Name: the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats
Uploaded: 2019-03-08T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

Эта рукопись была поддержана NIH Грант 7R01 HL083078-10 грантов от Американской ассоциации сердца AHA-17SDG33370112 и национальных институтах здравоохранения НИЗ K01 HL135474 для я.с. и от национальных институтов здоровья R01 HL133554 в. и.

Описанные ниже процедуры были одобрены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) Icahn школы медицины на горе Синай. Все крысы получили гуманной помощи в соответствии с горы Синай «Руководство по уходу и использования лабораторных животных».
1. Подготовк...

<ol>
	<li>Leopold, J., Maron, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+Pulmonary+Vascular+Remodeling+in+Pulmonary+Arterial+Hypertension.">Molecular Mechanisms of Pulmonary Vascular Remodeling in Pulmonary Arterial Hypertension.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (5), 761 (2016).</li><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective.">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 302 (4), L363-L369 (2012).</li><li>van Albada, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension.">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> European Respiratory Journal. 26 (3), 487-493 (2005).</li><li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A. J., Berger, R. M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension:+lessons+from+preclinical+animal+models.">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: lessons from preclinical animal models.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (1), L1-L14 (2013).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Cahill, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiological+basis+of+chronic+hypoxic+pulmonary+hypertension+in+the+mouse:+vasoconstrictor+and+structural+mechanisms+contribute+equally.">The pathophysiological basis of chronic hypoxic pulmonary hypertension in the mouse: vasoconstrictor and structural mechanisms contribute equally.</a> Experimental Physiology. 97 (6), 796-806 (2012).</li><li>Okada, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension.">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> American Journal of Pathology. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li><li>Happ&#233;, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats.">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li><li>Tanaka, Y., Schuster, D. P., Davis, E. C., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+vascular+injury+and+hemodynamics+in+rat+pulmonary+artery+remodeling.">The role of vascular injury and hemodynamics in rat pulmonary artery remodeling.</a> Journal of Clinical Investigation. 98 (2), 434-442 (1996).</li><li>Nishimura, T., Faul, J. L., Berry, G. J., Kao, P. N., Pearl, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+surgical+aortocaval+fistula+on+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension.">Effect of a surgical aortocaval fistula on monocrotaline-induced pulmonary hypertension.</a> Critical Care Medicine. 31 (4), 1213-1218 (2003).</li><li>Linardi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+and+pulmonary+vascular+remodeling+induced+by+pulmonary+overflow+in+a+chronic+model+of+pretricuspid+shunt.">Ventricular and pulmonary vascular remodeling induced by pulmonary overflow in a chronic model of pretricuspid shunt.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 2609-2617 (2014).</li><li>White, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plexiform-like+lesions+and+increased+tissue+factor+expression+in+a+rat+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension.">Plexiform-like lesions and increased tissue factor expression in a rat model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 293 (3), L583-L590 (2007).</li><li>Samson, N., Paulin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics,+inflammation+and+metabolism+in+right+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Epigenetics, inflammation and metabolism in right heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Pulmonary Circulation. 7 (3), 572-587 (2017).</li></ol>

В Пау пострадавших легких сосудистая распространения с neointimal формирования и облитерация легочных артерий привести серьезные изменения гемодинамики, недостаточность правого желудочка и ранней смертности7,8. Изменения в стенках сосудов увеличение сопро...

Легочная артериальная гипертензия (ПАУ) является прогрессивным и смертельной болезнью, характерно увеличение легочного кровотока, повышение сосудистого сопротивления, воспаление и ремонт мелких кровеносных сосудов легких1. Эта реконструкция обычно приводит к сосудистых поражений, которые препятствуют и уничтожить малые легочной артерии, вызывает вазоконстрикцию и увеличения правого желудочка afterload2. Существует несколько успешных фармакологических препаратов ПАУ; как следствие, ПАУ-смертность остается высокой. Недавно в центре внимания исследований по pathobiology легочной гипертензии был перенесен на механизм распространения ангио-в котором роль увеличение легочного кровотока рассматривается как важный триггер в развитии легочной сосудистой Ремоделирование3,4.
Животные модели легочной гипертензии предоставили критической идеи, которые помогают объяснить Патофизиология болезни и служил в качестве платформы для наркотиков, клеток, генов и белков доставки. Традиционно хроническая гипоксия индуцированной легочной гипертензии и модели MCT легких травм были основные модели, используемые для изучения патофизиологии ПАУ5. Однако они не являются достаточно для производства более легких кровь потока и neointimal шаблон ремоделирования, по сравнению с изменения, описанные в человека пациентов. Модели хронической гипоксии на грызунах приводит утолщение стенок сосудов с гипоксическая вазоконстрикция без ангио облитерации мелких легочных сосудов6. Кроме того состояние гипоксии является обратимым. Таким образом модель гипоксии также не достаточно для производства тяжелой ПАУ. Модель повреждений легких MCT выявить некоторые эндотелиальной дисфункции, но комплекс сосудистой облитерирующий убытокам найденным в людей с тяжелой первичной ПАУ не развиваются в крыс2. Кроме того крысы, MCT-лечение, как правило, умирают от токсичности MCT-индуцированной легких, заболевания печени Вено окклюзионной и миокардит, а не от ПАУ2. Наконец пневмонэктомия одиночку недостаточно производить neointimal поражений в мелких легочных сосудов в короткий период времени. После пневмонэктомии существует минимальная высота легочного артериального давления7. В организме человека когда контралатерального легкого здорового7пневмонэктомия хорошо переносится.
Однако процедура левой пневмонэктомия, в сочетании с MCT или Sugen выгодно, так как он имитирует увеличение легочного кровотока и приводит к легочного сосудистого ремоделирования сопоставимы с тяжелой клинической ПАУ. Пневмонэктомия выполняется на левого легкого, которая имеет только 1 доли, а не на право, которое имеет четыре лопастями. Если было удалено правое легкое, животное не сможет компенсировать дыхательной недостаточности. В модели пневмонэктомия MCT neointimal шаблон ремоделирования развивается в более чем 90% эксплуатируемых животных лечить7. Кроме того сочетание Sugen и пневмонэктомия приводит к тяжелой ПАУ, характеризуется ангио облитерирующий сосудистых поражений, распространения, апоптоз и RV дисфункции8. Левый пневмонэктомия процедура также выгодно по сравнению с другими хирургических процедур, чтобы побудить ПАУ. Ранее описанных моделей в крыс для увеличения легочного кровотока в легких включают аорто caval шунта или подключичной легочной артерии анастомоза. Эти модели являются чрезвычайно сложными7,9,10,11. Чтобы выполнить аорто caval шунта, животного живот должен быть открыт. Шунт помещается в брюшной аорты, что увеличивает приток крови к всех органов брюшной полости, а не только легкие, таким образом, ПАУ занимает гораздо больше времени для разработки. Кроме того трудно определить поток крови через шунт, тогда как с пневмонэктомия крови поступать остальные пары легких. Анастомоз подключичной легочной артерии также имеет много осложнений. Приток артериальной крови в Вену может привести к тромбоз анастомоза и кровотечения. Как аорто caval шунт трудно определить поток крови через анастомоза. Кроме того это дорого и сложно технику, которая требует сосудистой хирургических навыков. Одностороннее левой пневмонэктомия удваивает поток крови и касательное напряжение в контралатеральной легких и, в сочетании с MCT или Sugen, вызывает типичные гемодинамические и гистопатологические выводы ПАУ, которая является эндотелиальных клеток повреждения8, 12.
Новизна этой рукописи представлены в весьма подробный и всеобъемлющий хирургический протокол левой пневмонэктомия крыс и в обсуждении технических и физиологических проблем этих моделей. Потому что этот протокол в настоящее время не доступен, многих детективов считаем, что модель является слишком сложно использовать. Следователи, которые выполнили левой пневмонэктомия столкнулись с высокой смертности и заболеваемости, связанный с ненужной гибели животных, ущерба для научной оценки. Вместо этого многие будут использовать классические модели, такие как MCT инъекций, хроническая гипоксия или просто пневмонэктомия для создания ПАУ. Однако эти модели являются гораздо менее эффективными, чем сочетание MCT или Sugen с левой пневмонэктомия. Основная цель этой статьи заключается в предоставить первый подробный и воспроизводимые хирургический протокол для левой односторонней пневмонэктомия крыс и лучших хирургических модель ПАУ. Сочетая этот протокол для левой односторонней пневмонэктомии с MCT или SU5416 позволит следователей для создания гораздо более эффективным и клинически значимые модели тяжелых ПАУ для изучения патогенеза этой смертельной болезни.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:739px;" width="739">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:223px;">Surgical Blade</td>
			<td style="width:111px;">Bard-Parker</td>
			<td style="width:153px;">371215</td>
			<td style="width:252px;">Incision</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Forane (Isoflurane, USP)</td>
			<td style="width:111px;">Baxter</td>
			<td style="width:153px;">NDC 10019-360-40</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD Angiocath 16 G</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">381157</td>
			<td>intubation tube, chest tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">BD 1 mL Insulin Syringe</td>
			<td style="width:111px;">BD</td>
			<td style="width:153px;">329652</td>
			<td>administer buprinex post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Biogel Surgeons Surgical Gloves</td>
			<td style="width:111px;">Biogel</td>
			<td style="width:153px;">30460-01</td>
			<td>sterile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Wahl BravMini+ Trimmer</td>
			<td style="width:111px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:153px;">CLP-41590 P</td>
			<td>shave surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">SU5416</td>
			<td style="width:111px;">Cayman Chemical</td>
			<td style="width:153px;">13342</td>
			<td>Sugen&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Fiber Optic Illuminator</td>
			<td style="width:111px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:153px;">EW-41723-02</td>
			<td>light for intubation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgipro II 4-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">VP831X</td>
			<td>Closing intercostal muscles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Polysorb 5-0 Suture</td>
			<td style="width:111px;">Covidien</td>
			<td style="width:153px;">GL-885</td>
			<td>Closing skin</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Medium Slide Top Induction Chamber</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">12570</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">DRE Compact 150 Rodent Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:111px;">DRE Veterinary</td>
			<td style="width:153px;">373</td>
			<td>oxygen &#38; isoflurane delivery</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:111px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:153px;">18000-00</td>
			<td>cauterizer to minimize bleeding</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:111px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:153px;">55-7040</td>
			<td>ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">MouseSTAT Jr</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">MSTAT-JR</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate monitor</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Mouse Paw Pulse Oximeter Sensor</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">SPO2-MSE</td>
			<td style="width:252px;">pulse oximeter &#38; heart rate paw sensor</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PhysioSuite RightTemp</td>
			<td style="width:111px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:153px;">PS-02</td>
			<td>temperature pad</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">PVP Prep Solution</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">MDS093944</td>
			<td>Cleaning surgical site</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Poly-lined Drape</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">NON21002Z</td>
			<td>cover animal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">3 mL syringe</td>
			<td style="width:111px;">Medline</td>
			<td style="width:153px;">SYR103010</td>
			<td>administer fluids post-operatively</td>
		</tr>
		<tr height="83">
			<td height="83" style="height:83px;width:223px;">Microsurgical Kits, Integra&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">95042-540</td>
			<td style="width:252px;">surgical tools: plain wire speculum, double-ended probe, McPherson-Vannas Iris scissors straight, straight iris scissors</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Hemostatic forceps - Micro-Jacobson-Mosquito</td>
			<td style="width:111px;">Miltex</td>
			<td style="width:153px;">17-2602</td>
			<td>mosquito</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Buprenorphrine HCl 0.3 mg/mL</td>
			<td style="width:111px;">Par Pharmaceutical</td>
			<td style="width:153px;">NDC 42023-179-01</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Cooley-Mayo curved scissors</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">352090</td>
			<td>Large scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Gerald Tissue forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">351900</td>
			<td>forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Wangesnsteen Tissue Forceps</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">342929</td>
			<td>atraumatic forceps</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Pilling Thin Vascular Needle Holder</td>
			<td style="width:111px;">Pilling</td>
			<td style="width:153px;">354962DG</td>
			<td>needle holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Crotaline</td>
			<td style="width:111px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:153px;">C2401-1G</td>
			<td>MCT</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Surflash 20 G IV Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Terumo</td>
			<td style="width:153px;">SR*FF2051</td>
			<td style="width:252px;">For pressure reading during organ harvest</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">ADVantage PV System with 1.2 Fr Catheter</td>
			<td style="width:111px;">Transonic Inc</td>
			<td style="width:153px;">ADV500</td>
			<td style="width:252px;">Record pulmonary artery and right ventricle pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Medium Hemoclip</td>
			<td style="width:111px;">Weck</td>
			<td style="width:153px;">523700</td>
			<td>ligate vessels</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:223px;">Open Ligating Clip Applicator; Medium, curved</td>
			<td style="width:111px;">Weck Horizon</td>
			<td style="width:153px;">237081</td>
			<td>hemoclip applicator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Surgical Microscope</td>
			<td style="width:111px;">Zeiss OPMI MD</td>
			<td style="width:153px;">1808</td>
			<td>magnification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the left pneumonectomy combined with monocrotaline or sugen as a model of pulmonary hypertension in rats

В этом протоколе, мы подробно правильные процессуальные шаги и необходимые меры предосторожности, чтобы успешно выполнять левый пневмонэктомия и побудить ПАУ в крыс с дополнительным администрирование monocrotaline (MCT) или SU5416 (Sugen). Мы также сравнить эти две модели для других моделей ПАУ, широко используется в научных исследованиях. В последние несколько лет в центре внимания животных моделей ПАУ перешла к изучению механизма angioproliferation сплетениевидный поражений, в которых роль увеличение легочного кровотока рассматривается как важный триггер в развитии тяжелой легочной сосудистого ремоделирования. Одной из наиболее перспективных моделей грызунов увеличение легочного потока является одностороннее левой пневмонэктомия, в сочетании с «вторым хитом «MCT или Sugen. Удаление левого легкого приводит к увеличению и турбулентного легочного кровотока и сосудистого ремоделирования. В настоящее время не существует подробной процедуры пневмонэктомия хирургии в крыс. Эта статья подробно шаг за шагом протокол пневмонэктомия хирургической операции и послеоперационного ухода в крысах Sprague-Dawley. Вкратце наркоз животным и грудь будет открыт. После того, как визуализируются левой легочной артерии, легочная Вена и бронхов, они являются лигируют и левое легкое удаляется. Грудь, затем закрыт, и животное выздоровел. Кровь вынуждена распространить только на правом легком. Это повышение сосудистого давления приводит к прогрессивной ремоделирования и закупорки мелких легочных артерий. Второй хит MCT или Sugen — используется одной недели после операции побудить эндотелиальной дисфункции. Сочетание увеличение кровотока в легких и дисфункция эндотелия производит тяжелые ПАУ. Основным ограничением этой процедуры является, что она требует общих хирургических навыков.

Согласно принятой классификации системы легочная гипертензия характеризуется средней легочной артерии давления (ДЛАср), превышающих верхние пределы давления нормальной легочной артерии (т.е. 25 мм Hg). В пневмонэктомия + группа MCT тяжелой ПАУ разработанный 21 день с повы?...

Watch this Scientific Journal Video about The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats at JoVE.com

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

Левый пневмонэктомия, в сочетании с Monocrotaline или Sugen как модель легочной гипертензии у крыс

Грызунов левой пневмонэктомия — это ценный метод исследований легочной гипертензии. Здесь мы представляем протокол для описания процедуры пневмонэктомия крыса и послеоперационный уход для обеспечения минимальной заболеваемости и смертности.

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Этот протокол имеет важное значение, поскольку он производит наилучшие возможные модели для легочной артериальной гипертензии. Никакая другая модель не производит плексиформных поражений, найденных у пациентов с ПАУ человека. Основным преимуществом является то, что мы удваиваем поток крови в правом легком и легочной артерии, вызывая эндотелиальный ущерб и заставляя легкие работать в два раза больше.Наша группа разработала высокоэффективную модель легочной артериальной гипертензии для разработки терапевтических средств. Помимо легочной артерии гипертонии, этот метод может быть полезным в регенеративной медицине и может дать представление о других заболеваний с увеличением легочного потока, как врожденные пороки сердца или после пневмонэктомии пациентов. Для тех, кто никогда не выполнял эту технику, мой совет заключается в том, чтобы следовать протоколу точно и убедиться, что хирург может видеть именно то, что они делают.После анестезии крысы с 4%isoflurane, животное интубировано с помощью волоконно-оптического гусиного света для освещения трахеи. Вставьте катетер 16-го калибра в гортань и используйте холодное зеркало для наблюдения за конденсацией влажности в выдыхаемом дыхании от катетера для подтверждения итонации. Подключите крысу к аппарату искусственной вентиляции легких и поместите крысу под микроскоп в правом положении декубита на 37-градусную грелку По Цельсию.Закрещите передние конечности лентой и используйте клиперы, чтобы побрить левую грудную клетку из-за передней ноги до конца грудной клетки. Очистите открытые кожи с тремя последовательными 10%povidone йода раствора и 70% этанола салфетки, и место пульс-оксиметр на ногу крысы для мониторинга сердечного ритма и насыщения кислородом на протяжении всей операции. Теперь отрегулируйте микроскоп и сосредоточьте хирургический вид.Затем поместите стерильную драпировку над телом крысы и поднос для инструментов, чтобы создать стерильную среду. И, наконец, поместите стерильные инструменты на стерильный лоток инструмента. Для выполнения левой пневмонэктомии используйте ножницы Кули-Майо и ткани Джеральда, чтобы вырезать двух-три сантиметра отверстия в хирургической драпировке, и использовать хирургическое лезвие, чтобы сделать двухметровый боковой разрез в левой грудной клетке.Используйте ножницы Кули-Майо, чтобы сократить каждый слой ткани до тех пор, пока ребра и межреберные мышцы подвергаются воздействию. Используйте комара, чтобы сделать отверстие через мышцы третьего межреберных пространстве. Используя двойной зонд, переместить легкие, чтобы визуализировать легочную артерию, и использовать McPherson-Vannas Iris ножницы, чтобы открыть межреберные мышцы примерно на один-два сантиметра шириной.Поместите небольшой самоудержимый втягивающий в левую плевру, чтобы держать ребра и мышцы открытыми, и переместить левое легкое ниже в брюшной полости, чтобы обеспечить доступ к легочной артерии и бронхов. Для перевязки левого основного бронха и легочной артерии, во-первых, загрузить средний гемоклип в перевязку клип аппликатора и использовать Wangensteen атравматические миппы тщательно поднять верхнюю часть левого легкого подвергать легочной артерии. Закройте клип и аппликатор вокруг артерии, заботясь, чтобы не закрыть или разорвать левую вену azygos.И открыть разрез далее с помощью миндалин, чтобы отделить мышечные волокна. После загрузки другого среднего гемоклипа в лигатинг клип аппликатор, использовать атрауматические жимы и стандартные ткани миппы, чтобы поднять нижнюю часть легкого из разреза, пока левый основной бронх и левой легочной вены визуализированы. Тщательно ligate левой основной бронхов и легочной вены вместе со вторым гемоклип, и использовать ножницы, чтобы удалить легкое без резки или разрыв клипа.Затем используйте небольшой кусочек стерильной марли, чтобы поглощать любую кровь и остановить кровотечение. Используйте держатель иглы и 4-0 пролен шов, чтобы закрыть ребра и межреберные мышцы. Перед закрытием межреберных мышц вставьте катетер 16-го калибра в грудную полость вдали от хирургического разреза и в седьмое межреберное пространство и немедленно удалите иглу, оставив катетер на месте.Поместите 5-0 шва в кожу и вокруг грудной трубки, так что, когда грудная трубка удаляется, отверстие будет связано закрыты, и связать швы, чтобы закрыть ребра. Закройте кожу и подкожное пространство с запуском 5-0 шва, и использовать три миллилитров шприца для эвакуации воздуха из плевральной полости через катетер, чтобы восстановить нормальное негативное давление в грудной клетке. Используйте держатель иглы, чтобы немедленно зажать катетер, чтобы предотвратить воздух от обратно в грудной полости.Снимите катетер и завяжут шов, чтобы закрыть отверстие. В группе пневмонэктомии и монокроталина тяжелая легочная гипертензия развивается к 21-му дню, о чем свидетельствует повышение среднего давления легочной артерии по сравнению с контролем необработанных фиктивных животных. В пневмонэктомии плюс группа Sugen среднее давление легочной артерии в три раза выше, чем в контрольной группе.Правое желудочковое систолическое давление также гораздо выше как у монокроталинов, так и у суген-обработанных животных, по сравнению с контрольной группой. В гематоксилин и эозин окрашенных нормальных крыс легочной ткани разделов, пространства между альвеолами и альвеолярных структур очевидны, и сосуды ясны и нормальной толщины. В легочной артерии гипертонии легких, есть признаки ремоделирования, утолщение стенок сосудов, сильное сужение сосудов, а также воспаление и координационный легочный артерит.Зверь должен компенсировать потерю легкого, поэтому важно быть терпеливым в период восстановления. Мониторинг жизненно важных признаков и дать дополнительный объем кислорода или легких по мере необходимости. Сюген создает эндотелиальный апоптоз, который является клиническим соответствующим признаком легочной артериальной гипертензии.Левая модель пневмонэктомии у грызунов проложила путь для ученых для изучения аномалий потока и разработки новых методов лечения легочной артериальной гипертензии. Благодаря использованию изофлюрана, сугена и/или MCT в этой модели, средства индивидуальной защиты должны носиться в обязательное время.

Research

JoVE Journal

Medicine

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6th нефрэктомии в сочетании с высоким содержанием соли и азотной ингибирование синтазы, чтобы побудить хронического заболевания почек у крыс Льюиса

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Увеличение легочной артерии Ударные потока повышает гипоксического легочная гипертензия у поросят

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Модель ремоделирования сердца Через сужением брюшную аорту у крыс

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Шунтов, катетеризация правых отделов сердца, и сосудистому Морфометрия в крысиной модели для Flow-индуцированной легочной артериальной гипертензии

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Мышиные эхокардиографии из левого предсердия, аорта и легочная артерия

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Прямой Re-имплантация левой коронарной артерии в аорту у взрослых с аномальным происхождения левой коронарной артерии от легочной артерии (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Левого предсердий стенозом индуцированной легочных вен Arterialization и группа 2 легочной гипертензии в крыса

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

Индукция и характеристика легочной гипертензии у мышей с использованием модели Hypoxia/SU5416

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

Модель обратного ремоделирования сосудов при легочной гипертензии из-за болезни левого сердца при деформировании аорты у крыс

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Multiple Intravenous Bolus Dosing and Invasive Hemodynamic Assessment in a Hypoxia-Induced Mouse Pulmonary Artery Hypertension Model

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a progressive life-threatening disease, primarily affecting small pulmonary arterioles of the lung. Currently, ...