Name: pretargeted radioimmunotherapy based on the inverse electron demand diels-alder reaction
Uploaded: 2019-01-29T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pretargeted Radioimmunotherapy Based on the Inverse Electron Demand Diels-Alder Reaction at JoVE.com

המחברים תודה ד ר יעקב הוגטאון לשיחות מועיל. המחברים רוצה גם להודות NIH שלהם מימון נדיב (R00CA178205 ו- U01CA221046).

כל ויוו הניסויים המתוארים בעבודה זו היו שבוצעה על פי פרוטוקולים שאושרו והוצא להורג תחת ההנחיות האתית של ממוריאל סלואן קטרינג Cancer Center, מרכז רפואי וייל קורנל, מכללת האנטר טיפול בבעלי חיים מוסדיים, שימוש ועדות (IACUC).
1. הכנת huA33-TCO
הערה: הסינתזה של huA33-TCO כבר שדוו?...

<ol>
	<li>Goldenberg, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+Therapy+of+Cancer+with+Radiolabeled+Antibodies.">Targeted Therapy of Cancer with Radiolabeled Antibodies.</a> Journal of Nuclear Medicine. 43 (5), 693-713 (2002).</li><li>Goldenberg, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioimmunotherapy+of+B-cell+Lymphomas+with+Iodine-131-labeled+LL2+Monoclonal+Antibody.">Radioimmunotherapy of B-cell Lymphomas with Iodine-131-labeled LL2 Monoclonal Antibody.</a> Journal of Clinical Oncology. 9 (4), 548-564 (1991).</li><li>Kaminski, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioimmunotherapy+with+131I-Tositumomab+for+Relapsed+or+Refractory+B-cell+non-Hodgkin+Lymphoma:+Updated+Results+and+Long-Term+Follow-Up+of+the+University+of+Michigan+Experience.">Radioimmunotherapy with 131I-Tositumomab for Relapsed or Refractory B-cell non-Hodgkin Lymphoma: Updated Results and Long-Term Follow-Up of the University of Michigan Experience.</a> Blood. 96 (4), 1259-1266 (2000).</li><li>Davies, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioimmunotherapy+for+B-cell+Lymphoma:+Y90+Ibritumomab+Tiuxetan+and+I131+Tositumomab.">Radioimmunotherapy for B-cell Lymphoma: Y90 Ibritumomab Tiuxetan and I131 Tositumomab.</a> Oncogene. 26, 3614 (2007).</li><li>Rajendran, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Radiation+Dose+Estimation+for+Myeloablative+Radioimmunotherapy+for+Relapsed+or+Recurrent+Mantle+Cell+Lymphoma+Using+131I+Tositumomab+to+That+of+Other+Types+of+Non-Hodgkin's+Lymphoma.">Comparison of Radiation Dose Estimation for Myeloablative Radioimmunotherapy for Relapsed or Recurrent Mantle Cell Lymphoma Using 131I Tositumomab to That of Other Types of Non-Hodgkin's Lymphoma.</a> Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals. 19 (6), 738-745 (2004).</li><li>Rajendran, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Dose+131I-Tositumomab+(Anti-CD20)+Radioimmunotherapy+for+Non-Hodgkin's+Lymphoma:+Adjusting+Radiation+Absorbed+Dose+to+Actual+Organ+Volumes.">High-Dose 131I-Tositumomab (Anti-CD20) Radioimmunotherapy for Non-Hodgkin's Lymphoma: Adjusting Radiation Absorbed Dose to Actual Organ Volumes.</a> Journal of Nuclear Medicine. 45 (6), 1059-1064 (2004).</li><li>Larson, S. M., Carrasquillo, J. A., Cheung, N. -. K. V., Press, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioimmunotherapy+of+Human+tumours.">Radioimmunotherapy of Human tumours.</a> Nature Reviews Cancer. 15 (6), 347-360 (2015).</li><li>Kelly, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+Targeting+by+a+Multivalent+Single-Chain+Fv+(scFv)+Anti-Lewis+Y+Antibody+Construct.">Tumor Targeting by a Multivalent Single-Chain Fv (scFv) Anti-Lewis Y Antibody Construct.</a> Cancer Biotherapy &#38; Radiopharmaceuticals. 23 (4), 411-423 (2008).</li><li>Yazaki, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+Targeting+of+Radiometal+Labeled+Anti-CEA+Recombinant+T84.66+Diabody+and+T84.66+Minibody:+Comparison+to+Radioiodinated+Fragments.">Tumor Targeting of Radiometal Labeled Anti-CEA Recombinant T84.66 Diabody and T84.66 Minibody: Comparison to Radioiodinated Fragments.</a> Bioconjugate Chemistry. 12 (2), 220-228 (2001).</li><li>van Duijnhoven, S. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabody+Pretargeting+with+Click+Chemistry+In+Vivo.">Diabody Pretargeting with Click Chemistry In Vivo.</a> Journal of Nuclear Medicine. 56 (9), 1422-1428 (2015).</li><li>Altai, M., Membreno, R., Cook, B., Tolmachev, V., Zeglis, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pretargeted+Imaging+and+Therapy.">Pretargeted Imaging and Therapy.</a> Journal of Nuclear Medicine. 58 (10), 1553-1559 (2017).</li><li>Goldenberg, D. M., Chatal, J. -. F., Barbet, J., Boerman, O., Sharkey, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+Imaging+and+Therapy+with+Bispecific+Antibody+Pretargeting.">Cancer Imaging and Therapy with Bispecific Antibody Pretargeting.</a> Update on cancer therapeutics. 2 (1), 19-31 (2007).</li><li>Rossin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-Vivo+Chemistry+for+Pretargeted+Tumor+Imaging+in+Live+Mice.">In-Vivo Chemistry for Pretargeted Tumor Imaging in Live Mice.</a> Angewandte Chemie International Edition. 49 (19), 3375-3378 (2010).</li><li>Gestin, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-Step+Targeting+of+Xenografted+Colon+Carcinoma+Using+a+Bispecific+Antibody+and+188Re-Labeled+Bivalent+Hapten:+Biodistribution+and+Dosimetry+Studies.">Two-Step Targeting of Xenografted Colon Carcinoma Using a Bispecific Antibody and 188Re-Labeled Bivalent Hapten: Biodistribution and Dosimetry Studies.</a> Journal of Nuclear Medicine. 42 (1), 146-153 (2001).</li><li>Green, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Analysis+of+Bispecific+Antibody+and+Streptavidin-Targeted+Radioimmunotherapy+for+B-cell+Cancers.">Comparative Analysis of Bispecific Antibody and Streptavidin-Targeted Radioimmunotherapy for B-cell Cancers.</a> Cancer Research. 76 (22), 6669 (2016).</li><li>Sharkey, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Streptavidin&#8722;Anti-Carcinoembryonic+Antigen+Antibody,+Radiolabeled+Biotin+Pretargeting+Method+for+Radioimmunotherapy+of+Colorectal+Cancer.+Studies+in+a+Human+Colon+Cancer+Xenograft+Model.">Development of a Streptavidin&#8722;Anti-Carcinoembryonic Antigen Antibody, Radiolabeled Biotin Pretargeting Method for Radioimmunotherapy of Colorectal Cancer. Studies in a Human Colon Cancer Xenograft Model.</a> Bioconjugate Chemistry. 8 (4), 595-604 (1997).</li><li>Knox, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+II+Trial+of+Yttrium-90-DOTA-Biotin+Pretargeted+by+NR-LU-10+Antibody/Streptavidin+in+Patients+with+Metastatic+Colon+Cancer.">Phase II Trial of Yttrium-90-DOTA-Biotin Pretargeted by NR-LU-10 Antibody/Streptavidin in Patients with Metastatic Colon Cancer.</a> Clinical Cancer Research. 6 (2), 406 (2000).</li><li>Schubert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Tumor+Pretargeting+System+Based+on+Complementary+L-Configured+Oligonucleotides.">Novel Tumor Pretargeting System Based on Complementary L-Configured Oligonucleotides.</a> Bioconjugate Chemistry. 28 (4), 1176-1188 (2017).</li><li>Forero, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phase+1+Trial+of+a+Novel+Anti-CD20+Fusion+Protein+in+Pretargeted+Radioimmunotherapy+for+B-cell+Non-Hodgkin+Lymphoma.">Phase 1 Trial of a Novel Anti-CD20 Fusion Protein in Pretargeted Radioimmunotherapy for B-cell Non-Hodgkin Lymphoma.</a> Blood. 104 (1), 227 (2004).</li><li>Kalofonos, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+Tumor+in+Patients+with+Indium-111-Labeled+Biotin+and+Streptavidin-Conjugated+Antibodies:+Preliminary+Communication.">Imaging of Tumor in Patients with Indium-111-Labeled Biotin and Streptavidin-Conjugated Antibodies: Preliminary Communication.</a> Journal of Nuclear Medicine. 31 (11), 1791-1796 (1990).</li><li>Zeglis, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Pretargeted+PET+Imaging+Strategy+Based+on+Bioorthogonal+Diels-Alder+Click+Chemistry.">A Pretargeted PET Imaging Strategy Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry.</a> Journal of Nuclear Medicine. 54 (8), 1389-1396 (2013).</li><li>Meyer, J. -. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=18F-Based+Pretargeted+PET+Imaging+Based+on+Bioorthogonal+Diels-Alder+Click+Chemistry.">18F-Based Pretargeted PET Imaging Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry.</a> Bioconjugate Chemistry. 27 (2), 298-301 (2016).</li><li>Rossin, R., L&#228;ppchen, T., vanden Bosch, S. M., Laforest, R., Robillard, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diels-Alder+Reaction+for+Tumor+Pretargeting:+In+Vivo+Chemistry+Can+Boost+Tumor+Radiation+Dose+Compared+with+Directly+Labeled+Antibody.">Diels-Alder Reaction for Tumor Pretargeting: In Vivo Chemistry Can Boost Tumor Radiation Dose Compared with Directly Labeled Antibody.</a> Journal of Nuclear Medicine. 54 (11), 1989-1995 (2013).</li><li>Zeglis, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+a+Pretargeted+Strategy+for+the+PET+Imaging+of+Colorectal+Carcinoma+via+the+Modulation+of+Radioligand+Pharmacokinetics.">Optimization of a Pretargeted Strategy for the PET Imaging of Colorectal Carcinoma via the Modulation of Radioligand Pharmacokinetics.</a> Molecular Pharmaceutics. 12 (10), 3575-3587 (2015).</li><li>Agard, N. J., Prescher, J. A., Bertozzi, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Strain-Promoted+[3+++2]+Azide&#8722;Alkyne+Cycloaddition+for+Covalent+Modification+of+Biomolecules+in+Living+Systems.">A Strain-Promoted [3 + 2] Azide&#8722;Alkyne Cycloaddition for Covalent Modification of Biomolecules in Living Systems.</a> Journal of the American Chemical Society. 126 (46), 15046-15047 (2004).</li><li>Blackman, M. L., Royzen, M., Fox, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tetrazine+Ligation:+Fast+Bioconjugation+Based+on+Inverse-Electron-Demand+Diels&#8722;Alder+Reactivity.">Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels&#8722;Alder Reactivity.</a> Journal of the American Chemical Society. 130 (41), 13518-13519 (2008).</li><li>Houghton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+In+Vivo+Efficacy+of+Pretargeted+Radioimmunotherapy+Utilizing+Inverse+Electron+Demand+Diels-Alder+Click+Chemistry.">Establishment of the In Vivo Efficacy of Pretargeted Radioimmunotherapy Utilizing Inverse Electron Demand Diels-Alder Click Chemistry.</a> Molecular Cancer Therapeutics. 16 (1), 124-133 (2017).</li><li>Membreno, R., Cook, B. E., Fung, K., Lewis, J. S., Zeglis, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Click-Mediated+Pretargeted+Radioimmunotherapy+of+Colorectal+Carcinoma.">Click-Mediated Pretargeted Radioimmunotherapy of Colorectal Carcinoma.</a> Molecular Pharmaceutics. 15 (4), 1729-1734 (2018).</li><li>Reiner, T., Lewis, J. S., Zeglis, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harnessing+the+Bioorthogonal+Inverse+Electron+Demand+Diels-Alder+Cycloaddition+for+Pretargeted+PET+Imaging.">Harnessing the Bioorthogonal Inverse Electron Demand Diels-Alder Cycloaddition for Pretargeted PET Imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e52335 (2015).</li><li>Cook, B. E., Membreno, R., Zeglis, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendrimer+Scaffold+for+the+Amplification+of+In+Vivo+Pretargeting+Ligations.">Dendrimer Scaffold for the Amplification of In Vivo Pretargeting Ligations.</a> Bioconjugate Chemistry. 29 (8), 2734-2740 (2018).</li><li>Cheal, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Theranostic+Pretargeted+Radioimmunotherapy+of+Colorectal+Cancer+Xenografts+in+Mice+Using+Picomolar+Affinity+Y-86-+or+Lu-177-DOTA-Bn+Binding+scFv+C825/GPA33+IgG+Bispecific+Immunoconjugates.">Theranostic Pretargeted Radioimmunotherapy of Colorectal Cancer Xenografts in Mice Using Picomolar Affinity Y-86- or Lu-177-DOTA-Bn Binding scFv C825/GPA33 IgG Bispecific Immunoconjugates.</a> European journal of nuclear medicine and molecular imaging. 43 (5), 925-937 (2016).</li><li>Meyer, J. -. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioorthogonal+Masking+of+Circulating+Antibody-TCO+Groups+Using+Tetrazine-Functionalized+Dextran+Polymers.">Bioorthogonal Masking of Circulating Antibody-TCO Groups Using Tetrazine-Functionalized Dextran Polymers.</a> Bioconjugate Chemistry. 29 (2), 538-545 (2018).</li><li>Houghton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pretargeted+Immuno-PET+of+Pancreatic+Cancer:+Overcoming+Circulating+Antigen+and+Internalized+Antibody+to+Reduce+Radiation+Doses.">Pretargeted Immuno-PET of Pancreatic Cancer: Overcoming Circulating Antigen and Internalized Antibody to Reduce Radiation Doses.</a> Journal of Nuclear Medicine. 57 (3), 453-459 (2016).</li><li>Kein&#228;nen, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pretargeting+of+Internalizing+Trastuzumab+and+Cetuximab+with+a+(18)F-Tetrazine+Tracer+in+Xenograft+Models.">Pretargeting of Internalizing Trastuzumab and Cetuximab with a (18)F-Tetrazine Tracer in Xenograft Models.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging Research. 7, 95 (2017).</li><li>Billaud, E. M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-flow+Photosynthesis+of+New+Dienophiles+for+Inverse-Electron-Demand+Diels-Alder+Reactions.+Potential+Applications+for+Pretargeted+In+Vivo+PET+Imaging.">Micro-flow Photosynthesis of New Dienophiles for Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactions. Potential Applications for Pretargeted In Vivo PET Imaging.</a> Chemical Science. 8 (2), 1251-1258 (2017).</li></ol>

אחד היתרונות של גישה זו כדי ויוו pretargeting — במיוחד בקשר אסטרטגיות שהתבססו על נוגדנים bispecific, radiolabeled haptens — הוא המודולריות שלו: טרנס- cyclooctene moieties ניתן לצרף את כל נוגדן, tetrazine radioligands יכול להיות radiolabeled עם מגוון יוצא דופן של radionuclides בלי ופוגע ביכולתם להגיב עם שותפיהם לחץ. עדיין העיבוד של ג...

Radioimmunotherapy (המדהימה) – השימוש של נוגדנים עבור מסירת radionuclides טיפולית גידולים — כבר זמן רב בגישה מפתה לטיפול בסרטן1,2. אכן, הבטחה זו יש כבר שרווחים על-ידי האישור של מינהל התרופות והמזון ארה של שני radioimmunoconjugates לטיפול לימפומה של מחלת הודג'קין: 90Y-ibritumomab tiuxetan, 131-tositumomab3 , 4. עדיין אפילו החל מראשית ימיה, הסיכויים קליני של אירית יש כבר הקשו על ידי סיבוך קריטי: המחירים מינון קרינה גבוהה רקמות בריאה5,6. באופן כללי, radioimmunoconjugates עבור המדהימה מסומנות עם חיים ארוכים radionuclides (למשל, 131אני [t½ = 8.0 ימים] 90Y [t½ = 2.7 ימים]) עם חצי-החיים הגשמיים זה משתלב היטב עם ארוכה פרמוקוקינטיים מחצית החיים של immunoglobulins. זה חיוני, שהיא מבטיחה שאת הרדיואקטיביות מספיק נשאר ברגע הנוגדן הגיעה biodistribution האופטימלי שלה לאחר מספר ימים של מחזור הדם. עם זאת, שילוב זה של מגורים רב פעמים בדם וב פיזי זמן מחצית החיים תוצאות באופן בלתי נמנע ההקרנות של רקמות בריאה, ובכך להפחית את יחסי טיפולית והגבלת את היעילות של טיפול7. מספר אסטרטגיות נחקרו כדי לעקוף בעיה זו, כולל השימוש של נוגדן שנחתכו קטעים כגון Fab, Fab', F(ab')2, minibodies ו- nanobodies8,9,10. אחד של המבטיח ומרתק, עדיין גישות מורכבות ללא ספק, אלטרנטיבית היא ויוו pretargeting11.
In vivo pretargeting היא גישה הדמיה גרעינית וטיפול המבקשת לרתום את הזיקה מעולה ואת סלקטיביות של נוגדנים תוך עוקפת את החסרונות פרמוקוקינטיים11,12,13. למטרה זו, הוא הנוגדן radiolabeled בשימוש מסורתי radioimmunotherapy לשעשוע שני רכיבים: radioligand מולקולה קטנה, של immunoconjugate ניתן לאגד הן אנטיגן הגידול ולא את radioligand הנ ל. Immunoconjugate מוזרק ראשון, בהתחשב 'התחלה', לעיתים מספר ימים, במהלכם הוא מצטבר ברקמות היעד, מנקה מהדם. לאחר מכן, radioligand מולקולה קטנה מנוהל, משלב immunoconjugate בבית הגידול או מנקה במהירות מהגוף. בעיקרו של דבר, אין ויוו pretargeting מסתמך על ביצוע radiochemistry בתוך הגוף עצמו. על-ידי הפחתת זרימת הדם הרדיואקטיביות, גישה זו בו זמנית מפחית את מינון הקרינה לרקמות בריא ומקל את השימוש radionuclides (למשל, 68Ga, t½ = 68 דקות211; כ, t½ = 7.2 h) עם מחצית החיים נחשבים בדרך כלל בקנה אחד עם נוגדן מבוססי וקטורים.
החל בסוף שנות השמונים, קומץ של גישות שונות ל ויוו pretargeting פותחו, כולל אסטרטגיות בהתבסס על bispecific נוגדנים, האינטראקציה בין streptavidin לבין ביוטין, והכלאה משלימים oligonucleotides14,15,16,17,18. עוד אחד מוחזקת בחזרה בדרגות מאת סיבוכים, immunogenicity חזק ביותר של נוגדנים streptavidin-לאחרונה19,20. במהלך חמש השנים האחרונות, הקבוצה שלנו ואחרים פיתחו גישה ויוו pretargeting מבוסס על ראפיד, bioorthogonal אלקטרון הופכי דרישה תגובת דילס-אלדר מצדו בין טרנס- cyclooctene (TCO) tetrazine (ט ז) 21,22,23,24. המצליחה ביותר של אסטרטגיות אלו המועסקים של נוגדן TCO-לאחרונה, radioligand ט ז-מיסב, כמו TCO הוא בדרך כלל יותר יציב ויוו שלה צ' שותף (איור 1)25,26. כמו אחרים מתודולוגיות pretargeting, immunoconjugate mAb-TCO מנוהל קודם, זמן לנקות מהמחזור ולצבור ברקמת הגידול. לאחר מכן, radioligand ט ז מולקולה קטנה מוזרק, לאחר מכן הוא לוחץ עם immunoconjugate בתוך רקמת המטרה או מנקה במהירות מהגוף. זה ויוו pretargeting אסטרטגיה הוכיחה יעילים עבור חיית המחמד, SPECT הדמיה עם מספר נוגדנים שונים/אנטיגן מערכות באופן עקבי בהפקת תמונות עם ניגודיות גבוהה, ומאפשר שימוש radionuclides קצרת ימים כגון 18 F (t½ = 109 דקות) ו- 64Cu (t1/2 = 12.7 h)22,21,24. לאחרונה, היעילות של מבוסס-לחץ על radioimmunotherapy pretargeted (PRIT) הוכח במודלים מאתר של אדנוקרצינומה ductal הלבלב (PDAC) ו קרצינומה של המעי הגס27,28. למטרה זו, רדיונוקלידים טיפולית 177Lu (βמקסימום = 498 קוו, t1/2 = יום 6.7) הועסק בשיתוף עם שני נוגדנים שונים: 5B1, אשר מטרות אנטיגן פחמימות 19.9 (CA19.9) ubiquitously לידי ביטוי PDAC , huA33, אשר מטרות A33, ביטוי גליקופרוטאין transmembrane > 95% ממקרי סרטן המעי הגס. בשני המקרים, גישה זו ל 177Lu-PRIT הניבו פעילות גבוהה ריכוזים ברקמת הגידול יצרו אפקט למינון הטיפולי, בו זמנית מופחת ריכוז פעילות ברקמות בריא לעומת המסורתי ישירות עם התווית radioimmunoconjugates.
במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקולים עבור PRIT באמצעות radioligand tetrazine Lu דוטה-עם התווית של 177(Lu-DOTA-יתד [177Lu]7- ט ז), גרסה שונה-TCO של הנוגדן huA33 (huA33-TCO). ליתר דיוק, אנו מתארים את בניית huA33-TCO (איור 2), סינתזה, Lu-DOTA-יתד radiolabeling של [177Lu]7- צ' (איור 3 ו- 4 באיור), ואת הביצועים של vivo ב biodistribution, טיפול האורך מחקרים במודלים מאתר של סרטן המעי הגס. יתר על כן, נציג תוצאות, דיון, אנחנו להציג ערכת נתונים לדוגמה, כתובת אסטרטגיות אפשריות עבור אופטימיזציה של גישה זו, ולשקול את האסטרטגיה הזאת בהקשר רחב יותר של ויוו pretargeting ו- PRIT. לבסוף, חשוב לשים לב כי בעוד בחרנו להתמקד pretargeting באמצעות huA33-TCO [177Lu] Lu-DOTA-יתד7- Tz ב פרוטוקול זה, אסטרטגיה זו היא מאוד מודולרית, ניתן להתאים כדי להתאים מגוון רחב של נוגדנים, radionuclides.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>(E)-Cyclooct-4-enyl 2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl carbonate (TCO-NHS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>764523</td>
			<td>Store at -80 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,5-Dioxo-1-pyrrolidinyl 5-[4-(1,2,4,5-tetrazin-3-yl)benzylamino]-5-oxopentanoate (Tz-NHS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>764701</td>
			<td>Store at -80 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile (MeCN)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A998-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium Acetate (NH4OAc)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A639-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Boc-PEG7-amine (O-(2-Aminoethyl)-O&#8242;-[2-(Boc-amino)ethyl]hexaethylene glycol)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>70023</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane (DCM)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D143-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO), anhydrous</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D12345</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMD Millipore Amicon Ultra-2 Centrifugal Filter Unit</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>UFC205024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GE Healthcare Disposable PD-10 Desalting Columns</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>45-000-148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethylformamide (DMF), anhydrous</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC610941000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>70-011-044</td>
			<td>10x Concentrated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>p-SCN-Bn-DOTA</td>
			<td>Macrocyclics</td>
			<td>B-205</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triethylamine (TEA)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC157911000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trifluoroacetic Acid (TFA)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A116-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tumor measuring device</td>
			<td>Peira TM900</td>
			<td>Peira TM900</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pretargeted radioimmunotherapy based on the inverse electron demand diels-alder reaction

בעוד radioimmunotherapy (המדהימה) היא גישה מבטיחה לטיפול בסרטן, זמן מחצית החיים ארוכה פרמוקוקינטיים של נוגדנים radiolabeled יכול לגרום במנות קרינה גבוהה לרקמות בריאות. אולי לא מפתיע, מספר אסטרטגיות שונות פותחו כדי לעקוף מגבלה זו מטרידה. אחד המבטיח גישות אלה הוא pretargeted radioimmunotherapy (PRIT). PRIT מותנה בהשלמת decoupling של רדיונוקלידים מ אימונוגלובולינים מזריק אותם בנפרד, ואז ומאפשר להם לשלב ויוו -רקמת המטרה. גישה זו רתמות המאפיינים פילוח גידול יוצא דופן של נוגדנים תוך עוקפת את החסרונות פרמוקוקינטיים שלהם, ובכך הפחתת קרינה במינון הלא-יעד רקמות והקלה על השימוש radionuclides עם מחצית החיים כי הם נחשב שימוש קצר מדי עבור radioimmunoconjugates המסורתי. במהלך חמש השנים האחרונות, המעבדה שלנו ואחרים פיתחו גישה ויוו pretargeting התגובה תגובת דילס-אלדר (IEDDA) דרישה אלקטרון הופכי בין טרנס- cyclooctene (TCO) tetrazine (ט ז). אסטרטגיה זו הוחלה בהצלחה pretargeted טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים (PET), פליטת פוטון בודד טומוגרפיה ממוחשבת (SPECT) הדמיה עם מגוון רחב של מערכות נוגדן-אנטיגן. עם זוג פרסומים אחרונים הראו את היעילות של מבוססי IEDDA PRIT מאתר דגמים של אדנוקרצינומה ductal הלבלב, סרטן המעי הגס. ב פרוטוקול זה, אנו מתארים פרוטוקולים עבור PRIT באמצעות radioligand tetrazine Lu דוטה-עם התווית של 177(Lu-DOTA-יתד [177Lu]7- ט ז), גרסה שונה-TCO של סרטן המעי הגס מיקוד נוגדן huA33 (huA33-TCO). ליתר דיוק, נתאר את בניית huA33-TCO, סינתזה, Lu-DOTA-יתד radiolabeling של [177Lu]7- ט ז, ואת הביצועים של ויוו biodistribution ומחקרים טיפול האורך במודלים מאתר של סרטן המעי הגס.

הבניין של TCO כדי huA33 מותנה בהשלמת של צימוד בין עלות הבעלות הכוללת אמין-תגובתי-בקופת חולים משקעי ליזין על פני השטח של אימונוגלובולינים. שיטה זו לשחזור ועמיד מאוד, אמינה התשואות של מעלות-של-תיוג של 2-4 TCO/mAb. במקרה זה, הועסק ספקטרומטר מסה MALDI-תוף כדי לאשר מידה מסוימת של תיוג של על...

Watch this Scientific Journal Video about Pretargeted Radioimmunotherapy Based on the Inverse Electron Demand Diels-Alder Reaction at JoVE.com

Pretargeted Radioimmunotherapy Based on the Inverse Electron Demand Diels-Alder Reaction

פרוטוקול זה מתאר את סינתזה של אפיון טרנס- cyclooctene (TCO)-שונה נוגדן, radioligand tetrazine התווית על-ידי Lu (ט ז) 177עבור pretargeted radioimmunotherapy (PRIT). בנוסף, זה מפרט את השימוש אלה בונה שני עבור ויוו biodistribution ומחקרים טיפול האורך במודל מאתר של סרטן המעי הגס.

Radioimmunotherapy pretargeted התגובה תגובת דילס-אלדר דרישה אלקטרון הופכי

While radioimmunotherapy (RIT) is a promising approach for the treatment of cancer, the long pharmacokinetic half-life of radiolabeled antibodies can ...

פרוטוקול זה מתאר כיצד ליישם מתודולוגיה pretargeted על הקרנות ממוקדות של קסנוגרפים סרטן במודל העכבר. רדיוימונותרפיה או PRIT מפולחים מאפשרים לנו להזריק את הנוגדן ואת הרדיוליגנד בנפרד, ולתת לשניים לשלב ב-vivo באמצעות כימיית קליקים. בעוד אנו מציגים PRIT באמצעות מודל קסנוגרף של סרטן המעי הגס, טכניקה זו יכולה להיות מיושמת על כל אנטיגן משטח מיקוד נוגדן.חשוב לבחור אנטיגן שאינו מפנים במהירות או לשפוך בהרחבה כמו אלה יכולים להפחית את היעילות של הגישה. כדי לסנתז huA33-TCO הראשון להכין פתרון 125 microliter של 40 מיליגרם למיליליטר TCO-NHS ב מתילפורממיד יבש בצינור מיקרוצנטריפוגה 1.7 מיליליטר. פתרון זה יכול להיות aliquoted וקפוא ב 80 מעלות צלזיוס לשימוש בניסויים עתידיים.בצינור מיקרוצנטריפוגה נפרד 1.7 מיליליטר להכין פתרון חמישה מיליגרם למיליליטר של huA33 במיליליטר אחד של פוספט אגיר מלוחים. באמצעות aliquots קטן של 0.1 נתרן פחמתי טוחן, להתאים את ה- pH של פתרון הנוגדן בין 8.8 ו 9.0. השתמש בנייר pH או במד pH עם מיקרואלקטרוניקרוד כדי לפקח על ה- pH, ולתרגל טיפול שה- pH אינו עולה על 9.0.הוסף נפח המתאים ל-40 שקילות טוחנות של TCO-NHS לפתרון הנוגדנים. כדי למנוע משקעים של TCO-NHS הידרופובי, להוסיף אותו לאט עם תסיסה. אפשר את התגובה דגירה ב 25 מעלות צלזיוס על מערבל תרמי במשך שעה אחת עם תסיסה קלה.לפני טיהור ה- huA33-TCO immunoconjugate באמצעות עמודת התפלת אי-הכללה חד-פעמית ארוזה מראש, הצייד את עמודת אי-הכללת הגודל כמתואר על-ידי הספק כדי להסיר חומרים משמרים הקיימים בעמודה במהלך האחסון, אשר בדרך כלל כרוך בשטיפת העמודה חמש פעמים עם נפח של PBS התואם את נפח העמודה. מוסיפים את תערובת התגובה לעמודת אי-הכללת הגודל, ומוסיף את עוצמת הקול של תערובת התגובה. לאחר שתערובת התגובה נכנסה לעמודה, הוסף כמות מתאימה של PBS כדי להביא את הנפח הכולל של הפתרון שנוסף לעמודה עד 2.5 מיליליטר.לאסוף את המוצר באמצעות שני מיליליטר של PBS כמו eluent. למדוד את הריכוז של huA33-TCO באמצעות UV מול ספקטרופוטומטר ניטור אורך הגל ב 280 ננומטר. אם פתרון עם ריכוז גבוה יותר של immunoconjugate הוא הרצוי לרכז את פתרון huA33-TCO באמצעות יחידת סינון צנטריפוגלי עם 50, 000 ניתוק משקל מולקולרי בעקבות הוראות היצרן.אחסן את ה- huA33-TCO החיסוני שהושלם ב- 4 מעלות צלזיוס בחושך. אם הוא ישמש יותר מארבעה ימים בעתיד לאחסן אותו ב 80 מעלות צלזיוס בחושך. בצינור צנטריפוגה 1.7 מיליליטר להוסיף 200 microliters של 0.25 מאגר אמוניום אצטט טוחנת מותאם pH 5.5.הוסף את הכמות הרצויה של לותיום-177 כלוריד לפתרון המאגר. הסכום שנוסף יהיה תלוי במספר הנבדקים בניסוי, ובמנות הרדיואקטיביות המנוהלות. הוסף Tetrazine PEG7-DOTA ב- DMSO לתערובת הרדיואקטיבית.הסכום שנוסף תלוי במספר הנבדקים. אפשר לפתרון דגירה ב 37 מעלות צלזיוס במשך 20 דקות. ודא שהלייבלינג הושלם באמצעות כרומטוגרפיה של שכבה דקה-רדיו-מיידית עם pH EDTA 5.5 מילימולארי 5.5 כשלב הנייד.התווית Lutetium-177-DOTA-PEG7-Tetrazine תישאר בבסיס בעוד חינם Lutetium-177 יהיה מתואם על ידי EDTA ולנסוע עם חזית ממס. זה קריטי כי המיקום של גידולים תת עוריים אינו מפריע לטכניקת האיפוק שלך. אני ממליץ לשים אותם בצד האגף כי הוא מול היד המרסנת שלך.מאז שאני מרסן ביד שמאל בחרתי למקם את הגידולים באגף ימין. מיין עכברי עירום אתמיים נקבה עם קסנוגרף סרטן המעי הגס, כך נפח הגידול הממוצע בכל קבוצה שווה בערך. לשם כך, פרט את מספרי הזיהוי של בעלי חיים, תבנית חץ האוזן ונפח הגידול בשלוש עמודות נפרדות של תוכנית גיליון אלקטרוני.מיין את הנתונים מנפח הגידול הקטן ביותר לנפח הגידול הגדול ביותר. בעמודה רביעית להקצות לכל בעל חיים מספר כלוב. תרכוב על אופניים בכלובים בתבנית דמוית נחש עד שכל החיות יוקצו לכלוב.ברגע שהכלובים מוקצים למיין את הנתונים לפי מספר כלוב. כדי להזריק את המינונים לצייר immunoconjugate של 150 microliters של פתרון huA33-TCO במזרקים מטופלים מראש עם אלבומין סרום 1%bovine ב PBS, ולאחסן מזרקים אלה על קרח. כדי להזריק את radioligand, הראשון לצייר מינונים 150 microliters של 0.9%תמיסת מלח סטרילית המכילה 1.1 שקילות טוחנת של radiolabeled Tetrazine-PEG7-DOTA יחסית לכמות huA33-TCO מנוהל.השתמש calipers כדי למדוד את הצד הארוך ביותר של הגידול מלבני, כמו גם את הרוחב אשר ניצב לאורך. לשקול כל עכבר על איזון כדי לעקוב אחר עלייה במשקל או ירידה במשקל לאורך זמן. לבסוף, לחשב את אמצעי האחסון באמצעות הנוסחה עבור נפח של אליפסואיד בהנחה כי הגובה שווה בערך לרוחב.מוצג כאן הוא biodistribution של pretargeting in vivo עם huA33-TCO ו Lutetium-177-DOTA-PEG7-Tetrazine בעכברים עירום אתמי הנושאים גידולים תת עוריים SW1222 קנים המעי התת עורי האנושי. כל מרווחי ההזרקה מייצרים ריכוזי פעילות גבוהים ברקמת הגידול, כמו גם ריכוזי פעילות נמוכים באיברים בריאים. מרווח ההזרקה של 24 שעות מאפשר את ספיגת הגידול הגבוהה ביותר בהזרקה של 120 שעות לאחר ההזרקה.בהתבסס על ממצאים אלה נבחר מרווח זמן של 24 שעות למחקר הטיפול האורך הבא. מוצג כאן מחקר טיפול אורך של חמש קבוצות של עכברים הנושאים גידולים SW1222 תת עורית המתוארים בנפח הגידול הממוצע כפונקציה של זמן, ונפח הגידול מנורמל לנפח הראשוני כפונקציה של זמן. יש הבדל בולט בתגובת הקבוצות הניסיוניות בהשוואה לקבוצות הבקרה.בעוד הגידולים בעכברים שקיבלו רק מרכיב אחד באסטרטגיית הרדיוימונותרפיה הטרום-מותכת המשיכו לגדול ללא בדיקה, הגידולים של העכברים שקיבלו את משטר הרדיוימונותרפיה המפותל המלא הפסיקו לגדול ובסופו של דבר התכווצו. חשוב לציין, לא נצפו תופעות לוואי רעילות, וכל בעלי החיים שמרו על משקל בטווח של 20% מהמאסה הראשונית שלהם. באופן מדהים, לעכברים של קבוצות הניסוי היה רקורד מושלם של הישרדות בסוף החקירה.בעת ניסיון הליך זה יש חשיבות עליונה כדי למדוד במדויק ובשכפול את הגידולים. בעת עבודה עם רדיואקטיביות, התייעץ עם קצין בטיחות הקרינה של המוסד שלך כדי לפתח פרוטוקולים ומתקנים בטוחים. לאחר בקרת בטיחות נאותה במקום יגביל את החשיפה שלך ולהימנע זיהום.Pretargeting מאפשר מינון קרינה נמוך יותר לאברי רקע מאשר רדיואימונופתרפיה מסורתית. על ידי שיתוף פרוטוקול זה אנו מקווים שאחרים יוכלו לבדוק את המודלים והרעיונות שלהם שיובילו להתקדמות חדשה ומרגשת לטיפול בחולה.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Microwave-assisted Intramolecular Dehydrogenative Diels-Alder Reactions for the Synthesis of Functionalized Naphthalenes/Solvatochromic Dyes

מיקרוגל בסיוע תגובות Dehydrogenative intramolecular דילס-Alder לסינתזה של Naphthalenes הפונקציונלי / צבעי Solvatochromic

Functionalized naphthalenes have applications in a variety of research fields ranging from the synthesis of natural or biologically active molecules to ...

Microfluidic On-chip Capture-cycloaddition Reaction to Reversibly Immobilize Small Molecules or Multi-component Structures for Biosensor Applications

Microfluidic תגובת Capture-חיי בן אשר על השבב כדי לשתק הפיך מולקולות קטנות או מבני Multi-רכיב עבור יישומי Biosensor

Methods  for rapid surface immobilization of bioactive small molecules with control over  orientation and immobilization density are highly desirable for ...

Determining the Ice-binding Planes of Antifreeze Proteins by Fluorescence-based Ice Plane Affinity

קביעת המישורים המחייבים קרח של חלבונים נגד קיפאון על ידי זיקה למטוס קרח מבוסס פלואורסצנטיות

Antifreeze proteins (AFPs) are expressed in a variety of cold-hardy organisms to prevent or slow internal ice growth. AFPs bind to specific planes of ice ...

Amide Coupling Reaction for the Synthesis of Bispyridine-based Ligands and Their Complexation to Platinum as Dinuclear Anticancer Agents

תגובה אמידה צימוד לסינתזה של ligands מבוסס Bispyridine וcomplexation לפלטינה כסוכנים נגד סרטן Dinuclear

Amide coupling reactions can be used to synthesize bispyridine-based ligands for use as bridging linkers in multinuclear platinum anticancer drugs. ...

An Inverse Analysis Approach to the Characterization of Chemical Transport in Paints

גישה הפוכה ניתוח לאפיון כימי תחבורה בצבעים

The ability to directly characterize chemical transport and interactions that occur within a material (i.e., subsurface dynamics) is a vital component in ...

1,3,5-Triphenylbenzene and Corannulene as Electron Receptors for Lithium Solvated Electron Solutions

1,3,5-Triphenylbenzene ו Corannulene כמו אלקטרונים קולטנים ליתיום Solvated פתרונות אלקטרונים

The authors report on conductivity studies carried out on lithium solvated electron solutions (LiSES) prepared using two types of polyaromatic ...

The Preparation and Properties of Thermo-reversibly Cross-linked Rubber Via Diels-Alder Chemistry

הכנת המאפיינים של Thermo-הפיך צולב הגומי Via דילס-אלדר לכימיה

A method for using Diels Alder thermo-reversible chemistry as cross-linking tool for rubber products is demonstrated. In this work, a commercial ...

A Rapid Synthesis Method for Au, Pd, and Pt Aerogels Via Direct Solution-Based Reduction

שיטה מהירה סינתזה Au, Pd ו- Pt Aerogels באמצעות הפחתת המבוסס על פתרון ישיר

Here, a method to synthesize gold, palladium, and platinum aerogels via a rapid, direct solution-based reduction is presented. The combination of various ...

Quantitative Atomic-Site Analysis of Functional Dopants/Point Defects in Crystalline Materials by Electron-Channeling-Enhanced Microanalysis

ניתוח כמותי של אתר אטומי של דופנטים פונקציונליים/פגמים נקודתיים בחומרים גבישיים על ידי מיקרואנליזה משופרת של תקשור אלקטרונים

A novel elemental and chemical analysis scheme based on electron-channeling phenomena in crystalline materials is introduced, where the incident ...

Picometer-Precision Atomic Position Tracking through Electron Microscopy

מעקב אחר מיקום אטומי מדויק באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים

The modern aberration-corrected scanning transmission electron microscopes (AC-STEM) have successfully achieved direct visualization of atomic columns ...