 動脈瘤上行大動脈、右傍胸骨長軸ビューから。(C) 出血が大動脈、左傍胸骨長軸ビューから。出血 (D) および (E) 動脈瘤腹部大動脈。Asc の Ao = IA 上行大動脈腕頭動脈、LCA を = 左総頚動脈、LSA を = = 左鎖骨下動脈、PA = 肺動脈、副鼻腔大動脈洞、下大静脈を = = 下大静脈とアブド ・ Ao 腹部大動脈を =。黄色の三角形は、大動脈瘤を示しています。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59013/59013fig4.jpg"> 図 4:大動脈画像の測定。(Aで捕獲した胸部下行大動脈の画像) midsystole とエンド拡張期 (C)。Midsystole (B) 中に胸部大動脈基部の大動脈径の測定を示す画像と心臓拡張期 (D)。緑の線は、上行大動脈の中心を示します。黄色と赤の線はそれぞれ大動脈洞と上行大動脈の直径を示します。黄色と赤の色の数字はそれぞれ大動脈洞と上行大動脈の実際の直径を示します。腹部大動脈のイメージは、midsystole とエンド拡張期 (G)、(E) でキャプチャ。Midsystole (F) の中に副腎の大動脈の測定を示す画像は、拡張期 (H) 終了。赤と緑の線は、それぞれ直径と腹部大動脈の内腔領域を示します。赤と緑の色の数字は実際の直径を示し、腹部大動脈のそれぞれ。(私) モニター心電図 (ECG) は、画像集録中に記録されます。緑と黄色の線は、心電図と呼吸周期をそれぞれ示します。白の点線は終わり-弛緩期, を表し、紫色の線は収縮を。P = P 波と R = R 波。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59013/59013fig5.jpg"> 図 5:精度と再現性の超音波断層像と。(A) 代表的な画像の胸部大動脈超音波と c57bl/6 j マウス (10-12 週齢) 生体画像 ex。継ぎプロットを (B) の間のこのプロトコルの (C) 頚椎変性。Asc の Ao = IA, 大動脈腕頭動脈、LCA を = 左総頚動脈、LSA を = = 左鎖骨下動脈、PA = 肺動脈と静脈洞大動脈洞を =。緑の線は、上行大動脈の中心を示します。黄色と赤の線はそれぞれ大動脈洞と上行大動脈の直径を示します。赤内の数字は、ex vivo 画像と超音波で測定した上行大動脈の実際の直径を示します。黒の点線を示す平均と平均 ± 1.96 SD.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Supplemental Figure 1" src="/files/ftp_upload/59013/59013supfig1.jpg"> 補足図 1: 超音波解析ソフトウェア イメージの例です。超音波データ解析は、(A) 測定モードで実行する必要があります。(B) シネ ・ ループのスライダーを使用して映画のループからの分析の 1 つの大動脈の超音波画像が選択されます。(C) トレース距離関数を使用して、中心線が描画されます。大動脈の寸法は、直線距離 (D) 機能によって測定されます。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59013/59013supfig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。

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Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

超音波イメージングをマウスで胸部と腹部大動脈瘤の内腔の大きさを決定する一般的な様相となりました。このプロトコルでは、マウスの上昇と腹部大動脈の信頼性と再現性のある二次元超音波断層像を取得する手順について説明します。

マウス脳動脈瘤のサイズを調べるために胸部、腹部の大動脈の超音波断層像

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

高分解能超音波測定は、マウスの大動脈寸法を測定するために広く使用されてきた。このプロトコルは、このモダリティの適用に実用的なガイドを提供します。このプロトコルは、マウスにおける胸部および腹部大動脈の直径の再現性と正確な2次元測定の取得を容易にする。この手順のデモンストレーションは、博士研究員の澤田橋博士とケンタッキー大学の研究科学者ジェシカ・モルレゲン博士です。手順を開始する前に、綿棒を使用して麻酔薬のイメージング領域に拡張クリームを塗布します。1分後、クリームと髪をすべてそっと取り除き、露出した皮膚をぬるみですすります。皮膚を拭いてクリームを完全に取り除いた後、プラットフォーム上の4つの銅リードのそれぞれに超音波ゲルのドットを置きます。各足パッドを各リードにテープで貼り付け、心電図の測定値を得る。また、心拍数が毎分450〜450拍であることを確認します。あらかじめ温めた超音波ゲルを画像化部位に塗布し、プローブをホルダーに取り付けます。次に、最適なスキャンのためにプラットフォームを回転させ、超音波ゲルに接触するまでプローブを下げます。胸部大胸部をイメージするには、プラットフォームをマウスの左側に向かって下に傾け、プローブをマウスの胸骨の右端に置きます。プローブ上の基準マーカーの向きを大きくする。胸部大胸部の色のドップラーに切り替えて血流を確認します。そして、大オルタを明確に可視化するために、ステージとプローブの角度を調整します。画像の深さと幅のノブを使用して、フレームレートを増加させ、焦点深度のノブを使用して、高大大体の後側の焦点深さを変更するために超音波画像をトリミングします。表に示されているように超音波パラメータを確認し、X軸とY軸のステージノブを使用してプローブを穏やかに動かし、可能な限り最大の直径を持つ縦方向の大動脈画像をキャプチャします。腹部大動脈を画像化するには、マウスの右側に面したプローブの基準マーカーを使用して、胸骨とxyphoidプロセスのすぐ下にプローブを横向きに配置します。腹部大動脈は、下の大静脈、または門脈の隣に位置する必要があります。色のドーパーと腹部大動脈を視覚化して脈動性の流れを確認し、フレームレートを増加させるために超音波画像をトリミングします。腹大動脈の後壁に焦点深さを変更し、セリアックと優れた腸間膜動脈の分岐点を視覚化するためにプローブを大きく動かします。次に、右腎動脈をランドマークとして使用し、対象領域の正血ループを捕捉し、腹部大動脈の最大拡張を示す。すべての画像がキャプチャされた後、超音波ゲルを取り除き、暖かい水でイメージング領域をすすいで、マウスを静かに拭きます。マウスを加熱パッドのケージに戻し、超音波機械、プローブ、およびプラットフォームを柔らかい布と消毒剤のワイプで清掃します。その後、スキャン中に収集されたすべてのファイルをダウンロードし、超音波マシンをオフにします。非動脈瘤近位胸部大動脈のこの代表的な超音波画像では、上昇大動脈は、肺動脈の隣に位置し、アーチ領域に3つの枝を有する湾曲した管を形成することができる。分母動脈、左共通頸動脈、および左鎖骨下動脈。非動脈瘤腹部大動脈のこの代表的な超音波画像では、腹部大動脈は、下の大静脈に対して後回りに検出される。ここでは、胸部および腹部大動脈瘤の代表的な画像が示されている。大動脈大動脈と昇順大動脈径の測定に、緑の線は大動脈大動脈と昇順大動脈直径をそれぞれ標準化するために使用されます。線は大動脈の大動脈の内縁と最大上昇大動脈直径の間の緑の線に垂直に描くことができます。腹部大動脈の測定のために、内縁から血管内腔の内縁まで、最大の光径を横切る線を引き、大動脈管腔の内縁を光領域にトレースします。胸部と腹部大動脈の光径は、収縮期と拡張期の間で異なる。正確な測定のために心周期も考慮されるべきである。この代表的なパイロット研究では、超音波とex vivo画像の間の上昇大オルタの測定された直径に大きな違いはなかった。この超音波技術は、2人の独立した観察者によって行われた大動脈測定と測定セッションの間のこの実験で観測されなかった間または内部の観察者の変動性が観察されなかったとして、再現可能で正確な結果の取得を可能にする。プローブとステージの設定の調整は、信頼性が高く再現可能な大動脈画像撮影の重要なステップです。データ分析ステップは、正確な大動脈測定にも重要です。

Research

JoVE Journal

Medicine

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

マウスの腹部癒着の作成

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

ラットの腹部大動脈の収縮を通じて心臓リモデリングのモデル

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

マウスの腹部大動脈 Myointimal 過形成を誘導するために気球を利用した傷害

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

局所エラスターゼ誘発下下胸部大動脈瘤のマウス外科モデル

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

尿毛腹部大動脈瘤の豚モデル

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

Establishing In Situ Closed Circuit Perfusion of Lower Abdominal Organs and Hind Limbs in Mice

マウスにおける下腹部および後肢の脳閉回路灌流における確立

Ex vivo perfusion is an important physiological tool to study the function of isolated organs (e.g. liver, kidneys). At the same time, due to the small ...

Imaging and Analysis of Oil Red O-Stained Whole Aorta Lesions in an Aneurysm Hyperlipidemia Mouse Model

動脈瘤高脂血症マウスモデルにおけるオイルレッドO染色全大動脈病変のイメージングと解析

Apolipoprotein E (Apoe)- or low density lipoprotein receptor (Ldlr)-deficient hyperlipidemic mice are the two most commonly used models for ...

Drug Treatment by Central Venous Catheter in a Mouse Model of Angiotensin II Induced Abdominal Aortic Aneurysm and Monitoring by 3D Ultrasound

アンジオテンシンII誘発腹部大動脈瘤のマウスモデルにおける中心静脈カテーテルによる薬物治療と3D超音波によるモニタリング

Since pharmaceutical treatment options are lacking in the clinical management of abdominal aortic aneurysm (AAA), animal models, in particular mouse ...

Modified Arteriovenous Fistula Surgery to Establish the RV Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model (Video) | JoVE 

出生後右心室容積過負荷マウスモデルの確立と確認

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV ...

Imaging the Abdominal Aorta with Point-of-Care Ultrasound

An Approach to Point-Of-Care Ultrasound Evaluation of the Abdominal Aorta

Author Spotlight: Using Point-of-Care Ultrasound for Comprehensive Evaluation of the Abdominal Aorta

腹部大動脈のポイントオブケア超音波評価へのアプローチ

Disorders of the abdominal aorta, including aneurysms and dissection, have potentially high rates of morbidity and mortality. While computed tomography ...