Name: the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

Ce manuscrit a été pris en charge par les NIH accorder des subventions 7R01 HL083078-10 de l’American Heart Association AHA-17SDG33370112 et de la National instituts de la santé NIH K01 HL135474 à Y.S. et des instituts nationaux de santé R01 HL133554 à L.H.

Les procédures décrites ci-dessous ont été approuvés par l’animalier institutionnel et utilisation Comité (IACUC) de l’école de médecine de l’Icahn au mont Sinaï. Tous les rats ont reçu des soins compatissants en conformité avec le mont Sinaï « Guide for the Care and Use of Laboratory Animals ».
1. préparation pour la chirurgie
<ol><li>Autoclave Cooley-Mayo courbes droites ciseaux Iris (petits ciseaux), ciseaux de Vannas McPherson Iris (dos ciseaux), forceps de tissue ...

<ol>
	<li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension.">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761 (2016).</li><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective.">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li><li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension.">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li><li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension:+lessons+from+preclinical+animal+models.">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse:+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally.">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension.">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li><li>Happ&#233;, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats.">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li><li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling.">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li><li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension.">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li><li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt.">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li><li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension.">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li><li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics,+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li></ol>

Dans les poumons touchés par la PAH, prolifération vasculaire avec formation néointimale et l’oblitération des artères pulmonaires se traduire par modifications hémodynamiques graves, l’insuffisance ventriculaire droite et précoce mortalité7,8. Les modifications apportées aux parois des vaisseaux augmentent la résistance à la circulation sanguine, augmentant la pression artérielle et ventriculaire droite. Dans les premiers stades de la PAH, géné...

Hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) est une maladie progressive et mortelle caractérisée par une augmentation du débit sanguin pulmonaire, augmentation de la résistance vasculaire, l’inflammation et remodelage des petits vaisseaux sanguins pulmonaires1. Ce remodelage habituellement se traduit par des lésions vasculaires qui obstruent et oblitérer les petites artères pulmonaires, provoquant une vasoconstriction et augmentant le ventricule droit postcharge2. Il existe peu de traitements pharmacologiques réussie de HAP ; en conséquence, vestiges de la mortalité liée au HAP hautes. Récemment, au centre de recherche sur la pathologie de l’hypertension pulmonaire a déménagé vers un mécanisme d’angio-prolifération dans laquelle le rôle de la circulation sanguine pulmonaire accrue est considéré comme un déclencheur important dans le développement de pulmonaire vasculaire remodelage des3,4.
Modèles animaux d’hypertension pulmonaire ont fourni des idées essentielles qui aident à expliquer la physiopathologie de la maladie et ont servi de plateforme pour drogue, cellule, gène et la protéine livraison. Traditionnellement, le modèle de l’hypertension pulmonaire induite par l’hypoxie chronique et le modèle de lésion pulmonaire MCT ont été les principaux modèles utilisés pour étudier les HAP physiopathologie5. Toutefois, ils ne sont pas suffisants pour produire une augmentation artérielle pulmonaire flux néointimale tendance et du remodelage par rapport aux modifications décrites chez des patients humains. Le modèle de l’hypoxie chronique chez les rongeurs se traduit par l’épaississement des parois des vaisseaux avec vasoconstriction hypoxique sans angio-oblitération des petits vaisseaux pulmonaires6. En outre, la condition d’hypoxie est réversible. Ainsi, le modèle de l’hypoxie n’est également pas suffisant pour produire des HAP sévère. Le modèle de lésion pulmonaire MCT provoquer une dysfonction endothéliale, mais les lésions vasculaires oblitérante complexes, trouvées chez l’homme avec le PAH primaire sévère ne se développent pas dans le rat2. En outre, chez les rats traités MCT ont tendance à mourir de la toxicité pulmonaire induite par le MCT, maladie veino-occlusive du foie et la myocardite plutôt que de PAH2. Enfin, la pneumonectomie seule ne suffit pas produire des lésions néointimale dans les petits vaisseaux pulmonaires dans un court laps de temps. Après la pneumonectomie, il y a élévation minimale dans la pression artérielle pulmonaire7. Chez l’homme, la pneumonectomie est bien tolérée lorsque le poumon controlatéral est saine7.
Toutefois, la procédure de pneumonectomie gauche associée à MCT ou Sugen est avantageuse car elle imite la circulation sanguine pulmonaire accrue et se traduit par remodelage vasculaire pulmonaire comparable aux HAP clinique sévère. La pneumonectomie est effectuée sur le poumon gauche, qui a seulement 1 lobe, plutôt que sur la droite, qui a quatre lobes. Si le poumon droit a été supprimé, l’animal serait incapable de compenser l’insuffisance respiratoire. Dans le modèle de la pneumonectomie-MCT, néointimale modèle de remodelage se développe dans plus de 90 % des assurés-animaux traités7. De même, la combinaison des résultats Sugen et pneumonectomie en HAP grave, caractérisée par des lésions vasculaires angio-oblitérante, prolifération, apoptose et RV dysfonction8. La procédure de pneumonectomie gauche est également avantageuse par rapport aux autres interventions chirurgicales pour induire des HAP. Précédemment décrits chez les rats pour augmenter le débit sanguin pulmonaire vers les poumons ultrarésistant le shunt aorto-caval ou anastomose de l’artère sous-clavière-pulmonaire. Ces modèles sont extrêmement compliqués7,9,10,11. Pour effectuer un shunt aorto-caval, abdomen de l’animal doit être ouvert. Le shunt est placé dans l’aorte abdominale, ce qui augmente le flux sanguin vers les organes abdominaux au lieu de juste les poumons, donc, Hap prend beaucoup plus de temps à développer. En outre, il est difficile de déterminer le débit sanguin à travers le shunt, alors qu’avec la pneumonectomie le sang couler à la doublette de poumon restant. L’anastomose de l’artère sous-clavière-pulmonaire a aussi beaucoup de complications. Le flux du sang artériel dans la veine peut mener à la thrombose de l’anastomose et saignements. Comme le shunt aorto-caval, il est difficile de déterminer la circulation sanguine par l’intermédiaire de l’anastomose. En outre, c’est une technique coûteuse et difficile qui nécessite des compétences chirurgicales vasculaires. La pneumonectomie gauche unilatérale double du débit sanguin et la contrainte de cisaillement dans le poumon controlatérale et, en combinaison avec MCT ou Sugen, provoque les constatations histopathologiques et hémodynamiques typiques des HAP qui est la cellule endothéliale dommages8, 12.
La nouveauté de ce manuscrit est présentée dans le protocole chirurgical très détaillé et complet de la pneumonectomie gauche chez des rats et à la discussion des défis techniques et physiologiques de ces modèles. Parce que ce protocole n’est pas disponible, de nombreux chercheurs croient que le modèle est trop difficile. Les enquêteurs qui ont exercé la pneumonectomie gauche ont été confrontés à une mortalité élevée et des taux de morbidité associées à la perte inutile d’animaux, compromettre l’évaluation scientifique. Au lieu de cela, beaucoup utilisera des modèles classiques telles que l’injection, l’hypoxie chronique ou juste la pneumonectomie MCT pour créer des HAP. Toutefois, ces modèles sont beaucoup moins efficaces que la combinaison de MCT ou Sugen avec la pneumonectomie gauche. L’objectif principal de cet article est de fournir le protocole chirurgical d’abord détaillé et reproductible pour la pneumonectomie unilatérale gauche chez le rat et fournir le meilleur modèle chirurgical de HAP. Combinant ce protocole pour pneumonectomie unilatérale gauche avec MCT ou SU5416 permettra aux chercheurs de créer un modèle beaucoup plus efficace et cliniquement pertinent de HAP sévère pour l’étude de la pathogenèse de cette maladie mortelle.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:739px;" width="739">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:223px;">Surgical Blade</td>
			<td style="width:111px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371215</td>
			<td style="width:252px;">Incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Forane (Isoflurane, USP)</td>
			<td style="width:111px;">Baxter</td>
			<td style="width:153px;">NDC 10019-360-40</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD Angiocath 16 G</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">381157</td>
			<td>intubation tube, chest tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD 1 mL Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">329652</td>
			<td>administer buprinex post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Biogel Surgeons Surgical Gloves</td>
			<td style="width:111px;">Biogel</td>
			<td style="width:153px;">30460-01</td>
			<td>sterile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Wahl BravMini+ Trimmer</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:153px;">CLP-41590 P</td>
			<td>shave surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">SU5416</td>
			<td style="width:111px;">Cayman Chemical</td>
			<td style="width:153px;">13342</td>
			<td>Sugen&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:111px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41723-02</td>
			<td>light for intubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgipro II 4-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">VP831X</td>
			<td>Closing intercostal muscles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Polysorb 5-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">GL-885</td>
			<td>Closing skin</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Medium Slide Top Induction Chamber</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">12570</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DRE Compact 150 Rodent Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">373</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:111px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">18000-00</td>
			<td>cauterizer to minimize bleeding</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:111px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:153px;">55-7040</td>
			<td>ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MouseSTAT Jr</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">MSTAT-JR</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate monitor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Mouse Paw Pulse Oximeter Sensor</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">SPO2-MSE</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate paw sensor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PhysioSuite RightTemp</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">PS-02</td>
			<td>temperature pad</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PVP Prep Solution</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">MDS093944</td>
			<td>Cleaning surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Poly-lined Drape</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">NON21002Z</td>
			<td>cover animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">SYR103010</td>
			<td>administer fluids post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;width:223px;">Microsurgical Kits, Integra&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">95042-540</td>
			<td style="width:252px;">surgical tools: plain wire speculum, double-ended probe, McPherson-Vannas Iris scissors straight, straight iris scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Hemostatic forceps - Micro-Jacobson-Mosquito</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">17-2602</td>
			<td>mosquito</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Buprenorphrine HCl 0.3 mg/mL</td>
			<td style="width:111px;">Par Pharmaceutical</td>
			<td style="width:153px;">NDC 42023-179-01</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Cooley-Mayo curved scissors</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">352090</td>
			<td>Large scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Gerald Tissue forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">351900</td>
			<td>forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Wangesnsteen Tissue Forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">342929</td>
			<td>atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Pilling Thin Vascular Needle Holder</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">354962DG</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Crotaline</td>
			<td style="width:111px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">C2401-1G</td>
			<td>MCT</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Surflash 20 G IV Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Terumo</td>
			<td style="width:153px;">SR*FF2051</td>
			<td style="width:252px;">For pressure reading during organ harvest</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">ADVantage PV System with 1.2 Fr Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Transonic Inc</td>
			<td style="width:153px;">ADV500</td>
			<td style="width:252px;">Record pulmonary artery and right ventricle pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Medium Hemoclip</td>
			<td style="width:111px;">Weck</td>
			<td style="width:153px;">523700</td>
			<td>ligate vessels</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Open Ligating Clip Applicator; Medium, curved</td>
			<td style="width:111px;">Weck Horizon</td>
			<td style="width:153px;">237081</td>
			<td>hemoclip applicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgical Microscope</td>
			<td style="width:111px;">Zeiss OPMI MD</td>
			<td style="width:153px;">1808</td>
			<td>magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats

Dans ce protocole, nous détaillons les étapes de la procédure correctes et précautions nécessaires pour effectuer une pneumonectomie gauche et induisent des HAP chez les rats avec l’administration supplémentaire de monocrotaline (MCT) ou SU5416 (Sugen). Nous comparons également ces deux modèles à d’autres modèles de HAP couramment utilisés dans la recherche. Ces dernières années, la mise au point des modèles animaux de HAP a poussé vers l’étude du mécanisme d’angioproliferation des lésions plexiforme, dans laquelle le rôle de la circulation sanguine pulmonaire accrue est considéré comme un déclencheur important dans le développement de graves pulmonaire le remodelage vasculaire. Un des modèles rongeurs plus prometteurs de l’augmentation du débit pulmonaire est la pneumonectomie gauche unilatérale combinée avec un « second coup » de MCT ou Sugen. La suppression du poumon gauche mène à la circulation sanguine pulmonaire accrue et turbulent et remodelage vasculaire. Il n’existe actuellement aucune procédure détaillée de la chirurgie de la pneumonectomie chez les rats. Cet article décrit un protocole étape par étape de la procédure chirurgicale pneumonectomie et soins postopératoires chez les rats Sprague-Dawley. En bref, l’animal est anesthésié et le coffre est ouvert. Une fois que l’artère pulmonaire gauche, veines pulmonaires et des bronches sont visualisées, ils sont ligaturés et le poumon gauche est supprimé. La poitrine puis fermé et récupéré l’animal. Sang est obligé de circuler uniquement sur le poumon droit. Cette augmentation de la pression vasculaire entraîne un remodelage progressif et l’occlusion des petites artères pulmonaires. Le deuxième coup de MCT ou Sugen est utilisé une semaine après la chirurgie pour induire la dysfonction endothéliale. La combinaison de l’augmentation du débit sanguin dans le poumon et la dysfonction endothéliale produit HAP sévère. La principale limite de cette procédure est qu’il exige des compétences chirurgicales générales.

Selon le système de classification reconnus, une hypertension artérielle pulmonaire se caractérise par une pression de l’artère pulmonaire moyenne (Papm) dépassant les limites maximales de pression de l’artère pulmonaire normale (c'est-à-dire, 25 mm Hg). Dans la pneumonectomie + groupe MCT, Hap sévère développé par 21 jours avec une augmentation Papm (Figure 1). La Papm est calculée par la formule :
<p class="jove_content" fo:keep-togethe...

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The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

La pneumonectomie gauche combiné avec Monocrotaline ou Sugen comme un modèle d’Hypertension pulmonaire chez le rat

La pneumonectomie gauche rongeur est une technique utile dans la recherche d’une hypertension artérielle pulmonaire. Nous présentons ici un protocole visant à décrire la procédure de pneumonectomie rat et les soins post-opératoires afin d’assurer la mortalité et la morbidité minime.

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Ce protocole est significatif parce qu’il produit le meilleur modèle possible pour l’hypertension artérielle pulmonaire. Aucun autre modèle ne produit les lésions plexiformes trouvées dans les patients humains de PAH. Le principal avantage est que nous doublent le flux sanguin dans le poumon droit et l’artère pulmonaire, causant des dommages endothéliales et forçant les poumons à travailler deux fois plus dur.Notre groupe a développé un modèle très efficace de l’hypertension artérielle pulmonaire pour développer des thérapeutiques. Outre l’hypertension artérielle pulmonaire, cette méthode pourrait être utile en médecine régénérative et pourrait donner un aperçu d’autres maladies avec un flux pulmonaire accru comme les malformations cardiaques congénitales ou les patients post-pneumonectomy. Pour quelqu’un qui n’a jamais effectué cette technique, mon conseil est de suivre le protocole exactement et de s’assurer que le chirurgien peut voir exactement ce qu’ils font.Après avoir anesthésié le rat avec 4% d’isoflurane, l’animal est intubé à l’aide d’une chair de poule à fibres optiques pour éclairer la trachée. Insérez un cathéter de calibre 16 dans le larynx et utilisez un miroir froid pour observer la condensation de l’humidité dans le souffle expiré du cathéter pour confirmer l’intubation. Connectez le rat au ventilateur et placez le rat sous le microscope dans la bonne position de décubitus sur un coussin chauffant de 37 degrés Celsius.Fixez les membres antérieurs avec du ruban adhésif et utilisez des tondeuses pour raser le thorax gauche derrière la jambe avant jusqu’à l’extrémité de la cage thoracique. Nettoyez la peau exposée avec trois solutions séquentielles d’iode de 10 % povidone et 70 % d’lingettes à l’éthanol, et placez un oxymètre d’impulsion sur le pied du rat pour surveiller la fréquence cardiaque et la saturation en oxygène tout au long de la chirurgie. Maintenant, ajustez le microscope et mettre la vue chirurgicale au point.Ensuite, placez un drapé stérile sur le corps du rat et le plateau d’instruments pour créer un environnement stérile. Enfin, placez des instruments stériles sur le plateau stérile de l’instrument. Pour effectuer une pneumonectomie gauche, utilisez des ciseaux Cooley-Mayo et des forceps de tissu Gerald pour couper un trou de deux à trois centimètres dans le drapé chirurgical, et utilisez une lame chirurgicale pour faire une incision latérale de deux centimètres de long dans le thorax gauche.Utilisez des ciseaux Cooley-Mayo pour couper chaque couche de tissu jusqu’à ce que les côtes et les muscles intercostals soient exposés. Utilisez un moustique pour faire un trou à travers le muscle du troisième espace intercostal. À l’aide d’une sonde à double fin, déplacez le poumon pour visualiser l’artère pulmonaire et utilisez des ciseaux Iris McPherson-Vannas pour ouvrir les muscles intercostals à une largeur d’environ un à deux centimètres.Placez un petit rétractateur auto-retenant dans la plèvre gauche pour tenir les côtes et les muscles ouverts, et déplacez le poumon gauche plus bas dans l’abdomen pour permettre l’accès à l’artère pulmonaire et bronche. Pour la ligature de la bronche principale gauche et de l’artère pulmonaire, d’abord, chargez un hémoclip moyen dans un applicateur de clip ligating et utilisez les forceps atraumatic de Wangensteen pour soulever soigneusement la partie supérieure du poumon gauche pour exposer l’artère pulmonaire. Fermez le clip et l’applicateur autour de l’artère, en prenant soin de ne pas fermer ou rompre la veine azygos gauche.Et ouvrez l’incision plus loin en utilisant l’amygdale pour séparer les fibres musculaires. Après avoir chargé un autre hemoclip moyen dans l’applicateur de clip de ligating, utilisez les forceps atraumatic et les forceps standard de tissu pour soulever la partie inférieure du poumon hors de l’incision jusqu’à ce que le bronchus principal gauche et la veine pulmonaire gauche soient visualisés. Ligate soigneusement la bronche principale gauche et la veine pulmonaire avec le deuxième hémoclip, et utiliser des ciseaux pour enlever le poumon sans couper ou déchirer le clip.Ensuite, utilisez un petit morceau de gaze stérile pour absorber tout sang et endiguer tout saignement. Utilisez le porte-aiguille et une suture de prolène 4-0 pour fermer les côtes et les muscles intercostals. Avant de fermer les muscles intercostals, insérez un cathéter de calibre 16 dans la cavité thoracique loin de l’incision chirurgicale et dans le septième espace intercostal, et retirez immédiatement l’aiguille, laissant le cathéter en place.Placez une suture 5-0 dans la peau et autour du tube thoracique de sorte que lorsque le tube thoracique est enlevé, le trou sera attaché fermé, et attacher les sutures pour fermer les côtes. Fermez la peau et l’espace sous-cutané avec une suture 5-0 en cours d’exécution, et utilisez une seringue de trois millilitres pour évacuer l’air de la cavité pleurale à travers le cathéter pour rétablir la pression négative normale dans le thorax. Utilisez un porte-aiguille pour serrer immédiatement le cathéter pour empêcher l’air de revenir dans la cavité thoracique.Retirer le cathéter et attacher la suture pour fermer le trou. Dans le groupe de pneumonectomy et de monocrotaline, l’hypertension pulmonaire grave se développe par jour 21, comme démontré par une augmentation de la pression pulmonaire moyenne d’artère comparée aux animaux faux non traités de contrôle. Dans le groupe pneumonectomy plus Sugen, la pression moyenne d’artère pulmonaire est trois fois plus élevée que dans le groupe témoin.La pression systolique ventriculaire droite est également beaucoup plus élevée chez les animaux traités à la monocrotaline et au Sugen, par rapport au groupe témoin. Dans les sections normales de tissu pulmonaire de rat tachées d’hématoxyline et d’éosine, des espaces entre les alvéoles et les structures alvéolaires sont apparents, et les vaisseaux sont clairs et d’une épaisseur normale. Dans le poumon d’hypertension d’artère pulmonaire, il y a l’évidence du remodelage, de l’épaississement des parois de navire, de la constriction grave des vaisseaux, et de l’inflammation et de l’artérite pulmonaire focale.L’animal doit compenser la perte d’un poumon, il est donc important d’être patient pendant la période de récupération. Surveillez les signes vitaux et donnez un volume supplémentaire d’oxygène ou de poumons au besoin. Sugen crée l’apoptose endothéliale qui est le signe pertinent clinique de l’hypertension artérielle pulmonaire.Le modèle gauche de pneumonectomie chez les rongeurs a ouvert la voie aux scientifiques pour étudier des anomalies de flux et développer de nouveaux traitements pour l’hypertension artérielle pulmonaire. En raison de l’utilisation de l’isoflurane, sugen, et / ou MCT dans ce modèle, l’équipement de protection individuelle doit être porté en tout temps.

Research

JoVE Journal

Medicine

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6e néphrectomie en association avec High Salt Diet Nitric Oxide Synthase et inhibition pour provoquer la maladie rénale chronique chez le rat Lewis

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Recherche

Médecine

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

L&#39;augmentation de l&#39;artère pulmonaire pulsatile débit améliore l&#39;hypertension pulmonaire hypoxique chez les porcelets

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A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Un modèle de Cardiac Remodeling Grâce à constriction de l&#39;aorte abdominale chez les rats

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Chirurgie Shunt, droite Cathétérisme cardiaque et vasculaire Morphometry dans un modèle de rat pour Flow-induite Hypertension artérielle pulmonaire

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Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Re-implantation directe de gauche de l&#39;artère coronaire dans l&#39;aorte chez les adultes atteints de gauche Origine anomale coronarienne de l&#39;artère pulmonaire (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

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