Name: the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

כתב יד זה נתמך על ידי NIH להעניק 7R01 HL083078-10 מעניקה את איגוד הלב האמריקני AHA-17SDG33370112 ו מ את נבחרת מוסדות של בריאות NIH K01 HL135474 כדי Y.S., את נבחרת מוסדות של בריאות R01 HL133554 כדי L.H.

ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של בית הספר לרפואה Icahn במעמד הר סיני. כל העכברושים קיבל טיפול אנושי תואם הר סיני "מדריך עבור טיפול והשתמש של חיות מעבדה".
1. הכנה לניתוח
<ol><li>אוטוקלב קולי-מאיו מעוקל מספריים (מספריים גדולים), איריס...

<ol>
	<li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension.">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761 (2016).</li><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective.">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li><li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension.">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li><li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension:+lessons+from+preclinical+animal+models.">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse:+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally.">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension.">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li><li>Happ&#233;, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats.">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li><li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling.">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li><li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension.">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li><li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt.">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li><li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension.">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li><li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics,+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li></ol>

בריאות הפה מושפעות התפשטות כלי הדם עם היווצרות neointimal, מחק עורקי הריאה לגרום שינויים והמודינמיקה חמורה, כשל נכון חדרית ותמותה מוקדם7,8. השינויים כלי הדם להגביר התנגדות לזרימת הדם, הגדלת הלחץ בעורקים נכון חדרית. בשלבים המוקדמים של הפה, בדרך כלל כשלושה שבועות ל?...

לחץ דם עורקי ריאתי (הפה) היא מחלה מתקדמת, חמורה המאופיינת על ידי הגברת זרימת דם ריאתי מוגבר התנגדות כלי הדם, דלקת, שיפוץ של כלי דם ריאתי קטנים1. שיפוץ זה בדרך כלל תוצאות נגעים וסקולאריים להכשיל, להשמיד את העורקים הריאה קטן, גרימת vasoconstriction והגדלת החדר הימני afterload2. כמה טיפולי תרופתי מוצלחת של הפה קיים; מכך, הקשורות הפה התמותה נותר גבוה. לאחרונה, עבר המוקד של מחקר על pathobiology של יתר לחץ דם ריאתי לכיוון מנגנון של אנגיוגרפיה-התפשטות שבו התפקיד של זרימת דם ריאתי מוגבר נחשבת בגורם מפעיל חשוב בהתפתחות של ריאות כלי הדם שיפוץ3,4.
מודלים חייתיים של יתר לחץ דם ריאתי סיפקו תובנות קריטי לסייע להסביר את הפתופיזיולוגיה של המחלה, שמשו כפלטפורמה לשיווק התרופה, תא, ג'ין ומסירת חלבון. באופן מסורתי, הדגם לחץ דם ריאתי כרוני היפוקסיה-induced ודגם פגיעת ריאות MCT היו המודלים העיקריים בשימוש כדי לחקור הפה פתופסיולוגיה5. עם זאת, הן אינן מספיקות לייצר תבנית זרימת ואת neointimal דם ריאתי מוגבר של שיפוץ לעומת השינויים המתוארים בחולים אנושיים. המודל כרונית-היפוקסיה בחולדות תוצאות עיבוי של כלי הדם עם vasoconstriction שתקבעו בלי אנגיוגרפיה-ברכות כלי ריאתי קטנים6. בנוסף, התנאי היפוקסיה הוא הפיך. לפיכך, המודל היפוקסיה הוא גם לא מספיקה כדי לייצר הפה חמורה. המודל פגיעת ריאות MCT להפיק מסוימים בתפקוד אנדותל אבל מורכבות obliterative נגעים של כלי הדם נמצאו בני-אדם עם הפה הראשית חמורה אינם מפתחים החולדות2. בנוסף, חולדות שטופלו MCT נוטים למות רעילות MCT-induced ריאה, מחלת כבד veno-occlusive, דלקת שריר הלב, ולא מן הפה2. בסופו של דבר, כריתת ריאה לבד אינה מספיקה כדי לייצר neointimal נגעים של כלי ריאתי קטנה בתקופה קצרה של זמן. לאחר כריתת ריאה, יש גובה מינימלי בלחץ הדם בעורק ריאתי7. בבני אדם, כריתת ריאה הוא נסבל היטב כאשר הריאות contralateral בריא7.
עם זאת, הליך כריתת ריאה השמאלית בשילוב עם MCT או Sugen יש יתרון מאז זה מחקה את זרימת דם ריאתי מוגבר ותוצאות ריאתי וסקולרית שיפוץ להשוות. חמורה הפה קליניים. כריתת ריאה מתבצע על הריאה השמאלית, אשר יש רק 1 האונה, ולא מימין, שבו יש ארבע אונות. אם הריאה הימנית הוסרה, החיה יוכל לפצות אי ספיקה נשימתית. במודל כריתת ריאה-MCT, דפוס neointimal של שיפוץ מתפתח מעל 90% של פעלו בעלי חיים מטופלים7. באופן דומה, שילוב Sugen עם כריתת ריאה תוצאות חמורות הפה, מאופיינות אנגיוגרפיה-obliterative נגעים של כלי הדם, התפשטות, אפופטוזיס ועל תפקוד RV8. הנוהל כריתת ריאה השמאלית הוא גם יתרון לעומת ניתוחים אחרים לזירוז הפה. בעבר שתואר הדגמים בחולדות כדי להגביר את זרימת הדם ריאתי לריאות כוללים את aorto-caval דלף או עורק ריאתי-בריחי השקה. מודלים אלה הם מאוד מסובך7,9,10,11. לביצוע של המחלף aorto-caval, הבטן של החיה יש אפשרות לפתוח. המחלף נמצא במחלקה העורק הראשי, אשר מגביר את זרימת הדם אל כל אברי הבטן במקום רק את הריאות, לפיכך, הפה לוקח הרבה זמן כדי לפתח. בנוסף, קשה לקבוע את זרימת הדם דרך המחלף, ואילו עם כריתת ריאה הדם לזרום לזוג הריאה הנותרת. ההשקה עורק ריאתי-בריחי יש גם סיבוכים רבים. זרימת הדם בעורקים לווריד יכול להוביל פקקת של השקה ודימום. כמו המחלף aorto-caval, קשה לקבוע את זרימת הדם דרך ההשקה. יתר על כן, זה טכניקה יקר וקשה הדורש מיומנויות כירורגית כלי דם. כריתת ריאה השמאלית חד צדדית מכפילה את זרימת הדם ואת גזירה בריאה contralateral וגורם, בשילוב עם MCT או Sugen, הממצאים והמודינמיקה ו histopathological אופייני של הפה אשר הוא נזק תאי אנדותל8, 12.
החידוש של כתב יד זה מוצג ב פרוטוקול כירורגי מאוד מפורט ומקיף כריתת ריאה השמאלית בחולדות, בדיון של האתגרים הטכניים, פיזיולוגיים של מודלים אלה. כי פרוטוקול זה אינו זמין כעת, חוקרים רבים מאמינים שהמודל הוא שימוש קשה מדי. חוקרים אשר אמורה לבצע את כריתת ריאה השמאלית התמודדו עם תמותה גבוהה ומחירים תחלואה הקשורים עם אובדן מיותר של בעלי חיים, להתפשר על הערכה מדעית. במקום זאת, רבים ישתמש הדגמים הקלאסיים כגון הזרקת MCT, כרונית-היפוקסיה או רק את כריתת ריאה ליצירת הפה. עם זאת, מודלים אלה הם הרבה פחות יעיל מאשר השילוב של MCT או Sugen עם כריתת ריאה השמאלית. המטרה העיקרית של מאמר זה היא לספק פרוטוקול כירורגי תחילה מפורט, לשחזור כריתת ריאה חד צדדית משמאל בחולדות ולספק הדגם כירורגי הטוב של הפה. שילוב פרוטוקול זה עבור כריתת ריאה חד צדדית משמאל עם MCT או SU5416 יאפשר חוקרים כדי ליצור מודל הרבה יותר אפקטיבית, הרלוונטית קלינית של הפה חמור ללמוד בפתוגנזה של מחלה קטלנית זו.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:739px;" width="739">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:223px;">Surgical Blade</td>
			<td style="width:111px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371215</td>
			<td style="width:252px;">Incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Forane (Isoflurane, USP)</td>
			<td style="width:111px;">Baxter</td>
			<td style="width:153px;">NDC 10019-360-40</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD Angiocath 16 G</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">381157</td>
			<td>intubation tube, chest tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD 1 mL Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">329652</td>
			<td>administer buprinex post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Biogel Surgeons Surgical Gloves</td>
			<td style="width:111px;">Biogel</td>
			<td style="width:153px;">30460-01</td>
			<td>sterile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Wahl BravMini+ Trimmer</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:153px;">CLP-41590 P</td>
			<td>shave surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">SU5416</td>
			<td style="width:111px;">Cayman Chemical</td>
			<td style="width:153px;">13342</td>
			<td>Sugen&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:111px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41723-02</td>
			<td>light for intubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgipro II 4-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">VP831X</td>
			<td>Closing intercostal muscles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Polysorb 5-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">GL-885</td>
			<td>Closing skin</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Medium Slide Top Induction Chamber</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">12570</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DRE Compact 150 Rodent Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">373</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:111px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">18000-00</td>
			<td>cauterizer to minimize bleeding</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:111px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:153px;">55-7040</td>
			<td>ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MouseSTAT Jr</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">MSTAT-JR</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate monitor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Mouse Paw Pulse Oximeter Sensor</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">SPO2-MSE</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate paw sensor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PhysioSuite RightTemp</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">PS-02</td>
			<td>temperature pad</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PVP Prep Solution</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">MDS093944</td>
			<td>Cleaning surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Poly-lined Drape</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">NON21002Z</td>
			<td>cover animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">SYR103010</td>
			<td>administer fluids post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;width:223px;">Microsurgical Kits, Integra&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">95042-540</td>
			<td style="width:252px;">surgical tools: plain wire speculum, double-ended probe, McPherson-Vannas Iris scissors straight, straight iris scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Hemostatic forceps - Micro-Jacobson-Mosquito</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">17-2602</td>
			<td>mosquito</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Buprenorphrine HCl 0.3 mg/mL</td>
			<td style="width:111px;">Par Pharmaceutical</td>
			<td style="width:153px;">NDC 42023-179-01</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Cooley-Mayo curved scissors</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">352090</td>
			<td>Large scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Gerald Tissue forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">351900</td>
			<td>forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Wangesnsteen Tissue Forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">342929</td>
			<td>atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Pilling Thin Vascular Needle Holder</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">354962DG</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Crotaline</td>
			<td style="width:111px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">C2401-1G</td>
			<td>MCT</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Surflash 20 G IV Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Terumo</td>
			<td style="width:153px;">SR*FF2051</td>
			<td style="width:252px;">For pressure reading during organ harvest</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">ADVantage PV System with 1.2 Fr Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Transonic Inc</td>
			<td style="width:153px;">ADV500</td>
			<td style="width:252px;">Record pulmonary artery and right ventricle pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Medium Hemoclip</td>
			<td style="width:111px;">Weck</td>
			<td style="width:153px;">523700</td>
			<td>ligate vessels</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Open Ligating Clip Applicator; Medium, curved</td>
			<td style="width:111px;">Weck Horizon</td>
			<td style="width:153px;">237081</td>
			<td>hemoclip applicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgical Microscope</td>
			<td style="width:111px;">Zeiss OPMI MD</td>
			<td style="width:153px;">1808</td>
			<td>magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats

ב פרוטוקול זה, אנחנו פירוט ושלבי נכונה של אמצעי הזהירות הנדרשים לשם בהצלחה לבצע כריתת השמאלי, זירוז הפה בחולדות עם ממשל נוספים של monocrotaline (MCT) או SU5416 (Sugen). אנחנו גם להשוות בין 2 מודלים אחרים דגמי הפה נפוץ במחקר. השנים האחרונות, עברה המוקד של מודלים הפה כלפי לימוד המנגנון של angioproliferation של נגעים plexiform, שבה תפקידו של זרימת דם ריאתי מוגבר נחשבת בגורם מפעיל חשוב בהתפתחות של חמור ריאתי שיפוץ כלי הדם. אחד המודלים מכרסמים המבטיחים ביותר של זרימה ריאתי מוגבר היא כריתת ריאה השמאלית חד צדדית בשילוב עם "מכה שנייה" של MCT או Sugen. הסרת הריאה השמאלית מוביל זרימת דם ריאתי מוגבר, הסוערת ו שיפוץ כלי הדם. כיום, יש אין הליך מפורט של הניתוח כריתת ריאה אצל חולדות. מאמר זה מפרט פרוטוקול צעד אחר צעד של הליך ניתוחי כריתת ריאה, טיפול לאחר הניתוח בחולדות ספראג-Dawley זכר. בקצרה, החיה. הוא מורדם, פתיחת בית החזה. ברגע עורק הריאה השמאלית וריד ריאתי, סמפון הם דמיינו, הם מאתרים, הסרת הריאה השמאלית. החזה אז נעצמו וחילצנו החיה. הדם הוא נאלץ להפיץ רק על הריאה הימנית. זו הגברת לחץ בנימי הדם מוביל פרוגרסיב שיפוץ סגר עורקי הריאה קטן. הלהיט השני של MCT או Sugen הוא בשימוש שבוע לאחר הניתוח כדי לגרום בתפקוד אנדותל. השילוב של זרימת דם מוגברת ריאות, בתפקוד אנדותל מייצרת הפה חמורה. המגבלה העיקרית של הליך זה הוא כי הוא דורש מיומנויות כירורגית כללית.

על פי שיטת הסיווג המקובל, יתר לחץ דם ריאתי מאופיין בלחץ רשע עורק הריאה (mPAP) גבול עליון לחץ נורמלי עורק הריאה (קרי, 25 מ מ כספית). כריתת ריאה + קבוצה MCT, חמור הפה שפותחה על ידי יום 21 עם mPAP מוגברת (איור 1). MPAP מחושבת באמצעות הנוסחה:
<img...

Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

כריתת ריאה השמאלית בשילוב עם Monocrotaline או Sugen כמודל של יתר לחץ דם ריאתי אצל חולדות

כריתת ריאה מכרסם השמאלית היא טכניקה יקר במחקר יתר לחץ דם ריאתי. כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לתאר את הליך כריתת ריאה עכברוש וטיפול לאחר הניתוח כדי להבטיח מינימלי התחלואה והתמותה.

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

פרוטוקול זה הוא משמעותי כי זה מייצר את המודל הטוב ביותר האפשרי עבור יתר לחץ דם עורקי ריאתי. אף דגם אחר לא מייצר את נגעי הפלקסיפורם שנמצאו בחולים אנושיים של PAH. היתרון העיקרי הוא שאנחנו מכפילים את זרימת הדם בריאה הימנית ובסורק הריאה, גורמים לנזק אנדותל ומכריחים את הריאות לעבוד קשה כפליים.הקבוצה שלנו פיתחה מודל יעיל מאוד של יתר לחץ דם עורקי ריאתי לפתח טיפולים. מלבד יתר לחץ דם עורק ריאתי, שיטה זו יכולה להיות מועילה ברפואה רגנרטיבית יכול לתת תובנה למחלות אחרות עם זרימת ריאות מוגברת כמו מומים מולדים בלב או חולים שלאחר כריתת ריאות. עבור מישהו שמעולם לא ביצע טכניקה זו, העצה שלי היא לעקוב אחר הפרוטוקול בדיוק ולוודא המנתח יכול לראות בדיוק מה הם עושים.לאחר הרדמה של החולדה עם 4% isoflurane, החיה הוא צנרור באמצעות אור אווז סיבים אופטיים כדי להאיר את קנה הנשימה. הכנס קטטר 16-מד לתוך הגרון, ולהשתמש במראה קרה כדי לבחון את עיבוי הלחות בנשימה הנשיפה מן הקטטר כדי לאשר את הצנרור. חבר את החולדה למכונת ההנשמה והנח את החולדה מתחת למיקרוסקופ בתנוחת דטוביטוס הימנית על משטח חימום של 37 מעלות צלזיוס.אבטחו את הקדימות עם סרט הדבקה, ולהשתמש בקוצץ כדי לגלח את בית החזה השמאלי מאחורי הרגל הקדמית עד סוף בית החזה. נקו את העור החשוף בשלושה תווי יוד רציפים של 10%povidone ו-70% מגבוני אתנול, והניחו אוקסימטר דופק על כף הרגל של החולדה כדי לנטר את קצב הלב ורווית החמצן לאורך כל הניתוח. עכשיו, להתאים את המיקרוסקופ ולהביא את התצוגה הכירורגית לפוקוס.לאחר מכן, מניחים וילון סטרילי על גופו של החולדה ואת מגש המכשירים כדי ליצור סביבה סטרילית. ולבסוף, מניחים כלים סטריליים על מגש הכלים הסטרילי. כדי לבצע כריתת ריאות שמאלית, השתמש במספריים Cooley-Mayo ומטסות רקמת ג'רלד כדי לחתוך חור של שניים עד שלושה סנטימטרים בווילון הכירורגי, ולהשתמש בלהב כירורגי כדי לבצע חתך רוחבי באורך שני סנטימטרים בבית החזה השמאלי.השתמש מספריים Cooley-Mayo לחתוך כל שכבה של רקמה עד הצלעות והשרירים הבין צלי נחשפים. השתמש יתוש כדי להפוך חור דרך השריר של החלל הבין-חלק השלישי. באמצעות בדיקה דו-שלבי, להזיז את הריאה כדי לדמיין את עורק הריאה, ולהשתמש מספריים McPherson-Vannas איריס כדי לפתוח את השרירים הבין-ססטליים לרוחב של כ 1-2 ס"מ.מניחים מפשק קטן שמירה עצמית לתוך pleura שמאל להחזיק את הצלעות והשרירים פתוחים, ולהזיז את הריאה השמאלית התחתונה בבטן כדי לאפשר גישה לעורק הריאה הסופת. עבור קשירה של הסימפונות הראשית השמאלית ועורק הריאה, ראשית, לטעון Hemoclip בינוני לתוך המוליך קליפ קשירה ולהשתמש מדפים atraumatic Wangensteen כדי להרים בזהירות את החלק העליון של הריאה השמאלית כדי לחשוף את עורק הריאה. סגור את הקליפ והמוליך סביב העורק, דואג לא לסגור או לקרוע את וריד האזיקים השמאלי.ולפתוח את החתך עוד יותר באמצעות השקדים כדי להפריד את סיבי השריר. לאחר טעינת Hemoclip בינוני נוסף לתוך המוליך קליפ קשירה, להשתמש מדפים atraumatic ומדפים רקמה סטנדרטית כדי להרים את החלק התחתון של הריאה מתוך החתך עד הסימפונות הראשי השמאלי וריד ריאתי שמאל הם דמיינו. בזהירות ligate הסימפונות הראשית השמאלית וריד ריאתי יחד עם Hemoclip השני, ולהשתמש מספריים כדי להסיר את הריאה מבלי לחתוך או לקרוע את הקליפ.לאחר מכן, השתמש חתיכה קטנה של גזה סטרילית לספוג כל דם כדי לעצור כל דימום. השתמש במחזיק המחט ותפר פרולן 4-0 כדי לסגור את הצלעות ואת השרירים הבין-קומתיים. לפני סגירת השרירים הבין-חלקים, הכנס קטטר 16-מד לתוך חלל בית החזה הרחק החתך הכירורגי לתוך החלל הבין-חלק השביעי, ומיד להסיר את המחט, משאיר את הקטטר במקום.מניחים תפר 5-0 לתוך העור סביב צינור החזה, כך שכאשר צינור החזה מוסר, החור יהיה קשור סגור, ולקשור את התפרים כדי לסגור את הצלעות. סגור את העור ואת החלל התת עורי עם תפר פועל 5-0, ולהשתמש מזרק שלושה מיליליטר כדי לפנות את האוויר מן החלל pleural דרך קטטר כדי לשחזר את הלחץ השלילי הרגיל בבית החזה. השתמש במחזיק מחט כדי להדק מיד את הקטטר כדי למנוע מהאוויר לחזור לחלל בית החזה.הסר את הקטטר ולקשור את התפר כדי לסגור את החור. בקבוצת כריתת ריאות ומונוקורטלין, יתר לחץ דם ריאתי חמור מתפתח עד יום 21, כפי שממדים עלייה בלחץ עורק הריאה הממוצע בהשוואה לבעלי חיים מזויפים שאינם מטופלים. ב pneumonectomy בתוספת קבוצת סוגן, לחץ עורק הריאה הממוצע הוא שלוש פעמים גבוה יותר מאשר בקבוצת הביקורת.הלחץ סיסטולי החדר הימני הוא גם הרבה יותר גבוה הן בעלי חיים מונוקרולין ו סוגן מטופלים, בהשוואה לקבוצת הביקורת. בהמטוקסילין ואאוסין מוכתמים חלקי רקמת ריאות חולדה נורמלית, רווחים בין alveoli ומבני מכתשיים ניכרים, ואת כלי ברור של עובי נורמלי. בריאה יתר לחץ דם עורקי ריאתי, יש ראיות של שיפוץ, עיבוי של קירות הכלי, התכווצות חמורה של כלי הדם, דלקת ועורקים ריאתי מוקד.החיה צריכה לפצות על אובדן ריאה, ולכן חשוב להיות סבלניים במהלך תקופת ההחלמה. לפקח על הסימנים החיוניים ולתת נפח חמצן או ריאות נוסף לפי הצורך. סוגן יוצר אפופטוזיס אנדותל שהוא סימן רלוונטי קליני של יתר לחץ דם עורקי ריאתי.מודל כריתת הזרע השמאלית במכרסמים סלל את הדרך למדענים לחקור חריגות זרימה ולפתח טיפולים חדשניים ביתר לחץ דם עורקי ריאתי. בשל השימוש isoflurane, סוגן, ו / או MCT במודל זה, ציוד מגן אישי חייב להיות משוחק בכל עת.

Research

JoVE Journal

Medicine

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

Nephrectomy 5/6th בשילוב עם דיאטת מלח גבוהה ועיכוב תחמוצת החנקן synthase כדי לגרום למחלת כליות כרונית בחולדת לואיס

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

עורק ריאת הגדלת pulsatile תזרים משפר חוסר חמצן יתר לחץ דם ריאה בחזירונים

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

מודל של שיפוץ לב באמצעות התכווצות של אבי העורקים בבטן בחולדות

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

כירורגיה שאנט, צנתור לב ימני, וכלי הדם Morphometry במודל חולדה עבור נגרמת זרימה ריאתי עורקי יתר לחץ דם

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

אקו Murine של השמאל אטריום, אבי העורקים, ו עורק הריאה

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Re-ההשתלה ישיר של העורקים הכליליים שמאל לתוך אבי העורקים של מבוגרים עם אנומליים מוצא העורקים הכליליים שמאל מן העורק הריאתי (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

היצרות פרפור השמאלי המושרה Arterialization ורידית ריאתית יתר לחץ דם ריאתי קבוצה 2 בעכברוש

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

אינדוקציה ואפיון של יתר לחץ דם ריאתי בעכברים באמצעות מודל Hypoxia/SU5416

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

מודל של שיפוץ כלי דם הפוכים ביתר לחץ דם ריאתי עקב מחלת לב שמאלית על ידי התייבשות אבי העורקים בחולדות

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Multiple Intravenous Bolus Dosing and Invasive Hemodynamic Assessment in a Hypoxia-Induced Mouse Pulmonary Artery Hypertension Model

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive life-threatening disease, primarily affecting small pulmonary arterioles of the lung. Currently, ...