Name: the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00
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この原稿は、NIH によって支えられた 7R01 HL083078 10 は、アメリカ心臓協会 AHA 17SDG33370112 と、国家機関の健康 NIH K01 HL135474 にあるから、国家機関の健康 R01 HL133554 オリジナル作品に助成金を与える

次の手順は、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) シナイ山で、Icahn 医学部によって承認されています。すべてのラットは、シナイ山は、「ケアと実験動物使用ためのガイド」に準拠して人道的なケアを受けてください。
1. 手術のための準備
<ol><li>オートクレーブ クーリー-メイヨー曲線はさみ (大ばさみ) ストレート アイリスはさみ (ハサミ)、マクファーソン Vannas ア...

<ol>
	<li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension.">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761 (2016).</li><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective.">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li><li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension.">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li><li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension:+lessons+from+preclinical+animal+models.">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse:+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally.">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension.">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li><li>Happ&#233;, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats.">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li><li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling.">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li><li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension.">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li><li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt.">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li><li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension.">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li><li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics,+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li></ol>

PAH の影響を受けた肺で新生内膜形成、肺動脈の閉塞血管の増殖結果重度の血行動態、右心不全、早期死亡率7,8。血管壁への変更は、動脈と右心室の圧力の増加、血流への抵抗を高めます。PAH の初期の段階で通常 MCT または Sugen、管理後 3 週間ラット開発された内側の肥大、外の肥厚や小動脈および細動脈の muscularization のような非特異的な所見。?...

肺動脈高血圧症 (PAH) は肺血流量、血管抵抗の増加、炎症および肺の小さな血管1の改造の増加によって特徴付けられる進行と致命的な病気です。この改造は通常血管病変を妨害し、肺小動脈、血管収縮を引き起こし、右心室の後負荷2の増加を消し去ることで起因します。PAH のほとんどの成功した薬理学的治療法が存在しません。その結果、PAH 関連死亡のまま高.最近では、肺高血圧症の病態に関する研究のフォーカスに肺血流増加の役割は考慮した肺の開発の重要なトリガーとして血管血管増殖のメカニズムへ移動します。3,4を改造します。
肺高血圧症の動物モデルは、疾患の病態生理を説明し、薬、細胞、遺伝子、タンパク質配信のためのプラットフォームとして提供している、重要な洞察力を提供しています。従来、慢性低酸素血症による肺高血圧モデルと MCT 肺傷害モデルは、PAH の病態5を研究するために使用する主なモデルをされています。しかし、彼らは人間の患者に説明した差異と比較して改造の増加肺血流と新生内膜パターンを生成するのに十分ではありません。齧歯動物の慢性低酸素モデルは、小さな肺血管6の血管閉塞せず低酸素性血管収縮と血管壁の肥厚の結果します。さらに、低酸素状態は可逆的です。このように、低酸素血症モデルはまた重症 PAH を生成するのに十分ではありません。MCT 肺傷害モデルはいくつかの内皮機能不全を引き出すが、重度のプライマリ PAH を持つ人間で見つけられる複雑な血管のフェノタイプ病変ラット2では発症しません。また、MCT 投与ラットは PAH2からではなく、MCT による肺毒性、静脈閉塞性肝疾患、心筋炎から死ぬ傾向があります。最後に、肺全摘術だけでは時間の短い期間で新生内膜病変肺血管を生成するのに十分ではありません。全摘、術後後肺動脈圧7で最小限の標高があります。健康7対側の肺は、人間の肺全摘も容認されます。
ただし、それは肺血流増加を模倣し、結果肺血管リモデリング厳しい臨床 PAH に匹敵するので、MCT と Sugen 併用左肺全摘手順は有利。4 つ葉は、右ではなく、のみ 1 葉、左肺、肺の全摘術が実行されます。右の肺を削除した場合は、動物は呼吸不全を補正することになります。肺全摘術 MCT モデル改造の新生内膜パターンは扱われる運営動物7の 90% 以上で成長します。同様に、Sugen と肺全摘術の組み合わせによって重症 PAH、アンギオ フェノタイプの血管病変、増殖、アポトーシスおよび右心室機能不全の8によって特徴付けられます。左肺全摘手順は、PAH を誘発する他の外科手術と比較しても有利であります。以前大動脈, 下大静脈シャントまたは鎖骨下肺動脈吻合、肺への肺血流を増加するラットの説明モデルが含まれます。これらのモデルは、非常に複雑な7,9,10,11です。大動脈, 下大静脈シャントを行う動物の腹部が開かれます。シャント、肺だけではなくすべての腹部臓器への血流を増加腹部の大動脈に配置されます、PAH したがって、開発に長い時間がかかります。さらに、それは、全摘例の血流残存肺ダブルスに対し、シャントの血流を判断することは困難。鎖骨下肺動脈吻合では、多くの合併症もあります。静脈に動脈の血液の流れは、吻合部出血・血栓症につながることができます。大動脈下大静脈シャントのような吻合部の血流を判断することは困難です。さらに、血管外科のスキルを必要とする高価で難しい技術です。一方的な左肺全摘は血流と左肺内のせん断応力を 2 倍し、MCT や Sugen と組み合わせて、原因内皮細胞損傷8,である PAH の典型的な血行動態と病理組織学的所見12。
この原稿の目新しさは、左肺全摘ラットおよびこれらのモデルの技術と生理学的課題の議論の非常に詳細かつ包括的な外科手術で提示されます。このプロトコルが現在使用できないために、多くの研究者はモデルがあまりにも困難な使用と考えています。左肺全摘を行った者は、高い死亡率および動物、科学的評価を損なうことの不必要な損失に関連付けられている別の罹患率に直面しています。代わりに、多くは PAH を作成するのに MCT 注射、慢性的な低酸素症、またはちょうど肺全摘術などの古典的なモデルを使用します。ただし、これらのモデルは左肺全摘と MCT または Sugen の組み合わせよりもはるかに少ない効果的です。この記事の主な目的は、ラットの左一側肺全摘の最初詳細と再現性のある外科手術を提供し、PAH の最高の手術モデルを提供することです。この致命的な病気の病因を研究する重症 PAH のはるかに効果的な臨床的に関連するモデルを作成する研究者、MCT や SU5416 と左片側肺全摘のこのプロトコルを組み合わせることができます。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:739px;" width="739">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:223px;">Surgical Blade</td>
			<td style="width:111px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371215</td>
			<td style="width:252px;">Incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Forane (Isoflurane, USP)</td>
			<td style="width:111px;">Baxter</td>
			<td style="width:153px;">NDC 10019-360-40</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD Angiocath 16 G</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">381157</td>
			<td>intubation tube, chest tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD 1 mL Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">329652</td>
			<td>administer buprinex post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Biogel Surgeons Surgical Gloves</td>
			<td style="width:111px;">Biogel</td>
			<td style="width:153px;">30460-01</td>
			<td>sterile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Wahl BravMini+ Trimmer</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:153px;">CLP-41590 P</td>
			<td>shave surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">SU5416</td>
			<td style="width:111px;">Cayman Chemical</td>
			<td style="width:153px;">13342</td>
			<td>Sugen&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:111px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41723-02</td>
			<td>light for intubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgipro II 4-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">VP831X</td>
			<td>Closing intercostal muscles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Polysorb 5-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">GL-885</td>
			<td>Closing skin</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Medium Slide Top Induction Chamber</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">12570</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DRE Compact 150 Rodent Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">373</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:111px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">18000-00</td>
			<td>cauterizer to minimize bleeding</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:111px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:153px;">55-7040</td>
			<td>ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MouseSTAT Jr</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">MSTAT-JR</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate monitor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Mouse Paw Pulse Oximeter Sensor</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">SPO2-MSE</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate paw sensor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PhysioSuite RightTemp</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">PS-02</td>
			<td>temperature pad</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PVP Prep Solution</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">MDS093944</td>
			<td>Cleaning surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Poly-lined Drape</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">NON21002Z</td>
			<td>cover animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">SYR103010</td>
			<td>administer fluids post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;width:223px;">Microsurgical Kits, Integra&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">95042-540</td>
			<td style="width:252px;">surgical tools: plain wire speculum, double-ended probe, McPherson-Vannas Iris scissors straight, straight iris scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Hemostatic forceps - Micro-Jacobson-Mosquito</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">17-2602</td>
			<td>mosquito</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Buprenorphrine HCl 0.3 mg/mL</td>
			<td style="width:111px;">Par Pharmaceutical</td>
			<td style="width:153px;">NDC 42023-179-01</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Cooley-Mayo curved scissors</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">352090</td>
			<td>Large scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Gerald Tissue forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">351900</td>
			<td>forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Wangesnsteen Tissue Forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">342929</td>
			<td>atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Pilling Thin Vascular Needle Holder</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">354962DG</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Crotaline</td>
			<td style="width:111px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">C2401-1G</td>
			<td>MCT</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Surflash 20 G IV Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Terumo</td>
			<td style="width:153px;">SR*FF2051</td>
			<td style="width:252px;">For pressure reading during organ harvest</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">ADVantage PV System with 1.2 Fr Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Transonic Inc</td>
			<td style="width:153px;">ADV500</td>
			<td style="width:252px;">Record pulmonary artery and right ventricle pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Medium Hemoclip</td>
			<td style="width:111px;">Weck</td>
			<td style="width:153px;">523700</td>
			<td>ligate vessels</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Open Ligating Clip Applicator; Medium, curved</td>
			<td style="width:111px;">Weck Horizon</td>
			<td style="width:153px;">237081</td>
			<td>hemoclip applicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgical Microscope</td>
			<td style="width:111px;">Zeiss OPMI MD</td>
			<td style="width:153px;">1808</td>
			<td>magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats

このプロトコルでは、詳細に説明して正しい手順と必要な予防措置を正常に左肺全摘を行いモノクロ (MCT) の追加投与によるラットの PAH を誘発するまたは SU5416 (Sugen)。我々 はまた他の PAH のモデル研究でよく使用されるこれら 2 つのモデルを比較します。ここ数年で PAH の動物モデルのフォーカスに肺血流増加の役割は考慮した重度の開発の重要なトリガーとして肺の網状病変の angioproliferation のメカニズムを勉強へ移動します。血管リモデリング。肺血流の増加の最も有望な齧歯動物モデルの 1 つは、MCT の Sugen「2 番目のヒット」と組み合わせて片側左肺全摘術です。左の肺の除去は、増加および乱流の肺血流と血管リモデリングに します。現在、ラットの肺全摘手術の詳細な手順はありません。ここでは、肺全摘手術と雄 Sprague-dawley ラットの術後ケアの手順プロトコルについて詳しく説明します。簡単に言えば、動物の麻酔し、胸を開きます。左肺動脈、肺静脈、気管支を視覚化でき、それらが組み合わされて、左の肺が削除されます。胸が閉じられます、動物が回復しました。血液は右肺のみで循環させるとしています。この血管内圧の亢進は、進歩的な改造と肺小動脈の閉塞に します。MCT の Sugen 2 番目のヒットは、内皮機能不全を誘発する使用 1 週間後の手術です。肺と内皮機能不全の増加血流の組み合わせは、重症 PAH を生成します。この手順の主な制限は、一般的な手術技能が必要なことです。

受け入れられている分類体系では、肺高血圧症は、正常肺動脈圧 (すなわち、25 mm Hg) の上限を超える平均肺動脈圧 (mPAP) によって特徴付けられます。肺全摘術 + MCT グループでは、重症 PAH は日 21 増加 mPAP (図 1) によって開発されました。MPAP の式で計算されます。
<img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/59050/...

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The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

組み合わせてモノクロまたは Sugen 肺高血圧ラットのモデルとして左肺全摘

齧歯動物左肺全摘術は、肺高血圧症研究の貴重な手法です。ここでは、ラット肺全摘術の手順と最小限の罹患率と死亡率を確保するため術後のケアについて説明するためのプロトコルを提案する.

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

それは肺動脈性高血圧のための最良のモデルを生成するので、このプロトコルは重要です。他のモデルは、ヒトPAH患者に見られる神経叢病変を産生しない。主な利点は、右肺と肺動脈の血液の流れを2倍にし、内皮損傷を引き起こし、肺が2倍の硬い働きを強いられることです。我々のグループは、治療を開発するために肺動脈性高血圧症の非常に効率的なモデルを開発しました。肺動脈高血圧症に加えて、この方法は再生医療に役立ち、先天性心不全や肺切除後の患者のような肺流れの増加を伴う他の疾患に関する洞察を与えることができる。このテクニックを一度も行ったことがない人にとって、私のアドバイスは、プロトコルに正確に従い、外科医が彼らが何をしているのかを正確に見ることができるようにすることです。ラットを4%イオブルランで麻酔した後、動物は気管を照らす光ファイバーグースライトを使用して挿管されます。16ゲージのカテーテルを喉頭に挿入し、冷たい鏡を使用してカテーテルからの息を吐き出して、挿管を確認します。ラットを人工呼吸器に接続し、ラットを顕微鏡下の37°Cの加熱パッドの右の褥瘡の位置に置きます。前肢をテープで固定し、クリッパーを使用して前脚の後ろから胸部の端まで左胸部を剃ります。3つの連続した10%ポビドンヨウ素溶液と70%エタノールワイプで露出した皮膚をきれいにし、ラットの足にパルスオキシメーターを置き、手術中の心拍数と酸素飽和度を監視します。さて、顕微鏡を調整し、焦点に外科ビューをもたらします。次に、ラットの体と計器トレイの上に滅菌ドレープを置き、滅菌環境を作り出します。そして最後に、滅菌器具を滅菌器トレイに置きます。左肺切開術を行う場合は、クーリー・メイヨー・ハサミとジェラルド組織鉗子を使用して外科用ドレープの穴を2~3センチカットし、外科用ブレードを使用して左胸郭に2センチの横切開を行います。クーリーメイヨーは、肋骨と肋間筋が露出するまで組織の各層を切断するために使用します。蚊を使って、第3肋間空間の筋肉に穴を開けます。ダブルエンドプローブを使用して、肺を動かして肺動脈を視覚化し、マクファーソン・ヴァンナスアイリスはさみを使用して肋間筋を約1〜2センチメートルの幅に開きます。小さな自己保持レトラクターを左胸膜に入れ、肋骨と筋肉を開いたままにし、左肺を腹部の下に動かして肺動脈と気管支へのアクセスを可能にする。左主気管支および肺動脈の結紮のために、まず、中程度のヘモクリップを合字クリップアプリケーターにロードし、ワンゲンスティーンの外傷性鉗子を使用して、左肺の上部を慎重に持ち上げて肺動脈を露出させる。左アジゴス静脈を閉じたり破裂させたりしないように注意して、動脈の周りのクリップとアプリケーターを閉じます。扁桃を使用して切開をさらに開き、筋線維を分離する。別の媒体ヘモクリップを合字クリップアプリケーターにロードした後、非外傷性鉗子と標準的な組織鉗子を使用して、左の主気管支および左肺静脈が視覚化されるまで、肺の下部を切開から持ち上げる。左側の主気管支と肺静脈を第2のヘモクリップと一緒に慎重にリゲートし、はさみを使用してクリップを切断または引き裂くことなく肺を取り除きます。次に、任意の血液を吸収し、任意の出血を止めるために滅菌ガーゼの小片を使用しています。針ホルダーと4-0のプロレン縫合糸を使用して、肋骨と肋間筋を閉じます。肋間筋を閉じる前に、外科的切開から離れた胸腔に16ゲージのカテーテルを挿入し、第7肋間空間に挿入し、すぐに針を取り除き、カテーテルを所定の位置に残します。胸管が取り除かれると穴が閉じ、縫合糸を結んで肋骨を閉じるように、5-0縫合糸を皮膚と胸管の周りに置きます。5-0縫合糸で皮膚と皮下空間を閉じ、3ミリリットルの注射器を使用して胸郭の正常な負圧を回復させるために、胸膜腔を通して胸膜腔から空気を避難させます。針ホルダーを使用して、空気が胸腔に戻るのを防ぐために、カテーテルをすぐにクランプします。カテーテルを取り外し、縫合糸を結んで穴を閉じます。肺炎切除術および単crotaline群では、重度の肺高血圧症は、未処理の恥動物を制御するのと比較して平均肺動脈圧の増加によって証明されるように、21日目までに発症する。肺切除とSugen群では、平均肺動脈圧は対照群の3倍高い。右心室収縮期圧は、対照群と比較して、モノクロータリンおよびスゲン処理動物の両方ではるかに高い。ヘマトキシリンとエオシン染色された正常ラット肺組織切片では、肺胞と肺胞構造の間の空間が明らかであり、血管は明確で正常な厚さである。肺動脈性高血圧肺には、改造、血管壁の肥厚、血管の重度の収縮、炎症および焦点肺動脈炎の証拠がある。動物は肺を失うことを補う必要があるので、回復期間中に忍耐することが重要です。バイタルサインを監視し、必要に応じて追加の酸素または肺の体積を与えます。Sugenは、肺動脈性高血圧の臨床的関連徴候である内皮アポトーシスを作成します。げっ歯類の左肺切除術モデルは、科学者が流れの異常を研究し、肺動脈性高血圧の新しい治療法を開発する道を開いた。このモデルでは、イオブルラン、スーゲン、および/またはMCTを使用しているため、個人用保護具は常に着用する必要があります。

Research

JoVE Journal

Medicine

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

高塩ダイエットとルイスラットにおける慢性腎臓病を誘発するために一酸化窒素合成酵素阻害と組み合わせた5/6thの腎摘出

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

増加肺動脈の拍動流が豚における低酸素性肺高血圧を改善しました

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

ラットの腹部大動脈の収縮を通じて心臓リモデリングのモデル

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

流れ誘導性の肺動脈性肺高血圧症のためのラットモデルにおけるシャント手術、右心カテーテル、および血管形態計測

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

左心房、大動脈、肺動脈のマウス心エコー

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

肺動脈から左冠状動脈の異常原点と成人における大動脈内に左冠状動脈の直接再注入（ALCAPA）

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

左心房狭窄による肺静脈動脈化術とグループ 2 肺高血圧症ラット

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

低酸素/SU5416モデルを用いたマウスにおける肺高血圧の誘導と特徴づけ

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

ラットの大動脈剥離による左心疾患による肺高血圧症における逆血管リモデリングのモデル

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Multiple Intravenous Bolus Dosing and Invasive Hemodynamic Assessment in a Hypoxia-Induced Mouse Pulmonary Artery Hypertension Model

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive life-threatening disease, primarily affecting small pulmonary arterioles of the lung. Currently, ...