Name: an improved and high throughput respiratory syncytial virus (rsv) micro-neutralization assay
Uploaded: 2019-01-26T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay at JoVE.com

Авторы благодарят всех участников. Мы признаем правительство викторианской оперативной инфраструктуры поддержки программы. ПВЛ является получателем NHMRC стипендий развития карьеры.

Примечание: Все шаги должны быть выполнены в капюшоне BSL2, если не указано иначе. Вирусная титрования требуется заблаговременно PRN анализа для определения оптимальной концентрации RSV, используемых в PRN assay. Рекомендуется Алиготе запасов вируса в небольшом объеме, который будет р...

<ol>
	<li>Shi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional,+and+national+disease+burden+estimates+of+acute+lower+respiratory+infections+due+to+respiratory+syncytial+virus+in+young+children+in+2015:+a+systematic+review+and+modelling+study.">Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study.</a> Lancet. 390 (10098), 946-958 (2017).</li><li>Modjarrad, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=WHO+consultation+on+Respiratory+Syncytial+Virus+Vaccine+Development+Report+from+a+World+Health+Organization+Meeting+held+on+23-24+March+2015.">WHO consultation on Respiratory Syncytial Virus Vaccine Development Report from a World Health Organization Meeting held on 23-24 March 2015.</a> Vaccine. 34 (2), 190-197 (2016).</li><li>Giersing, B. K., Karron, R. A., Vekemans, J., Kaslow, D. C., Moorthy, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meeting+report:+WHO+consultation+on+Respiratory+Syncytial+Virus+(RSV)+vaccine+development,+Geneva,+25-26+April+2016.">Meeting report: WHO consultation on Respiratory Syncytial Virus (RSV) vaccine development, Geneva, 25-26 April 2016.</a> Vaccine. , (2017).</li><li>Mazur, N. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+respiratory+syncytial+virus+vaccine+landscape:+lessons+from+the+graveyard+and+promising+candidates.">The respiratory syncytial virus vaccine landscape: lessons from the graveyard and promising candidates.</a> Lancet Infect Diseases. 18 (10), e295-e311 (2018).</li><li>Hosken, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multi-laboratory+study+of+diverse+RSV+neutralization+assays+indicates+feasibility+for+harmonization+with+an+international+standard.">A multi-laboratory study of diverse RSV neutralization assays indicates feasibility for harmonization with an international standard.</a> Vaccine. 35 (23), 3082-3088 (2017).</li><li>Zielinska, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+improved+microneutralization+assay+for+respiratory+syncytial+virus+by+automated+plaque+counting+using+imaging+analysis.">Development of an improved microneutralization assay for respiratory syncytial virus by automated plaque counting using imaging analysis.</a> Virology Journal. 2, 84 (2005).</li><li>van Remmerden, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+respiratory+syncytial+virus+neutralization+assay+based+on+the+detection+of+green+fluorescent+protein+expression+and+automated+plaque+counting.">An improved respiratory syncytial virus neutralization assay based on the detection of green fluorescent protein expression and automated plaque counting.</a> Virology Journal. 9, 253 (2012).</li><li>Varada, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+neutralization+assay+for+respiratory+syncytial+virus+using+a+quantitative+PCR-based+endpoint+assessment.">A neutralization assay for respiratory syncytial virus using a quantitative PCR-based endpoint assessment.</a> Virology Journal. 10, 195 (2013).</li><li>Tripp, R. A., Jorquera, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Human respiratory syncytial virus: methods and protocols. , (2016).</li><li>Suara, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+neutralizing+antibody+to+respiratory+syncytial+virus+in+sera+from+mothers+and+newborns+residing+in+the+Gambia+and+in+The+United+States.">Prevalence of neutralizing antibody to respiratory syncytial virus in sera from mothers and newborns residing in the Gambia and in The United States.</a> Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 3 (4), 477-479 (1996).</li><li>Wang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+neutralizing+serum+antibodies+of+patients+vaccinated+with+human+papillomavirus+L1+or+L2-based+immunogens+using+furin-cleaved+HPV+Pseudovirions.">Measurement of neutralizing serum antibodies of patients vaccinated with human papillomavirus L1 or L2-based immunogens using furin-cleaved HPV Pseudovirions.</a> PLoS One. 9 (7), e101576 (2014).</li><li>Magnus, C., Reh, L., Trkola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+resistance+to+neutralizing+antibodies:+Determination+of+antibody+concentrations+leading+to+escape+mutant+evolution.">HIV-1 resistance to neutralizing antibodies: Determination of antibody concentrations leading to escape mutant evolution.</a> Virus Research. 218, 57-70 (2016).</li></ol>

Мы разработали и оптимизированы простой и эффективный RSV микро нейтрализация assay, который может быть легко адаптирована в большинстве лабораторий. Этот assay возможность измерить способность вирусной инфекции, а также измерения ингибирования вирусной инфекции на NAb на клеточном уровне, ?...

Респираторно-синцитиальный вирус (RSV) является ведущей причиной инфекции нижних дыхательных путей в педиатрической населения во всем мире1. Несмотря на его высокое бремя существует до сих пор нет вакцины или лечения доступны. С 2013 года Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила RSV вакцина развития как приоритет крупных исследования, с ежегодной встречи ВОЗ консультации2,3. ВОЗ согласовали использование RSV, нейтрализуя антитело (NAb) измерения для мониторинга иммуногенность вакцины, как это признается в качестве основных серологических маркеров защиты4. Цапает было показано, чтобы защитить от тяжелой инфекции RSV в ряде исследований, а также клинические испытания palivizumab анти RSV моноклональных антител, в настоящее время только профилактические стратегии доступны4.
Есть несколько форматов пробирного NAb, используемых в лабораториях во всем мире, в том числе на основе клеток и молекулярные анализы, которые предприняли усилия стандартизации сложной5,6,,78. Однако обычные налета снижение нейтрализации (PRN) assay, который измеряет количество сокращение зубного налета, образуя единиц (ОРП) присутствие RSV-специфические антитела остается золотой стандарт9. Здесь мы приводим улучшение, упрощенная и высок объём PRN протокол, который может использоваться в многочисленных клеточных линий, с повышенной пробирного пропускную способность различных штаммов RSV и. Этот протокол был протестирован с помощью клинических образцов из различных параметров, а также на образцах из животных модельных экспериментов.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cell line</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A549</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td>provided by Dr Keith Chappell, University of Queensland</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Viral strains</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RSV A2</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>VR-1540</td>
			<td>lot number 60430286</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1000142511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa-Fluor donkey anti-goat IgG (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A11055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMC sodium salt powder</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5678-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM (no serum, 3.7 g/L NaHC, P/S) (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Scientific Services &#8211; Tissue Culture</td>
			<td></td>
			<td>MCRI in house supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal calf Serum (stored in 50ml aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>SFBS-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat X RSV antibody</td>
			<td>Merck</td>
			<td>AB1128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>human polyclonal antiserum to respiratory syncytial virus (RSV) (stored in 45 &#181;L aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>BEI Resources</td>
			<td>NR-4022</td>
			<td>Free order through BEI Resources upon registration. This serum belong to a panel of human antiserum and immune globulin to RSV (NR-32832)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M199 powder</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>31100035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milk diluent blocking solution (stored at 4 &#176;C)</td>
			<td>Australian Biosearch</td>
			<td>50-82-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin (stored in 6mL aliquots at -20 &#176;C)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>s.d.H2O from Milli-Q dispenser</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td>In-house dispensation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile 1X PBS for culture (stored at 4&#176;C)</td>
			<td>Scientific Services &#8211; Tissue Culture</td>
			<td></td>
			<td>MCRI in house supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20 polysorbate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>9005-64-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>General Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Falcon tubes (50 mL)</td>
			<td>Invitro Technologies</td>
			<td>FAL352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter unit 0.22um (500 mL)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>NAL5660020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Eppendorf tubes (1.5 mL)</td>
			<td>Australia PL</td>
			<td>AM12400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile flat-bottom plates (96-well with lid)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>655180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile U-bottom plates (96-well with lid)</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>650180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5ml serological pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS4487-200EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL serological pipette</td>
			<td>Interpath</td>
			<td>607180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 mL serological pipette</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS4251-200EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 1-200 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 96TIPS PKG960</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-200-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 5-20 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 96TIPS PKG960</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-20-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 100-1000 &#181;LClear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 100TIPS PKG1000</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TF-1000-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tip Pipette 1-10 &#181;L Clear Maxymum Recovery Racked Pre-sterilized 10RACKS x 100TIPS PKG1001</td>
			<td>Fisher Biotec</td>
			<td>TXLF-10-L-R-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipments and softwares</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ELISpot reader system</td>
			<td>AID iSpot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strasburg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AID ELISpot software version 5.0</td>
			<td>AID iSpot, Autoimmun Diagnostika GmbH, Strasburg, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Excel 2007</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an improved and high throughput respiratory syncytial virus (rsv) micro-neutralization assay

Органов дыхания-синцитиальный вирус специфических нейтрализующие антитела (RSV NAbs) являются важным маркер защиты против RSV. Количество различных пробирного форматов в настоящее время используются во всем мире так что необходимо для точной и высок объём метода измерения RSV NAbs. Мы опишем здесь на основе изображений микро нейтрализация assay который был протестирован на RSV подгруппы A и также может быть адаптирована для RSV подгруппы B и различные примеры типов. Этот метод является весьма воспроизводимость, с вариациями между анализами для ведения антисыворотки, менее 10%. Мы считаем, что этот assay может быть легко установлена во многих лабораториях во всем мире при относительно низких затратах. Разработка улучшилось, высок объём assay который измеряет RSV NAbs представляет собой значительный шаг вперед для стандартизации этот метод на международном уровне, а также имеют решающее значение для оценки Роман RSV вакцина кандидатов в будущем.

Титрование запасов вируса была выполнена с 1:10 до 1:108 разрежения для определения запасов концентрация вируса до пробирного PRN (представитель результаты, показанные на рисунке 5). Рисунок 5, PFU может учитываться надежно в разведениях ...

Watch this Scientific Journal Video about An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay at JoVE.com

An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus RSV Micro-neutralization Assay

Это исследование описывает высокую пропускную способность, на основе изображений микро нейтрализация пробирного определить титр нейтрализующих антител специфических для респираторно-синцитиальный вирус (RSV). Этот assay формат был протестирован на различных образцов типов.

Улучшенная и высокой пропускной способности Assay микро нейтрализация респираторно-синцитиальный вирус (RSV)

Respiratory syncytial virus-specific neutralizing antibodies (RSV NAbs) are an important marker of protection against RSV. A number of different assay ...

Существует необходимость в точном и высокой пропускной способности метода для измерения RSV нейтрализации антител, в качестве важного маркера защиты от респираторно-синцитиального вируса. Этот метод является весьма воспроизводимым с меж-анализ вариаций для ссылки антисемя время менее 10%Мы считаем, что этот анализ может быть легко создана во многих лабораториях по всему миру при относительно низкой стоимости. Мы описываем здесь анализ микролимфлизации на основе изображений, который был протестирован на подгруппе A RSV, а также может быть адаптирован для подгруппы B RSV и различных типов образцов.Демонстрацией процедуры будет Рубен Цзе, член исследовательской группы MCRI. Для семян пластин в первый день, первый resuspend A549 клеток в DMEM средств массовой информации, с 10%FCS и 1000 единиц пенициллин-стрептомицин смеси в концентрации 400000 клеток на миллилитр. Затем семя 96-ну плоские нижние стерильные пластины с 40000 A459 клеток при плотности 100 микролитров на колодец.Инкубировать пластину при 37 градусах по Цельсию в 5%углекислого газа окружающей среды в одночасье. Для подготовки разбавления сыворотки на второй день, сначала оттепель человека RSV ссылки сыворотки и сыворотки тестовых образцов при комнатной температуре. Затем поместите их в ванну для воды при температуре 56 градусов по Цельсию в течение 30 минут, чтобы нагреть и активировать их.Далее приготовьте более 110 микролитров от одного до 100 разбавления эталонной сыворотки, смешивая 1,5 микролитера эталонной сыворотки с без FCS DMEM-медиа с пенициллин-стрептомициновой смесью до конечного объема в 150 микролитров. Pipette 110 микролитров этого разбавления в хорошо A12 из 96-ну U-нижней стерильной пластины. Чтобы сделать серийный один-два разбавления вниз пластины, сначала добавить 55 микролитров FCS-бесплатных СРЕДСТВ массовой информации DMEM с Пенициллин-Стрептомицин смеси скважин B12 до H12.Затем с новым наконечником перенесите 55 микролитров из хорошо A12 в колодец B12. Pipette вверх и вниз пять раз, чтобы смешать раствор, и продолжать, пока вы не достигнете хорошо H12. Пипетка от лишних 55 микролитров раствора из хорошо H12.Затем приготовьте от одного до 100 разбавления образцов теста сыворотки и добавьте 110 микролитров каждого разбавления к соответствующим скважинам A1 к A9 и E1 к E9 из 96-хорошо стерильной пластины. Затем добавьте 55 микролитров fcS-бесплатных СРЕДСТВ массовой информации DMEM с пенициллин-стрептомицин смеси скважин в столбцах от одного до девяти. Сделайте последовательное от одного до двух разбавлений строки A в строку D и из строки E в строку H, как описано ранее.Добавьте 55 микролитров средств массовой информации DMEM без FCS со смесью пенициллин-стрептомицин в скважины колоннами 10 и 11. Чтобы подготовить вирусный запас, сначала положите замороженный флакон RSV в водяную ванну 37 градусов по Цельсию, чтобы быстро разморозить ее, а затем поместите флакон на лед. Затем добавьте вирус в DMEM-средства массовой информации, содержащие смесь пенициллин-стрептомицин, примерно в 200 ПФУ на скважину, чтобы сделать общий объем 55 миллилитров для 100 скважин.Чтобы подготовить смесь сыворотки вируса, сначала добавьте 55 микролитров разбавленного вируса во все скважины столбцов от одного до девяти и колодцы рядов E через H столбцов 10 и 11. Затем добавьте 55 микролитров FCS-бесплатных СРЕДСТВ массовой информации DMEM с пенициллин-стрептомицин смесь для всех скважин рядов D колонн 10 и 11, и инкубировать пластины при 37 градусов по Цельсию в 5%углекислого газа окружающей среды в течение одного часа. До прививки клеток A549 с RSV, изучить клеточной пластины под световым микроскопом, чтобы подтвердить, что A549 клеток монослойных 80%confluent.Затем инвертировать пластину осторожно, чтобы отбросить средства массовой информации, и слегка пятно пластины на стерильных абсорбентное бумажное полотенце. После каждого, мыть с фильтрованной стерильной PBS. Затем добавьте 100 микролитров на колодец смеси сыворотки вируса к соответствующим скважинам на клеточной пластине A549 в соответствии с шаблоном пластины, предусмотренным в рукописи, и инкубировать пластину при 37 градусах по Цельсию в 5%углекислом газе в течение одного часа.В конце инкубации используйте пипетку для удаления 90 микролитров на колодец и добавьте 100 микролитров мультимедиа, содержащих смесь 1XM199, 1,5%CMC и 2%FCS в смеси пенициллин-стрептомицин. Инкубировать пластину при 37 градусах по Цельсию в 5%углекислого газа в течение трех дней. Чтобы исправить и разработать анализ пластины, сначала инвертировать RSV-инфицированных A549 клеточной пластины мягко отказаться от средств массовой информации, содержащей M199, CMC, 2%FCS, и пенициллин-стрептомицин смеси.Затем медленно добавьте 200 микролитров Fixation Buffer к каждой колодец. Инкубировать пластину при температуре минус 20 градусов по Цельсию в течение 20 минут. Затем отбросьте буфер фиксации и аккуратно помарку на абсорбентное бумажное полотенце.Оставьте тарелку лицом вниз, чтобы высохнуть в течение 10 минут. Затем с фильтрованным буфером PBS, содержащим 05 полисорбата 20, сделайте 5%молочный блокирующий раствор. Добавьте 200 микролитров блокирующего раствора к каждой колодец и инкубировать пластину при комнатной температуре в течение 30 минут.В конце инкубации инвертировать пластину осторожно, чтобы отказаться от раствора и пятно на абсорбентное бумажное полотенце. Чтобы сделать первичное антитело, разбавить от одного до 500 коз XRSV антитела в блокирующий раствор. Добавьте 50 микролитров к каждому колодец и инкубировать пластину при 37 градусах по Цельсию в течение одного часа.Вымойте пластину три раза с фильтрованным PBS-полисорбатом. Далее, сделать вторичное антитело, разбавляя от одного до 5000 Alexa Fluor осла анти-коза иммуноглобулин G в блокирующий раствор. Добавьте 50 микролитров к каждой колодец и инкубировать при 37 градусах по Цельсию в течение одного часа.Вымойте пластину пять раз с фильтрованным PBS-полисорбатом. Для подсчета табличек с автоматическим считывателем пятен сначала используйте неиспользованную культурную пластину 96-ну для совместной работы с инструментом, введя настройки подсчета в канале FITC. Затем прочитайте клеточную пластину, заверните ее в фольгу и храните при четырех градусах цельсия.Далее проверьте изображения колодцев на наличие артефактных бляшек или нарушенных монослой клеток, а также исключите скважины с нарушенными монослойными ячейками. Среднее количество бляшек не-сыворотки контрольных скважин было рассчитано и использовано для определения 50%-нейтрализации отрезания, что приведет к 50%-ной ингибированию вирусной активности. Взаимное разбавление сыворотки было построено на х-оси и количество бляшек на оси полу-журнала график от линии, нарисованной между двумя точками.50%-нейтрализации титры тестовых образцов сыворотки были красными и разбавления сыворотки с подсчетами непосредственно выше или ниже 50% значение не-сыворотки контрольных скважин были определены. Анализы RSVAPRN в двух различных взрослых когортах из Гамбии и здоровых добровольцах в Мельбурне привели к тому, что взрослые гамбийцы имеют более низкий средний титр NAB по сравнению со взрослыми мельбурнами. Показанная сыворотка с ссылкой на RSV человека демонстрирует очень низкую изменчивость с коэффициентом вариации 6,82%Это улучшенное высокое содержание пропускной способности RSV анализа нейтрализации бляшек RSV может быть легко реализовано во многих лабораториях, и будет поддерживать международные усилия ВОЗ по гармонизации для анализа RSV нейтрализации антител.Это будет иметь решающее значение для оценки новых кандидатов вакцины РСВ в будущем.

Research

JoVE Journal

Medicine

An Improved and High Throughput Respiratory Syncytial Virus (RSV) Micro-neutralization Assay

Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping

Мышь глаз Энуклеация для удаленного высокой пропускной Фенотипирование

The mouse eye is an important genetic model for the translational study of human ophthalmic disease. Blinding diseases in humans, such as macular ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

Высокая пропускная способность последовательного ELISA для проверки биомаркеров острого трансплантат против хозяина

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

Высокая пропускная проточной цитометрии Клеточная Анализ для выявления антител к N-метил-D-аспартат рецепторов или допамин-2 рецепторов в сыворотке человека

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Sublingual Immunotherapy as an Alternative to Induce Protection Against Acute Respiratory Infections

Сублингвальной иммунотерапии как альтернатива Вызвать защиты от острыми респираторными инфекциями

Sublingual route has been widely used to deliver small molecules into the bloodstream and to modulate the immune response at different sites. It has been ...

An Organotypic High Throughput System for Characterization of Drug Sensitivity of Primary Multiple Myeloma Cells

Органотипической Высокая пропускная система для характеризации наркотиками чувствительности первичных клетки множественной миеломы

In this work we describe a novel approach that combines ex vivo drug sensitivity assays and digital image analysis to estimate chemosensitivity and ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Усовершенствованный метод Rapid интубации трахеи у мышей

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

A High Throughput, Multiplexed and Targeted Proteomic CSF Assay to Quantify Neurodegenerative Biomarkers and Apolipoprotein E Isoforms Status

Высокая пропускная способность, Multiplexed и Targeted Протеомный CSF Анализ на Количественно нейродегенеративных биомаркеров и аполипопротеина Е изоформы Статус

Many neurodegenerative diseases are&#160;still lacking effective treatments. Reliable biomarkers for identifying and classifying these diseases will be ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Мышиная левая передняя нисход (ЛАД) аортокоронарное Лигирование: Улучшенная и Простая модель инфаркт миокард

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...