Name: two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av departementet for vitenskap og teknologi, Taiwan (mest 106-2320-B-038-024, de fleste 105-2221-E-038-007-MY3 og mest 104-2320-B-424-001) og Taipei Medical University Hospital (107TMUH-SP-01). Dette manuskriptet ble redigert av Wallace akademiske redigering.

Institusjonelle dyr omsorg og bruk komiteer i Academia Sinica og Taipei medisinske universitet godkjent denne protokollen for bruk av forsøksdyr.
1. MCAO/reperfusion modell
<ol><li>Gi musene vann og chow til operasjonen.</li>
	<li>Autoclave den kirurgiske verktøy og rense kirurgi tabellen og utstyr med 70% etanol. Bruk en kirurgiske maske og sterile hansken. Bruk en tørr perle sterilisere for å resterilize kirurgiske verktøy hvis flere musen operasjoner vil bli utført i et eksperiment....

<ol>
	<li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology,+treatment,+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke.">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11 (2011).</li><li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunology+of+acute+stroke.">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).</li><li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury.">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li><li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy.">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li><li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice:+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery.">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li><li>Wellons, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia.">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li><li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distal+hypoxic+stroke:+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput,+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit.">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li><li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia:+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion.">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li><li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability.">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106 (2016).</li><li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats.">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li><li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia.">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting.">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li><li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain.">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li><li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons.">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li><li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction.">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity.">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li><li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation.">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li></ol>

MCAO/reperfusion musemodell er en dyremodell vanligvis brukes til å etterligne forbigående iskemi i mennesker. Denne dyremodell kan brukes på transgene og knockout mus stammer å undersøke i Patofysiologien ved slag. Flere trinn i protokollen er spesielt viktig. (1) microdrill må brukes forsiktig når du oppretter et hull i skallen, upassende handling forårsaker lett blødning fra MCA. (2) MCA bør ikke bli skadet, og blødning må unngås før og etter ligatur prosedyren. Skade på MCA påvirker nivået av reperfu...

Cerebral iskemi-reperfusion musen modellen er en av de mest brukte eksperimentelle tilnærmingene for å undersøke i Patofysiologien ved ischemia-indusert hjernen skade1. Fordi cerebral iskemi-reperfusion aktiverer eksterne immunsystemet, perifere immunceller infiltrere iskemiske hjernen og forårsake neuronal skade2. Dermed kreves en pålitelig og reproduserbar musemodell som etterligner cerebral iskemi-reperfusion å forstå i Patofysiologien ved slag.
C57BL/6J (B6) mus er mest brukte belastningen slag eksperimenter fordi de kan lett bli genetisk manipulert. Det finnes to vanlige modeller av MCAO/reperfusion som etterligner tilstand cerebral iskemi-reperfusion. Først er intraluminal filament modell av proksimale MCAO, der en silisium-belagt filament er ansatt for å intravascularly occlude blodstrømmen i MCA; den occluding filament fjernes senere for å gjenopprette blodet flyt3. En kort okklusjon varighet resulterer i en leksjonen av subkortikal regionen, mens en lengre okklusjon varighet forårsaker infarkter i kortikale og subkortikal. Den andre modellen er den ligatur distale MCAO, som innebærer ekstravaskulær overvåking av ligation av MCA og CCA å redusere blodstrømmen gjennom MCA, som blodstrøm gjenopprettes gjennom fjerning av Sutur og aneurisme klipp4. I denne modellen en betennelsessykdommer skyldes i kortikale områder og dødelighet er lav. Ligation av MCAO/reperfusion modellen krever craniectomy å avsløre stedet av distale MCA, nettstedet lett kan bekreftes og undersøke om blodstrømmen i distale MCA avbrytes under prosedyren er enkel.
B6 mus viser betydelige variasjoner i anatomi av vennekretsen Willis; Dette kan påvirke betennelsessykdommer volumet etter cerebral iskemi-reperfusion5,6,7. Foreløpig kan dette problemet løses gjennom ligation av den distale MCA8. I denne studien etablere vi en metode for å skjule den MCA blodstrømmen og aktivere reperfusion etter en forhåndsbestemt periode ischemia. To-fartøy okklusjon av cerebral iskemi-reperfusion modellen induserer forbigående ischemia av MCA territoriet gjennom ligation av rett distale MCA og høyre CCA, med blodstrøm gjenopprettes etter en viss ischemia. Denne MCAO/reperfusion modellen induserer en betennelsessykdommer stabil størrelse, hoveddelen av hjernen-infiltrere immunceller i den iskemiske hjernen og atferdsmessige underskudd etter cerebral iskemi-reperfusion4.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bone rongeur</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>Friedman</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1097603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloral hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8383</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ-745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric clippers</td>
			<td>Petpro</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% formalin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F5304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator dry bead sterilizer</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>10 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>9 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>11 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdrill</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>FOREEDOM K.1070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-scissors-Vannas</td>
			<td>HEISS</td>
			<td>H-4240</td>
			<td>blade 7mm, 8 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse brain matrix</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-invasive blood pressure system</td>
			<td>Muromachi</td>
			<td>MK-2000ST</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>14 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological Monitoring System</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blades</td>
			<td>Ever-Ready</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stoelting Rodent Warmers</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53810</td>
			<td>Heating pad</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture clip</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>IDEALTEK</td>
			<td></td>
			<td>No.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>15672</td>
			<td>Surgical glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10-0 suture</td>
			<td>UNIK</td>
			<td>NT0410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion

I denne studien er en arteria cerebri (MCA) okklusjon musemodell ansatt å studere cerebral iskemi-reperfusion. En reproduserbar og pålitelig musemodell er nyttig for undersøke i Patofysiologien ved cerebral iskemi-reperfusion og bestemme potensielle strategier for pasienter med hjerneslag. Variasjoner i anatomi av sirkelen av Willis av C57BL/6 mus påvirker betennelsessykdommer volumet etter cerebral iskemi-forårsaket skader. Studier har indikert at distale MCA okklusjon (MCAO) kan løse dette problemet og resultere i en stabil betennelsessykdommer størrelse. I denne studien etablere vi en to-fartøy okklusjon musemodell av cerebral iskemi-reperfusion gjennom avbrudd i blodtilførselen til høyre MCA. Vi distally ligate høyre MCA og høyre arteria carotis communis (CCA) og gjenopprette blodsirkulasjonen etter en viss ischemia. Denne ischemia-reperfusion skaden induserer en betennelsessykdommer stabil størrelse og atferdsmessige underskudd. Eksterne immunceller infiltrere iskemiske hjernen innen 24 timer infiltrasjon perioden. Dessuten er neuronal tap i kortikale området mindre for en lengre reperfusion varighet. Denne to-fartøy okklusjon-modellen er derfor egnet for undersøke immunrespons og neuronal utvinning i reperfusion perioden etter cerebral iskemi.

Dette MCAO/reperfusion produsert en kortikale betennelsessykdommer i høyre MCA og forårsaket atferdsmessige underskudd. Forskjellige grader av ischemia-indusert betennelsessykdommer volum (figur 1AB) og neuronal tap (figur 1 cD) ble opprettet i hjernebarken i høyre MCA området gjennom en økning i ligation varighet. Denne MCAO/reperfusion skaden redusert dyrets locomotor aktivitet på 48 time...

Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

To-fartøy okklusjon musemodell av Cerebral iskemi-reperfusion

En musemodell av cerebral iskemi-reperfusion er etablert for å undersøke i Patofysiologien ved slag. Vi distally ligate av høyre arteria cerebri og høyre arteria carotis communis og gjenopprette blodsirkulasjonen etter 10 eller 40 min av ischemia.

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Denne to-fartøy okklusjon mus modell av cerebral iskemi-reperfusjon kan undersøke patofysiologi av hjerneslag. Denne modellen vil indusere et stabilt infarktvolum av hoveddelen av hjernen infiltrerende immunceller i den iskemiske hjernen og atferdsunderskuddet etter cerebral iskemi-reperfusjon. I denne modellen er det forårsaket en infarkt i kortikale områder og dødeligheten er lav.Fordi ligation MCAO reperfusjonsmodellen krever kraniotomi for å avsløre størrelsen på distal MCA, kan størrelsen lett bekreftes, og eksamen om blodstrømmen i den distale MCAO forstyrres under prosedyren er grei. Gi musene fri tilgang til vann og mat til operasjonen. Autoklav kirurgiske verktøy, og bruk 70% etanol for å rense kirurgi tabellen og utstyr.Etter å ha bedøvet en åtte til 12 uker gammel mus, må du kontrollere at den ikke har en pedalrefleks når den testes ved hjelp av en fast tåkleming. Bruk veterinær salve for å forhindre tørrhet i øyet mens musen er under anestesi. For å overvåke blodtrykket, først fjerne håret, og deretter bruke et ikke-invasivt blodtrykkssystem og et fysiologisk overvåkingssystem for å overvåke rektal temperatur og arterielle blodgasser.Injiser musen subkutant med et profylaktisk antibiotika. Deretter plasserer du musen i liggende stilling på varmeputen. For å eksponere huden, bruk elektriske klippere til å barbere pelsen på ventral nakkeområdet og i regionen mellom høyre øye og høyre øre.Fjern pelsen fra dyrets kropp med epilering av krem, og desinfiser operasjonsstedet med 70% etanol. Klipp deretter et en centimeter langt mellomlinje snitt i nakken ved hjelp av iris saks. Med iris tang, nøye dissekere den vanlige halspulsåren fri fra vagus nerver uten å forårsake fysisk skade, og bruke 5-0 silke suturer for å isolere arterien.Deretter bruker du irissaks for å lage et 0,3-centimeter snitt i hodebunnen midtpunktet mellom høyre øye og høyre øre. Bruk mikrosaks, kutt temporalmuskelen for å avsløre det zygomatiske og squamosale beinet. Plasser musen under et stereo dissekeremikroskop, og bruk en mikro drill for å lage et to milliliter hull rett over høyre distal midten cerebral arterie.Bruk en 10-0 sutur for å ligate stammen på høyre side distal MCA, og bruk en ikke-traumatisk aneurisme klipp for å okkludere høyre side CCA. Etter ønsket varighet av iskemi, fjern sutur og aneurisme klipp for å gjenopprette blodstrømmen til MCA og CCA. Bruk en suturklemme for å forsegle hud snittet på hodet og forsegle livmorhalshud snittene med kirurgisk lim.Injiser buprenorfin subkutant for smertelindring. Opprettholde dyrets kroppstemperatur på 36,5 pluss eller minus 0,5 grader Celsius på varmeputen, og ikke la det stå uten tilsyn eller returnere den til selskap med andre dyr før det er fullt ut gjenopprettet fra anestesi. Til slutt plasserer du musen i autoklaven buret slik at den fritt kan få tilgang til vann og mat etter at den er helt gjenopprettet.Bruk iris saks for å gjøre et snitt i huden på hodet av bedøvet og halshugget mus for å avsløre skallen. Bruk deretter driftssaks til å kutte fremre av frontalbenet, og med irissaks, kutt skallen langs sagittalsugen. Med en beinrongeur skyver du til side frontal og parietal bein, og utsett hjernen.Fjern hjernen, og legg den i en musehjernematrise. Bruk barberblad for å få to milliliter koronarskiver, og plasser dem i 50-milliliter rør fylt med fem milliliter på 2% TTC. Når du bruker musen hjernen matrise for å oppnå koronale skiver, kutte størrelsen bør være samme i forskjellige hjerner.Kutte størrelse påvirker størrelsen på hjerneskiver, noe som også påvirker beregningen av infarkt størrelse. Flekk hjerneskivene med 2% TTC og 1X PBS i 10 minutter ved 37 grader Celsius, og skyll deretter to ganger med 10% formalin. Fiks hjerneskivene i 10% formalin ved romtemperatur i 24 timer.Etter tørking av hjerneskivene på vevspapiret for å absorbere overflødig formalin, ordne dem på en ren plastsklie, orientere dem fra rostral til caudal, og dekk dem med en annen ren plastsklie. Skann lysbildet med en skanner. Snu lysbildet over, og skann baksiden.Bruk ImageJ-programvaren til å beregne infarktområdet for hver del, ved først å åpne bildefilen og sette opp skalaen for bildet. Bruk deretter frihåndsvalg til å velge det infarktområdet, og bruk områdene av interesse roi manager til å måle interesseområdet. Til slutt summerer du de infarktområdene for hver seksjon, og multipliserer resultatet av seksjonstykkelsen for å estimere det totale infarktvolumet, og deretter fullføre statistisk analyse som beskrevet i manuskriptet.Økning i iskemivarighet under denne MCAO-reperfusjonsprosedyren ga forskjellige grader av iskemi-indusert infarktvolum og nevronalt tap i hjernebarken i det rette MCA-området. Videre reduserte iskemi dyrets lokomotoriske aktivitet 48 timer etter MCAO-reperfusjonen. Etter cerebral iskemi-reperfusjon infiltrerte en stor av perifere immunceller den ipsilaterale halvkule i den iskemiske hjernen.I tillegg, da denne to-fartøys okklusjonsmodellen ble sammenlignet med MCAO-modellen, var deres infarktvolumer ikke signifikant forskjellige. Mikroboret må brukes forsiktig når du oppretter et hull i skallen. Med upassende handling, lett forårsaker blødning fra MCA.MCA skal ikke skades, og blødningen må unngås før og etter ligationprosedyren. MCA-okklusjonen og reperfusjonsstatusen kan kontrolleres av laseren Doppler. Denne metoden kan bekrefte tilstanden til blodstrømmen av MCA.

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stamcelletransplantasjon i en In vitro Simulert ischemia / reperfusjon Model

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Optimalisert System for cerebral perfusjon Monitoring i Rat Stroke Modell av intraluminal Middle Cerebral arterieokklusjon

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Iskemi-reperfusjon Modell av akutt nyreskade og Post Injury fibrose i Mus

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduserbar Paraplegi av Thoracic Aorta Okklusjon i en Muse Model of Spinal Cord iskemi-reperfusjon

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Murine modell av intestinal iskemi-reperfusjon Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

En musemodell av retinal iskemi-reperfusjonsskade Gjennom Heving av intraokulært trykk

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

En pre-klinisk rotte modell for studier av ischemia-reperfusion skade i rekonstruktiv mikrokirurgi

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Organ iskemi-reperfusjon skade ved å simulere hemoodynamiske endringer i rotte levertransplantasjon modell

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...