Name: a simple migration/invasion workflow using an automated live-cell imager
Uploaded: 2019-02-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Simple Migration/Invasion Workflow Using an Automated Live-cell Imager at JoVE.com

Vi vil gerne anerkende vores finansielle støtte af Bloomfield gruppe Foundation gennem Hunter Medical Research Institute (HMRI 13-02). X.Z understøttes af en APA stipendium gennem University of Newcastle og HCRA biomarkører flagskib ph.d.-stipendium.

Bemærk: To cellelinjer bør håndteres separat. Følgende procedurer bør være anvendes for en enkelt celle hvis det ikke er angivet.
1. Optimer celle tæthed inden såret
<ol><li>Kultur vedhængende celler i T75 cm2 vævskultur flasker til ca. 80% sammenløbet i phenol-rød gratis Dulbecco ændret Eagle Medium (DMEM) suppleret med 10% føtal bovint serum (FBS), 200 mM L-glutamin og 2 µg/mL insulin ved 37 ° C med 5% CO2 ( standard inkubation betinge...

<ol>
	<li>Graham, C. H., Lala, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+placental+invasion+of+the+uterus+and+their+control.">Mechanisms of placental invasion of the uterus and their control.</a> Biochemistry and Cell Biology. 70, 867-874 (1992).</li><li>Affolter, M., Zeller, R., Caussinus, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+remodelling+through+branching+morphogenesis.">Tissue remodelling through branching morphogenesis.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 10, 831-842 (2009).</li><li>Brugues, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forces+driving+epithelial+wound+healing.">Forces driving epithelial wound healing.</a> Nature Physics. 10, 683-690 (2014).</li><li>Weigelt, B., Peterse, J. L., van't Veer, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast+cancer+metastasis:+markers+and+models.">Breast cancer metastasis: markers and models.</a> Nature Reviews Cancer. 5, 591-602 (2005).</li><li>Kalluri, R., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+basics+of+epithelial-mesenchymal+transition.">The basics of epithelial-mesenchymal transition.</a> Journal of Clinical Investigation. 119, 1420-1428 (2009).</li><li>Scully, O. J., Bay, B. H., Yip, G., Yu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast+cancer+metastasis.">Breast cancer metastasis.</a> Cancer Genomics Proteomics. 9, 311-320 (2012).</li><li>Kramer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+cell+migration+and+invasion+assays.">In vitro cell migration and invasion assays.</a> Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 752, 10-24 (2013).</li><li>Holliday, D. L., Speirs, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+the+right+cell+line+for+breast+cancer+research.">Choosing the right cell line for breast cancer research.</a> Breast Cancer Research. 13, 215 (2011).</li><li>Clark, A. G., Vignjevic, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modes+of+cancer+cell+invasion+and+the+role+of+the+microenvironment.">Modes of cancer cell invasion and the role of the microenvironment.</a> Current Opinion in Cell Biology. 36, 13-22 (2015).</li></ol>

Migration og invasion er vigtige parametre til at vurdere mobilitet af kræftceller. Ved hjælp af værktøjet 96-pin scratch, er det muligt at gennemføre sårheling assays i 2D og 3D samtidigt. Ud over at lette den automatiske scanning giver en stabil celle kultur miljø med minimal forstyrrelse, scratch analysen foretaget ved hjælp af værktøjet 96-pin scratch giver konsekvent scratch sår, gør det muligt for eksperimenter, der er mere robuste og reproducerbare. 96-brønd plade format giver ekstra muligheder for en...

Celle migration og invasion er vigtige biologiske processer, der aktiverer normale funktioner i det menneskelige legeme, såsom sår lukning, invasion af moderkagen i livmoderen og mælkekirtlen morfogenese1,2,3. Den menneskelige krop har præcise og nøje kontrol af disse biologiske hændelser; der er dog nogle undtagelser. Maligne tumorer, for eksempel, er stand til at undslippe denne sikkerhedsforanstaltning, udstille unormale spredning og invadere i omkringliggende væv, som kaldes metastaser. Metastaser er den største årsag til cancer-relaterede dødelighed4.
Brystkræft er mest almindeligt diagnosticeret kræft hos kvinder, og er den næsthøjeste årsag til cancer-relaterede dødsfald blandt kvinder i udviklede lande verden over5. Brystkræft stammer fra kanalerne eller lobules, der består af et eller flere lag af epitelceller. I den normale bryst overholde epitelceller hinanden og basalmembranen gennem Membranproteiner som E-cadherin og integriner6. Men invasiv brystkræftceller har mistet deres polaritet og cell-celle vedhæftning, og klassisk gennemgå epitelial mesenchymale overgang (EMT) og få mulighed for at flytte. Efter ekstravasation, disse celler flytte på tværs af den ekstracellulære matrix (ECM) og indtaste blodkar eller lymfesystemet, derefter efterfulgt af intravasation og metastatisk vækst7. Forstå de mekanismer, hvormed dette sker er af stor betydning, fordi metastase er den mest almindelige årsag til cancer-relaterede dødelighed og er nært beslægtet med kræft celle migration/invasion. For at visualisere bevægelse af kræftceller, er migration og invasion assays ideelle modeller at studere 2D og 3D celle bevægelse, henholdsvis. Migration vurderer direkte bevægelse af cellerne invasion indebærer interaktion med mikromiljø og evnen til at forringe biologiske barrierer. De to processer er ikke fuldstændig uafhængigt af hinanden, som migration er et krav for en invasion.
Flere metoder er blevet udviklet for at studere migration og invasion. Som gennemgået af Kramer et al., migration assays såsom sårheling, genererer hegn og mikro-carrier assays en celle-fri område at tillade celler til at flytte ind, vurdering af ændringen af område; transwell og kapillær assays er baseret på antallet af celler, der bevæger sig mod en attractant8. For invasion assays, en ECM miljø skal sættes op med ECM gel eller kollagen for eksempel, og 3D bevægelse kan vurderes ved at overvåge invasion område, afstand og celle tæller (f.eks. transwell assay, platypus assay)8. En anden type af invasion assay er at kombinere de invasive celler med non-invasiv celler og vurdere adfærd af de invasive celler (f.eks. klumpformet undersøgelser). Ovenstående metoder har deres fordele og ulemper, og en måde, der er let at tilgang, let at gentage og kombinere migration analysen og invasion assay i en lignende arbejdsproces er privilegerede i eksperimentelle design.
Denne protokol beskriver måling af celle migration og invasion ved hjælp af en live-celle imager. Det er en real-time celle overvågnings system installeret i en standard celle kultur inkubator. Det tager high definition billeder ifølge sæt scanning intervaller og målinger ved at anvende passende masker på celler eller fluorescerende mål. Modul af migration/invasion assay omfatter også brug af en 96-pin skrabeværktøj, som er egnet til at gøre homogene scratch sår på en celle éncellelag i en 96-brønd plade. Mekanismen er baseret på in vitro-sår healing assays, overvågning 2D celle bevægelse på en plastik eller coated overflade. Invasion eller 3D bevægelse på tværs af en yderligere ECM i bunden sår kan også blive vurderet. En kort workflow er illustreret i figur 1.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:695px;" width="695">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">0.5% trypsin-EDTA solution (10x)</td>
			<td style="width:100px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">30028-02</td>
			<td style="width:167px;">Dilute to 2x in DPBS</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Countess II FL Automated Cell Counter</td>
			<td style="width:100px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AMQAX1000</td>
			<td style="width:167px;">Automated cell counter</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Detergent 1 (Alconox)</td>
			<td style="width:100px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">242985</td>
			<td style="width:167px;">0.5% working concentration</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Detergent 2 (Virkon S)</td>
			<td style="width:100px;">VetProduct DIRECT</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">1% working concentration</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:309px;">Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium, no phenol-red</td>
			<td style="width:100px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">21063-045</td>
			<td style="width:167px;">Supplimented with 10% FBS, 200 mM L-glutamine, 2 &#956;g/ml insulin</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">ECM Gel (matrigel)</td>
			<td style="width:100px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E6909</td>
			<td style="width:167px;">Growth-factor reduced, phenol red free</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Essen ImageLock 96-well plate, flat bottom</td>
			<td style="width:100px;">Essen</td>
			<td style="width:119px;">4379</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">EVE Counting slides</td>
			<td style="width:100px;">BioTools</td>
			<td style="width:119px;">EVS-50</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td style="width:100px;">Bovogen Biologicals</td>
			<td style="width:119px;">SFBS-F-500ml</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">IncuCyte 96-well scratch wound cell invasion accessories</td>
			<td style="width:100px;">Essen</td>
			<td style="width:119px;">4444</td>
			<td style="width:167px;">Including CoolBox, 2x CoolSink</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:309px;">IncuCyte Cell migration kit</td>
			<td style="width:100px;">Essen</td>
			<td style="width:119px;">4493</td>
			<td style="width:167px;">Including the 96-well pin block, 2x wash boats and the software</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">IncuCyte ZOOM</td>
			<td style="width:100px;">Essen</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Live cell analysis system</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:309px;">Insulin solution human</td>
			<td style="width:100px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">19278-5ML</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">L-glutamine solution (100x)</td>
			<td style="width:100px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">25030-091</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:309px;">Tissue culture flask, 75 cm2 growth area</td>
			<td style="width:100px;">Greiner Bio-One</td>
			<td style="width:119px;">658175</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a simple migration/invasion workflow using an automated live-cell imager

Kræft celle mobilitet er afgørende for indledningen af metastaser. Undersøgelse af celle bevægelse og invasive kapacitet er derfor af stor betydning. Migration assays give grundlæggende indsigt i celle bevægelse på en 2D plan, mens invasion assays er mere fysiologisk relevante, efterligne in vivo kræft celle dislodgment fra det oprindelige websted og invaderer gennem den ekstracellulære matrix. Den nuværende protokol giver en enkelt arbejdsgang for migration og invasion assays. Sammen med den integrerede automatiseret mikroskopiske kamera for real-time HD billeder og indbygget analyse modul giver det forskerne en tid-effektiv, simpel og reproducerbar eksperimentelle indstilling. Denne protokol omfatter også erstatninger for forbrugsstoffer og alternative analysemetoder for brugere at vælge imellem.

Denne migration/invasion assay er baseret på sår healing assay, der evaluerer satsen af celler bevæger sig ind i en celle-fri område lavet af 96-pin skrabeværktøj. Forskellen mellem migration og invasion-assays er, at migration undersøgelser vedrørende foranstaltning celler bevæger sig på vævskultur behandlet plast overflade og invasion foranstaltninger celler bevæger sig på tværs af ECM gel.
Scratch-værktøj er d...

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Migration/Invasion Workflow Using an Automated Live-cell Imager at JoVE.com

A Simple Migration/Invasion Workflow Using an Automated Live-cell Imager

En simpel Migration/Invasion arbejdsgang ved hjælp af en automatiseret Live-celle Imager

Den nuværende protokol beskriver en integreret metode undersøger kræft celle migration og invasion på en enkelt platform i realtid, som giver en let gengivelig og tid-effektiv mulighed for at studere cellen mobilitet og morfologi.

Cancer cell mobility is crucial for the initiation of metastasis. Therefore, investigation of the cell movement and invasive capacity is of great ...

Kræft celle mobilitet er afgørende for indledningen af metastase. Derfor, undersøgelse af cellebevægelse og invasiv kapacitet af tumorceller er af stor interesse. Denne integrerede metode til undersøgelse af migration og invasion af kræftceller på en enkelt platform i realtid giver en let reproducerbar og tidseffektiv mulighed for at studere cellemobilitet og patologi.Denne metode kan give indsigt i kræft celle invasion, gennem den ekstra-cellulære matrix, og kan anvendes til andre celletyper. For at opnå en optimal ridsetid skal du sikre dig, at såningstætheden er optimeret og ikke forlænger inkubationstiden, når cellemonskeren har nået 100 procent sammenløb. For at bestemme det optimale antal seedede celler til en migrationsanalyse skal cellerne placeres i en række tætheder i tre eksemplarer i en 96-vægplade.Placer pladen i den levende celle imager, og vælg planlægge scanninger fra opgavelisten i imager software. I skuffens opsætningsrude skal du bestemme pladens positioner og klikke på tilføj beholder'for at vælge pladetypen. Vælg eller rediger scanningsmønsteret i scanningsopsætningsruden i opsætningen af scanningen i henhold til opsætningen af den eksperimentelle plade, og angiv scanningstypen som standard.Højreklik på tidslinjen, og vælg sætintervaller. Angiv derefter tilføj scanninger hver 'til to timer i 24 timer, og klik på anvend. Efter 24 timer skal du åbne skuffeopsætningen, så forsøgspladen kan vælges, og klik på Fjern beholderen.Vælg tre til seks repræsentative billeder, og placer dem i en ny billedsamling. Hvis du vil bestemme en korrekt behandlingsdefinition, skal du bruge segmenteringsjustering, oprydning og filtre til at anvende en passende sammenløbsmaske og bruge eksempelstrøm alle'for at få vist maskernes nøjagtighed. Start analysejobbet og bestem en optimeret celletæthed, ifølge en omtrentlig 100 procent sammenløb mod tiden, inden for seks til atten timer, afhængigt af hvornår migrationsanalysen begynder.Påfør derefter sammenløbets behandlingsanalyseværktøj på de højdefinitionsfasekontrastbilleder, der automatisk indsamles for at generere en celleprolifererende kurve mod tiden. Før analysen påbegyndes, skal pladen til invasionsanalysen belægges med 50 mikroliter af ekstracellulær matrixgel, fortyndet i iskold cellekulturmedium, til en koncentration på 100 mikrogram pr. milliliter. Derefter placere pladen i en celle kultur kuvøse natten over.Den næste eftermiddag, forsigtigt aspirere det overskydende medium, og plade cellerne på den optimerede tæthed, i tre eksemplarer, i de relevante brønde af den ekstracellulære matrix-belagt plade, og i en ekstra ubestrøget 96-brønd plade. Derefter placere pladerne i cellen kultur kuvøse natten over. Næste morgen skal du placere den ubestrøget trækplade i bunden af bundpladeholderen på ridseværktøjet, og brug de vejledende dyvler til forsigtigt at placere holderens top på basen.Tryk på og hold det sorte håndtag, mens du forsigtigt løfter stiften for at lave ridserne. Ridserne i hver brønd skal være synlige med det blotte øje, såvel som under mikroskopet. Derefter vaskes pladen en eller to gange med forvardt kulturmedium for at fjerne eventuelle fritliggende celler eller celleark.For invasionen assay, ridse den belagte plade som netop demonstreret. Når du har fjernet de fritliggende celler og plader, skal du bruge en forkølet køleboks til at ligevægte pladen ved fire grader Celsius i fem minutter, før den forsigtigt aspirerer det kolde medium. Dernæst tilsættes 50 mikroliter af fortyndet ekstracellulær matrixgel i de relevante brønde og læg pladen i cellekulturkubvøsen i tredive minutter.Bobler er almindelige, når du arbejder med ekstracellulære matrix gel, men de kan elimineres ved at aspirere 70 procent ethanol. Derefter tilsættes 100 mikroliter frisk, varm medium, med eller uden testforbindelsen, til de relevante brønde af enten migration eller invasion assay plade, og placere pladen i levende celle billeddannelse platform. For at rengøre ridseværktøjet skal du placere den øverste pin-blok i individuelle 45 milliliter vaskebåde, der indeholder 5 procent vaskemiddel en, en procent vaskemiddel to, sterilt destilleret vand eller 70 procent ethanol i fem minutter pr vask, før du placerer ridseværktøjet tilbage på bundpladen, til opbevaring i et støvfrit miljø.Ved billeddannelse af såranalyserne skal der efter at have ladet pladen komme i ligevægt i fem minutter vælge kartype'som billedlogplan og indstille scanningstypen som ridsesår. Vælg eller rediger scanningsmønsteret i henhold til den eksperimentelle pladeopsætning, og planlæg 24 timers gentagelsesscanning hver en til to timer i 72 timer, eller indtil sårene er helet som påvist. Når alle sårene er helet, skal du stoppe scanningen og vælge tre til seks repræsentative billeder, der spænder over en række lydprocenter, herunder billeder lige efter såret er blevet gjort, og sårlukning med 10 og 50 procent.For at bestemme en korrekt behandlingsdefinition skal du anvende en passende ridsesårmaske og en sammenløbsmaske som vist og bruge eksempelstrøm alle'for at få vist maskernes nøjagtighed. Start derefter analysejobbet. I en migrationsanalyse er sårbredden den gennemsnitlige afstand mellem cellearkene ved siden af såret.Sår sammenløbet er sammenløbet i det sårede område. Den ideelle indledende sår sammenløb bør være tæt på nul procent. Den relative sårtæthed og sår sammenløb tyder på hastigheden af de celler, der besætter bunden sår området.Disse data overlapper næsten hinanden i begge disse repræsentative cellelinjer. Forskellige cellelinjer viser meget forskellige sårhelingsevner, hvilket indikerer differentierede trækevner mellem cellelinjerne. For eksempel observeres lamellipodia i denne brystadenocarcinom cellelinje ved migrationsfronten i begyndelsen af migrationen, mens denne mucin 1-producerende brystkræftcellelinje ikke udviste tegn på cellemigration på samme tidspunkt.Endvidere blev den relative sårtæthed i brystadenocarcinomlinjen mættet efter 50 timer, mens den relative sårtæthed af den mucin 1-producerende brystkræftcellelinje ikke ændrede sig over tid, hvilket understreger den meget invasive fænotype af adenocarcinomcellerne og ikke-invasivheden af mucin 1-producerende brystkræftceller. Adenocarcinomcellerne opførte sig også anderledes, mens de invaderede gennem den ekstracellulære matrixgel, hvilket demonstrerede en aflang morfologi med førende fremspring, og i migrationsanalyser blev en bleb på migrationsfronten visualiseret. Når plating, skal du huske, at hvis for få celler er seedet, vil bunden ikke dannes korrekt, og hvis alt for mange celler er seedet, vil der være overbelægning.Efter denne procedure kan der tilføjes sporbehandlinger, så denne metode kan tilpasses til screening af spor med høj overførselshastighed. Denne metode gør det muligt for forskere at udføre disse analyser på en enkelt platform, som er høj-gennemløb, og giver forskerne mulighed for at overvåge deres celler i realtid, snarere end i eksperimentelle slutpunkt. De desinfektionsmidler, der anvendes til sterilisering af ridseværktøjet, kan være farlige.Sørg for at indsamle og bortskaffe løsningerne i henhold til de relevante MSDS og de regelmæssige udløsningslinjer på dit anlæg.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Bevæger sig opad: En enkel og fleksibel In Vitro tredimensionale Invasion Assay protokol

Although 3D invasion assays have been developed, the challenge remains to study cells without affecting the integrity of their microenvironment. ...

Long-term Live-cell Imaging to Assess Cell Fate in Response to Paclitaxel

Langsigtet Live-celle Imaging for at vurdere celle skæbne i svar til Paclitaxel

Live-cell imaging is a powerful technique that can be used to directly visualize biological phenomena in single cells over extended periods of time. Over ...

Live Cell Imaging of the TGF-	&beta;/Smad3 Signaling Pathway In Vitro and In Vivo Using an Adenovirus Reporter System

Live Cell Imaging of the TGF-	ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²/Smad3 Signaling Pathway In Vitro and In Vivo Using an Adenovirus Reporter System

Live celle billeddannelse af den TGF-β/Smad3 Signaling Pathway In Vitro og In Vivo ved hjælp af en Adenovirus Reporter System

Transforming Growth Factor &#946; (TGF-&#946;) signaling regulates many important functions required for cellular homeostasis and is commonly found ...

Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

Rumlig og tidsmæssig kontrol af murine melanom initiering fra mutant melanocyte stamceller

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

In vitro-analyse for at studere tumor-makrofag interaktion

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

A Data Integration Workflow to Identify Drug Combinations Targeting Synthetic Lethal Interactions

En dataintegrationsarbejdsgang til identifikation af lægemiddelkombinationer, der er målrettet mod syntetiske dødelige interaktioner

A synthetic lethal interaction between two genes is given when knock-out of either one of the two genes does not affect cell viability but knock-out of ...

An Automated Differential Nuclear Staining Assay for Accurate Determination of Mitocan Cytotoxicity

En automatiseret differentiale nuklear farvning assay til nøjagtig bestemmelse af Mitocan Cytotoxicity

The contribution of mitochondria to oncogenic transformation is a subject of wide interest and active study. As the field of cancer metabolism becomes ...

A Rapid Screening Workflow to Identify Potential Combination Therapy for GBM using Patient-Derived Glioma Stem Cells

En hurtig screeningsarbejdsgang til identifikation af potentiel kombinationsbehandling for GBM ved hjælp af patientafledte gliomstamceller

The glioma stem cells (GSCs) are a small fraction of cancer cells which play essential roles in tumor initiation, angiogenesis, and drug resistance in ...

Automated Dissection Protocol for Tumor Enrichment in Low Tumor Content Tissues

Automatiseret dissektionsprotokol til tumorberigelse i væv med lavt tumorindhold

Tumor enrichment in low tumor content tissues, those below 20% tumor content depending on the method, is required to generate quality data reproducibly ...

An Automated Microscopic Scoring Method for the &#947;-H2AX Foci Assay in Human Peripheral Blood Lymphocytes

An Automated Microscopic Scoring Method for the ÃƒÅ½Ã‚Â³-H2AX Foci Assay in Human Peripheral Blood Lymphocytes

En automatiseret mikroskopisk scoringsmetode til γ-H2AX Foci-analysen i humane perifere blodlymfocytter

Ionizing radiation is a potent inducer of DNA damage and a well-documented carcinogen. Biological dosimetry comprises the detection of biological effects ...