Name: an improved and high throughput respiratory syncytial virus (rsv) micro-neutralization assay
Uploaded: 2019-01-26T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay at JoVE.com

著者は、関与するすべての参加者をありがとうございます。我々 は、ビクトリア朝の政府の運用インフラストラクチャ サポート プログラムを認めます。PVL は、NHMRC キャリア開発フェローシップ受領者です。

注:すべての手順は、異なる記載がない限り BSL2 フードで行います。ウイルスの滴定は、PRN アッセイ PRN 試金で使用される最適の RSV の濃度を決定する前に必要です。一度解凍および各民放連試金のために使用される少量のウイルス株の約数を勧めします。1 つの研究からのすべてのサンプルの実行すべての民放連試金のため同じウイルス株を使用することをもお勧めします。文化...

<ol>
	<li>Shi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional,+and+national+disease+burden+estimates+of+acute+lower+respiratory+infections+due+to+respiratory+syncytial+virus+in+young+children+in+2015:+a+systematic+review+and+modelling+study.">Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study.</a> Lancet. 390 (10098), 946-958 (2017).</li><li>Modjarrad, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=WHO+consultation+on+Respiratory+Syncytial+Virus+Vaccine+Development+Report+from+a+World+Health+Organization+Meeting+held+on+23-24+March+2015.">WHO consultation on Respiratory Syncytial Virus Vaccine Development Report from a World Health Organization Meeting held on 23-24 March 2015.</a> Vaccine. 34 (2), 190-197 (2016).</li><li>Giersing, B. K., Karron, R. A., Vekemans, J., Kaslow, D. C., Moorthy, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meeting+report:+WHO+consultation+on+Respiratory+Syncytial+Virus+(RSV)+vaccine+development,+Geneva,+25-26+April+2016.">Meeting report: WHO consultation on Respiratory Syncytial Virus (RSV) vaccine development, Geneva, 25-26 April 2016.</a> Vaccine. , (2017).</li><li>Mazur, N. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+respiratory+syncytial+virus+vaccine+landscape:+lessons+from+the+graveyard+and+promising+candidates.">The respiratory syncytial virus vaccine landscape: lessons from the graveyard and promising candidates.</a> Lancet Infect Diseases. 18 (10), e295-e311 (2018).</li><li>Hosken, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multi-laboratory+study+of+diverse+RSV+neutralization+assays+indicates+feasibility+for+harmonization+with+an+international+standard.">A multi-laboratory study of diverse RSV neutralization assays indicates feasibility for harmonization with an international standard.</a> Vaccine. 35 (23), 3082-3088 (2017).</li><li>Zielinska, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+improved+microneutralization+assay+for+respiratory+syncytial+virus+by+automated+plaque+counting+using+imaging+analysis.">Development of an improved microneutralization assay for respiratory syncytial virus by automated plaque counting using imaging analysis.</a> Virology Journal. 2, 84 (2005).</li><li>van Remmerden, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+respiratory+syncytial+virus+neutralization+assay+based+on+the+detection+of+green+fluorescent+protein+expression+and+automated+plaque+counting.">An improved respiratory syncytial virus neutralization assay based on the detection of green fluorescent protein expression and automated plaque counting.</a> Virology Journal. 9, 253 (2012).</li><li>Varada, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+neutralization+assay+for+respiratory+syncytial+virus+using+a+quantitative+PCR-based+endpoint+assessment.">A neutralization assay for respiratory syncytial virus using a quantitative PCR-based endpoint assessment.</a> Virology Journal. 10, 195 (2013).</li><li>Tripp, R. A., Jorquera, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Human respiratory syncytial virus: methods and protocols. , (2016).</li><li>Suara, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+neutralizing+antibody+to+respiratory+syncytial+virus+in+sera+from+mothers+and+newborns+residing+in+the+Gambia+and+in+The+United+States.">Prevalence of neutralizing antibody to respiratory syncytial virus in sera from mothers and newborns residing in the Gambia and in The United States.</a> Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 3 (4), 477-479 (1996).</li><li>Wang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+neutralizing+serum+antibodies+of+patients+vaccinated+with+human+papillomavirus+L1+or+L2-based+immunogens+using+furin-cleaved+HPV+Pseudovirions.">Measurement of neutralizing serum antibodies of patients vaccinated with human papillomavirus L1 or L2-based immunogens using furin-cleaved HPV Pseudovirions.</a> PLoS One. 9 (7), e101576 (2014).</li><li>Magnus, C., Reh, L., Trkola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+resistance+to+neutralizing+antibodies:+Determination+of+antibody+concentrations+leading+to+escape+mutant+evolution.">HIV-1 resistance to neutralizing antibodies: Determination of antibody concentrations leading to escape mutant evolution.</a> Virus Research. 218, 57-70 (2016).</li></ol>

我々 は開発し、ほとんどの実験室に容易に合わせることができるシンプルかつ効率的なの RSV マイクロ中和のアッセイを最適化します。この試金はコンピューター化されたイメージのスキャンを使用して細胞レベルで民放連によるウイルス感染の阻害を測定し同様、ウイルスの感染能力を測定することができます。イメージング ベースのプラットフォームおよび特定抗体ベース システムの?...

呼吸器合胞体ウイルス (RSV) は、小児人口世界1の下気道感染症の主要な原因です。その高い負担にもかかわらずありませんまだワクチンや治療。2013 年以降、世界保健機関 (WHO) は回 WHO 協議会議2,の3の主要な研究の優先順位として RSV ワクチンの開発を宣言しています。WHO は、保護4の主要な血清学的マーカーと見なされると、rs ウイルス中和抗体 (NAb) の測定を使用してワクチンの免疫原性を監視するに合意しました。NAbs 抗 rs ウイルス抗体 palivizumab、現在のみ予防戦略利用できる4の臨床試験と同様、研究の数の厳しい RSV 感染に対する保護するために示されています。
5,6,7、8に挑戦の標準化の努力をした細胞および分子ベースのアッセイを含む世界中の研究所で使用される複数の NAb アッセイ フォーマットがあります。ただし、RSV 型特異抗体の存在によって減らされたプラーク形成単位 (PFU) の数を測定する従来のプラーク減少中和 (PRN) アッセイまだ金本位制9のままです。ここで、RSV の異なる系統と増加測定スループットに多数の細胞に使用ことができます改善、簡素化、および高スループット PRN プロトコルを報告します。このプロトコルは、さまざまな設定からだけでなく、動物実験からのサンプルの臨床サンプルを使用してテストされています。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cell line</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td>provided by Dr Keith Chappell, University of Queensland</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Viral strains</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RSV A2</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>VR-1540</td>
			<td>lot number 60430286</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1000142511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa-Fluor donkey anti-goat IgG (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A11055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMC sodium salt powder</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5678-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM (no serum, 3.7 g/L NaHC, P/S) (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Scientific Services &#8211; Tissue Culture</td>
			<td></td>
			<td>MCRI in house supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal calf Serum (stored in 50ml aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>SFBS-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat X RSV antibody</td>
			<td>Merck</td>
			<td>AB1128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>human polyclonal antiserum to respiratory syncytial virus (RSV) (stored in 45 &#181;L aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>BEI Resources</td>
			<td>NR-4022</td>
			<td>Free order through BEI Resources upon registration. This serum belong to a panel of human antiserum and immune globulin to RSV (NR-32832)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M199 powder</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>31100035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk diluent blocking solution (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Australian Biosearch</td>
			<td>50-82-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin (stored in 6mL aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>s.d.H2O from Milli-Q dispenser</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td>In-house dispensation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile 1X PBS for culture (stored at 4&#176;C)</td>
			<td>Scientific Services &#8211; Tissue Culture</td>
			<td></td>
			<td>MCRI in house supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20 polysorbate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9005-64-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>General Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Falcon tubes (50 mL)</td>
			<td>Invitro Technologies</td>
			<td>FAL352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter unit 0.22um (500 mL)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>NAL5660020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Eppendorf tubes (1.5 mL)</td>
			<td>Australia PL</td>
			<td>AM12400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile flat-bottom plates (96-well with lid)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>655180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile U-bottom plates (96-well with lid)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>650180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5ml serological pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS4487-200EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL serological pipette</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>607180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 mL serological pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS4251-200EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 1-200 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 96TIPS PKG960</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-200-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 5-20 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 96TIPS PKG960</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-20-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 100-1000 &#181;LClear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 100TIPS PKG1000</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-1000-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 1-10 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 100TIPS PKG1001</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TXLF-10-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipments and softwares</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELISpot reader system</td>
			<td>AID iSpot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strasburg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AID ELISpot software version 5.0</td>
			<td>AID iSpot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strasburg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Excel 2007</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an improved and high throughput respiratory syncytial virus (rsv) micro-neutralization assay

呼吸器合胞体ウイルス特異中和抗体 (RSV NAbs) は、RSV に対する保護の重要なマーカーです。さまざまな分析フォーマットの数が現在使用中世界中があるので RSV NAbs を測定する正確かつ高スループット方法に必要性。RSV サブグループ A でテストされています、RSV サブグループ B の別のサンプル タイプも適合できるイメージング ベース微量中和試験をご紹介します。このメソッドは、10% 未満のものをされている参照抗測定間変動と、再現性が高いです。この試金は比較的低コストで、世界中の研究所で容易に確立できると考えています。RSV NAbs を測定、向上、高スループットの測定法の開発は、将来的に新規の RSV ワクチン候補の評価のために重要なあることと同様、国際的にこの方法の標準化のための重要な一歩前進を表します。

ウイルス ストックの滴定を 1:10 1:10 から行った8希釈 PRN アッセイ (典型的な結果を図 5に示すように) 前にウイルス ストック濃度を決定します。図 5から PFU カウントされることが確実に 1:10 の希釈液で4と 1:10 の5。同じ希釈で帳票の井戸から PFU の平均数を算出しました。1:105希釈された 14 ?...

Watch this Scientific Journal Video about An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay at JoVE.com

An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay

本研究は、高スループットを説明します呼吸器合胞体ウイルス (RSV) の中和抗体の力価を決定するためのマイクロ中和アッセイのイメージングに基づきます。このアッセイの形式は、別のサンプル タイプにテストされています。

高スループットの改善された呼吸器合胞体ウイルス (RSV) 微量中和試験

Respiratory syncytial virus-specific neutralizing antibodies (RSV NAbs) are an important marker of protection against RSV. A number of different assay ...

呼吸間合質ウイルスに対する保護の重要なマーカーとして、RSV中和抗体を測定するための正確で高いスループット方法が必要です。この方法は、参照抗血清のアッセイ間の変動が10%未満であることで非常に再現性が高く、比較的低コストで世界中の多くの研究所でこのアッセイを容易に確立できると考えています。ここでは、RSVサブグループAで試験されたイメージングベースのマイクロ中和アッセイについて説明し、RSVサブグループB、および異なるサンプルタイプに適合させることもできます。この手順のデモンストレーションは、MCRIの研究チームのメンバーであるルーベン・ツです。1日目にプレートをシードするには、まずDMEM培地でA549細胞を再懸濁し、10%FCSと1,000単位ペニシリン・ストレプトマイシン混合物を1ミリリットル当たり400,000細胞の濃度で再懸濁させた。その後、ウェルあたり100マイクロリットルの密度で40,000 A459細胞を持つ96ウェルフラットボトム滅菌プレートをシードします。一晩で5%の二酸化炭素環境で摂氏37度でプレートをインキュベートします。2日目に血清希釈を調製するために、まずヒトRSV参照血清および血清検査サンプルを室温で解凍する。その後、加熱し、それらを活性化するために30分間摂氏56度の水浴にそれらを置きます。次に、110マイクロリットル以上のリファレンスセラムを1.5マイクロリットルの参照血清とFCSフリーDMEM培地とペニシリンストレプトマイシン混合物と混合して、150マイクロリットルの最終体積に調製します。この希釈のピペット110マイクロリットルは、96ウェルU-底滅菌プレートのA12によく。シリアル1~2の希釈液をプレートに下ろすには、まずペニシリン・ストレプトマイシン混合物を含むFCSフリーDMEM培地55マイクロリットルをウェルB12〜H12に加えます。その後、新しい先端で井戸A12からウェルB12に55マイクロリットルを移す。ピペットは5回上下して溶液を混合し、H12によく達するまで続けます。よくH12から溶液の過剰55マイクロリットルをオフにピペット。次に、血清試験サンプルの1~100希釈液を調製し、各希釈液の110マイクロリットルを、対応するウェルA1からA9、E1から96ウェルの無菌プレートのE9に加える。その後、55マイクロリットルのFCSフリーDMEM培地をペニシリン・ストレプトマイシン混合物で追加し、1列から9列の井戸に加えます。前に説明したように、行 A から行 D、および行 E から行 H の順次 1 から 2 つのディリューションを作成します。55マイクロリットルのFCSフリーDMEM培地をペニシリン・ストレプトマイシン混合物で、10列目と11桁目のウェルに加えます。ウイルスストックを準備するには、まず37°Cの水浴にRSVの冷凍バイアルを入れて急速に解凍し、次にバイアルを氷の上に置きます。次に、ペニシリンストレプトマイシン混合物を含むDMEM培地に、ウェルあたり約200 PFUでウイルスを加え、100ウェルの総容量を55ミリリットルにします。ウイルス血清混合物を調製するために、まず、希釈されたウイルスの55マイクロリットルをカラム1〜9の全ウェルと列10および11のHを通る行Eの井戸に加える。次に、ペニシリンストレプトマイシン混合物を含むFCSフリーDMEM培地を列10と11のD行AからDのすべてのウェルに加え、5%の二酸化炭素環境で37°Cでプレートを1時間インキュベートします。RSVによるA549細胞の接種に先立ち、光学顕微鏡下で細胞板を調べ、A549細胞単層が80%コンフルエントであることを確認します。その後、プレートを優しく反転して媒体を捨て、滅菌吸収性のペーパータオルで軽くプレートをブロットします。各後、濾過された滅菌PBSで洗浄する。次に、原稿に記載されているプレートテンプレートに従って、A549細胞プレート上の対応するウェルにウイルス血清混合物のウェルあたり100マイクロリットルを加え、5%の二酸化炭素で37°Cでプレートを1時間インキュベートします。インキュベーションの最後に、ピペットを使用して1ウェルあたり90マイクロリットルを除去し、ペニシリン・ストレプトマイシン混合物に1XM199、1.5%CMC、および2%FCSを含む培地の100マイクロリットルを加える。3日間の5%の二酸化炭素で37°Cでプレートをインキュベートします。アッセイプレートを固定して開発するには、まずRSV感染A549細胞プレートを優しく反転させ、M199、CMC、2%FCS、ペニシリン・ストレプトマイシン混合物を含む培地を廃棄します。その後、ゆっくりと各ウェルに固定バッファーの200マイクロリットルを追加します。マイナス20度でプレートを20分間インキュベートします。その後、固定バッファーを捨て、吸収性のペーパータオルにそっとブロットします。プレートの面を下にして10分間乾燥させます。次に、05ポリソルベート20を含む濾過されたPBSバッファーで、5%乳遮断溶液を作る。各ウェルに200マイクロリットルのブロッキング溶液を加え、室温でプレートを30分間インキュベートします。インキュベーションの終わりに、プレートを優しく反転させ、吸収性のペーパータオルに溶液を捨ててブロットします。一次抗体を作るために、ブロッキング溶液中の1~500ヤギXRSV抗体を希釈する。各ウェルに50マイクロリットルを加え、1時間摂氏37度でプレートをインキュベートします。ろ過したPBS-ポリソルベートでプレートを3回洗います。次に、ブロッキング溶液中の1~5,000個のアレクサフルーオールロバ抗ヤギ免疫グロブリンGを希釈して二次抗体を作る。各井戸に50マイクロリットルを加え、摂氏37度で1時間インキュベートします。ろ過したPBS-ポリソルベートで5回プレートを洗います。自動スポットリーダーでプラークをカウントするには、まず未使用の96ウェルカルチャープレートを使用して、FITCチャンネルにカウント設定を入力して機器をコラボレーションします。その後、セルプレートを読み、ホイルで包み、摂氏4度で保存します。次に、実際のプラークまたは破壊された細胞単層の井戸の画像をチェックし、破壊された細胞単層を有する井戸を除外する。非血清制御ウェルのプラークの平均数を計算し、ウイルス活性の50%阻害をもたらす50%中和遮断を決定するために使用した。逆血清希釈は、x軸上にプロットし、2点間に引かれた線から半対数グラフのy軸上のプラークの数をプロットした。試験血清サンプルの50%中和価は、赤および血清希釈と、無血清制御ウェルの50%値の直下または直下の数を有し、同定された。ガンビアの2つの異なる成人コホートとメルボルンの健康なボランティアのRSVAPRNアッセイは、ガンビアの成人がメルボルンの成人と比較して低い平均NABトワトレを有する結果をもたらした。示されたヒトRSV参照血清は、6.82%の変動係数を有する非常に低い変動性を示し、この改善された高スループットRSVプラーク還元中和アッセイは多くの研究室で容易に実施することができ、RSV中和抗体アッセイのためのWHOの国際的な調和の取り組みをサポートします。これは、将来の新しいRSVワクチン候補の評価にとって重要です。

Research

JoVE Journal

Medicine

An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus (RSV) Micro-neutralization Assay

Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping

リモートハイスループット表現型解析のためのマウスの目の摘出

The mouse eye is an important genetic model for the translational study of human ophthalmic disease. Blinding diseases in humans, such as macular ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

急性移植片対宿主病のバイオマーカーの検証のためのハイスループットシーケンシャルELISA

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

ハイスループットフローサイトメトリー細胞ベースのアッセイN-メチル-D-アスパラギン酸受容体またはヒト血清中のドーパ​​ミン-2受容体に対する抗体を検出する

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

代替として舌下免疫療法は、急性呼吸器感染症に対する保護を誘導するために

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

An Organotypic High Throughput System for Characterization of Drug Sensitivity of Primary Multiple Myeloma Cells

一次多発性骨髄腫細胞の薬剤感受性の特徴付けのための器官のハイスループットシステム

In this work we describe a novel approach that combines ex vivo drug sensitivity assays and digital image analysis to estimate chemosensitivity and ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

マウスの気管の迅速な挿管のための改善された方法

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

A High Throughput, Multiplexed and Targeted Proteomic CSF Assay to Quantify Neurodegenerative Biomarkers and Apolipoprotein E Isoforms Status

神経変性のバイオマーカーおよびアポリポタンパク質Eアイソフォームの状態を定量化するために高スループット、多重化およびターゲットプロテオームCSFアッセイ

Many neurodegenerative diseases are&#160;still lacking effective treatments. Reliable biomarkers for identifying and classifying these diseases will be ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

マウス左前方降順（LAD）冠動脈結紮：心筋梗塞のための改善と簡略化されたモデル

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...