Name: measuring bone remodeling and recreating the tumor-bone microenvironment using calvaria co-culture and histomorphometry
Uploaded: 2020-03-14T12:00:00
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作者感谢马里奥·野村、医学博士和鲁道夫·迪亚斯在《本体学》方面的帮助，以及皮耶里克·富尼尔博士为提高论文质量而提出的宝贵意见。

这些测定中使用的所有小鼠都是从BALB/c小鼠菌株中获得的，不分青红皂白地使用雄性小鼠和雌性小鼠。以前的培养实验也使用其他菌株进行，如FVB、瑞士小鼠、CD-1和CsA小鼠11、12、14。11,12,14所有小鼠均根据国家卫生研究院（NIH）指南，涉及动物主题的附录Q程序已获得恩塞纳达科学研究和高等教育中心的机构动物护理和使用委?...

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	<li>Boyce, B., Coleman, R. E., Abrahamsson, P. A., Hadji, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+biology+and+pathology.">Bone biology and pathology.</a> Handbook of Cancer-Related Bone Disease. , 3-21 (2012).</li><li>Clark, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Anatomy and Physiology: Understanding the Human Body. 474, (2005).</li><li>Fournier, P. G. J., Ju&#225;rez, P., Guise, T. A., Heymann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-bone+interactions:+there+is+no+place+like+bone.">Tumor-bone interactions: there is no place like bone.</a> Bone Cancer: Primary Bone Cancers and Bone Metastases. , 13-28 (2014).</li><li>Ribatti, D., Mangialardi, G., Vacca, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stephen+Paget+and+the+"seed+and+soil"+theory+of+metastatic+dissemination.">Stephen Paget and the "seed and soil" theory of metastatic dissemination.</a> Clinical and Experimental Medicine. 6 (4), 145-149 (2006).</li><li>Guise, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vicious+cycle+of+bone+metastases.">The vicious cycle of bone metastases.</a> Journal of Musculoskeletal &amp; Neuronal Interactions. 2 (6), 570-572 (2002).</li><li>Mundy, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+bone+metastasis.">Mechanisms of bone metastasis.</a> Cancer. 80 (8), 1546-1556 (1997).</li><li>Mundy, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastasis+to+bone:+causes,+consequences+and+therapeutic+opportunities.">Metastasis to bone: causes, consequences and therapeutic opportunities.</a> Nature Reviews Cancer. 2 (8), 584-593 (2002).</li><li>Chong, S. K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+bone+metastasis:+Opportunities+for+the+study+of+cancer+dormancy.">Experimental models of bone metastasis: Opportunities for the study of cancer dormancy.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 94 (1), 141-150 (2015).</li><li>Deguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+model+of+bone+to+facilitate+measurement+of+adhesion+forces+and+super-resolution+imaging+of+osteoclasts.">In vitro model of bone to facilitate measurement of adhesion forces and super-resolution imaging of osteoclasts.</a> Scientific Reports. 6 (22585), 1-13 (2016).</li><li>Marino, S., Staines, K. A., Brown, G., Howard-Jones, R. A., Adamczyk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+ex+vivo+explant+cultures:+applications+in+bone+research.">Models of ex vivo explant cultures: applications in bone research.</a> BoneKEY Reports. 5, 818 (2016).</li><li>Nordstrand, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+validation+of+an+in+vitro+coculture+model+to+study+the+interactions+between+bone+and+prostate+cancer+cells.">Establishment and validation of an in vitro coculture model to study the interactions between bone and prostate cancer cells.</a> Clinical &amp; Experimental Metastasis. 26 (8), 945-953 (2009).</li><li>Curtin, P., Youm, H., Salih, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+cancer-bone+metastasis+model+using+ex+vivo+cocultures+of+live+calvaria+bones+and+cancer+cells.">Three-dimensional cancer-bone metastasis model using ex vivo cocultures of live calvaria bones and cancer cells.</a> Biomaterials. 33 (4), 1065-1078 (2012).</li><li>Garret, R., Helfrich, M. H., Ralston, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+bone+formation+using+mouse+calvarial+organ+cultures.">Assessing bone formation using mouse calvarial organ cultures.</a> Bone Research Protocols. , 183-198 (2003).</li><li>Mohammad, K. S., Chirgwin, J. M., Guise, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+new+bone+formation+in+neonatal+calvarial+organ+cultures.">Assessing new bone formation in neonatal calvarial organ cultures.</a> Methods in Molecular Biology. 455 (1), 37-50 (2008).</li></ol>

在这里，我们描述了计算骨骼形成或吸收以及研究癌细胞与钙质小鼠骨骼相互作用的钙质前活体模型的协议。该技术的关键步骤是钙质的解剖、培养、嵌入和形态学分析。在解剖钙质时，将半部钙质切成梯形至关重要，因为它将有力地促进石蜡加入过程中的方向。在研究癌细胞与钙质的相互作用时，使用未为细胞培养治疗的多孔板来防止癌细胞粘附和生长在塑料上而不是骨头上是很重要的?...

骨骼是一种动态的结缔组织，具有多种功能，包括支持肌肉，保护内脏器官和骨髓，储存和释放钙和生长因子11，2。2为了保持其完整性和功能，骨组织不断进行重塑。一般来说，骨重塑的周期可以分为骨吸收和骨骼形成1。骨重塑这两个阶段之间的不平衡可能导致骨病理学的发展。此外，乳腺癌等疾病通常影响骨骼完整性;大约70%以上的晚期患者有或将有骨转移。当乳腺癌细胞进入骨骼时，它们影响骨骼代谢，导致过度再吸收（骨质病变）和/或形成（骨质病变）3。
要了解骨病的生物学，开发新的治疗方法，必须了解骨重塑所涉及的机制。在癌症研究中，研究骨转移过程及其与转移微环境的关系至关重要。1889年，Stephen Paget假设当肿瘤细胞和目标组织之间存在相容性时就会发生转移，并建议转移位点取决于肿瘤对微环境4的亲和力。1997年，蒙迪和吉斯引入了"骨转移的恶性循环"的概念，以解释肿瘤细胞如何改变骨微环境以实现其生存和生长，以及骨微环境如何通过提供钙和生长因子55、6、76,7来促进其生长。
为了描述骨重塑和骨转移所涉及的机制，并评估具有潜在治疗潜力的分子，有必要在体外和体内培养模型。然而，这些模型目前存在许多限制，如骨微环境的简化表示，其成本88，9。9骨外植物外植物的培养具有保持三维组织以及骨细胞多样性的优点。此外，可以控制实验条件。外植模型包括骨骼、股骨头、钙质体和颌骨或纹芯10的培养。在不同研究中，前活体模型的优点得到了证明。2009年，Nordstrand和合作者报告说，建立了基于骨癌和前列腺癌细胞11相互作用的共同培养模型。此外，在2012年，Curtin和合作者报告说，使用外野共同培养12的三维模型的发展。这种前活体模型的目的是尽可能准确地重现骨微环境的条件，以便能够描述正常或病理性骨重塑所涉及的机制，并评估新的治疗剂的疗效。
本议定书以加勒特13和穆罕默德等人14日公布的程序为基础。新生儿小鼠钙质培养物已被用作实验模型，因为它们保留了发育中的骨骼和骨细胞的三维结构，包括分化所有阶段的细胞（即成细胞、成骨细胞、骨细胞、基质细胞），这些细胞导致成熟成骨细胞和成骨细胞，以及矿化基质14。前活体模型并不完全代表骨病的病理过程。然而，对骨骼重塑或癌症引起的骨裂的影响可以准确测量。
简而言之，该协议包括以下步骤：从5-7天大小鼠的钙质解剖，钙质预培养，钙质培养应用（例如，在胰岛素存在培养，癌细胞或中等，甚至剂与治疗潜力，根据调查的目的），骨固定和钙质化贴花，组织处理，组织分析，结果解释。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>24 well cell culture</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well non tissue culture</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>15705-060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL cryovial</td>
			<td>SSI</td>
			<td>2341-S0S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotics-Antimycotic</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-004-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>P6154-100GR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugue</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22628188</td>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Corning</td>
			<td>2935-24X50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytoseal resin</td>
			<td>Richard Allen</td>
			<td>8310-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td></td>
			<td>D2650-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modification of Eagles Medium, with 4.5 g/L glucose and L-glutamine, without sodium pyruvate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10-017-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s PBS (10X)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>20-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ebedding Cassettes</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z672122-500EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Golden</td>
			<td>26400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding Workstation</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A81000001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Golden</td>
			<td>60600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>JALMEK</td>
			<td>E5325-17P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>BIO-S1650-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filters</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS431229</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps and scissors</td>
			<td>LANCETA HG</td>
			<td>74165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin buffered 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides 25 x 75 mm</td>
			<td>Premiere</td>
			<td>9105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Harris&#39;s Hematoxylin</td>
			<td>Jalmek</td>
			<td>SH025-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High profile blades</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>1001259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoquinet</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>813150</td>
			<td>STP 120</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>16634</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>Axio Scope.A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>905200</td>
			<td>MICROM HM 355S</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse food, 18% prot, 2018S</td>
			<td>Harlan</td>
			<td>T.2018S.15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neubauer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>631-0696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orange G</td>
			<td>Biobasic</td>
			<td>OB0674-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin</td>
			<td>Paraplast</td>
			<td>39601006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Section Flotation Bath</td>
			<td>Electrothermal</td>
			<td>MH8517X1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phloxin B</td>
			<td>Probiotek</td>
			<td>166-02072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Corning</td>
			<td>25-051-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wax dispenser</td>
			<td>Electrothermal</td>
			<td>MH8523BX1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Golden</td>
			<td>534056-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring bone remodeling and recreating the tumor-bone microenvironment using calvaria co-culture and histomorphometry

骨骼是由成骨细胞、骨细胞和成骨细胞组成的结缔组织，是一种成矿的细胞外基质，赋予其强度和灵活性，使其能够履行其功能。骨骼不断受到各种刺激，在病理条件下可以放松对骨重塑的调节。为了研究骨生物学和疾病，并评估潜在的治疗药物，有必要开发体外和体内模型。
本稿描述了从新生儿小鼠分离的钙质的解剖过程和培养条件，以研究骨骼形成和骨肿瘤微环境。与体外和体内模型不同，这种前活体模型允许保存组织的三维环境以及骨骼的细胞多样性，同时在规定的条件下进行培养以模拟所需的微环境。因此，可以研究骨重塑及其机制，以及与其他细胞类型的相互作用，如癌细胞和骨骼之间的相互作用。
这里报告的测定使用5-7天大的BALB/C小鼠的钙瓦里。获得的中度钙瓦解是在存在胰岛素、乳腺癌细胞（MDA-MB-231）或乳腺癌细胞培养物的调节介质的情况下培养的。经分析，确定胰岛素诱发新的骨骼形成，而癌细胞及其条件介质诱发骨吸收。钙质模型已成功应用于基础和应用研究，研究骨骼发育和癌症诱发的骨病。总体而言，它是简单、信息丰富、低成本测定的绝佳选择。

为了评估钙质模型中的骨形成，我们在具有或不含50μg/mL胰岛素的介质中培育了中层钙质。组织部分被制备并染色H&E。在这些条件下，组织学表明，骨骼的结构完整性得以保持，从而能够识别其不同成分（图1）。与对照相比，用胰岛素治疗的钙质比骨组织的数量增加了（图2A）。对血型钙质厚度和骨面积的定量组织...

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Measuring Bone Remodeling and Recreating the Tumor-Bone Microenvironment Using Calvaria Co-culture and Histomorphometry

骨外植物的外生培养是骨生理学研究的宝贵工具，是骨改和骨病药物的潜在评价。提交的协议描述了从新生小鼠头骨分离的钙瓦里亚的制备和培养及其应用。

利用卡尔瓦里亚共同培养和教条法测量骨重塑和再造肿瘤-骨微环境

Bone is a connective tissue constituted of osteoblasts, osteocytes, and osteoclasts and a mineralized extracellular matrix, which gives it its strength ...

此过程的目的是有一个外体模型，以评估骨重塑，并使用 calvaria 培养物或与癌细胞共同培养肿瘤骨微环境。大多数钙质技术是一种器官培养系统，使用新生儿小鼠的钙质骨来评估骨骼重塑。您可以测试不同分子的治疗潜力，甚至结合癌细胞使用骨肿瘤微环境。所有这一切在一个简单和简单的测定在短时间内和低成本。该技术的目的是利用小鼠卡路里器官培养的外体模型，利用癌症骨骼微环境评估骨再生的工具。首先，选择一只老鼠小狗，然后把它放在引擎盖下。我们使用从五到七天大的老鼠幼崽的卡瓦里亚。用注射器拿头，切开皮肤，清除头皮区域，足以解剖钙。确定头骨、下垂、日冕和羔羊的缝合线。沿着羔羊缝合线做一个笔直的切口，大约在眼睛的水平。切在每一边，从羊皮缝合线到日冕缝合线。在 45 角度下，再进行一次切割，以连接与前部字体的切口进行切割的切口。定义头骨缝合线、下垂、前冠、冠状体、羔羊类，以保证正确的组织内含和组织学分析，是极其重要的。用细尖钳，取出卡瓦里亚，并把它放在培养皿盖上。用手术刀，沿着下垂缝合线沿着下垂缝合线从后牙线直接切割，穿过日冕缝合线。获得两个半方面变量。用钳子选取每个卡瓦里亚，并把它们放在一个新的培养皿与PBS。对于培养，将下摆放在24井组织培养板中，含有1毫升培养剂，并在37度下孵育24小时。我们还可以使用原发性钙质培养物来再现肿瘤骨微环境，用于骨吸收。为此，我们与癌细胞或癌细胞的调节介质共同培养钙。24 小时后，卸下介质并将其替换为包含您要测试的处理效果的介质。如果你想评估癌细胞和骨相互作用，或重新创建肿瘤骨微环境，将钙质传递到低细胞附着板，以避免癌细胞附着在板上。对癌细胞进行分析，数一数，并小心地将它们放在半膜体的顶部。您也可以使用来自癌细胞的条件介质，并用它来孵化下摆。在37度下孵育6至7天，二氧化碳占5%。第三天，更换介质，继续孵化。在共培养中使用的细胞数量取决于癌症细胞线。首先，您需要优化在一个单元格中诱导响应所需的单元格数。培养后，卡瓦里亚通过固定、脱钙和石蜡嵌入的过程。此外，组织被分切在微原子中，染色，并进行组织形态分析。包含卡瓦里亚可能比较棘手。为确保组织在内含过程中受到保护，您可以将组织放在海绵之间，或使用纸巾或其他吸水纸，然后再将其放入盒式磁带中。对于组织加工，用纸巾包装下半膜。然后，将其放入嵌入盒中，并在正式状态的中性缓冲区中固定，在四度下 24 小时。要对卡瓦里亚进行脱钙，请将盒式磁带放入 10%EDTA 中，在四度下 48 小时。在自动组织处理器中使用半圆锥形处理组织盒。遵循常规的一天旋转周期，然后，包括在石蜡中。对于分切，用显微原子切割四个微分部分，将截面安装到玻璃显微镜幻灯片上，用赤氧树脂素、eosin进行染色。组织学分析用于对骨骼表面和骨骼重塑区域进行定量分析。使用成像软件对7天中钙的影像进行了分析。对于定量评估，首先，定义分析区域。查看 telopa 上的部分，其中四个 X 可以确定方向和缝合线。定义日冕缝合线，并识别一侧的长骨表面，然后识别另一侧的短面。在40X放大倍率下，识别日冕缝合线，沿着长表面将两到三个光场移离缝合线。捕获此区域的图像以进行分析。您可以使用图像软件来分析骨骼的结构完整性。可以对半角体厚度和骨骼面积进行定量组织形态分析。正确的 calvaria 分析取决于良好的嵌入和正确的方向，以取得一致的组织学结果。确保每个实验条件至少使用三个卡路里。在这里，我们可以看到骨骼的结构。在橙色中，观察到骨骼。我们还可以看到周分、骨质疏松、内分泌和骨骼其他部位的存在。在我们的案例中，我们使用胰岛素来增加骨骼重塑。与控件相比，我们可以看到骨骼面积显著增加。在这里，我们可以看到MDA-MB-231细胞系对模型卡尔瓦里亚的影响。与控制相比，我们可以看到癌细胞的存在会诱发刺激骨骼破坏的骨解因子。我们使用 calvaria 模型测量骨再生和癌细胞骨相互作用，通过与癌细胞和组织学的共培养。我们还通过定量实时 PCR 验证数据。这种外体模型具有许多优点，如三维组织和骨骼的细胞多样性得到保存，可以控制实验条件。此外，模型很简单，可以在短时间内看到结果，而且成本低。它可以与其他技术相结合，如定量实时PCR，显微镜和微型CT。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Comprehensive Protocol to Sample and Process Bone Marrow for Measuring Measurable Residual Disease and Leukemic Stem Cells in Acute Myeloid Leukemia

测定急性髓系白血病可测残留病和白血病干细胞的骨髓标本和过程综合协议

Response criteria in acute myeloid leukemia (AML) has recently been re-established, with morphologic examination utilized to determine whether patients ...

科研

癌症研究

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

骨髓间充质干细胞在浆组织中的分离及与癌细胞联合培养研究其相互作用

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

研究肿瘤分泌性副体结扎对宏噬细胞活化的影响，使用可渗透膜支架共培养

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...

Analysis of Side Population in Solid Tumor Cell Lines

固体肿瘤细胞系侧面人口分析

Cancer stem cells (CSCs) are an important cause of tumor growth, metastasis, and recurrence. Isolation and identification of CSCs are of great ...

Modeling Primary Bone Tumors and Bone Metastasis with Solid Tumor Graft Implantation into Bone

通过实体瘤移植植入骨模拟原发性骨肿瘤和骨转移

Primary bone tumors or bone metastasis from solid tumors result in painful osteolytic, osteoblastic, or mixed osteolytic/osteoblastic lesions. These ...

Isolation of Proximal Fluids to Investigate the Tumor Microenvironment of Pancreatic Adenocarcinoma

分离近端液研究胰腺腺癌肿瘤微环境

Pancreatic adenocarcinoma (PDAC) is the fourth leading cause of cancer-related death, and soon to become the second. There is an urgent need of variables ...

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Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

使用福尔马林固定和石蜡包埋组织样品的质谱成像扩展肿瘤微环境的理解

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...

Industrialized, Artificial Intelligence-guided Laser Microdissection for Microscaled Proteomic Analysis of the Tumor Microenvironment

工业化、人工智能引导的激光显微切割，用于肿瘤微环境的微尺度蛋白质组学分析

The tumor microenvironment (TME) represents a complex ecosystem comprised of dozens of distinct cell types, including tumor, stroma, and immune cell ...