Name: the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

Dette manuskriptet ble støttet av NIH gir 7R01 HL083078-10 tilskudd fra American Heart Association AHA-17SDG33370112 og fra den nasjonale institutter for helse NIH K01 HL135474 til utleid og den nasjonale institutter helse R01 HL133554 til L.H.

Fremgangsmåtene nedenfor har blitt godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk Committee (IACUC) av Icahn School of Medicine i Sinai. Alle rotter mottatt Human omsorg i henhold til Mount Sinai "Guide og bruk av forsøksdyr".
1. forberedelse til operasjon
<ol><li>Autoclave Cooley-Mayo buet saks (store saks), rett Iris saks (liten saks), McPherson-Vannas Iris saks (tilbake saks), Wangensteen tissue tang (atraumatiske tang), Gerald tissue tang, vanlig wire spekulum (selv beholde festepunkt...

<ol>
	<li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension.">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761 (2016).</li><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective.">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li><li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension.">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li><li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension:+lessons+from+preclinical+animal+models.">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse:+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally.">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension.">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li><li>Happ&#233;, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats.">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li><li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling.">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li><li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension.">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li><li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt.">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li><li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension.">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li><li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics,+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li></ol>

I PAH-berørte lungene, vaskulære spredning med neointimal formasjon og utslettelse av pulmonary arteriene resultere i alvorlig hemodynamic endringer, høyre ventrikkel svikt og tidlig dødelighet7,8. Endringene i fartøyet vegger øke motstand mot blodstrøm, økende arterielle og høyre ventrikkel press. I de tidlige stadiene av PAH utviklet vanligvis 3 uker etter administrerer MCT eller Sugen, rotter uspesifikke histologiske endringer som mediale hypertrofi, ...

Pulmonal arteriell hypertensjon (PAH) er en progressiv og dødelig sykdom karakterisert ved en økning i lunge blodstrøm, økt vascular motstand, betennelse og ombygging av små lunge blodkar1. Denne remodeling vanligvis fører vaskulær lesjoner som hindrer og utslette liten pulmonary arteriene, forårsaker vasokonstriksjon og øke høyre ventrikkel afterload2. Få vellykket farmakologiske behandlinger for PAH eksisterer; som en konsekvens, PAH dødelighet fortsatt høyt. Nylig har fokus for forskning på pathobiology av pulmonal hypertensjon flyttet mot en mekanisme for angio-spredning der rollen økt lunge blodstrøm er regnet som en viktig utløser i utviklingen av lunge vaskulære remodeling3,4.
Dyr modeller av pulmonal hypertensjon har gitt kritisk innsikt som hjelper å forklare i patofysiologien av sykdom og har fungert som en plattform for narkotika, celle, gene og protein levering. Tradisjonelt, har kronisk hypoksi-indusert pulmonal hypertensjon modellen og MCT lungen skade modellen vært de viktigste modellene som brukes til å studere PAH patofysiologi5. Men er de ikke tilstrekkelig til å produsere økt lunge blodet flyt og neointimal mønster av remodeling sammenlignet endringer beskrevet i menneskelige pasienter. Kronisk hypoksi modellen i gnagere resulterer i jevning av fartøyet vegger med hypoxic vasokonstriksjon uten angio-utslettelse av små lunge fartøy6. I tillegg er hypoksi betingelsen reversibel. Dermed er hypoksi modellen heller ikke tilstrekkelig til å produsere alvorlig PAH. MCT lungen skade modellen framprovosere noen endotelial dysfunksjon men komplekse vaskulær obliterative lesjoner funnet hos mennesker med alvorlige primære PAH utvikle ikke i rotter2. I tillegg MCT-behandlet rotter har tendens til å dø fra MCT-indusert lunge toksisitet, veno-occlusive leversykdom og Myokarditt fremfor PAH2. Til slutt, i år alene er ikke tilstrekkelig til å produsere neointimal lesjoner i små lunge fartøyer i en kort periode. Etter år er det minimal høyde i pulmonal arteriell press7. Hos mennesker, er i år godt tolerert når kontralateral lunge er sunn7.
Venstre år prosedyren kombinert med MCT eller Sugen er imidlertid en fordel siden den etterligner økt lunge blodstrøm og resulterer i lunge vaskulær remodeling sammenlignes med alvorlig klinisk PAH. I år er utført på den venstre lungen, som har bare 1 lobe, i stedet for til høyre, som har fire lobes. Hvis høyre lunge ble fjernet, vil dyret kan ikke kompensere for åndedretts insuffisiens. I år-MCT-modellen utvikler neointimal mønster av remodeling i over 90% av drives-dyr behandlet7. Tilsvarende kombinasjonen av Sugen og år fører alvorlig PAH, preget av angio-obliterative vaskulære lesjoner, spredning, apoptose og RV dysfunksjon8. Venstre år prosedyren er også en fordel i forhold til andre kirurgiske prosedyrer å indusere PAH. Tidligere inkludere beskrevet modeller i rotter å øke lunge blodstrømmen til lungene by-pass aorto-caval shunt eller subclavia-lunge arterien anastomose. Disse modellene er ekstremt komplisert7,9,10,11. For å utføre en by-pass aorto-caval shunt, har dyrets bakkroppen åpnes. Shunt plasseres i abdominal aorta, som øker blodtilførselen til alle abdominal organer i stedet for bare i lungene, dermed PAH tar mye lengre tid å utvikle. I tillegg er det vanskelig å fastslå blodstrømmen gjennom shunt, mens med år blodstrømmen til gjenværende lunge Double. Subclavia-lunge arterien anastomose har også mange komplikasjoner. Flyten av arteriell blod i venen kan føre til blodpropp anastomose og blødning. Som by-pass aorto-caval shunt er det vanskelig å fastslå blodstrømmen gjennom anastomose. Det er et dyrt og vanskelig teknikk som krever vaskulær kirurgiske ferdigheter. Den ensidige venstre år dobler blodstrøm og skjæring stress i kontralateral lungene og, i kombinasjon med MCT eller Sugen, forårsaker typisk hemodynamic og histopathological resultatene av PAH som endothelial celle skade8, 12.
Nyheten av dette manuskriptet er presentert i svært detaljerte og omfattende kirurgisk protokollen til den venstre år i rotter og diskusjon om tekniske og fysiologiske utfordringene i disse modellene. Fordi denne protokollen ikke er tilgjengelig, tror mange etterforskerne modellen er for vanskelig. Etterforskerne som har utført den venstre år har møtt høy dødelighet og sykelighet priser forbundet med unødvendige tap av dyr, at vitenskapelig vurdering. I stedet bruker mange klassiske modeller som MCT injeksjon, kronisk hypoksi eller bare år for å opprette PAH. Disse modellene er imidlertid mindre effektiv enn kombinasjonen av MCT eller Sugen med den venstre år. Hovedformålet med denne artikkelen er å gi første detaljert og reproduserbar kirurgisk protokollen for den venstre ensidige år i rotter og gi det beste kirurgiske modellen for PAH. Kombinere denne protokollen for venstre ensidige år med MCT eller SU5416 vil tillate etterforskere til å opprette en langt mer effektiv og klinisk relevant modell av alvorlig PAH å studere patogenesen av denne dødelige sykdommen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:739px;" width="739">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:223px;">Surgical Blade</td>
			<td style="width:111px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371215</td>
			<td style="width:252px;">Incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Forane (Isoflurane, USP)</td>
			<td style="width:111px;">Baxter</td>
			<td style="width:153px;">NDC 10019-360-40</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD Angiocath 16 G</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">381157</td>
			<td>intubation tube, chest tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD 1 mL Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">329652</td>
			<td>administer buprinex post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Biogel Surgeons Surgical Gloves</td>
			<td style="width:111px;">Biogel</td>
			<td style="width:153px;">30460-01</td>
			<td>sterile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Wahl BravMini+ Trimmer</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:153px;">CLP-41590 P</td>
			<td>shave surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">SU5416</td>
			<td style="width:111px;">Cayman Chemical</td>
			<td style="width:153px;">13342</td>
			<td>Sugen&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:111px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41723-02</td>
			<td>light for intubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgipro II 4-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">VP831X</td>
			<td>Closing intercostal muscles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Polysorb 5-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">GL-885</td>
			<td>Closing skin</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Medium Slide Top Induction Chamber</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">12570</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DRE Compact 150 Rodent Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">373</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:111px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">18000-00</td>
			<td>cauterizer to minimize bleeding</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:111px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:153px;">55-7040</td>
			<td>ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MouseSTAT Jr</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">MSTAT-JR</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate monitor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Mouse Paw Pulse Oximeter Sensor</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">SPO2-MSE</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate paw sensor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PhysioSuite RightTemp</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">PS-02</td>
			<td>temperature pad</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PVP Prep Solution</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">MDS093944</td>
			<td>Cleaning surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Poly-lined Drape</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">NON21002Z</td>
			<td>cover animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">SYR103010</td>
			<td>administer fluids post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;width:223px;">Microsurgical Kits, Integra&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">95042-540</td>
			<td style="width:252px;">surgical tools: plain wire speculum, double-ended probe, McPherson-Vannas Iris scissors straight, straight iris scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Hemostatic forceps - Micro-Jacobson-Mosquito</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">17-2602</td>
			<td>mosquito</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Buprenorphrine HCl 0.3 mg/mL</td>
			<td style="width:111px;">Par Pharmaceutical</td>
			<td style="width:153px;">NDC 42023-179-01</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Cooley-Mayo curved scissors</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">352090</td>
			<td>Large scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Gerald Tissue forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">351900</td>
			<td>forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Wangesnsteen Tissue Forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">342929</td>
			<td>atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Pilling Thin Vascular Needle Holder</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">354962DG</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Crotaline</td>
			<td style="width:111px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">C2401-1G</td>
			<td>MCT</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Surflash 20 G IV Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Terumo</td>
			<td style="width:153px;">SR*FF2051</td>
			<td style="width:252px;">For pressure reading during organ harvest</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">ADVantage PV System with 1.2 Fr Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Transonic Inc</td>
			<td style="width:153px;">ADV500</td>
			<td style="width:252px;">Record pulmonary artery and right ventricle pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Medium Hemoclip</td>
			<td style="width:111px;">Weck</td>
			<td style="width:153px;">523700</td>
			<td>ligate vessels</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Open Ligating Clip Applicator; Medium, curved</td>
			<td style="width:111px;">Weck Horizon</td>
			<td style="width:153px;">237081</td>
			<td>hemoclip applicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgical Microscope</td>
			<td style="width:111px;">Zeiss OPMI MD</td>
			<td style="width:153px;">1808</td>
			<td>magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats

I denne protokollen, detalj vi riktig fremgangsmåter for trinnene og nødvendige forholdsregler å utføre en venstre år og indusere PAH i rotter med ekstra administrasjonen av monocrotaline (MCT) eller SU5416 (Sugen). Vi kan også sammenligne disse to modeller til andre PAH modeller brukt i forskning. I de siste årene, har fokus for PAH dyremodeller flyttet mot studere mekanismen av angioproliferation av plexiform lesjoner, der rollen økt lunge blodstrøm er regnet som en viktig utløser i utviklingen av alvorlige lunge vaskulær remodeling. En av de mest lovende gnager modellene av økt lunge flyt er den ensidige venstre år kombinert med en "andre hit" MCT eller Sugen. Fjerning av venstre lungene fører til økt og turbulente lunge blodstrøm og vaskulær remodeling. Foreløpig er det ingen detaljert prosedyre år kirurgi i rotter. Denne artikkelen omhandler en trinnvis protokoll år kirurgisk prosedyre og postoperativ omsorg i hannrotter Sprague-Dawley. Kort, dyret er anesthetized og brystet åpnes. Når den venstre lungearterien, pulmonary blodåre, og bronchus er visualisert, de er samskrevet og venstre lunge er fjernet. Brystet deretter lukket og dyret utvinnes. Blod er tvunget til å sirkulere bare på høyre lunge. Denne økte vaskulær trykket fører til en progressiv remodeling og okklusjon av små pulmonary arterier. Den andre slo MCT eller Sugen er brukt en uke etter operasjonen å indusere endotelial dysfunksjon. Kombinasjonen av økt blodstrøm i lungene og endotelial dysfunksjon produserer alvorlig PAH. Den største begrensningen i denne fremgangsmåten er at det krever de generelle kirurgiske ferdigheter.

Ifølge akseptert klassifikasjonssystem, er pulmonal hypertensjon preget av en mener lungearterien Press (mPAP) overskride øvre normal lungearterien Press (dvs. 25 mm Hg). I år + MCT gruppe, alvorlig PAH utviklet av dagen 21 med en økt mPAP (figur 1). MPAP beregnes formelen:
<img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/59050/59050eq1.jpg">
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1...

Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

Den venstre år kombinert med Monocrotaline eller Sugen som en modell for pulmonal hypertensjon i rotter

Den gnager venstre år er en verdifull teknikk i pulmonal hypertensjon forskning. Her presenterer vi en protokoll for å beskrive rat år prosedyre og postoperativ pleie å sikre minimal sykelighet og dødelighet.

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Denne protokollen er betydelig fordi den produserer best mulig modell for pulmonal arteriell hypertensjon. Ingen annen modell produserer pleksiformlesjoner som finnes hos humane PAH-pasienter. Den største fordelen er at vi dobler blodstrømmen i høyre lunge- og lungearterie, forårsaker endotelskade og tvinger lungene til å jobbe dobbelt så hardt.Vår gruppe har utviklet en svært effektiv modell av pulmonal arteriell hypertensjon for å utvikle terapeutiske midler. Foruten pulmonal arterie hypertensjon, denne metoden kan være nyttig i regenerativ medisin og kan gi innsikt i andre sykdommer med økt lungestrøm som medfødte hjertefeil eller post-pneumonectomy pasienter. For noen som aldri har utført denne teknikken, er mitt råd å følge protokollen nøyaktig og å sørge for at kirurgen kan se nøyaktig hva de gjør.Etter å ha bedøvet rotten med 4% isofluran, blir dyret intubert ved hjelp av et fiberoptisk gåslys for å belyse luftrøret. Sett et 16-gauge kateter inn i strupehodet, og bruk et kaldt speil for å observere kondensen av fuktigheten i utåndet pust fra kateteret for å bekrefte intubasjonen. Koble rotten til ventilatoren og plasser rotten under mikroskopet i riktig decubitusposisjon på en 37 graders Celsius varmepute.Fest forbenet med tape, og bruk clippers til å barbere venstre thorax fra bak forbenet til enden av brystkassen. Rengjør den eksponerte huden med tre sekvensielle 10% povidone jodoppløsning og 70% etanolservietter, og plasser et pulsoksymeter på rottens fot for å overvåke hjertefrekvensen og oksygenmetningen gjennom hele operasjonen. Juster nå mikroskopet og sett det kirurgiske synet i fokus.Deretter plasserer du en steril drapering over rottens kropp og instrumentbrettet for å skape et sterilt miljø. Og til slutt, plasser sterile instrumenter på det sterile instrumentbrettet. For å utføre en venstre pneumonektomi, bruk Cooley-Mayo saks og Gerald vev tang å kutte en to til tre centimeter hull i kirurgisk drap, og bruke et kirurgisk blad for å gjøre en to centimeter lang lateral snitt i venstre thorax.Bruk Cooley-Mayo saks for å kutte hvert lag av vev til ribbeina og interkostalrommuskulaturen er utsatt. Bruk en mygg for å lage et hull gjennom muskelen i det tredje interkostalromrommet. Ved hjelp av en dobbelt-end sonde, flytte lungen for å visualisere lungearterien, og bruke McPherson-Vannas Iris saks for å åpne interkostalrommuskulaturen til en omtrent en til to centimeter bredde.Plasser en liten selvbeholdende retractor i venstre pleura for å holde ribbeina og musklene åpne, og flytt venstre lunge lavere i magen for å gi tilgang til lungearterien og bronkiene. For ligation av venstre viktigste bronkier og lungearterie, først, laste en middels Hemoclip inn i en ligating klips applikator og bruke Wangensteen atraumatiske tang å forsiktig løfte den øvre delen av venstre lunge for å avsløre lungearterien. Lukk klippet og applikatoren rundt arterien, og ta vare på å ikke lukke eller bryte venstre azygos vene.Og åpne snittet videre ved hjelp av mandlene for å skille muskelfibrene. Etter å ha lastet en annen medium Hemoclip inn i ligating klips applikatoren, bruk atraumatiske tang og standard vevst tang for å løfte den nedre delen av lungene ut av snittet til venstre hovedbronchus og venstre lungevene visualiseres. Kå forsiktig de venstre hovedbronkiene og lungevenen sammen med den andre Hemoclip, og bruk saks til å fjerne lungene uten å kutte eller rive klemmen.Deretter bruker du et lite stykke steril gasbind for å absorbere blod og å stamme blødninger. Bruk nåleholderen og en 4-0 prolensutur for å lukke ribbeina og interkostalrommuskulaturen. Før du lukker interkostalrommuskulaturen, setter du inn et 16-gauge kateter i thoraxhulen vekk fra det kirurgiske snittet og inn i det syvende interkostalromrommet, og fjern umiddelbart nålen, slik at kateteret er på plass.Plasser en 5-0 sutur i huden og rundt brystrøret slik at når brystrøret er fjernet, vil hullet bli bundet lukket, og bind suturene for å lukke ribbeina. Lukk huden og det subkutane rommet med en løpende 5-0-sutur, og bruk en tre milliliter sprøyte for å evakuere luften fra pleuralhulen gjennom kateteret for å gjenopprette det normale undertrykket i thoraxen. Bruk en nåleholder til umiddelbart å klemme kateteret for å hindre at luft går tilbake i thoraxhulen.Fjern kateteret og bind suturen for å lukke hullet. I pneumonektomi- og monokrotalingruppen utvikler alvorlig pulmonal hypertensjon etter dag 21, noe som fremgår av en økning i gjennomsnittlig lungearterietrykk sammenlignet med å kontrollere ubehandlede sham dyr. I pneumonektomi pluss Sugen-gruppen er gjennomsnittlig lungearterietrykk tre ganger høyere enn i kontrollgruppen.Riktig ventrikulært systolisk trykk er også mye høyere hos både monokrotalin- og Sugen-behandlede dyr, sammenlignet med kontrollgruppen. I hematoksylin og eosin farget normal rotte lungevev seksjoner, mellomrom mellom alveoler og alveolær strukturer er tydelig, og fartøyene er klare og av en normal tykkelse. I lungearterien hypertensjon lunge, det er tegn på remodeling, fortykning av fartøyets vegger, alvorlig innsnevring av karene, og betennelse og fokal lungearteritt.Dyret må kompensere for å miste en lunge, så det er viktig å være tålmodig i gjenopprettingsperioden. Overvåk vitale tegn og gi ekstra oksygen- eller lungevolum etter behov. Sugen skaper endotelapoptose som er klinisk relevant tegn på pulmonal arteriell hypertensjon.Den venstre pneumonektomimodellen hos gnagere har banet vei for forskere å studere strømningsabnormiteter og utvikle nye behandlinger for pulmonal arteriell hypertensjon. På grunn av bruk av isofluran, Sugen og/eller MCT i denne modellen, må personlig verneutstyr brukes til enhver tid.

Research

JoVE Journal

Medicine

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6th Nephrectomy i kombinasjon med høy Salt Kosthold og nitrogenoksidsyntase Hemming å indusere kronisk nyresykdom i Lewis Rat

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Økende lungearterien Pulsatile Flow Forbedrer hypoksisk pulmonal hypertensjon i Piglets

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

En modell av Cardiac Ombygging Gjennom Innsnevring av hovedpulsåren i Rats

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt Surgery, Høyre hjertekateterisering, og Vaskulær morfometri i en rottemodell for Flow-indusert pulmonal arteriell hypertensjon

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine Ekkokardiografi av Venstre Atrium, aorta, og lungearterien

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkte Re-implantasjon av Venstre koronar inn i aorta hos voksne med Anomalous opprinnelse Venstre koronar fra lungearterien (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Venstre Atrial stenose indusert lunge venøse Arterialization og gruppe 2 pulmonal hypertensjon i rotte

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

Induksjon og karakterisering av pulmonal hypertensjon hos mus ved bruk av hypoksi/SU5416-modellen

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

En modell for omvendt vaskulær ombygging i lungehypertensjon på grunn av venstre hjertesykdom ved aortisk debanding hos rotter

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Multiple Intravenous Bolus Dosing and Invasive Hemodynamic Assessment in a Hypoxia-Induced Mouse Pulmonary Artery Hypertension Model

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive life-threatening disease, primarily affecting small pulmonary arterioles of the lung. Currently, ...