Name: human serum anti-aquaporin-4 immunoglobulin g detection by cell-based assay
Uploaded: 2019-04-05T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Human Serum Anti-aquaporin-4 Immunoglobulin G Detection by Cell-based Assay at JoVE.com

Авторы признательны за поддержку от субсидий из национального фонда науки Китая (№ 31600820), здравоохранения и планирования семьи Комиссии провинции Цзилинь (нет 2016Q036) и наука и технология планирования проекта из провинции Цзилинь (No. 20180520110JH).

Эта процедура была утверждена Комитетом этики первой больнице Цзилинь университета и была исполнена на примерно 1500 темы.
1. пациент подачи и забора образца крови
<ol><li>Примените Лаборатория обнаружения сыворотки, анти AQP4 IgG к клинике пациентов с главным жалобы и симптомы,...

<ol>
	<li>Zekeridou, A., Lennon, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+autoimmunity.">Aquaporin-4 autoimmunity.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 2 (4), 110 (2015).</li><li>Ho, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crystal+structure+of+human+aquaporin+4+at+1.8+A+and+its+mechanism+of+conductance.">Crystal structure of human aquaporin 4 at 1.8 A and its mechanism of conductance.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (18), 7437-7442 (2009).</li><li>Takeshita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neuromyelitis+optica-IgG+at+the+blood-brain+barrier+in+vitro.">Effects of neuromyelitis optica-IgG at the blood-brain barrier in vitro.</a> in vitro.Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 4 (1), 311 (2016).</li><li>Sato, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinction+between+MOG+antibody-positive+and+AQP4+antibody-positive+NMO+spectrum+disorders.">Distinction between MOG antibody-positive and AQP4 antibody-positive NMO spectrum disorders.</a> Neurology. 82 (6), 474-481 (2014).</li><li>Wingerchuk, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+consensus+diagnostic+criteria+for+neuromyelitis+optica+spectrum+disorders.">International consensus diagnostic criteria for neuromyelitis optica spectrum disorders.</a> Neurology. 85 (2), 177-189 (2015).</li><li>Ruiz-Gaviria, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specificity+and+sensitivity+of+aquaporin+4+antibody+detection+tests+in+patients+with+neuromyelitis+optica:+A+meta-analysis.">Specificity and sensitivity of aquaporin 4 antibody detection tests in patients with neuromyelitis optica: A meta-analysis.</a> Multiple Sclerosis and Related Disorders. 4 (4), 345-349 (2015).</li><li>Waters, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicentre+comparison+of+a+diagnostic+assay:+aquaporin-4+antibodies+in+neuromyelitis+optica.">Multicentre comparison of a diagnostic assay: aquaporin-4 antibodies in neuromyelitis optica.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 87 (9), 1005-1015 (2016).</li><li>Fryer, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AQP4+autoantibody+assay+performance+in+clinical+laboratory+service.">AQP4 autoantibody assay performance in clinical laboratory service.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 1 (1), 11 (2014).</li><li>Long, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+antibody+in+neuromyelitis+optica:+re-testing+study+in+a+large+population+from+China.">Aquaporin-4 antibody in neuromyelitis optica: re-testing study in a large population from China.</a> The International Journal of Neuroscience. 127 (9), 790-799 (2017).</li><li>Pisani, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+autoantibodies+in+Neuromyelitis+Optica:+AQP4+isoform-dependent+sensitivity+and+specificity.">Aquaporin-4 autoantibodies in Neuromyelitis Optica: AQP4 isoform-dependent sensitivity and specificity.</a> PloS One. 8 (11), 79185 (2013).</li><li>Jarius, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+antibody+testing:+direct+comparison+of+M1-AQP4-DNA-transfected+cells+with+leaky+scanning+versus+M23-AQP4-DNA-transfected+cells+as+antigenic+substrate.">Aquaporin-4 antibody testing: direct comparison of M1-AQP4-DNA-transfected cells with leaky scanning versus M23-AQP4-DNA-transfected cells as antigenic substrate.</a> Journal of Neuroinflammation. 11, 129 (2014).</li><li>Jury&#324;czyk, M., Craner, M., Palace, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overlapping+CNS+inflammatory+diseases:+differentiating+features+of+NMO+and+MS.">Overlapping CNS inflammatory diseases: differentiating features of NMO and MS.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 86 (1), 20-25 (2015).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Features+of+Patients+with+Multiple+Sclerosis+and+Neuromyelitis+Optica+Spectrum+Disorders.">Clinical Features of Patients with Multiple Sclerosis and Neuromyelitis Optica Spectrum Disorders.</a> Chinese Medical Journal. 129 (17), 2079-2084 (2016).</li><li>Majed, M., Fryer, J. P., McKeon, A., Lennon, V. A., Pittock, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+utility+of+testing+AQP4-IgG+in+CSF:+Guidance+for+physicians.">Clinical utility of testing AQP4-IgG in CSF: Guidance for physicians.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 3 (3), 231 (2016).</li><li>Jarius, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+antibodies+to+aquaporin-4+in+neuromyelitis+optica+and+related+disorders:+frequency,+origin,+and+diagnostic+relevance.">Cerebrospinal fluid antibodies to aquaporin-4 in neuromyelitis optica and related disorders: frequency, origin, and diagnostic relevance.</a> Journal of Neuroinflammation. 7, 52 (2010).</li><li>Asgari, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+the+leptomeningeal+blood+barrier+in+neuromyelitis+optica+spectrum+disorder.">Disruption of the leptomeningeal blood barrier in neuromyelitis optica spectrum disorder.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 4 (4), 343 (2017).</li><li>Kim, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI+characteristics+of+neuromyelitis+optica+spectrum+disorder:+an+international+update.">MRI characteristics of neuromyelitis optica spectrum disorder: an international update.</a> Neurology. 84 (11), 1165-1173 (2015).</li><li>Jarius, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MOG+encephalomyelitis:+international+recommendations+on+diagnosis+and+antibody+testing.">MOG encephalomyelitis: international recommendations on diagnosis and antibody testing.</a> Journal of Neuroinflammation. 15 (1), 134 (2018).</li><li>Narayan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MOG+antibody+disease:+A+review+of+MOG+antibody+seropositive+neuromyelitis+optica+spectrum+disorder.">MOG antibody disease: A review of MOG antibody seropositive neuromyelitis optica spectrum disorder.</a> Multiple Sclerosis and Related Disorders. 25, 66-72 (2018).</li><li>Ogawa, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MOG+antibody-positive,+benign,+unilateral,+cerebral+cortical+encephalitis+with+epilepsy.">MOG antibody-positive, benign, unilateral, cerebral cortical encephalitis with epilepsy.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 4 (2), 322 (2017).</li><li>Valentino, P., Marnetto, F., Granieri, L., Capobianco, M., Bertolotto, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+antibody+titration+in+NMO+patients+treated+with+rituximab:+A+retrospective+study.">Aquaporin-4 antibody titration in NMO patients treated with rituximab: A retrospective study.</a> Neurology Neuroimmunology &amp; Neuroinflammation. 4 (2), 317 (2016).</li><li>Kessler, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-aquaporin-4+titer+is+not+predictive+of+disease+course+in+neuromyelitis+optica+spectrum+disorder:+A+multicenter+cohort+study.">Anti-aquaporin-4 titer is not predictive of disease course in neuromyelitis optica spectrum disorder: A multicenter cohort study.</a> Multiple Sclerosis and Related Disorders. 17, 198-201 (2017).</li><li>Mealy, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aquaporin-4+serostatus+does+not+predict+response+to+immunotherapy+in+neuromyelitis+optica+spectrum+disorders.">Aquaporin-4 serostatus does not predict response to immunotherapy in neuromyelitis optica spectrum disorders.</a> Multiple Sclerosis. , (2017).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+aquaporin-4+antibodies+in+Chinese+patients+with+neuromyelitis+optica.">The role of aquaporin-4 antibodies in Chinese patients with neuromyelitis optica.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 20 (1), 94-98 (2013).</li><li>Kitley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+factors+and+disease+course+in+aquaporin-4+antibody-positive+patients+with+neuromyelitis+optica+spectrum+disorder+from+the+United+Kingdom+and+Japan.">Prognostic factors and disease course in aquaporin-4 antibody-positive patients with neuromyelitis optica spectrum disorder from the United Kingdom and Japan.</a> Brain. 135 (6), 1834-1849 (2012).</li></ol>

Мы описали широко доступный метод для обнаружения анти AQP4 IgG в сыворотке крови человека. Анти-AQP4 IgG тесно связана с NMOSD, и создание надежных анти AQP4 метод обнаружения IgG имеет решающее значение для клинической диагностики NMOSD. Во-первых анти AQP4 IgG специфичен для NMOSD. Рассеянный склероз явля?...

Сыворотка AQP4 IgG-это основные диагностические biomarker для нейромиелит optica спектра расстройств (NMOSD)1. Пробирного ячейки на основе (ЦБА) является широко используемым анти AQP4 метод обнаружения IgG с высокой чувствительностью и специфичностью. Здесь представлен подробный протокол для АЗВ.
AQP4, белок канала воды, имеет шесть единиц, охватывающих мембраны и два винтовых доменов, вокруг один водный поры2. Анти-AQP4 IgG участвует в патогенезе NMOSD через привязку к ее целевому объекту AQP4, который расположен главным образом на endfeet астроциты3. Было показано, что анти AQP4 IgG положительный примерно две трети пациентов NMOSD4. В самых последних международных диагностические критерии для NMOSD считается, что основные диагностические биомаркер5анти AQP4 IgG. В этой связи крайне важно создать надежный протокол обнаружить сыворотке человека анти AQP4 IgG и облегчения клинический диагноз NMOSD.
В настоящее время доступны различные методы обнаружения анти AQP4 IgG, такие как ЦБА, на основе ткани пробирного, энзим соединенный assay иммуносорбента и потока цитометрии6,7. ЦБ Азербайджана занято EU90 клетки, которые являются transfected с человеческой AQP4, чтобы захватить анти AQP4 IgG. Захваченные анти AQP4 IgG обнаружены флуоресцентные вторичные антитела и впоследствии визуализированное микроскопии. Накопление доказательств показал, что АЗВ является более чувствительной, чем другие анти AQP4 IgG определение методов6,7. По словам мета анализ чувствительность и специфичность ЦБА было показано, что 76% и 99%, которые были выше, чем на основе ткани и иммуноферментного assays6. Кроме того многоцентровое Сравнение диагностических анализов анти AQP4 IgG был проведены7. В общей сложности 193 исследования, предметы из 15 европейских диагностических центров были зачислены7. Четыре различные методы были использованы для выявления сыворотка анти AQP4 IgG7. Было продемонстрировано, что куб был чувствительными, чем другие методы7. Как AQP4 выражается в виде двух основных изоформ (AQP4-M1 и AQP4-M23), анти AQP4 IgG захват клеток является transfected с AQP4-M1 или AQP4-M23. Однако какой тип захвата клеток — лучше остается спорным. Одно расследование поддерживает AQP4-M1 на базе ЦБ8, в то время как другие указали, что AQP4-M23 основе АЗВ является более7,9,10. Однако на основе AQP4-M23 ЦБА может дать ложные положительные результаты благодаря неспецифических IgG привязки8. Jarius и др.. 11 сообщили, что не было никаких существенных различий в показатели выявления IgG анти AQP4 AQP4-M1 и на основе AQP4-M23 КТД.
В резюме, сыворотка анти AQP4 IgG-это ядро biomarker для NMOSD. КУБ имеет выше специфичность и чувствительность, чем другие методы обнаружения анти AQP4 IgG. Она остается спорным ли AQP4-M1 - или AQP4-M23-на основе ЦБА лучше. В этой статье описан подробный протокол для АЗВ, основанные на AQP4-M1, которые можно применить к клинической диагностики и исследования NMOSD.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:553px;" width="552">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:185px;">Anti-aquaporin-4 IIFT</td>
			<td style="width:96px;">Euroimmun</td>
			<td style="width:105px;">FA 1128-2005-50</td>
			<td style="width:167px;">Contains biochip slides coated with AQP4-M1 transfected and untransfected EU 90 cells, fluorescein-labelled anti-human IgG, anti-AQP4 antibody as positive control, antibody negative sample, salt for PBS pH 7.2, Tween 20 and embedding medium.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">CellSens Dimension</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>N/A</td>
			<td>photograph software</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Gel &#38; clot activator tube</td>
			<td>Improve medical</td>
			<td>623040202</td>
			<td>From a local Chinese company</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human serum anti-aquaporin-4 immunoglobulin g detection by cell-based assay

Анти Аквапорин-4 (AQP4) иммуноглобулина G (IgG) является основной диагностики biomarker для нейромиелит optica спектра расстройств (NMOSD). На основе клеток пробирного (ЦБА) является широко используемым методом для обнаружения анти AQP4 IgG в сыворотке крови человека с высокой чувствительностью и специфичностью. Вкратце, сыворотка анти AQP4 IgG захвачен AQP4-transfected клеток, что является фиксированной на биочип затем определяется флуоресцеин, меченного вторичное антитело. Микроскопии флуоресцирования используется для визуализации флюоресценция, и интенсивность флуоресценции оценивается по крайней мере два опытных клиницистов. Окончательный диагноз NMOSD может производиться на основе на комбинации результаты обнаружения анти AQP4 IgG, клинические проявления и перенёс выводов. По данным предыдущих исследований ЦБА чувствительными, чем другие методы обнаружения анти AQP4 IgG, и оно может применяться для клинической диагностики и исследования NMOSD. Этот метод имеет ограничения; например в международном масштабе по оценке сыворотке крови анти AQP4 IgG титры по-прежнему отсутствует. Здесь описан подробный протокол для сыворотки крови человека анти AQP4 IgG обнаружения с помощью ЦБА.

Используя процедуру, описанную здесь, конкретных анти AQP4 IgG в сыворотке крови является обнаруживаемой. Во время процедуры, предварительно разбавленного образцов, положительный контроль и отрицательный контроль были добавлены к реакции полям, которые содержат transfected ?...

Watch this Scientific Journal Video about Human Serum Anti-aquaporin-4 Immunoglobulin G Detection by Cell-based Assay at JoVE.com

Human Serum Anti-aquaporin-4 Immunoglobulin G Detection by Cell-based Assay

Определение анти Аквапорин-4 иммуноглобулина G сыворотку крови человека по Cell-based Assay

На основе клеток пробирного является широко используемым методом для обнаружения сыворотка анти Аквапорин-4 иммуноглобулина G. Этот метод может применяться для клинической диагностики и научных исследований нейромиелит оптического спектра расстройств.

Anti-aquaporin-4 (AQP4) immunoglobulin G (IgG) is the core diagnostic biomarker for neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD). The cell-based assay ...

В соответствии с недавними международными диагностическими критериями для нейромиелита optica расстройства спектра, анти-A'P4 IgG считается основным диагностическим биомаркером. Обнаружение анти-A'P4 IgG с помощью клеточного анализа может облегчить клиническую диагностику. Таким образом, анализ на основе клеток является более чувствительным и конкретным, чем другие методы обнаружения.И он может быть применен как к клинической диагностике, так и к научным исследованиям. Во-первых, довнесите образцы сыворотки пациента, слайд биочипа, порошок PBS и TWEEN 20 из комплекта анализа на основе холодильных клеток до комнатной температуры. Затем подготовьте более 200 миллилитров буфера для мытья PBS, содержащего 0,2 процента TWEEN 20 для каждого слайда биочипа.Используйте буфер для мытья, чтобы сделать 10-кратное серийное разбавление каждого образца сыворотки. Подготовка положительного и отрицательного контроля в соответствии с инструкциями производителя. Добавьте 30 микролитров 10-кратного последовательного разбавления образца, положительный контроль и отрицательный контроль к пяти индивидуальным полям реакции на реагентном подносе.Держите биочип слайд на слайдах и удалить защитную крышку, не касаясь его реакционной поля. Положите слайд на верхней части реагента лоток и инкубировать установки при комнатной температуре в течение 30 минут. Аккуратно промойте биочип слайд с буфером мытья.Затем погрузите его в стакан 500 миллилитров, наполненный 100 миллилитров буфера для мытья, и оставьте его при комнатной температуре на 10 минут. Вынуть биочип слайд из буфера мытья. Используйте бумажное полотенце, чтобы тщательно стереть любой оставшийся буфер из-за пределов поля реакции.Пусть слайд воздух сухой в течение одной-двух минут. В темной комнате добавьте 25 микролитров флуоресцентных вторичных антител к каждому реакционной полю реагентного лотка. Положите слайд на верхней части реагента лоток и инкубировать установки при комнатной температуре в течение 30 минут.Аккуратно промойте биочип слайд с буфером мытья. Затем погрузите его в 500 миллилитров стакан заполнены 100 миллилитров свежего буфера мытья, и оставить его при комнатной температуре в течение 10 минут. Вынуть биочип слайд из буфера мытья.Используйте бумажное полотенце, чтобы тщательно стереть любой оставшийся буфер из-за пределов поля реакции. Пусть слайд воздух сухой в течение одной-двух минут. Аккуратно добавьте одну каплю среды встраивания к каждому поле реакции на слайде биочипа.Наконец, печать биочип слайд с крышкой стекла, избегая пузырьков воздуха и приступить к визуализации. Слабая интенсивность флуоресценции отрицательного контроля, наблюдаемая в зараженной области, указывает на неспецифическую привязку вторичного антитела. Сравнение обнаруженных интенсивностей флуоресценции положительного контроля в инфицированных и неинфицированных районах указывает на специфическую привязку анти-АЗП4 ИгГ к АКП4М1 в инфицированных клетках.Отрицательная сыворотка против АЗП4 IgG показывает связывающие модели, аналогичные негативному контролю как в инфицированных, так и в неинфицированных областях. Положительная сыворотка показывает связывающие модели, аналогичные положительному контролю как в инфицированных, так и в неинфицированных областях. Образцы считаются анти-A'P4 IgG положительным, когда флуоресценция неоднородно увеличивается в зараженной области.Интенсивность флуоресценции коррелирует с анти-A'P4 IgG titer в сыворотке крови. Образцы считаются, вероятно, положительными, когда лишь небольшое количество клеток в трансфицированной области показывают обнаруживаемые интенсивности флуоресценции. Образец следует рассматривать как отрицательный анти-A'P4 IgG, когда его интенсивность в зараженном районе только однородно сильнее, чем в неинфицированной области.Как избежать пузырьков воздуха является жизненно важным и трудным. Чтобы устранить пузырьки воздуха, сначала используйте пипетки, чтобы избежать пузырьков воздуха в каплях. Во-вторых, при применении биочип слайд реагент лоток, сначала пусть одна сторона слайда коснуться капель, а затем выровнять слайд медленно.Кроме того, не прикасайтесь к полям реакции на протяжении всего эксперимента.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

Определение Реакционная способность и титр сыворотки использованием гемагглютинации Пробирной

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Combination of Adhesive-tape-based Sampling and Fluorescence in situ Hybridization for Rapid Detection of Salmonella on Fresh Produce

Сочетание Клей-ленты на основе выборки и флуоресценции На месте Гибридизация для быстрого обнаружения Сальмонеллы На Fresh Produce

This protocol describes a simple approach for adhesive-tape-based sampling of tomato and other fresh produce surfaces, followed by on-tape fluorescence in ...

Detection of Infectious Virus from Field-collected Mosquitoes by Vero Cell Culture Assay

Выявление инфекционных Касперского с поля, собранные Комары от Vero Пробирной культуры клеток

Mosquitoes transmit a number of distinct viruses including important human pathogens such as West Nile virus, dengue virus, and chickungunya virus. Many ...

Using the BLT Humanized Mouse as a Stem Cell based Gene Therapy Tumor Model

Использование BLT Humanized мышь в качестве стволовых клеток на основе модели генной терапии опухолей

Small animal models such as mice have been extensively used to study human  disease and to develop new therapeutic interventions. Despite the wealth of  ...

Cell-based Flow Cytometry Assay to Measure Cytotoxic Activity

Клеточная проточной цитометрии измерить цитотоксическую активность

Cytolytic activity of CD8+ T cells is rarely evaluated. We describe here a new cell-based assay to measure the capacity of antigen-specific CD8+ T cells ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Оценка Врожденная зондирование инфицированных ВИЧ-1 CD4<sup&gt; +</sup&gt; Т-клеток плазмоцитов дендритных клеток с помощью<em&gt; Экс естественных</em&gt; Совместное культивирование системы.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Conformational Evaluation of HIV-1 Trimeric Envelope Glycoproteins Using a Cell-based ELISA Assay

Конформационный Оценка ВИЧ-1 тримерных гликопротеинов с помощью мобильного основе ELISA Пробирной

HIV-1 envelope glycoproteins (Env) mediate viral entry into target cells and are essential to the infectious cycle. Understanding how those glycoproteins ...

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

Простой проточной цитометрии на основе анализа для определения в Vitro антитела зависит повышение вируса денге, с помощью вируса Зика выздоравливающих сыворотки

Antibody dependent enhancement of infection has been shown to play a major role in Dengue viral pathogenesis. Traditional assays that measure the capacity ...

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo

A Suction Blister Protocol to Study Human T-cell Recall Responses In Vivo

Всасывания блистер протокол для изучения человеческий Т-клеточный вспомнить ответы в естественных условиях

Cutaneous antigen-recall models allow for studies of human memory responses in vivo. When combined with skin suction blister (SB) induction, this model ...