Name: a tripeptide-stabilized nanoemulsion of oleic acid
Uploaded: 2019-02-27T13:00:00
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Gewähren Sie wir dankbar anerkennen, finanziellen Unterstützung durch das National Cancer Institute SC2CA206194. Keine finanziellen Interessenkonflikte werden erklärt.

1. Synthese von Ölsäure Acids–Platinum(II) Konjugat
<ol><li>Aktivierung von cisplatin<ol>
<li>Aussetzen von 50 mg (0.167 Mmol) von Cisplatin in 4 mL Wasser (z.B. Nanopure) bei 60 ° C.</li>
		<li>Die Lösung von Cisplatin tropfenweise 55,2 mg (0.325 Mmol) AgNO3 in 0,5 mL Wasser hinzu und rühren Sie die Reaktion für mindestens 2 h bei 60 ° C. Zeigt den Fortschritt der Reaktion bilden der weiße Niederschlag von AgCl.</li>
		<li>Um festzustellen, ob die Aktivierung Reaktion abgeschlossen ist, führen Si...

Wichtige Schritte bei der Nanoemulsion Synthese gehören das molare Verhältnis der Substrate anpassen, Erhaltung Temperatur und Durchflussmenge Tarifsteuerung während Ölsäure acids–Pt(II) Zugabe und ausreichend Zeit für die Selbstmontage und Reinigung das Produkt mit einer zentrifugale Konzentrator Spalte. Diese Parameter beeinflussen die Größe und Morphologie der KYF-Pt-NE; Daher ist es besonders wichtig, das richtige molare Verhältnis pflegen und die synthetischen Bedingungen korrekt einstellen.
<p class=...

In den letzten Jahren gab es ein wachsendes Interesse an der Technik von Nanopartikeln für biomedizinische Anwendungen wie Drug Delivery und Bioimaging1,2,3,4. Die Multifunktionalität von Nanopartikel-basierten Systemen erfordert oft unter Einbeziehung mehrerer Komponenten innerhalb einer Formulierung. Die Bausteine, die oft auf Lipide oder Polymeren basieren unterscheiden sich hinsichtlich ihrer physikalisch-chemischen Eigenschaften sowie ihrer Biokompatibilität und biologische Abbaubarkeit, was letztlich die Funktion der Nanostruktur1, beeinträchtigt 5,6. Biologisch abgeleitete Materialien, wie Proteine und Peptide, wurden lange als viel versprechende Komponenten von multifunktionalen Nanostrukturen aufgrund ihrer Sequenz Flexibilität7,8anerkannt. Peptide, die selbst-zusammenbauen in hochgeordnete supramolekularen Architekturen bilden spiralförmige Bänder9,10, faserigen Gerüste11,12und viele mehr, und ebnete damit den Weg zu Haus Biomolekül-basierten Hybrid Nanostrukturen mit einem Bottom-up-Ansatz13.
Peptide wurden für Anwendungen in Medizin und Biotechnologie, vor allem für die Krebstherapie14 und Herz-Kreislauf-Krankheiten15 sowie für antibiotische Entwicklung16,17, metabolische untersucht Störungen18und Infektionen19. Es gibt über hundert kleinen Peptid-Therapeutika, die in klinischen Studien20. Peptide sind einfach zu ändern und schnell, kostengünstig zu synthetisieren. Darüber hinaus sind sie biologisch abbaubar, das erleichtert ihre biologische und pharmazeutische Anwendungen21,22. Die Verwendung von Peptiden als strukturelle Komponenten umfasst das Engineering von responsive, Peptid-basierte Nanopartikel und Hydrogel Depots für kontrollierte Freisetzung23,24,25,26 , 27, Peptid-basierte Biosensoren28,29,30,31, oder Bio-elektronische Geräte32,33,34. Wichtig ist, fanden sich auch kurze Peptide mit zwei oder drei Aminosäure-Resten, die Phenylalanin enthalten, führen die Selbstmontage35,36,37 verarbeitet und stabilisierte Emulsionen38 zu schaffen .
Platin-basierte Medikamente, aufgrund ihrer hohen Wirksamkeit in vielen Krebs-Behandlungsschemata, sowohl allein als auch in Kombination mit anderen Agenten39,40eingesetzt. Platin Verbindungen verursachen DNA-Schäden durch die Bildung von Interstrand, Monoadducts bzw. Intrastrand Querverbindungen. Die Pt-DNA-Läsionen sind durch die zelluläre Maschinerie erkannt und wenn nicht repariert, zu zellulären Apoptose führen. Der wichtigste Mechanismus, den PT(II) zum Krebs Zelltod beiträgt ist die Hemmung der DNA-Transkription41,42. Allerdings sind die Vorteile von Platin-Therapie durch systemische Toxizität des Pt(II) verringert, die schweren Nebenwirkungen auslöst. Dies führt zu niedrigeren klinische Dosierung von Pt(II)43, führt oft zu Sub-therapeutische Konzentrationen von Platin erreichen die DNA. Infolgedessen trägt die DNA-Reparatur, die folgt, Krebs Zelle überleben und den Erwerb von Pt(II) Widerstand. Die Platin Chemo-Widerstand ist ein großes Problem in der Anti-Krebs-Therapie und die Hauptursache für Behandlung Scheitern44,45.
Wir haben eine stabile Nanosysteme entwickelt, die den Pt(II)-Agent um eine Schirmwirkung im systemischen Kreislauf versorgen und die Pt II-induzierten Nebenwirkungen zu vermindern kapselt. Das System basiert auf einem Ölsäure acids-Pt(II) Kern mit einem KYF Tripeptid bilden eine Nanoemulsion (KYF-Pt-NE)46stabilisiert. Die Bausteine der KYF-Pt-NE, die Aminosäuren der Tripeptid sowie die Ölsäure, haben den Status im allgemeinen erkannt als Safe (GRAS) mit Food and Drug Administration (FDA). KYF-Pt-NE wird mithilfe einer Nanoprecipitation Methode47vorbereitet. Kurz gesagt, wird die Ölsäure acids-Pt(II) Konjugat in einem organischen Lösungsmittel gelöst und dann tropfenweise zu einer wässrigen Lösung KYF (Abbildung 1) bei 37 ° C. Die Lösung wird für mehrere Stunden in Selbstmontage KYF-Pt-ne erlauben gerührt. Die Nanoemulsion wird in 10 kDa zentrifugale Konzentratoren konzentriert und dreimal mit Wasser gewaschen. Die chemische Modifizierung von KYF mit einem Fluorophor ermöglicht die Synthese von fluoreszierenden FITC-KYF-Pt-NE für biomedizinische Bildgebung geeignet.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-(1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluronium 
			tetrafluoroborate (TBTU)</td>
			<td>ANASPEC INC.:</td>
			<td>AS-20376</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well chamber confocal dish</td>
			<td>Lab-Tek II, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>154526</td>
			<td>For imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-bromohexanoic acid</td>
			<td>Chem-Impex INT&#8217;L INC.</td>
			<td>24477</td>
			<td>Click modification for peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A2780</td>
			<td>Generously doanted by professor John Martignetti from The Mount Sinai Hospital</td>
			<td></td>
			<td>Ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barnstead Nanopure</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>D11901</td>
			<td>water filtration system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BUCHI rotavapor R-3</td>
			<td>Buchi</td>
			<td>Z568090</td>
			<td>For solvent removal and sample drying</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810 R</td>
			<td>eppendorf</td>
			<td>5811F</td>
			<td>For platinum complex separation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cis-dichlorodiamineplatinum (II) 99%</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>19376-0050</td>
			<td>in vitro tests</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CP70</td>
			<td>Generously doanted by professor John Martignetti from The Mount Sinai Hospital</td>
			<td></td>
			<td>Ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital water bath</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97025-134</td>
			<td>For warming up media for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynamic Light Scattering (DLS)</td>
			<td>Brookhaven Instrument Corporation</td>
			<td></td>
			<td>For nanoparticle size measurments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ES-2</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1978</td>
			<td>ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-L-Lys(Boc)-OH 99.79%</td>
			<td>Chem-Impex INT&#8217;L INC.</td>
			<td>00493</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-L-Phe 4-alkoxybenzyl alcohol resin (0.382 meq/g),</td>
			<td>Chem-Impex INT&#8217;L INC.</td>
			<td>01914</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fmoc-LTyr(tBu)-OH 98%</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>H59730</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HERACELL 150i CO2 incubator</td>
			<td>Thermo Scientific Fisher</td>
			<td></td>
			<td>incubator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High pressure syringe pump</td>
			<td>New Era</td>
			<td>1010-US</td>
			<td>For platinum complex addition in nanoparticle synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hotplate/stirrer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>12365-382</td>
			<td>For sample stirring and heating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAMP-1 Antibody(cojugated with Alexa Fluor 647)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-18821 AF647</td>
			<td>For imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-diisopropylethylamine (DIPEA)</td>
			<td>Oakwood Chemical</td>
			<td>005027</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ninhydrin 99%</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>A10409</td>
			<td>Kaiser test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oleic acid</td>
			<td>Chem-Impex INT&#8217;L INC.</td>
			<td>01421</td>
			<td>For platinum complex synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OV90</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-11732</td>
			<td>Ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-031-CV</td>
			<td>For cell wash</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permount mounting medium</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SP15-100</td>
			<td>For imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>A92500</td>
			<td>Kaiser test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphotungstic acid</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>A248-25</td>
			<td>negative stain for TEM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Piperidine 99%</td>
			<td>BTC</td>
			<td>219260-2.5L</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum AAS standard soultion</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>88086</td>
			<td>1000ug/ml for calibration curve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propargyl bromide 97%</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>L10595</td>
			<td>For alkyne modification of fluoresceine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scientific biological cabinet</td>
			<td>Thermo Scientific Fisher</td>
			<td>1385</td>
			<td>Bio-hood for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Self-Cleaning Vacuum System</td>
			<td>Welch</td>
			<td>2028</td>
			<td>Vacuum pump for rotavapor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver nitrate</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>19768-0250</td>
			<td>Cisplatin activation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SKOV3</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>HTB-77</td>
			<td>Ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S313-1</td>
			<td>For platinum complex synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tin (II) chloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>208256</td>
			<td>Test for Platinum presence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TOV21G</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-11730</td>
			<td>Ovarian cancer cell line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic acid 99% (TFA)</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>L06374</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triisopropylsilane (TIPS)</td>
			<td>Chem-Impex INT&#8217;L INC.</td>
			<td>01966</td>
			<td>SPPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton-X</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787-100ML</td>
			<td>For imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uranine powder 40%</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S25328A</td>
			<td>For alkyne modification of fluoresceine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vivaspin 20 (10000 MWCO)</td>
			<td>Sartorious</td>
			<td>VS2001</td>
			<td>For Nanoparticle wash and condensation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Inverted Microscope</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89404-462</td>
			<td>For cell culture monitoring</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a tripeptide-stabilized nanoemulsion of oleic acid

Wir beschreiben eine Methode um eine Nanoemulsion bestehend aus einem Ölsäure acids-Pt(II) Kern und einer Lysin-Tyrosin-Phenylalanin (KYF) Beschichtung (KYF-Pt-NE) zu produzieren. KYF-Pt-NE Pt(II) bei 10 Gew.-% kapselt, hat einen Durchmesser von 107 ± 27 nm und eine negative Oberflächenladung. KYF-Pt-NE ist stabil im Wasser und im Serum und ist biologisch aktiv. Die Konjugation der Fluorophor, KYF ermöglicht die Synthese von einem fluoreszierenden Nanoemulsion die für biologische Bildgebung geeignet sind. Die Synthese von der Nanoemulsion wird in einer wässrigen Umgebung und die KYF-Pt-NE Formen über Self-assembly eine kurze KYF-Peptid und ein Konjugat Ölsäure acids-platinum(II) durchgeführt. Die Selbstmontage Prozess hängt die Temperatur der Lösung, das molare Verhältnis der Substrate und der Durchflussmenge des Substrats hinaus. Entscheidende Schritte umfassen Beibehaltung der optimalen rühren Rate während der Synthesis, genügend Zeit für die Selbstmontage bei schönem und Pre-Konzentration der Nanoemulsion allmählich in eine zentrifugale Konzentrator.

Vertreter TEM Bild von KYF-Pt-NE unter Verwendung dieses Protokolls ist in Abbildung 2Adargestellt. KYF-Pt-NEs sind sphärische Morphologie, gut verteilt, und einheitlich in der Größe. Der Kerndurchmesser des KYF-Pt-NEs, gemessen direkt von drei TEM Bilder mit einem Minimum von 200 Messungen durchgeführt, ist 107 ± 27 nm. Die hydrodynamische Durchmesser von KYF-Pt-NE, mit dynamischen Licht Spektroskopie (DLS), analysiert erwies sich 240 nm mit einem Polyd...

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A Tripeptide-Stabilized Nanoemulsion of Oleic Acid

Ein Tripeptid-stabilisierten Nanoemulsion Ölsäure

Dieses Protokoll beschreibt eine effiziente Methode um eine Nanoemulsion eine Ölsäure acids-platinum(II) Konjugat mit einer Lysin-Tyrosin-Phenylalanin (KYF) Tripeptid stabilisiert zu synthetisieren. Die Nanoemulsion Formen unter milden synthetischen Bedingungen über Self-assembly von der KYF und das Konjugat.

We describe a method to produce a nanoemulsion composed of an oleic acids-Pt(II) core and a lysine-tyrosine-phenylalanine (KYF) coating (KYF-Pt-NE). The ...

Angesichts der großen Auswahl an kurzen Peptidsequenzen kann diese Methode auf viele andere Nanopartikel-Designs erweitert werden. Peptidmodifikation kann das System für diagnostische Zwecke geeignet machen. Die Verkapselung von Krebsplatin zu Arzneimitteln mit biologisch abbaubarem, niedrig toxischem Stabilisierungsmittel ist für pharmazeutische Anwendungen von großer Bedeutung.Vorläufige In-vivo-Studien mit Eierstockkrebs sind vielversprechend und werden weiter untersucht. Zunächst 50 Milligramm Cisplatin in vier Millilitern reines Wasser bei 60 Grad Celsius aussetzen. Fügen Sie die Silbernitratlösung tropfenweise in die Cisplatin-Lösung und rühren Sie das Gemisch bei 300 bis 400 Umdrehungen pro Minute für zwei Stunden bei 60 Grad Celsius im Dunkeln.Danach verwenden Sie 10 Gewichtsprozent Salzsäure, um zu bestätigen, dass es keine freien Silberionen in Lösung gibt. Wenn sich bei Zugabe von Salzsäure kein zusätzliches Silberchlorid bildet, zentrieren Sie das Gemisch bei 3, 220-facher Schwerkraft für 10 Minuten. Dekantden Sie den Überstand und filtern Sie ihn durch einen 0,2 Mikrometer Spritzenfilter.Dann testen Sie das Filtrat auf Platin, indem Sie zwei bis drei Tropfen auf 10 zwei Chloridkristalle auftragen. Platin ist vorhanden, wenn die Suspension dunkelbraun oder orange wird. Als nächstes fügen Sie 13,3 Milligramm Natriumhydroxid in einem Milliliter Wasser in 94,2 Milligramm Suspension von Ölsäure in drei Milliliter Wasser bei 60 Grad Celsius hinzu.Rühren Sie die Mischung für zwei Stunden bei 60 Grad Celsius. Dann schalten Sie die Hitze aus und rühren Sie bei Raumtemperatur für 16 bis 24 Stunden, um das Rohprodukt als öligen, gelbbraunen Niederschlag zu erhalten. Zentrifugieren Sie das Reaktionsgemisch bei 3, 220-facher Schwerkraft für 10 Minuten, und entfernen Sie den Überstand.Trocknen Sie die Produkte auf einem Rotationsverdampfer bei 25 Grad Celsius. Das Rohprodukt in fünf Milliliter Acetonitril aussetzen, indem das Produkt durch Zentrifugation gewirbelt und zurückgewinnt. Wiederholen Sie diesen Waschvorgang mindestens zwei weitere Male, um das reine Ölsäure-Platin-II-Konjugat als hellgelben Feststoff zu erhalten.Erstens, tränken Sie 5,7 Gramm Fmoc geschützt L-Phenylalanin funktionalisierte Wang Harz in 25 Milliliter Dimethylformamid für eine Stunde. Dann das Harz in 15 Milliliter 20%Piperidin in DMF für fünf Minuten einweichen, während es bei 80 RPM schüttelt, um das Amin zu de-schutzn. Das Harz abtropfen lassen und den De-Schutz 20 Minuten wiederholen.Waschen Sie das Harz anschließend mit DMF und Isopropylalkohol. Sobald der De-Schutz bestätigt wurde, fügen Sie Fmoc geschützte L-Tyrosin TBTU und DIPEA und rühren Sie die Mischung für 16 bis 24 Stunden, um Kopplung durchzuführen. Waschharz mit DMF und Isopropylalkohol.Führen Sie den Kaiser-Test durch und fahren Sie mit dem De-Schutz und der Wäsche fort, wie zuvor beschrieben. Paar und de-protect Fmoc geschütztLysin in der gleichen Weise. Waschen Sie das Harz anschließend mit DMF, IPA, Methanol, Dichlormethan und Diethylether.Legen Sie ein Gramm KYF-lagerisches Harz für die FITC-Modifikation beiseite. Das restliche Harz in 95% Trifluoressigsäure einweichen. 2,5% Triisopropylsilan und 2,5% Wasser für drei Stunden, um das Tripeptid aus dem Harz zu spalten.Das rohe Peptid mit auf 20 Grad Celsius gekühltem Diethylether ausfälten. Waschen Sie den Niederschlag dreimal durch Zentrifugation in 30 bis 40 Milliliter Portionen kalten Diethylethers und trocknen Sie ihn unter Vakuum. Als nächstes mischen Sie das restliche Gramm KYF-Harz mit 120,1 Milligramm 6-Acetohexansäure in 30 Milliliter DMF mit TBTU und DIPEA.Rühren Sie die Mischung für 16 bis 24 Stunden bei Raumtemperatur, um das Azid modifizierte Tripeptid zu erhalten. Kombinieren Sie dann 253 Milligramm dieses Harzes mit 3,78 Milligramm festem Kupfer(I)iodid 71,9 Milligramm Propargylflorisean und 2,24 Milligramm DIPEA. Lassen Sie die Mischung reagieren, während sie für 24 Stunden schüttelt.Dann waschen Sie das FITC modifizierte KYF-Lagerharz gründlich. Den FITC modifizierten KYF aus dem Harz lassen und auf die gleiche Weise wie das unveränderte Tripeptid reinigen. Um mit der Vorbereitung der Nanoemoulsion zu beginnen, lösen Sie 10 Milligramm des Ölsäure-Platin-II-Konjugats in 1,5 Milliliter IPA auf.Zeichnen Sie diese Lösung in eine 5-Milliliter-Spritze, befestigen Sie eine 20-Meter-Nadel und montieren Sie die Spritze auf einer Spritzenpumpe über dem Reaktionsbereich. Stellen Sie die Spritzenpumpe auf 0,1 Milliliter pro Minute ein. Für eine Nanoemulsion mit FITC modifiziertem KYF, lösen Sie ein Milligramm FITC modifizierte KYF und ein Milligramm unverändertes KYF in 20 Milliliter Wasser auf.Für eine Nanoemulsion mit unverändertem KYF lösen Sie stattdessen zwei Milligramm KYF in 20 Milliliter Wasser auf. Erhitzen Sie die FITC-modifizierte oder unveränderte KYF-Lösung auf 37 Grad Celsius. Stellen Sie sicher, dass die KYF-Lösung bei etwa 400 Umdrehungen umrührt und dass die Spritze auf die Lösung ausgerichtet ist.Starten Sie dann die Spritzenpumpe, um mit dem Hinzufügen der Ölsäure Platin zwei Konjugat Tropfen klug zu beginnen. Nachdem das Konjugat hinzugefügt wurde, reduzieren Sie die Rührgeschwindigkeit auf 150 Umdrehungen pro Minute und lassen Sie die Lösung auf Raumtemperatur abkühlen. Fahren Sie 16 bis 24 Stunden lang mit dem Rühren fort.Konzentrieren Sie dann das Nanoemultion in einer 10.000 Daltons Zentrifugalfiltereinheit. Waschen Sie die Nanoemulsion dreimal in einer Zentrifugalfiltereinheit mit vier Milliliter-Portionen Reinstwasser. Und dann speichern Sie es als wässrige Lösung bei vier Grad Celsius.Das Endprodukt ist opaleszierend für KYF-Nanopartikel und fluoreszierend für FITC-modifizierte Nanopartikel. Die Tröpfchen in einer Nanoemulsion, die mit unverändertem KYF hergestellt wurden, waren kugelförmig, gut dispergiert und relativ gleichmäßig. Basierend auf Transmissionselektronenmikroskopiebildern hatten die Kerne einen Durchmesser von etwa 107 Nanometern.Die FITC-modifizierte Nanoemulsion, die hier grün erscheint, könnte in Zellen aus verschiedenen Eierstockkrebszelllinien eindringen. Während der hydrodynamische Durchmesser beider Formulierungen während der viermonatigen Lagerung im Wasser zunahm, blieben die Gesamtabmessungen erhalten. Darüber hinaus wurde nach einem Tag der Inkubation in 20% fetalem Rinderserum keine Opsonisierung der Emulsion beobachtet.Die Freisetzung von Platin aus der Emulsion war am langsamsten bei pH 7,4 mit nur 20,8% des Platins, das nach vier Stunden freigesetzt wurde. Die Platinfreisetzung beschleunigte sich, als der pH-Wert abnahm. Die platinhaltige KYF-beschichtete Nanoemulsion reduzierte die Lebensfähigkeit dieser Eierstockkrebszelllinien in einem viel größeren Maße als carboplatin, das klinisch relevante Analog.Die Nanoemulsion zeigte auch eine vergleichbare oder größere Verringerung der Lebensfähigkeit als Cisplatin in fünf der sechs Zelllinien. Die KYF-beschichtete Nanoemulsion führte durchweg zu einer vergleichbaren oder größeren Verringerung der Lebensfähigkeit als das Oleicsäure-Platin-II-Konjugat allein. Dies ist eine einfache, effiziente Methode zur Verkapselung hydrophober Therapeutika in das Nanopartikelgerüst der Tripeptidbasis.Kurze Peptide sind biologisch abbaubar und haben eine geringe Toxizität, was für die Medizin und Biotechnologie von Bedeutung ist. Führen Sie dieses Verfahren unter der Dunstabzugshaube durch, um eine Exposition gegenüber organischen Lösungsmitteln zu vermeiden. Platinölsäure und KYF Platin-Nanoemulsionen haben Krebsschutzeigenschaften und sollten daher mit besonderer Sorgfalt behandelt werden.Diese Methode ist einfach in Bezug auf niedrige Filabilator Aktivität und Ausrüstung, aber es stützt sich auf die ordnungsgemäße Anwendung der Synthesestrategie, und zugrunde liegende chemische Konzepte. Unsere Methode kann erweitert werden, um andere kleine Wirkstoffmoleküle zu liefern. Der Nanopartikelkern besteht aus Ölsäure und eignet sich daher für die Verkapselung hydrophober Wirkstoffe.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

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Metabolic Glycoengineering of Sialic Acid Using N-acyl-modified Mannosamines

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Metabolische Glykan der Sialinsäure Säure mit N-Acyl-Mannosamines geändert

Sialic acid (Sia) is a highly important constituent of glycoconjugates, such as N- and O-glycans or glycolipids. Due to its position at the non-reducing ...

Human Pluripotent Stem Cell Culture on Polyvinyl Alcohol-Co-Itaconic Acid Hydrogels with Varying Stiffness Under Xeno-Free Conditions

Menschlichen pluripotenten Stammzelle-Kultur auf Polyvinyl Alkohol-Co-Itaconic Säure Hydrogele mit unterschiedlicher Steifigkeit Xeno-freien Bedingungen

The effect of physical cues, such as the stiffness of biomaterials on the proliferation and differentiation of stem cells, has been investigated by ...

Preparation, Purification, and Use of Fatty Acid-containing Liposomes

Vorbereitung, Reinigung und Anwendung von Fettsäure-haltigen Liposomen

Liposomes containing single-chain amphiphiles, particularly fatty acids, exhibit distinct properties compared to those containing diacylphospholipids due ...

Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology

Mikrodissektion primäre renale Gewebe Segmente und Einbindung mit neuartigen Gerüst-freie Konstrukt-Technologie

Kidney transplantation is now a mainstream therapy for end-stage renal disease. However, with approximately 96,000 people on the waiting list and only ...

Hyaluronic-Acid Based Hydrogels for 3-Dimensional Culture of Patient-Derived Glioblastoma Cells

Hyaluronsäure basierte Hydrogele für 3-dimensionale Kultur des Patienten abgeleitet Glioblastom-Zellen

Glioblastoma (GBM) is the most common, yet most lethal, central nervous system cancer. In recent years, many studies have focused on how the extracellular ...