Name: primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions
Uploaded: 2019-03-12T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av et stipend fra National Science Council Taiwan (NSC102-2320-B-037-008-MY3) og en National Cheng-Kung University Hospital Research Grant (NCKUH-10102045).

Alle prosedyrer inkludert dyr fag er godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen av Kaohsiung Medical University.
1. eksperimentelle prosedyren
<ol><li>Ofre voksen (8 til 12 uke-gamle) kvinne/mann SD rotter av CO2 euthanasia.</li>
	<li>Bruke 70% etanol og la det bli absorbert inn i huden og tørk huden med en papir.</li>
	<li>Putte rotta på en ren plast plate i supine posisjon.</li>
	<li>Løft huden med "eksterne" buet tang på midtlinjen og utføre en stump disseksj...

<ol>
	<li>Frith, C. H., Jones, T. C., Mohr, U., Hunt, R. D., Capen, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histology,+Adrenal+Gland,+Mouse.">Histology, Adrenal Gland, Mouse.</a> Endocrine System. Monographs on Pathology of Laboratory Animals. , 8-12 (1983).</li><li>Keegan, C. E., Hammer, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+insights+into+organogenesis+of+the+adrenal+cortex.">Recent insights into organogenesis of the adrenal cortex.</a> Trends in Endocrinology Metabolism. 13 (5), 200-208 (2002).</li><li>Marieb, E., Wilhelm, P. B., Mallatt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 17: The Endocrine System. , 558-581 (2017).</li><li>Chrousos, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+and+immune-mediated+inflammation.">The hypothalamic-pituitary-adrenal axis and immune-mediated inflammation.</a> New England Journal Medicine. 332 (20), 1351-1362 (1995).</li><li>Bornstein, S. R., Rutkowski, H., Vrezas, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokines+and+steroidogenesis.">Cytokines and steroidogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. (1-2), 135-141 (2004).</li><li>Bielohuby, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+analysis+of+the+mouse+adrenal+gland+from+weaning+to+adulthood:+time-+and+gender-dependent+alterations+of+cell+size+and+number+in+the+cortical+compartment.">Growth analysis of the mouse adrenal gland from weaning to adulthood: time- and gender-dependent alterations of cell size and number in the cortical compartment.</a> American Journal of Physiology-Endocrinology Metabolism. 293 (1), E139-E146 (2007).</li><li>van Weerden, W. M., Bierings, H. G., van Steenbrugge, G. J., de Jong, F. H., Schroder, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenal+glands+of+mouse+and+rat+do+not+synthesize+androgens.">Adrenal glands of mouse and rat do not synthesize androgens.</a> Life Sciences. 50 (12), 857-861 (1992).</li><li>Wang, T., Rainey, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+adrenocortical+carcinoma+cell+lines.">Human adrenocortical carcinoma cell lines.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 351 (1), 58-65 (2012).</li><li>Payne, A. H., Hales, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+steroidogenic+enzymes+in+the+pathway+from+cholesterol+to+active+steroid+hormones.">Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones.</a> Endocrine Review. 25 (6), 947-970 (2004).</li><li>Ruggiero, C., Lalli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+ACTH+Signaling+on+Transcriptional+Regulation+of+Steroidogenic+Genes.">Impact of ACTH Signaling on Transcriptional Regulation of Steroidogenic Genes.</a> Frontiers in Endocrinology. 7, 24 (2016).</li><li>Chen, Y. C., Liang, Y. L., Huang, Y. L., Huang, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Toona+sinensis-stimulated+adrenal+steroidogenesis+in+primary+rat+adrenal+cells.">Mechanism of Toona sinensis-stimulated adrenal steroidogenesis in primary rat adrenal cells.</a> Journal of Functional Foods. 14 (2015), 318-323 (2015).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+I.+Culture+conditions+for+optimal+growth+and+function.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. I. Culture conditions for optimal growth and function.</a> In Vitro. 17 (7), 599-604 (1981).</li><li>Rybak, S. M., Ramachandran, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+culture+of+normal+rat+adrenocortical+cells.+II.+Quantitation+of+steroid+dehydrogenase+stain.">Primary culture of normal rat adrenocortical cells. II. Quantitation of steroid dehydrogenase stain.</a> In Vitro. 17 (7), 605-611 (1981).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+metabolism+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Steroid metabolism by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 58 (3), 447-462 (1973).</li><li>Di Blasio, A. M., Fujii, D. K., Yamamoto, M., Martin, M. C., Jaffe, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+cell+proliferation+and+steroidogenesis+in+cultured+human+fetal+adrenal+cells+chronically+exposed+to+adrenocorticotropic+hormone:+rationalization+of+in+vitro+and+in+vivo+findings.">Maintenance of cell proliferation and steroidogenesis in cultured human fetal adrenal cells chronically exposed to adrenocorticotropic hormone: rationalization of in vitro and in vivo findings.</a> Biology of Reproduction. 42 (4), 683-691 (1990).</li><li>Brasaemle, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+The+perilipin+family+of+structural+lipid+droplet+proteins:+stabilization+of+lipid+droplets+and+control+of+lipolysis.">Thematic review series: adipocyte biology. The perilipin family of structural lipid droplet proteins: stabilization of lipid droplets and control of lipolysis.</a> Journal of Lipid Research. 48 (12), 2547-2559 (2007).</li><li>Hoeflich, A., Bielohuby, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+adrenal+gland+growth:+signal+integration+by+extracellular+signal+regulated+kinases1/2.">Mechanisms of adrenal gland growth: signal integration by extracellular signal regulated kinases1/2.</a> Journal of Molecular Endocrinology. 42 (3), 191-203 (2009).</li><li>O'Hare, M. J., Neville, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+responses+to+corticotrophin+and+cyclic+AMP+by+adult+rat+adrenocortical+cells+in+monolayer+culture.">Morphological responses to corticotrophin and cyclic AMP by adult rat adrenocortical cells in monolayer culture.</a> Journal of Endocrinology. 56 (3), 529-536 (1973).</li></ol>

Binyrene spille en nøkkelrolle i miljømessige tilpasning3. Hormonet som binyrebarken utskiller kan regulere og justere fysiologiske funksjoner og homeostase3. I vivo modellen reflekterer de ekte fysiologiske effektene i kroppen. Imidlertid er det fortsatt påvirket av mange komplekse faktorer, forårsaker ustabil effekter eksperimenter. I kontrast har i vitro celle modellen fordeler som gjør det sammenlignes med dyr modellen. Først er miljømessige tilstanden lett å ko...

Det endokrine systemet er ansvarlig for å regulere fysiologisk aktivitet og homeostase1. Binyrene ligger på skallen Polen av nyrer er en av de store endokrine organene som skiller mineralkortikoider, glukokortikoider, og androgen2,3. Det er to forskjellige deler av det adrenalin kjortelen: cortex og margen. Binyrebarken består av tre lag: den ytre glomerulosa, den mellomliggende fasciculata og indre reticularis3. Den zona glomerulosa er den opprinnelige secreting aldosteron, en mineralocorticoid, som hjelpemidler i reabsorbing natrium ion og vann i nyrene3. Den zona fasciculata produserer hovedsakelig en basal nivå av glukokortikoider i normale fysiologiske forhold3. Corticosteroids i gnagere og kortisol hos mennesker fungere for å hjelpe kroppen med å mestre stress ved å regulere blod glukose3. I noen grad, kan hemme inflammatorisk svar og regulere immunsystemet4,5. I motsetning til andre pattedyr, mus og rotter har ikke en funksjonell zona reticularis skyldes mangel på en 17α-hydroksylase uttrykk i binyrene6,7. Dermed er binyrene fra mus og rotter blottet for utskillelsen av C-19 binyrene (cortisol og adrenalin androgener).
Primære kulturperler adrenocortical celler har vist seg å være nyttig for å undersøke mekanismer som styrer adrenal fysiologi8. Som andre steroidogenic vev syntetiserer hver adrenal sone sin steroider gratis kolesterol9. På adrenocorticotropic hormone (ACTH) stimulering, gratis kolesterol er løslatt fra sammenbrudd lipid dråper og dermed forbedrer steroid produksjon i fasciculata og reticularis10.
Mange grupper har forsøkt å etablere stabil linjer fra adrenocortical kreftsvulster. Men har flere bekymringer begrenset bruken av adrenocortical linjer som vitro modeller8. Steroid svarene på linjer kan variere mellom passasjer, partinummeret for serum og kvaliteten av serum, etc. Videre skiller kommersiell adrenal cellelinjer (Y1 og SW13) ikke corticosterone, gjør det vanskeligere å studere adrenal steroidogenesis8. Bruke storfe og jevndøgn binyrene som ex vivo modeller kan være et godt valg, selv om vev fra disse markedene kan utydeliggjøre noen ukjente risikoer. Sammenlignet med dem, behandle rotte binyrene er lettere og kilden er relativt mer stabil og patogen. Samlet kan nåværende metoden beskrevet her brukes til å undersøke relaterte mekanisme corticosterone syntese i rotte adrenal fasciculata celler.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>female/ male, SD/Wistar rats (8-12 wk)</td>
			<td>BioLASCO</td>
			<td></td>
			<td>male or femal rats are suitable for experiments. Female&#39;s adrenal glands are larger than male rats, however, female rats own the oestrous cycles that may influence the experiments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagenase, type II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C-6885</td>
			<td>isolation of adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12800-017</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ham&#39;s F12</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21700-075</td>
			<td>powder media for adrenal cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>4018</td>
			<td>buffer (powder)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>3506-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>16050014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>SAFC</td>
			<td>12103C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin (10,000 U)-streptomycin (10,000 ug/ml)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-002-Cl</td>
			<td>antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>curved forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD343R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BD331R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC224R</td>
			<td>cut rat skin and muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>delicate scissor</td>
			<td>BRAUN</td>
			<td>BC101R</td>
			<td>cut adrenal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>adipose-differentiation related protein</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab108323</td>
			<td>antibody for lipid droplet associated protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>corticosterone ELISA kit</td>
			<td>cayman</td>
			<td>500655</td>
			<td>assay for corticosterone synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>inverted light microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>JT.baker</td>
			<td>X198-07</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>goat anti-rabbit IgG Alexa 488 Fluor secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-11034</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-ADFP</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>108323</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold antifade mountant</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>P36935</td>
			<td>for immunofluorescence staining</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

primary culture of rat adrenocortical cells and assays of steroidogenic functions

Hormonet som binyrebarken utskiller er avgjørende for dyr mot stress og sykdommer. Metoden beskrevet her er prosedyren for primære kulturperler rotte adrenal celler og relaterte funksjonelle analyser (immunofluorescence farging av lipid slippverktøy overflaten protein, samt corticosterone analyse). I motsetning til en i vivo modell, variasjonen av interexperiments i adrenal monolayer kulturer er mindre og eksperimentelle betingelsen er lett å kontrollere. Dessuten er kilden til rotter også mer stabilt enn andre dyr, som storfe seg. Det er også flere human adrenal cellelinjer (NCI-H295, NCI-H295R, SW13, etc.) som kan brukes i adrenal studier. Steroid produksjon av disse linjene, vil imidlertid fortsatt påvirkes av mange faktorer, som inkluderer serum partinummer, passasjen tall, mutant/tap av forskjellige gener, etc. Bortsett fra mangler 17α-hydroksylase, er primære kultur rotte adrenocortical celler en bedre og enklere teknikk for å studere adrenal fysiologi. Oppsummert kan primære rotte adrenal kulturer være en god i vitro plattform for forskere å undersøke mekanismer for reagensen interesse binyrene systemet.

Bruke fremgangsmåten som er beskrevet her, kan primære kulturperler adrenal celler skilles under et mikroskop med fase kontrast (figur 1A). For å bekrefte videre at blemmer i cytoplasma lipid dråper, kan den immunofluorescence flekker adipose differensiering-relaterte protein (ADRP) bli gjennomført på dag-3 kulturer (figur 1B). Cellene ble dyrket på glass coverslips. Cellene ble vasket tre ganger med fosfat-bufret saltvann...

Watch this Scientific Journal Video about Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions at JoVE.com

Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions

Primære kultur av rotte Adrenocortical celler og analyser av Steroidogenic funksjoner

Hormone secreted av binyrebarken er avgjørende for dyr mot stress og sykdommer. Her presenterer vi en protokoll til kultur primære rotta adrenal celler. Det kan være en god i vitro plattform for å undersøke mekanismer for reagensen av adrenalin steroidogenesis og lipid biosyntesen.

The hormone which the adrenal cortex secretes is vital for animals against stress and diseases. The method described here is the procedure of primary ...

Den presenterte protokollen er veldig enkel, og det vil hjelpe forskere med å forberede primære binyrekulturer. Det gir en enkel prosedyre for å starte binyre steroidogenese. Denne teknikken kan brukes på screening av stressrelaterte sykdommer, alle potensialet til de agenthemmete inflammatoriske reaksjonene.Å demonstrere prosedyren vil være Wei-Chang Lee, en Master-student fra laboratoriet mitt. Begynn med å sterilisere eutanisert SD-rotte ved hjelp av 70% etanol og la den absorberes i huden. Etter å ha tørket huden med vevspapiret, legg rotten på en ren plastplate i liggende stilling.Deretter bruker du eksterne buede tang for å løfte huden midtlinjen. Bruk saks til å utføre en stump disseksjon av huden ved å skape en Y-form fra lårets nivå til subcostal vinkel. Etter å ha skyllet saksen med 70% etanol, kutt muskelen, og opprett også en Y-form.Finn venstre binyrene bak magen i høyre bak leveren. Med et par standard tang og et par buede tang, løft magen og leveren og deretter isolere binyrene med en annen buet tang og legg dem i en steril tallerken. Bruk fine tang til å forsiktig flytte binyrene fra hver kjertel.Nå, bruk en delikat saks til å kutte binyrene i små biter i nok mengde serumfri DMEM F-12 medium for å dekke vevet. Forbered tre forskjellige helle størrelse pasteur pipetter ved å varme dem over en brenner. Bruk den første pipetten med den største åpningen for å overføre alle binyrebitene til et 50ml konisk rør som inneholder medium med Collagenase II.Pipette forsiktig vevsbitene opp og ned ca 10 ganger.Deretter inkubere røret i et vannbad på 37 grader Celsius i tjue minutter, og rist det hvert femte minutt, fire ganger totalt. Det er svært viktig å utføre vevsdispergering på riktig måte under fordøyelsen av enzymet. Bruk den andre og deretter den minste hellestørrelsespipetten til å gjenta pipettering og inkubasjon til alle vevsbitene blir mindre.Deretter legger du til seksdoblet volum bresh i fire grader Celsius kaldt medium for å stoppe den enzymatiske reaksjonen. Deretter centrafuge ved 800 ganger G i 10 minutter, og kast supernatant begge ganger. Legg til et passende volum av medium, og re-suspendere cellene.Plant cellene i ønskede tallerkener eller retter med dyrket medium over natten ved 37 grader Celsius i 95% fuktighet og 5% karbondioksid. På neste dag, vask forsiktig cellene to ganger med serumfri, varm DMEM F-12 medium. Tilsett fersk vekstmedium og vedlikehold cellene ved 37 grader Celsius og 95% fuktighet og 5% karbondioksid til dag 3.Ved hjelp av denne protokollen ble primære kultiverte rotte binyreceller oppnådd. Dag 3 binyreceller ble bekreftet under et fasekontrastmikroskop. Immunofluorescerende farging av fettdikatyriseringsrelatert protein utført på dag 3-kulturer bekreftet at vesikler i cytoplasma er lipiddråper.Etter adrenokortikotrope hormonstimulering av rotte binyreceller, ble hormonproduserende evne til cellene bestemt av kortikosteronanalyse, som viste økt kortikosteron frigjøring med høyere ACTH konsentrasjon. Denne metoden kan brukes på andre primære kultursystemer, for eksempel primære hjertekulturer, binyre medulla kulturer, et cetera. Denne teknikken kan også bidra til å undersøke samspillet mellom adrenocortiske celler og kromoffinceller.

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

Isolering og Primær kultur Rat Nedsatt Cells

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Culturing Primary Rat Inner Medullary Collecting Duct Cells

Dyrking Primær Rat Indre Medullary Samle Duct Cells

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolasjon og kultur av mus Primær acinøse Cells

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Viability Assays for Cells in Culture

Levedyktighet Analyser for celler i kultur

Manual cell counts on a microscope are a sensitive means of assessing cellular viability but are time-consuming and therefore expensive. Computerized ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolasjon og Primær Culture of Mouse endotelceller fra aorta

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

A Tissue Culture Model of Estrogen-producing Primary Bovine Granulosa Cells

En vev kultur modell av Estrogen-produserende primære bovin Granulosa celler

Ovarian granulosa cells (GC) are the major source of estradiol synthesis. Induced by the preovulatory luteinizing hormone (LH) surge, cells of the theca ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

Isolering og kultur av primær aorta endothelial celler fra miniatyr griser

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...