Name: a protocol for transcranial photobiomodulation therapy in mice
Uploaded: 2018-11-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Protocol for Transcranial Photobiomodulation Therapy in Mice at JoVE.com

이 작품 S.S. e Tabriz 대학 의료 과학 (no. 61019 부여)에서 교부 금에 의해 지원 되었다 그리고 LiteCure LLC, 뉴어크, 드, 미국 L.D.T.에서에서 게시 부여 저자는 면역학 부 및 그들의 친절에 Tabriz 대학 의료 과학의 교육 개발 센터 (EDC) 감사 하 고 싶습니다.

모든 절차의 관리 및 건강의 국가 학회 (NIH;의 실험 동물의 사용에 대 한 가이드에 따라 실시 했다 게시 번호 85-23, 개정 1985) Tabriz 대학 의료 과학의 지역 윤리 위원회에 의해 승인.
주의:이 프로토콜 클래스 3B 레이저의 응용 프로그램을 포함 하 고 적절 한 교육 및 안전 지침을 준수 해야 합니다. 클래스 3B 레이저 심각 하 게 눈을 손상 시킬 수 있습니다 그리고 피부를 열 수 있?...

<ol>
	<li>Chung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nuts+and+bolts+of+low-level+laser+(light)+therapy.">The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy.</a> Annals of Biomedical Engineering. 40 (2), 516-533 (2012).</li><li>Salehpour, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+Photobiomodulation+Therapy:+a+Narrative+Review.">Brain Photobiomodulation Therapy: a Narrative Review.</a> Molecular Neurobiology. , 1-36 (2018).</li><li>Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shining+light+on+the+head:+photobiomodulation+for+brain+disorders.">Shining light on the head: photobiomodulation for brain disorders.</a> BBA Clinical. 6, 113-124 (2016).</li><li>Karu, T. I., Pyatibrat, L. V., Kolyakov, S. F., Afanasyeva, N. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Absorption+measurements+of+a+cell+monolayer+relevant+to+phototherapy:+reduction+of+cytochrome+c+oxidase+under+near+IR+radiation.">Absorption measurements of a cell monolayer relevant to phototherapy: reduction of cytochrome c oxidase under near IR radiation.</a> Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology. 81 (2), 98-106 (2005).</li><li>de Freitas, L. F., Hamblin, M. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondria+take+center+stage+in+aging+and+neurodegeneration.">Mitochondria take center stage in aging and neurodegeneration.</a> Annals of Neurology. Official Journal of the American Neurological Association and the Child Neurology Society. 58 (4), 495-505 (2005).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-level+laser+therapy+for+beta+amyloid+toxicity+in+rat+hippocampus.">Low-level laser therapy for beta amyloid toxicity in rat hippocampus.</a> Neurobiology of Aging. 49, 165-182 (2017).</li><li>Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+open+field+maze+to+measure+locomotor+and+anxiety-like+behavior+in+mice.">Use of the open field maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e52434 (2015).</li><li>Rosenfeld, C. S., Ferguson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Barnes+maze+testing+strategies+with+small+and+large+rodent+models.">Barnes maze testing strategies with small and large rodent models.</a> Journal of Visualized Experiments. (84), e51194 (2014).</li><li>Huang, Y. Y., Chen, A. C. H., Carroll, J. D., Hamblin, M. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+low-level+infrared+laser+irradiation+ameliorates+depression+induced+by+reserpine+in+rats.">Transcranial low-level infrared laser irradiation ameliorates depression induced by reserpine in rats.</a> Lasers in Medical Science. 31 (8), 1651-1656 (2016).</li><li>Zhang, Y., Zhang, C., Zhong, X., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+evaluation+of+SOCS-induced+optical+clearing+efficiency+of+skull.">Quantitative evaluation of SOCS-induced optical clearing efficiency of skull.</a> Quantitative Imaging in Medicine and Surgery. 5 (1), 136 (2015).</li><li>Shaw, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotection+of+midbrain+dopaminergic+cells+in+MPTP-treated+mice+after+near-infrared+light+treatment.">Neuroprotection of midbrain dopaminergic cells in MPTP-treated mice after near-infrared light treatment.</a> Journal of Comparative Neurology. 518 (1), 25-40 (2010).</li><li>Moro, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photobiomodulation+inside+the+brain:+a+novel+method+of+applying+near-infrared+light+intracranially+and+its+impact+on+dopaminergic+cell+survival+in+MPTP-treated+mice.">Photobiomodulation inside the brain: a novel method of applying near-infrared light intracranially and its impact on dopaminergic cell survival in MPTP-treated mice.</a> Journal of Neurosurgery. 120 (3), 670-683 (2014).</li><li>Reinhart, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+behavioural+and+neuroprotective+outcomes+when+670+nm+and+810+nm+near+infrared+light+are+applied+together+in+MPTP-treated+mice.">The behavioural and neuroprotective outcomes when 670 nm and 810 nm near infrared light are applied together in MPTP-treated mice.</a> Neuroscience Research. 117, 42-47 (2017).</li><li>Sadowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-&#946;+deposition+is+associated+with+decreased+hippocampal+glucose+metabolism+and+spatial+memory+impairment+in+APP/PS1+mice.">Amyloid-&#946; deposition is associated with decreased hippocampal glucose metabolism and spatial memory impairment in APP/PS1 mice.</a> Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 63 (5), 418-428 (2004).</li></ol>

우리 쥐에서 transcranial PBMT 절차 수행을 위한 프로토콜을 설명 합니다. 이 프로토콜은 특히 설치류에 초점을 맞춘 photobiomodulation 연구를 수행 하는 신경 과학 연구소를 타겟으로하는. 그러나,이 프로토콜 토끼, 고양이, 개, 또는 원숭이 등 신경 과학 분야에서 자주 사용 되는 다른 실험 동물에 적응 될 수 있다.
현재, 증가 관심 transcranial PBMT 레드/적외선 레이저와 Led를 조사 하 고...

PBMT, 또는 저수준 레이저 가벼운 치료 (LLLT), 레이저 또는 발광 다이오드 (Led) 빛 에너지에 의해 생물 학적 조직의 자극에 따라 치료 방법을 참조 하는 일반적인 용어입니다. 거의 모든 PBMT 치료 1100 nm, 1에서 500 까지의 출력 전력 600에서 근처-적외선 (NIR) 빛 파장에서 붉은 색으로 적용 됩니다 mW, 그리고 < 1 >에서 이르기까지 fluence 20 J/c m2 (정 외.1참조).
Transcranial PBMT 외부 광원 (레이저 또는 Led)2를 사용 하 여 머리의 방사선 조사에 의해 실시 하는 비 침 투 적인 빛 전달 방법입니다. 동물 응용 프로그램에 대 한이 방법은 접촉 또는 비접촉 배치의 동물의 머리에 LED 또는 레이저 프로브를 포함합니다. 치료 관심 영역에 따라 가벼운 프로브 (모든 뇌 영역을 다루는)에 대 한 전체 머리 또는 머리, 전 두 엽, 정면, 또는 정수 리 영역 등의 특정 부분에 배치할 수 있습니다. 두 피, 두개골, 그리고 두 라 메이 터를 통해 레드/NIR 빛의 부분 전송 대뇌 피 질의 표면 수준에 도달 하 고 치료 혜택을 생산 하는 충분 한 광자 에너지의 금액을 제공할 수 있습니다. 그 후, 대뇌 피 질의 수준에서 전달 된 빛 fluence 뇌3의 깊은 구조를 도달할 때까지 회색과 흰색 두뇌 문제에 메시지를 전파 것 이다.
빨강 빨강 영역 (600-680 nm)과 초기 NIR 영역 (800-870 nm)에서 스펙트럼 밴드 빛 시 토 크롬 c 산화 효소, 미토 콘 드리 아 호흡 사슬4의 터미널 효소의 흡수 스펙트럼에 해당합니다. 그것을 PBMT 레드/적외선 스펙트럼에서 photodissociation 산화 질소 (NO)의 시 토 크롬 c 산화 효소에서 결과적으로 미토 콘 드리 아 전자 전송에 증가 원인과, 궁극적으로, ATP 생성5증가 가설입니다. 신경 응용 프로그램 관련의 잠재적인 neurostimulatory 혜택 뇌 방법 다양 한 외상 성 뇌 부상 (TBI)6의 설치류 모델을 포함 한 전 임상 연구에서에서 보고 되었습니다 transcranial 방사선을 사용 하 여 PBMT 급성 뇌졸중7, Alzheimer의 질병 (광고)8, 파 킨 슨 병 (PD)9, 우울증10, 그리고 노화11.
뇌 노화에는 부정적인 영향을 미치는 몇 가지 인지 기능, 학습 및 메모리12등 신경 심리적 조건으로 간주 됩니다. 미토 콘 드리 아 ATP 생산 및 신경 생체에 대 한 책임 기본 세포입니다. 미토 콘 드 리아 기능 장애 관련 마13등 공간 탐색 메모리에 연결 된 뇌 영역에 적자 나이 관련 된 것으로 알려져 있다. 레드/NIR 두개골 치료 행위 주로 미토 콘 드리 아 생체의 변조, 빛 때문에 해 마에 전달된 빛 복용량을 충분 한 공간 메모리 결과14의 개선 될 수 있습니다.
현재 프로토콜의 목표는 쥐, 붉은 빛의 낮은 수준을 사용 하의 transcranial PBMT 절차를 보여 줍니다. 필요한 레이저 광선 전송 측정 세 쥐의 머리 조직을 통해 설명 합니다. 또한, 반 즈 미로, 해 마 의존 공간 학습 및 메모리 작업 및 생체 인덱스로 hippocampal ATP 수준으로 사용 됩니다 동물에서 치료 영향의 평가.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Alfasan</td>
			<td>#1608234-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Alfasan</td>
			<td>#1608238-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#A4679</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superglue</td>
			<td>Quickstar</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Campden Instruments</td>
			<td>#MA752-707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical glass</td>
			<td>Sail Brand</td>
			<td>#7102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power meter</td>
			<td>Thor labs</td>
			<td>#PM100D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photodiode detector</td>
			<td>Thor labs</td>
			<td>#S121C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caliper</td>
			<td>Pittsburgh</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GaAlAs laser</td>
			<td>Thor Photomedicine</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etho Vision</td>
			<td>Noldus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Froilabo</td>
			<td>#SW14R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Earmuffs</td>
			<td>Blue Eagle</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital camera</td>
			<td>Visionlite</td>
			<td>#VCS2-E742H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterio amplifier</td>
			<td>Sony</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hamonteb</td>
			<td>#665.128321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barnes maze</td>
			<td>Costom-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP assay kit</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#MAK190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elisa reader</td>
			<td>Awareness</td>
			<td>#Stat Fax 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a protocol for transcranial photobiomodulation therapy in mice

Transcranial photobiomodulation 뇌 생체, 다양 한 신경학 상과 정신 장애, 뇌 기능 및 나이 관련 된 인지에 관한 약화에 메모리 향상을 향상을 위한 잠재적인 혁신적인 비 침 투 적인 치료 방법입니다. 그리고 신경 퇴행 성 질환입니다. 우리 쥐에서 transcranial photobiomodulation 치료 (PBMT)를 위한 실험실 프로토콜을 설명합니다. 세 BALB/c 마우스 (18 개월)는 660 nm 레이저 transcranially, 일단 2 주 동안 매일 처리 됩니다. 레이저 투과율 데이터는 두 피에 빨간 입사광의 약 1% 관통 등 해 마는 대뇌 피 질의 표면에서 1mm 깊이 도달 보여줍니다. 두 가지 방법으로 치료 결과 평가: 반 즈 미로 한 해 마 의존 공간 학습 및 메모리 작업 평가, 테스트 및 측정 hippocampal ATP 수준 생체 인덱스로 사용 되는. 반 즈 작업에서 결과 레이저 치료 세 쥐 나이 일치 하는 컨트롤에 비해 공간 메모리 향상을 보여 줍니다. 생 화 확 적인 분석 뒤 레이저 치료 hippocampal ATP 레벨 증가. 우리는 메모리 성능 향상은 잠재적으로 빨간 레이저 치료에 의해 유도 된 hippocampal 에너지 대사에 개선 인해 공준. 쥐에서 관찰 때문에이 프로토콜 변환 신경 과학, 토끼, 고양이, 개, 또는 원숭이 등에서 자주 사용 하는 다른 종에 적응 될 수 다른 동물 모델에 연장 될 수 있습니다. Transcranial photobiomodulation 나이 관련 된 인지 장애에 유망한 치료 접근 될 수 있는 안전 하 고 비용 효율적인 양식 적임 이다.

통계 분석
양방향 ANOVA;에 의해 반 즈 훈련 세션에서 가져온 데이터의 통계 분석 분석 다른 행동 테스트와 분석 그룹 사이의 hippocampal ATP 레벨의 일방통행 ANOVA, Tukey의 포스트 hoc 테스트 다음에 의해 실행 되었다. 모든 데이터는 의미 ± 표준 편차 (SD)으로 표시 되는 레이저 전송 데이터 제외 ± 표준 오차 (SEM), 의미의 ...

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A Protocol for Transcranial Photobiomodulation Therapy in Mice

Photobiomodulation 치료 다양 한 신경학 상과 정신 장애의 처리를 위한 혁신적인 비 침 투 적인 양식 적임 이며 건강 한 두뇌 기능을 향상 시킬 수 있다. 이 프로토콜은 다른 실험실 설치류에 있는 사용을 위해 적응 시킬 수 있다 transcranial 빛 배달 여 쥐에서 뇌 photobiomodulation를 수행 하는 단계별 가이드를 포함 합니다.

마우스에 Transcranial Photobiomodulation 치료에 대 한 프로토콜

Transcranial photobiomodulation is a potential innovative noninvasive therapeutic approach for improving brain bioenergetics, brain function in a wide ...

다음 실험 프로토콜의 전반적인 목표는 쥐에서 낮은 수준의 적색 레이저를 사용하여 경두개 광생물 변조 요법을 수행하는 것이다. 이것은 마우스 머리에 레이저 프로브의 직접 접촉에 의해 수행된다. 첫 번째 단계로, 레이저 광 전달의 평가하기 위해, 신중하게 두개골에서 뇌 조직을 해부.그런 다음 두개골과 두피 와 뇌 조직의 1 밀리미터 조각을 통해 전달 된 빛의 힘을 측정합니다. 치료 섹션에서, bregma에서 두피에 직접 레이저 프로브의 끝을 문의. 이 공간 학습 및 메모리 기능은 반즈 미로 작업에 의해 평가됩니다.이어서, 해마 ATP 수준은 분광측정 방법에 의해 결정된다. 레이저 전송 데이터는 두피 표면의 선행 광의 약 1 %가 피질 표면에서 1 밀리미터 깊이에 도달한 것으로 나타났습니다. 반즈 미로 작업의 결과는 경두개 붉은 레이저 치료의 2 주 다음 노인 마우스에서 공간 메모리의 개선을 보여줍니다.또한, 결과 레이저 치료 숙성 쥐에서 증가 해 마 ATP 수준을 제안. 경두개 광생물변조는 광범위한 신경 및 정신 질환의 치료와 건강한 뇌 기능을 개선하기 위한 비침습적 치료 접근법입니다. 실제로, 광생물 변조 요법은 미토콘드리아의 시토크롬 c 산화제에서 산화 질소의 광합성을 유발한다고 믿습니다.이들은 차례차례로 ATP 생산에 있는 증가로 이끌어 내는 mitrochondrial 전자 수송을 증가합니다. 이 방법은 레이저 및 발광 다이오드를 포함한 외부 광원을 사용하여 헤드의 방사선에 의해 수행되는 안전하고 비용 효율적인 광 전달 접근법입니다. 거의 모든 경두개 광생물 변조 절차는 600에서 1100 나노미터, 1에서 500 밀리와트에 이르는 전력, 1에서 20 주얼 미터 평방 에 이르는 연도에 가까운 적외선에 빨간색으로 적용됩니다.깊은 마취 마우스에서, 조심스럽게 두개골에서 뇌 조직을 해부. 먼저, 아가로즈 젤에 손상되지 않은 뇌 조직을 고정하고 염화나트륨과 접착제를 포함한 필요한 모든 물질을 준비한다. 그런 다음, 진동 마운팅 블록의 표면에 접착제의 얇은 층을 확산.조심스럽게 아가로즈 블록을 부착하고 위치를 조정합니다. 진동 블레이드를 블록의 상부 표면과 약간 일치시키고 카운터 값을 기록합니다. 진동 탱크를 얼음처럼 차가운 일반 식염수 용액으로 채웁니다.진동의 속도와 진동 주파수를 조정하고 카운터를 1mm의 슬라이스 두께를 얻기위한 적절한 값으로 변경합니다. 진동을 켜고 시작 버튼을 누르고 1 밀리미터두께의 슬라이스로 뇌를 반경으로 자른다. 먼저 광학 유리 표면에 물 한 방울을 추가합니다.그런 다음, 유리에 뇌 조각을 넣어. 물 방울을 넣고 두 번째 광학 유리를 조심스럽게 놓습니다. 조직 건조를 방지하고 거친 표면에서 빛이 산란되는 것을 방지하기 위해 물 한 방울을 샘플 및 유리 경계에 추가해야합니다.샘플을 광학 실험실로 옮기. 광학 장치를 설정하고 전원 미터를 켭니다. 레이저 장치로 작동하기 전에 눈 보호 고글을 착용하십시오.레이저를 켜고 광선이 거울에 초점을 맞추어 광선을 포토디오드의 활성 영역으로 안내하도록 합니다. 먼저, 파워 미터의 표면에 두 개의 빈 광학 안경을 배치하고 디스플레이 화면에서 전송 된 광 전력을 읽습니다. 빈 안경을 제거하고 뇌 샘플을 파워 미터 표면에 부드럽게 배치하고 조직의 각 영역에 빔을 집중하고 전달 된 힘을 읽습니다.이번에는 파워 미터의 표면에 빈 광학 유리를 놓고 송신 된 광 전력을 읽습니다. 그런 다음 빈 유리를 제거하고 전원 미터 표면에 신선한 두개골과 두피 조직으로 광학 유리를 약간 놓습니다. 브레그마에 빔을 집중하고 전달된 전력을 읽습니다.마지막으로 레이저 장치와 파워 미터를 끕니다. 현재 프로토콜의 치료 섹션에는 클래스 3B 레이저 계측기의 적용이 포함되며 적절한 교육 및 안전 지침이 필요합니다. 새로운 환경에 동물을 적응시키기 위하여는, 치료를 시작하기 약 20 분 전에 그들의 홈 케이지에서 치료실에 마우스를 가지고.먼저 레이저 장치 플러그를 전기 보호기에 삽입합니다. 프로브 표면에 긁히지 않도록 투명 나일론 필름으로 레이저 프로브의 끝을 덮습니다. 레이저 프로브를 장치의 채널에 조심스럽게 연결합니다.레이저 장치로 작동하기 전에 눈 보호 고글을 착용하십시오. 레이저 장치를 켜고 워밍업을 위해 몇 초 동안 기다립니다. 장치 패널에서 레이저 준비 기호를 관찰한 후 조사 시간 및 작동 모드를 포함한 치료 매개 변수를 조정합니다.치료를 시작하기 전에, 프로브의 끝을 장치의 파워 미터의 활성 영역에 접촉하여 레이저 평균 전력을 결정한다. 현재 프로토콜에서 레이저 프로브는 브레그마 영역에 배치되며, 이는 귀의 전방 베이스 사이에 그려진 선에 약 3밀리미터 로스트럴이 있습니다. 동물의 눈에 직접 방사선을 피하기 위해 먼저 레이저 프로브의 끝을 머리에 놓고 레이저 프로브를 켜고 조사가 완료 될 때까지 프로브를 안정적으로 유지하십시오.그런 다음 레이저 장치를 끄고 장치에서 프로브를 분리합니다. 절차가 끝나면 적절한 광학 클리너로 레이저 프로브를 청소하십시오. 공간 학습 및 메모리 작업은 반즈 미로에서 수행됩니다.먼저 작업실 문 바깥쪽에 표지판을 입력하지 마십시오. 주변 벽에 시각적 공간 신호를 연결합니다. 미로 플랫폼 위에 비디오 카메라를 배치합니다.원치 않는 후각 큐를 제거하기 위해 70 %에탄올로 미로 플랫폼의 표면을 청소하십시오. 동물의 집 새장에서 소량의 침구를 이스케이프 박스에 추가하여 후각 신호역할을 합니다. 작업을 시작하기 전에 각 마우스를 새 케이지에 넣고 케이지를 반즈 미로 룸으로 옮습니다.습관화하려면 동물이 작업 전에 30 분 동안 방에 남아 있게하십시오. 그런 다음 케이지에서 마우스를 제거하고 동물을 이스케이프 박스에 부드럽게 넣고 1 분 동안 거기에 남아 있게하십시오. 1 분 후, 부드럽게 탈출 상자에서 마우스를 제거하고, 경기장의 중앙에 동물을 배치하고, 그것에 시작 챔버를 넣어.10초 후, 시작 챔버를 들어 올려 동물이 3 분 동안 경기장을 탐험 할 수 있습니다. 조용히 컴퓨터 영역으로 이동하고 귀덮개를 착용하고 큰 백색 잡음으로 구성된 부정적인 청각 자극을 유발합니다. 그런 다음 비디오 녹화를 시작하고 컴퓨터 모니터에서 동물의 행동을 관찰합니다.검은 미로는 흰색 마우스를 테스트하는 데 사용되어야한다. 또한, 블랙 매트는 케이스 추적 시스템 소프트웨어가 사용되는 경우미제 아래에 배치되어야한다. 비디오 추적 소프트웨어 프로그램을 설정하고 녹화된 비디오에서 관심 있는 매개 변수를 추출합니다.생화학적 평가를 위해 해마 조직을 해부하고, 샘플 버퍼에서 균질화하고, 원심분리한 다음, 분광측정 방법을 사용하여 ATP 수준을 평가합니다. 660 나노미터 레이저 광 전달은 두개골과 숙성마우스의 두피를 통한 약 16%였으며, 약 10%의 가치는 숙성된 뇌 조직의 1밀리미터 슬라이스를 통해 레이저 투과로 측정하였다. 모든 실험 군 중 열린 필드 테스트에서 모터 활동의 로그에 통계적으로 유의한 차이가 없었다.반즈 미로 작업의 데이터는 노인 대조군의 대기 시간이 훈련 세션의 세 번째와 네 번째 날에 젊은 대조군의 대기 시간이 분명히 더 길다는 것을 보여주었습니다. 그러나, 적색 레이저 치료는 4일째에 대기 시간을 현저히 감소시키는 것으로. 소품 시험 세션에서, 노인 제어 동물은 젊은 제어 동물에 비해 대상 사분면에서 상당히 짧은 시간을 보낸다.그러나, 레이저 처리된 숙성된 마우스는 노인 대조군 마우스에 비해 표적 사분면에서 상당히 더 긴 시간을 보냈다. 해마 생물 에너지 데이터는 노인 대조군 동물의 ATP 수준 감소를 보여줍니다. 한편, 적색 레이저 치료는 숙성된 마우스의 해마내평균 ATP 함량을 현저히 증가시킨다.우리는 마우스에서 경두개 광생물 무드 치료 절차를 수행하는 실험실에 대한 프로토콜을 설명했다. 우리의 프로토콜은 토끼, 개, 원숭이, 등 세테라와 같은 번역 신경 과학 분야에서 자주 사용되는 다른 실험실 동물에 적응 할 수 있습니다. 우리의 조사에 따라, 적색광의 낮은 수준은 향상된 공간 기억 기능에 반영되는 ATP 생산을 증폭하여 노인 두뇌에 있는 해마 분해를 복구할 수 있습니다.이 방법에서는 병리학에 의해 어떤 뇌 영역이 영향을 받는지에 따라 조사 시간, 치료 간격, 적용 된 광채 및 연도를 포함한 여러 신체 및 치료 매개 변수가 더 나은 결과를 달성하기 위해 최적으로 조정되어야합니다. 경두개 광생물 변조 치료는 노화와 관련된 인지 기능 저하 및 신경 퇴행성 질환에 대한 잠재적 인 전략이 될 수있는 뇌 대사 와 인지 향상을 개선하기위한 유망한 접근 법으로 제안됩니다.

Research

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Neuroscience

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연구

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