Name: primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions
Uploaded: 2019-03-12T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af en bevilling fra National Science Rådet Taiwan (NSC102-2320-B-037-008-MY3) og nationale Cheng Kung University Hospital forskning tilskud (NCKUH-10102045).

Alle de procedurer, herunder animalske emner er blevet godkendt af institutionelle Animal Care og brug Udvalget af Kaohsiung medicinske universitet.
1. eksperimentel Procedure
<ol><li>Ofre voksen (8 til 12 uger gamle) kvinde/mand SD rotter af CO2 eutanasi.</li>
	<li>Anvende 70% ethanol og lad det blive absorberet i huden, og derefter tørre hud med en silkepapir.</li>
	<li>Sæt rotten på en ren plast plade i den liggende stilling.</li>
	<li>Løft huden med "eksterne" buet pincet ...

<ol>
	<li>Frith, C. H., Jones, T. C., Mohr, U., Hunt, R. D., Capen, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histology,+Adrenal+Gland,+Mouse.">Histology, Adrenal Gland, Mouse.</a> Endocrine System. Monographs on Pathology of Laboratory Animals. , 8-12 (1983).</li><li>Keegan, C. E., Hammer, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+insights+into+organogenesis+of+the+adrenal+cortex.">Recent insights into organogenesis of the adrenal cortex.</a> Trends in Endocrinology Metabolism. 13 (5), 200-208 (2002).</li><li>Marieb, E., Wilhelm, P. B., Mallatt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 17: The Endocrine System. , 558-581 (2017).</li><li>Chrousos, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+and+immune-mediated+inflammation.">The hypothalamic-pituitary-adrenal axis and immune-mediated inflammation.</a> New England Journal Medicine. 332 (20), 1351-1362 (1995).</li><li>Bornstein, S. R., Rutkowski, H., Vrezas, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokines+and+steroidogenesis.">Cytokines and steroidogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. (1-2), 135-141 (2004).</li><li>Bielohuby, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+analysis+of+the+mouse+adrenal+gland+from+weaning+to+adulthood:+time-+and+gender-dependent+alterations+of+cell+size+and+number+in+the+cortical+compartment.">Growth analysis of the mouse adrenal gland from weaning to adulthood: time- and gender-dependent alterations of cell size and number in the cortical compartment.</a> American Journal of Physiology-Endocrinology Metabolism. 293 (1), E139-E146 (2007).</li><li>van Weerden, W. M., Bierings, H. G., van Steenbrugge, G. J., de Jong, F. H., Schroder, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenal+glands+of+mouse+and+rat+do+not+synthesize+androgens.">Adrenal glands of mouse and rat do not synthesize androgens.</a> Life Sciences. 50 (12), 857-861 (1992).</li><li>Wang, T., Rainey, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adrenocortical+carcinoma+cell+lines.">Human adrenocortical carcinoma cell lines.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 351 (1), 58-65 (2012).</li><li>Payne, A. H., Hales, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+steroidogenic+enzymes+in+the+pathway+from+cholesterol+to+active+steroid+hormones.">Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones.</a> Endocrine Review. 25 (6), 947-970 (2004).</li><li>Ruggiero, C., Lalli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+ACTH+Signaling+on+Transcriptional+Regulation+of+Steroidogenic+Genes.">Impact of ACTH Signaling on Transcriptional Regulation of Steroidogenic Genes.</a> Frontiers in Endocrinology. 7, 24 (2016).</li><li>Chen, Y. C., Liang, Y. L., Huang, Y. L., Huang, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Toona+sinensis-stimulated+adrenal+steroidogenesis+in+primary+rat+adrenal+cells.">Mechanism of Toona sinensis-stimulated adrenal steroidogenesis in primary rat adrenal cells.</a> Journal of Functional Foods. 14 (2015), 318-323 (2015).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+I.+Culture+conditions+for+optimal+growth+and+function.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. I. Culture conditions for optimal growth and function.</a> In Vitro. 17 (7), 599-604 (1981).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+II.+Quantitation+of+steroid+dehydrogenase+stain.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. II. Quantitation of steroid dehydrogenase stain.</a> In Vitro. 17 (7), 605-611 (1981).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+metabolism+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Steroid metabolism by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 58 (3), 447-462 (1973).</li><li>Di Blasio, A. M., Fujii, D. K., Yamamoto, M., Martin, M. C., Jaffe, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+cell+proliferation+and+steroidogenesis+in+cultured+human+fetal+adrenal+cells+chronically+exposed+to+adrenocorticotropic+hormone:+rationalization+of+in+vitro+and+in+vivo+findings.">Maintenance of cell proliferation and steroidogenesis in cultured human fetal adrenal cells chronically exposed to adrenocorticotropic hormone: rationalization of in vitro and in vivo findings.</a> Biology of Reproduction. 42 (4), 683-691 (1990).</li><li>Brasaemle, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+The+perilipin+family+of+structural+lipid+droplet+proteins:+stabilization+of+lipid+droplets+and+control+of+lipolysis.">Thematic review series: adipocyte biology. The perilipin family of structural lipid droplet proteins: stabilization of lipid droplets and control of lipolysis.</a> Journal of Lipid Research. 48 (12), 2547-2559 (2007).</li><li>Hoeflich, A., Bielohuby, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+adrenal+gland+growth:+signal+integration+by+extracellular+signal+regulated+kinases1/2.">Mechanisms of adrenal gland growth: signal integration by extracellular signal regulated kinases1/2.</a> Journal of Molecular Endocrinology. 42 (3), 191-203 (2009).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+responses+to+corticotrophin+and+cyclic+AMP+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Morphological responses to corticotrophin and cyclic AMP by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 56 (3), 529-536 (1973).</li></ol>

Binyrerne spiller en nøglerolle i miljømæssig tilpasning3. Hormon som binyrebarken udskiller kan regulere og justere fysiologiske funktioner og homøostase3. In vivo modellen afspejler de reelle fysiologiske virkninger i kroppen. Det er dog stadig påvirket af mange komplicerede faktorer, forårsager ustabilt effekter i eksperimenter. Derimod har in vitro celle model fordele som gør det mageløse dyr model. Først, den miljømæssige tilstand er nemme at kontrollere i i...

Det endokrine system er ansvarlig for at regulere fysiologiske aktiviteter og homøostase1. Binyrerne ligger på den kranielle pol i nyrerne er en af de største endokrine organer, som udskiller mineralkortikoider og glukokortikoider androgen2,3. Der er to adskilte dele af binyrerne: cortex og medulla. Binyrebarken består af tre lag: den ydre glomerulosa, den mellemliggende fasciculata og indre reticularis3. Zona glomerulosa er den oprindelige secernerende af aldosteron, en mineralocorticoid, som aids i reabsorbing natrium ion og vand i nyrerne3. Zona fasciculata producerer primært en basal grad af glukokortikoider i normale fysiologiske forhold3. Kortikosteroider i gnavere og cortisol hos mennesker handle for at hjælpe kroppen med at klare stress ved at regulere blod glucose3. Til en vis grad kan hæmme inflammatoriske respons og regulere immunsystemet4,5. I modsætning til andre pattedyr, mus og rotter ikke har en funktionel zona reticularis på grund af manglen på en 17α-hydroxylase udtryk i binyrerne6,7. Binyrer fra mus og rotter er således blottet for udskillelsen af adrenal C-19 steroider (kortisol og adrenale androgener).
Primære kulturperler binyrebarkhormon celler har vist sig at være nyttige for efterforskningen mekanismer kontrollerende adrenal fysiologi8. Ligesom andre steroidogene væv syntetiserer hver adrenal zone sin steroider fra gratis kolesterol9. Ved adrenocorticotropt (ACTH) hormonstimulation, gratis kolesterol slippes fra fordelingen lipid dråber, og dermed forbedrer steroid produktion i fasciculata og reticularis10.
Mange grupper har forsøgt at etablere stabile cellelinjer fra binyrebarkhormon karcinomer. Men flere bekymringer har begrænset brug af binyrebarkhormon cellelinjer som in vitro modeller8. De steroid svar af cellelinjer kan variere mellem passager, lotnummeret for serum og kvaliteten af serum, osv. Derudover udskiller kommercielle adrenal cellelinjer (Y1 og SW13) ikke corticosteron, hvilket gør det vanskeligere at studere adrenal steroidogenesis8. Ved hjælp af kvæg og enhovede dyr binyrer som ex vivo modeller kan være et godt valg, selvom væv fra disse markeder kan sløre nogle ukendte risici. Sammenlignet med dem, forvaltningen af rotte binyrerne er lettere og kilden er relativt mere stabil og patogenfrie. Tilsammen, kunne den nuværende metode beskrevet her bruges til at undersøge den relaterede mekanisme af corticosterone syntese i rotte adrenal fasciculata celler.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>female/ male, SD/Wistar rats (8-12 wk)</td>
			<td>BioLASCO</td>
			<td></td>
			<td>male or femal rats are suitable for experiments. Female&#39;s adrenal glands are larger than male rats, however, female rats own the oestrous cycles that may influence the experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagenase, type II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C-6885</td>
			<td>isolation of adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12800-017</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ham&#39;s F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21700-075</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>4018</td>
			<td>buffer (powder)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>3506-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>16050014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>SAFC</td>
			<td>12103C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin (10,000 U)-streptomycin (10,000 ug/ml)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-002-Cl</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD343R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD331R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC224R</td>
			<td>cut rat skin and muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>delicate scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC101R</td>
			<td>cut adrenal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adipose-differentiation related protein</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108323</td>
			<td>antibody for lipid droplet associated protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>corticosterone ELISA kit</td>
			<td>cayman</td>
			<td>500655</td>
			<td>assay for corticosterone synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted light microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>X198-07</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG Alexa 488 Fluor secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-11034</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-ADFP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>108323</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold antifade mountant</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>P36935</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions

Det hormon, som binyrebarken udskiller er afgørende for dyr mod stress og sygdomme. Metoden beskrevet her er proceduren for primære kulturperler rotte adrenal celler og relaterede funktionelle assays (immunofluorescens farvning af lipid droplet overflade proteiner samt corticosterone analyse). I modsætning til en in vivo model, variation af interexperiments i adrenal éncellelag kulturer er mindre og den eksperimentelle betingelse er nemme at kontrollere. Desuden er kilde til rotter også mere stabil end andre dyr som kvæg ones. Der er også flere menneskelige adrenal cellelinjer (NCI-H295, NCI-H295R, SW13, etc.), der kan bruges i adrenal undersøgelser. Steroid produktion af disse linjer vil dog stadig påvirkes af mange faktorer, som omfatter serum lotnummer, passage nummer, mutant/tab af forskellige gener, osv. Bortset fra mangler 17α-hydroxylase, er den primære kultur af rotte binyrebarkhormon celler en bedre og mere bekvem teknik til at studere adrenal fysiologi. I Resumé, kan primære rotte adrenal kulturer være en god in vitro-platform for forskere at efterforske mekanismerne af reagens interesse i binyrerne system.

Ved hjælp af den beskrevne procedure her, kunne primære kulturperler adrenal celler skelnes under et fasekontrast mikroskop (figur 1A). For at bekræfte yderligere at vesikler i cytoplasma er lipid dråber, kunne immunofluorescens-farvning af fedt differentiering-relaterede protein (ADRP) udføres på dag-3 kulturer (figur 1B). Celler blev dyrket på glas coverslips. Cellerne blev vasket tre gange med fosfatbufferet saltopløsn...

Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions

Primære kultur af rotte binyrebarkhormon celler og Assays af steroidogene funktioner

Det hormon, der udskilles af binyrebarken er afgørende for dyr mod stress og sygdomme. Vi præsenterer her, en protokol til kultur den primære rotte adrenal celler. Det kunne være en god in vitro-platform for at undersøge mekanismerne af reagens interesse for adrenal steroidogenesis og lipid biosyntesen.

The hormone which the adrenal cortex secretes is vital for animals against stress and diseases. The method described here is the procedure of primary ...

Den præsenterede protokol er meget let, og det vil hjælpe forskere forberede primære binyrekulturer. Det giver en nem procedure for at starte binyresterogenese. Denne teknik kan anvendes på screening af stress-relaterede sygdomme, alle potentialer af agent-hæmmet inflammatoriske reaktioner.Demonstration af proceduren vil være Wei-Chang Lee, en Masters studerende fra mit laboratorium. Begynd med at sterilisere aflives SD rotte ved hjælp af 70% ethanol og lade det blive absorberet i huden. Efter aftørring af huden med silkepapiret, læg rotten på en ren plastplade i liggende position.Brug derefter eksterne buede kraftæcesser til at løfte huden ved midterlinjen. Brug en saks til at udføre en stump dissektion af huden ved at skabe en Y form fra niveauet af låret til subkostalkelvinklen. Efter skylning saksen med 70% ethanol, skæres musklen, også at skabe en Y form.Find den venstre binyre kirtel bag maven i højre bag leveren. Med et par standardfængsler og et par buede scefængre løftes maven og leveren og derefter isolere binyrerne med en anden buet kraftang og placere dem i en steril skål. Brug fine kraftanger til forsigtigt at flytte binyrekapslen fra hver kirtel.Nu skal du bruge en delikat saks til at skære binyrerne i små stykker i nok mængde serum-fri DMEM F-12 medium til at dække vævet. Forbered tre forskellige pour størrelse pasteur pipetter ved at opvarme dem over en brænder. Brug den første pipette med den største åbning til at overføre alle binyrestykkerne til et 50 ml konisk rør, der indeholder medium med Collagenase II.Forsigtigt Pipette vævsstykkerne op og ned omkring 10 gange.Derefter inkubere røret i et vandbad ved 37 grader Celsius i tyve minutter, og ryst det hvert femte minut, fire gange i alt. Det er meget afgørende at korrekt udføre væv dispersion under enzym fordøjelsen. Brug den anden og derefter den mindste pour-size pipette til at gentage pipettering og inkubation, indtil alle væv stykker bliver mindre.Derefter tilsættes seksdoblet volumen af luftse i fire grader Celsius koldt medium for at stoppe enzymatisk reaktion. Derefter centrafuge på 800 gange G i 10 minutter, og kassér supernatant begge gange. Tilføj en passende mængde medie, og stop cellerne igen.Plant cellerne i ønskede plader eller retter med dyrket medium natten over ved 37 grader Celsius i 95% fugtighed og 5% kuldioxid. Den følgende dag vaskes cellerne omhyggeligt to gange med serumfrit, varmt DMEM F-12 medium. Tilføj frisk vækst medium og vedligeholde cellerne på 37 grader Celsius og 95% fugtighed og 5% kuldioxid indtil dag 3.Ved hjælp af denne protokol blev der opnået primære dyrkede rotte adrenalceller. Dag 3 binyreceller blev bekræftet under et fasekontrastmikroskop. Immunfluorescerende farvning af fedtdifferentieringsrelateret protein udført på dag 3-kulturer bekræftede, at vesikler i cytoplasmaet er lipiddråber.Efter adrenocorticotropic hormon stimulation af rotte binyreceller, hormon-producerende evne af cellerne blev bestemt af corticosterone assay, viser øget corticosteron frigivelse med højere ACTH koncentration. Denne metode kan anvendes på andre primære kultursystemer, såsom primære hjertekulturer, adrenal medulla kulturer osv. Denne teknik kan også bidrage til at undersøge samspillet mellem adrenokortikale celler og krofilceller.

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolering og Primær kultur Rotte levercellerne

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Culturing Primary Rat Inner Medullary Collecting Duct Cells

Dyrkning Primær Rat Inner Medullær samlekanal Cells

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolering og dyrkning af Mouse Primære Pancreas acinarceller

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Viability Assays for Cells in Culture

Levedygtighed Analyser for celler i kultur

Manual cell counts on a microscope are a sensitive means of assessing cellular viability but are time-consuming and therefore expensive. Computerized ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolering og primær kultur af muse aortaendotelceller

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

A Tissue Culture Model of Estrogen-producing Primary Bovine Granulosa Cells

En vævskultur Model af østrogen-producerende primære Bovine Granulosa-celler

Ovarian granulosa cells (GC) are the major source of estradiol synthesis. Induced by the preovulatory luteinizing hormone (LH) surge, cells of the theca ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolation og kultur af primære aorta endotelceller fra miniature grise

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...