Name: two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

وكان يدعمها هذا العمل بوزارة العلوم والتكنولوجيا، تايوان (الأكثر 106-2320-ب-038-024، معظم 105-2221-E-038-007-MY3، ومعظم 104-2320-ب-424-001) ومستشفى الجامعة الطبية تايبيه (107TMUH-س-01). تم تحرير هذه المخطوطة عن طريق "تحرير والاس الأكاديمية".

رعاية الحيوان المؤسسية واللجان استخدام سينيكا وجامعة الطب تايبيه أقرت هذا البروتوكول لاستخدام الحيوانات التجريبية.
1-نموذج مكاو/ضخه
<ol><li>توفر الفئران مع حرية الوصول إلى المياه وتشو حتى الجراحة.</li>
	<li>اﻷوتوكﻻف الجراحية أدوات وتطهير الجدول جراحة ومعدات استخدام الإيثانول 7...

<ol>
	<li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology,+treatment,+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke.">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11 (2011).</li><li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunology+of+acute+stroke.">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).</li><li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury.">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li><li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy.">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li><li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice:+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery.">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li><li>Wellons, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia.">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li><li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distal+hypoxic+stroke:+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput,+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit.">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li><li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia:+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion.">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li><li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability.">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106 (2016).</li><li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats.">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li><li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia.">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting.">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li><li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain.">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li><li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons.">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li><li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction.">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity.">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li><li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation.">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li></ol>

نموذج الماوس ماكاو/ضخه نموذج حيوانية المستخدمة عادة لتقليد الاسكيمية العابرة في البشر. يمكن تطبيق هذا النموذج الحيواني لسلالات الفئران المحورة وراثيا والضربة القاضية للتحقيق في الفسيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية. عدة خطوات في البروتوكول أهمية خاصة. (1 ميكرودريل) يجب أن تستخدم بعناية عن...

الطراز الماوس ضخه الاسكيمية الدماغي أحد النهج التجريبي الأكثر استخداماً للتحقيق في الفسيولوجيا المرضية ل الإصابات الناجمة عن الاسكيمية الدماغ1. لأنه ينشط ضخه الاسكيمية الدماغي المناعي المحيطية، الخلايا المناعية المحيطية التسلل إلى الدماغ الدماغية ويسبب تلف الخلايا العصبية2. وهكذا، نموذجا لماوس موثوقة واستنساخه يحاكي ضخه الاسكيمية الدماغي مطلوب لفهم الفسيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية.
الفئران (B6) C57BL/6J هي سلالة الأكثر استخداماً في التجارب السكتة الدماغية نظراً لأنها يمكن بسهولة أن يكون وراثيا معالجته. تتوفر نماذج مشتركة اثنين من ماكاو/الاكسجينيه التي تحاكي حالة ضخه الاسكيمية الدماغي. الأول هو نموذج الشعيرة intraluminal الدانية ماكاو، حيث يعمل خيوط المغلفة بالسيليكون إينترافاسكولارلي أوككلودي تدفق الدم في هيئة مكافحة الاحتكارات؛ بعد ذلك يتم إزالة خيوط أوككلودينج لاستعادة تدفق الدم3. مدة قصيرة انسداد يؤدي آفة من منطقة subcortical، بينما أطول مدة انسداد يسبب الاحتشاءات في المناطق القشرية وسوبكورتيكال. النموذج الثاني هو نموذج ربط مكاو القاصي، الذي ينطوي على ربط اكسترافاسكولار MCA والتقييم القطري المشترك للحد من تدفق الدم من خلال هيئة مكافحة الاحتكارات، بعدها يتم استعادة تدفق الدم عن طريق إزالة مقطع خياطة الجروح والأوعية الدموية4. في هذا النموذج، بسبب احتشاء في المناطق القشرية، ومعدل وفيات منخفض. لأنه يتطلب ربط نموذج ماكاو/ضخه كرانيكتومي لفضح موقع MCA القاصي، يمكن تأكيد الموقع بسهولة، ودراسة ما إذا كان تدفق الدم في MCA القاصي تتعطل أثناء الإجراء واضح ومباشر.
B6 الفئران تظهر اختلافات كبيرة في التشريح لدائرة ويليس؛ وهذا قد يؤثر على حجم احتشاء بعد ضخه الاسكيمية الدماغي5،،من67. حاليا، يمكن التغلب على هذه المشكلة عن طريق ربط MCA القاصي8. في هذه الدراسة، علينا أن ننشئ أسلوب أوككلودينج تدفق الدم MCA وتمكين ضخه بعد فترة محددة سلفا من الاسكيمية. انسداد السفينتين من طراز ضخه الاسكيمية الدماغي يستحث الاسكيمية العابرة لإقليم اتحاد الماليزيين الصينيين من خلال ربط MCA القاصي الحق والحق التقييم القطري المشترك، مع تدفق الدم المستعادة بعد فترة معينة من الاسكيمية. يدفع هذا النموذج ماكاو/ضخه احتشاء حجم مستقر، والجزء الأكبر من التسلل إلى الدماغ الخلايا المناعية في الدماغ الدماغية، وعجز سلوكية بعد الاسكيمية الدماغي – ضخه4.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bone rongeur</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>Friedman</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1097603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloral hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8383</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ-745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric clippers</td>
			<td>Petpro</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% formalin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F5304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator dry bead sterilizer</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>10 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>9 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>11 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdrill</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>FOREEDOM K.1070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-scissors-Vannas</td>
			<td>HEISS</td>
			<td>H-4240</td>
			<td>blade 7mm, 8 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse brain matrix</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-invasive blood pressure system</td>
			<td>Muromachi</td>
			<td>MK-2000ST</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>14 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological Monitoring System</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blades</td>
			<td>Ever-Ready</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stoelting Rodent Warmers</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53810</td>
			<td>Heating pad</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture clip</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>IDEALTEK</td>
			<td></td>
			<td>No.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>15672</td>
			<td>Surgical glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10-0 suture</td>
			<td>UNIK</td>
			<td>NT0410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion

في هذه الدراسة، يستخدم نموذج ماوس انسداد شريان دماغي الأوسط (MCA) لدراسة ضخه الاسكيمية الدماغي. مفيد نموذجا ماوس استنساخه وموثوق بها للتحقيق في الفسيولوجيا المرضية لضخه الاسكيمية الدماغي وتحديد الاستراتيجيات العلاجية المحتملة بالنسبة للمرضى الذين يعانون من السكتة الدماغية. الاختلافات في التشريح لدائرة ويليس C57BL/6 الفئران يؤثر على حجم احتشاء بعد الإصابة الدماغية الاسكيمية--المستحثة. أشارت الدراسات إلى أن انسداد MCA القاصي (ماكاو) يمكن التغلب على هذه المشكلة ويؤدي إلى حجم احتشاء مستقرة. في هذه الدراسة، ونحن إنشاء نموذج ماوس انسداد السفينتين من ضخه الاسكيمية الدماغي عن طريق انقطاع تدفق الدم إلى MCA الحق. ونحن ديستالي اضطر MCA الأيمن والشريان السباتي المشترك الحق (CCA) واستعادة تدفق الدم بعد فترة معينة من الاسكيمية. هذه الإصابة ضخه الاسكيمية يستحث احتشاء حجم ثابت وعجز سلوكية. الخلايا المناعية المحيطية التسلل الدماغ الدماغية ضمن فترة تسلل ح 24. بالإضافة إلى ذلك، يتم فقدان الخلايا العصبية في منطقة القشرية أقل لمدة أطول من ضخه. ولذلك، هذا النموذج انسداد السفينتين مناسبة للتحقيق في الاستجابة المناعية والعصبية الانتعاش خلال فترة ضخه بعد الاسكيمية الدماغي.

تنتج من احتشاء القشرية محيط MCA الحق هذا الإجراء ماكاو/ضخه وتسبب عجزا سلوكية. درجات مختلفة من حجم احتشاء المستحثة الاسكيمية (الشكل 1 أ، ب) وفقدان الخلايا العصبية (الشكل 1، د) تم إنشاؤها في قشرة الدماغ من منطقة MCA الحق عن طريق ...

Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

انسداد السفينتين الماوس النموذجي لضخه الاسكيمية الدماغي

نموذج الفأر من ضخه الاسكيمية الدماغي أنشئت للتحقيق في الفسيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية. ونحن ديستالي سد الشريان الدماغي الأوسط الحق والشريان السباتي المشترك الحق واستعادة تدفق الدم بعد 10 أو 40 دقيقة من الاسكيمية.

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

هذا نموذج الماوس انسداد وعاءين من نقص التروية الدماغية-reperfusion يمكن التحقيق في الفيزيولوجيا المرضية للسكتة الدماغية. هذا النموذج سوف تحفز حجم مستقر من الجزء الأكبر من الدماغ اختراق الخلايا المناعية في الدماغ الإقفاري والعجز السلوكي بعد نقص التروية الدماغية-reperfusion. في هذا النموذج، يحدث فيركت في المناطق القشرية ومعدل الوفيات منخفض.لأن نموذج إعادة ضخ MCAO الربط يتطلب استئصال القحف لفضح حجم MCA عن بعد, يمكن تأكيد حجم بسهولة, والفحص ما إذا كان يتم تعطيل تدفق الدم في MCAO القحف أثناء الإجراء مباشرة. تزويد الفئران بحرية الوصول إلى الماء والطعام حتى الجراحة. اتوماتيف الأدوات الجراحية، واستخدام 70٪ الإيثانول لتطهير الجدول والمعدات الجراحية.بعد تخدير فأر عمره ثمانية إلى 12 أسبوعًا ، تأكد من أنه ليس لديه رد فعل دواسة عند اختباره باستخدام قرصة إصبع القدم. استخدم مرهمًا بيطريًا لمنع جفاف العين أثناء وضع الماوس تحت التخدير. لمراقبة ضغط الدم، قم أولاً بإزالة الشعر، ثم استخدم نظام ضغط الدم غير الغازية ونظام مراقبة فسيولوجي لمراقبة درجة حرارة المستقيم وغازات الدم الشريانية.حقن الماوس تحت الجلد مع مضاد حيوي وقائي. بعد ذلك، ضع الماوس في موضع الوبين على لوحة التدفئة. لفضح الجلد، استخدم المقصات الكهربائية لحلاقة الفراء على منطقة الرقبة البطنية وفي المنطقة الواقعة بين العين اليمنى والأذن اليمنى.مسح الفراء من جسم الحيوان مع كريم الغطا، وتطهير الموقع الجراحي مع الإيثانول 70٪. ثم قطع شق خط وسط طوله سنتيمتر واحد في الرقبة باستخدام مقص القزحية. مع ملقط القزحية، تشريح بعناية الشريان السباتي المشترك خالية من الأعصاب المبهمة دون التسبب في إصابة جسدية، واستخدام خياطة الحرير 5-0 لعزل الشريان.بعد ذلك، استخدم مقص القزحية لإجراء شق 0.3 سنتيمتر في فروة الرأس عند نقطة الوسط بين العين اليمنى والأذن اليمنى. باستخدام مقص صغير، وقطع العضلات الزمني لفضح عظم الزيج وsquamosal. ضع الفأر تحت مجهر ستيريو تشريح، واستخدام حفر صغيرة لخلق ثقب مليلتر اثنين مباشرة على الجانب الأيمن من الشريان الدماغي الأوسط.استخدام خياطة 10-0 لligate الجذع من MCA القاصي الجانب الأيمن، واستخدام مقطع تمدد الأوعية الدموية nontraumatic لocclude CCA الجانب الأيمن. بعد المدة المطلوبة من الإقفاري، وإزالة خياطة وتمدد الأوعية الدموية مقطع لاستعادة تدفق الدم إلى MCA وCCA. استخدمي مشبك خياطة لختم شق الجلد على الرأس وختم شقوق الجلد العنقي بالغراء الجراحي.حقن البوبرينورفين تحت الجلد لتخفيف الألم. الحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان عند 36.5 زائد أو ناقص 0.5 درجة مئوية على وسادة التدفئة، ولا تترك دون مراقبة أو إعادته إلى شركة الحيوانات الأخرى حتى يتم استردادها بالكامل من التخدير. وأخيرا، ضع الماوس في قفص الأوتوكلاف بحيث يمكن الوصول بحرية إلى الماء والغذاء بعد أن تعافى تماما.استخدام مقص القزحية لجعل شق في الجلد من رأس الماوس تخدير وقطع الرأس لفضح الجمجمة. ثم استخدام مقص التشغيل لقطع الأمامي من العظام الأمامية، ومع مقص القزحية، وقطع الجمجمة على طول خياطة القوس. مع الرخّاء العظمي، اُترك العظم الجبهي والجريبي جانباً، وفضح الدماغ.أزل الدماغ، وضعه في مصفوفة دماغ الماوس. استخدام شفرات الحلاقة للحصول على شرائح إكليلية مليلتر، ووضعها في أنابيب 50 ملليلتر مليئة ب5 ملليلتر من 2٪ TTC. عند استخدام مصفوفة الدماغ الماوس للحصول على شرائح الإكليل، يجب أن يكون حجم القطع نفسه في أدمغة مختلفة.حجم القطع يؤثر على حجم شرائح الدماغ، والتي تؤثر أيضا على حساب حجم المزارع. وصمة عار شرائح الدماغ مع 2٪ TTC و 1X PBS لمدة 10 دقائق في 37 درجة مئوية، ثم شطف مرتين مع 10٪formalin. إصلاح شرائح الدماغ في 10٪ formalin في درجة حرارة الغرفة لمدة 24 ساعة.بعد تجفيف شرائح الدماغ على ورق الأنسجة لامتصاص الزائدة formalin، وترتيبها على شريحة بلاستيكية نظيفة، وتوجيهها من روسترالي إلىcaudal، وتغطيتها مع شريحة بلاستيكية نظيفة أخرى. مسح الشريحة ضوئيًا باستخدام ماسح ضوئي. قم بقلب الشريحة، ثم قم بمسح الجانب العكسي.استخدم برنامج ImageJ لحساب منطقة احتشاء كل قسم، وذلك بفتح ملف الصورة أولاً وإعداد مقياس الصورة. ثم استخدم التحديد اليدوي لتحديد منطقة infarct ، واستخدام المناطق التي تهم مدير العائد على الاستثمار لقياس المنطقة ذات الاهتمام. وأخيراً، قم بتلخيص المساحات المخصصة لكل قسم، ثم ضرب النتيجة بسمك القسم لتقدير حجم الاحشاء الكلي، ثم أكمل التحليل الإحصائي كما هو موضح في المخطوطة.زيادة في مدة نقص التروية خلال هذا الإجراء MCAO reperfusion أنتجت درجات مختلفة من حجم الإقفارية الناجمة عن فقدان الخلايا العصبية في قشرة الدماغ من منطقة MCA الحق. وعلاوة على ذلك، انخفض الإقفار النشاط الحركي للحيوان في 48 ساعة بعد إعادة ضخ MCAO. بعد الإقفار الدماغي- reperfusion, تسللت الجزء الأكبر من الخلايا المناعية الطرفية نصف الكرة الأرضية من الدماغ الإقفاري.وبالإضافة إلى ذلك، عندما تمت مقارنة هذا النموذج الانسداد لسفينة اثنين مع نموذج MCAO، كانت أحجامها غير مختلفة بشكل ملحوظ. يجب استخدام الحفر الدقيق بعناية عند إنشاء ثقب في الجمجمة. مع عمل غير لائق، والتسبب في نزيف سهل من MCA.لا ينبغي أن يكون معطوبا MCA، ويجب تجنب النزيف قبل وبعد عملية الربط. يمكن فحص انسداد MCA وحالة إعادة التسريب بواسطة دوبلر الليزر. يمكن لهذه الطريقة تأكيد حالة تدفق الدم من MCA.

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

زرع الخلايا الجذعية في في المختبر مقلد نقص التروية / إعادة إشباع الخلايا النموذجي

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

نقص التروية-ضخه نموذج من إصابة الكلى الحاد والتليف آخر الاصابات في الفئران

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducable الشلل النصفي عن طريق الشريان الأورطي الصدري انسداد في نموذج الفئران من الحبل الشوكي نقص التروية، ضخه

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

نموذج الفئران من المعوية الإسكيمية-ضخه إصابة

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

نموذج الفأر من الشبكية الإسكيمية-ضخه إصابة خلال ارتفاع ضغط العين

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

نموذج الفئران قبل السريرية لدراسة نقص التروية-ضخ الاصابه في جراحه المجهرية الترميمية

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

إصابة الجهاز الإقصاب الإقفاري-Reperfusion عن طريق محاكاة التغيرات الديناميكية الدموية في نموذج زراعة كبد الفئران

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...