Name: two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Bu eser Bakanlığı bilim ve teknoloji, Tayvan (en 106-2320-B-038-024, en 105-2221-E-038-007-MY3 ve en 104-2320-B-424-001) ve Taipei Tıp Üniversitesi Hastanesi (107TMUH-SP-01) tarafından desteklenmiştir. Bu el yazması Wallace akademik düzenleyerek düzenlendi.

Kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı Komiteler Academia Sinica ve Taipei Tıp Üniversitesi deneysel hayvan kullanımı için bu protokolü onayladı.
1. MCAO/reperfüzyon modeli
<ol><li>Fareler ameliyat kadar su ve yemek için ücretsiz erişim sağlar.</li>
	<li>Otoklav cerrahi araçları ve cerrahi tablo ve % 70 etanol kullanarak ekipman sterilize. Ameliyat maskesi ve steril eldiven giymek. Eğer birden çok fare ameliyatları bir deneyde yapılan cerrahi araçlar resterilize için Kur...

<ol>
	<li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology,+treatment,+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke.">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11 (2011).</li><li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunology+of+acute+stroke.">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).</li><li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury.">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li><li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy.">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).</li><li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice:+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery.">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li><li>Wellons, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia.">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li><li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distal+hypoxic+stroke:+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput,+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit.">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li><li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia:+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion.">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li><li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability.">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106 (2016).</li><li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats.">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li><li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia.">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting.">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li><li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain.">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li><li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons.">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li><li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction.">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity.">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li><li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation.">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li></ol>

MCAO/reperfüzyon fare modeli yaygın insanlarda geçici iskemi taklit etmek için istihdam hayvan bir modeldir. Bu hayvan modeli transgenik ve nakavt fareler suşları için kontur Patofizyoloji araştırmak için uygulanabilir. İletişim kuralı birkaç adımda özellikle önemlidir. (1 microdrill dikkatli bir delik ile uygunsuz eylem kolayca MCA kanama neden kafatasında, oluşturulurken kullanılan gerekir. (2) MCA bozuk ve kanama önce ve sonra ligasyonu yordam kaçınılmalıdır. MCA hasar reperfüzyon iskemik be...

Serebral iskemi-reperfüzyon fare modeli beyin iskemi indüklenen yaralanma1Patofizyoloji soruşturma için en çok kullanılan deneysel yaklaşımlar biridir. Serebral iskemi-reperfüzyon periferik bağışıklık sistemi aktive periferik bağışıklık hücreleri iskemik beyin sızmak ve nöronal hasar2çünkü. Böylece, serebral iskemi-reperfüzyon taklit eden bir güvenilir ve tekrarlanabilir fare modeli kontur Patofizyoloji anlamak için gereklidir.
C57BL/6J (B6) fareler en sık kullanılan zorlanma kontur deneylerde olduklarından, genetik olarak kolayca yönetilebilir. Serebral iskemi-reperfüzyon durumunu taklit iki ortak MCAO/reperfüzyon modelleri mevcuttur. Ilk proksimal MCAO, nerede bir silikon kaplı filament intravascularly MCA kan akışında doldurmak için istihdam intraluminal filaman modeldir; occluding filaman kan akışı3geri yüklemek için daha sonra kaldırılır. Daha uzun bir tıkanıklığı süre infarkt kortikal ve subcortical alanlarında neden olur, ancak kısa tıkanıklığı süresi subcortical bölgesinin bir lezyon oluşur. İkinci model MCA ve CCA sonra dikiş ve anevrizma klip4kaldırılması kan akışını geri yüklenir MCA yoluyla kan akışını azaltmak için extravascular ligasyon içerir distal MCAO tüp ligasyonu modeldir. Bu modelde, bir enfarktüsü kortikal bölgelerde neden olur ve ölüm oranı düşüktür. MCAO/reperfüzyon modeli ligasyonu distal MCA sitenin ortaya çıkarmak için Kraniyektomi gerektirdiğinden, site kolayca teyit edilmesi ve distal MCA kan akışında işlem sırasında bozulur olup olmadığını inceleyerek basittir.
B6 fareler anatomisini önemli değişimler Willis onların dairenin sergi; Bu serebral iskemi-reperfüzyon5,6,7takip enfarktüsü birim etkileyebilir. Şu anda, bu sorun distal MCA8ligasyonu ile aşılabilir. Bu çalışmada, MCA kan akımı occluding ve önceden belirlenmiş bir süre iskemi reperfüzyon sağlayan bir yöntem oluşturun. İki damar tıkanıklığı serebral iskemi-reperfüzyon modelinin MCA bölgenin sağ distal MCA ve doğru CCA, tüp ligasyonu ile geçici iskemi kan akımı iskemi belirli bir süre sonra geri ile neden olmaktadır. Bu MCAO/reperfüzyon model bir enfarktüsü istikrarlı boyutu, bir toplu iskemik beyin ve davranış bir açığı beyin infiltre bağışıklık hücreleri ve serebral iskemi-reperfüzyon4' ten sonra neden olmaktadır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bone rongeur</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>Friedman</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1097603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloral hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8383</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ-745</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric clippers</td>
			<td>Petpro</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% formalin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F5304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator dry bead sterilizer</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>10 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Diener</td>
			<td></td>
			<td>9 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>11 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdrill</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>FOREEDOM K.1070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-scissors-Vannas</td>
			<td>HEISS</td>
			<td>H-4240</td>
			<td>blade 7mm, 8 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse brain matrix</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-invasive blood pressure system</td>
			<td>Muromachi</td>
			<td>MK-2000ST</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Scissors STR</td>
			<td>Karl Klappenecker</td>
			<td></td>
			<td>14 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Physiological Monitoring System</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blades</td>
			<td>Ever-Ready</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stoelting Rodent Warmers</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>53810</td>
			<td>Heating pad</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture clip</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>IDEALTEK</td>
			<td></td>
			<td>No.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>15672</td>
			<td>Surgical glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10-0 suture</td>
			<td>UNIK</td>
			<td>NT0410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8877</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

two-vessel occlusion mouse model of cerebral ischemia-reperfusion

Bu çalışmada, bir orta serebral arter (MCA) tıkanıklığı fare modeli serebral iskemi-reperfüzyon çalışmaya istihdam edilmektedir. Bir tekrarlanabilir ve güvenilir fare modeli serebral iskemi-reperfüzyon Patofizyoloji araştıran ve kontur olan hastalar için potansiyel tedavi stratejileri belirlemek için yararlıdır. Anatomi varyasyonları Willis C57BL/6 fareler çemberi serebral iskemi indüklenen yaralanma sonra onların enfarktüsü birimi etkiler. Çalışmalar bu distal MCA tıkanıklığı (MCAO) bu sorunun üstesinden gelmek ve istikrarlı enfarktüsü boyutunda neden belirttiler. Bu çalışmada, serebral iskemi-reperfüzyon doğru MCA için kan akımı kesintiye aracılığıyla bir iki-damar tıkanıklığı fare modeli kurmak. Klemple doğru MCA ve şu ortak Karotid arter (CCA) ligate ve kan akımı iskemi belirli bir süre sonra geri yükleme. Bu iskemi-reperfüzyon hasarı bir enfarktüsü ve istikrarlı boyutu ve davranışsal bir açığı neden olmaktadır. Periferik bağışıklık hücreleri iskemik beyin 24 h infiltrasyon süresi içinde sızmak. Ayrıca, kortikal alanı nöronal kaybına daha uzun bir reperfüzyon süre için azdır. Bu nedenle, bu iki-damar tıkanıklığı model sonra serebral iskemi reperfüzyon döneminde bağışıklık yanıtı ve nöronal kurtarma soruşturma için uygundur.

Bu MCAO/reperfüzyon yordamı bir kortikal enfarktüsü doğru MCA çevresinde üretilen ve davranışsal bir açığı neden oldu. İskemi indüklenen enfarktüsü birim (şekil 1AB) ve nöronal kaybı (şekil 1 cD) farklı derecelerde bir artışı ligasyonu süresi ile doğru MCA çevrenin beyin korteksi oluşturulmuş. Bu MCAO/reperfüzyon hasarı hayvanın Lokomotor aktivite, 48 h MCAO/reper...

Watch this Scientific Journal Video about Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion at JoVE.com

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Serebral iskemi-reperfüzyon iki damar tıkanıklığı fare modeli

Serebral iskemi-reperfüzyon bir fare modeli kontur Patofizyoloji araştırmak için kuruldu. Klemple sağ orta serebral arter ve şu ortak Karotid arter ligate ve kan akımı iskemi 10-40 dakika sonra geri yükleme.

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Serebral iskemi-reperfüzyonun bu iki damarlı oklüzyon fare modeli inmenin patofizyolojisini araştırabilir. Bu model iskemik beyin ve serebral iskemi-reperfüzyon sonrası davranış açığı bağışıklık hücrelerinin sızan beynin toplu istikrarlı bir enfarkt hacmi neden olacaktır. Bu modelde kortikal bölgelerde enfarktüs etüt ve mortalite oranı düşüktür.Ligasyon MCAO reperfüzyon modeli distal MCA boyutunu ortaya çıkarmak için kraniyotomi gerektirdiğinden, boyutu kolayca teyit edilebilir, ve muayene distal MCAO kan akımı işlem sırasında bozuldu olup olmadığını basittir. Farelere ameliyata kadar su ve yiyeceklere ücretsiz erişim sağlayın. Cerrahi aletleri otoklav ve cerrahi tablo ve ekipman dezenfekte etmek için% 70 etanol kullanın.Sekiz ila 12 haftalık bir fareyi anestezi ettikten sonra, sağlam bir ayak tutamını kullanarak test edildiğinde pedal refleksi olmadığından emin olun. Fare anestezi altında yken göz kuruluğu önlemek için veteriner merhem kullanın. Kan basıncını izlemek için, ilk saç kaldırmak ve daha sonra rektal sıcaklık ve arteriyel kan gazları izlemek için non-invaziv kan basıncı sistemi ve fizyolojik bir izleme sistemi kullanın.Fareye subkutan bir profilaktik antibiyotik enjekte edin. Daha sonra, fareyi ısıtma yastığının üzerindeki supine pozisyonuna yerleştirin. Cildi ortaya çıkarmak için, ventral boyun bölgesinde ve sağ göz ile sağ kulak arasındaki bölgede kürkü tıraş etmek için elektrikli makaslar kullanın.Epilasyon kremi ile hayvanın vücudundan kürk temizleyin ve% 70 etanol ile cerrahi site dezenfekte. Sonra iris makas kullanarak boyun bir santimetre uzunluğunda orta hat kesi kesti. Iris forceps ile, dikkatle fiziksel yaralanmaya neden olmadan vagus sinirleri ücretsiz ortak karotis arter incelemek, ve arter izole etmek için 5-0 ipek sütür kullanın.Daha sonra, sağ göz ve sağ kulak arasındaki orta noktada kafa derisi 0.3 santimetrelik bir kesi yapmak için iris makas kullanın. Mikro makas kullanarak, zigomatik ve squamosal kemik ortaya çıkarmak için temporalis kas kesti. Bir stereo diseksiyon mikroskobu altında fare yerleştirin ve sağ tarafta distal orta serebral arter üzerinde doğrudan iki mililitrelik bir delik oluşturmak için bir mikro matkap kullanın.Sağ taraftaki distal MCA'nın gövdesini inkâr etmek için 10-0 dikiş kullanın ve sağ cca'yı tıkamak için travmatik olmayan bir anevrizma klipsi kullanın. Iskemi istenilen süre sonra, MCA ve CCA kan akışını geri yüklemek için dikiş ve anevrizma klip sök. Kafaya deri kesisini kapatmak için bir dikiş klipsi kullanın ve servikal deri kesilerini cerrahi tutkalla kapatın.Ağrı kesici için deri altı buprenorfin enjekte edin. Isıtma yastığıüzerinde hayvanın vücut ısısını 36,5 artı veya eksi 0,5 santigrat derecede koruyun ve anesteziden tamamen iyileşene kadar gözetimsiz bırakmayın veya diğer hayvanların şirketine iade etmeyin. Son olarak, fareyi otoklav kafesine yerleştirin, böylece tamamen iyileştikten sonra su ve yiyeceklere serbestçe erişebilsin.Kafatası ortaya çıkarmak için anestezi ve kafası kesilmiş farenin başının derisinde bir kesi yapmak için iris makas kullanın. Sonra frontal kemiğin ön kesmek için işletim makas kullanın, ve iris makas ile, sagittal sütür boyunca kafatası kesti. Bir kemik rongeur ile, frontal ve parietal kemik kenara itin ve beyin ortaya çıkarmak.Beyni çıkarın ve fare beyin matrisine yerleştirin. İki mililitrelik koronal dilimler elde etmek için jilet kullanın ve 50 mililitrelik tüpler% 2 TTC beş mililitre ile dolu yerleştirin. Koronal dilimler elde etmek için fare beyin matris kullanırken, kesme boyutu farklı beyinlerde aynı olmalıdır.Kesme boyutu beyin dilimlerinin boyutunu etkiler, bu da enfarktüs boyutunun hesaplanmasını etkiler. 37 santigrat derece 10 dakika için% 2 TTC ve 1X PBS ile beyin dilimleri leke ve sonra% 10 formalin ile iki kez durulayın. 24 saat boyunca oda sıcaklığında% 10 formalin beyin dilimleri düzeltin.Fazla formalin imal etmek için kağıt üzerinde kağıt üzerinde beyin dilimleri kuruduktan sonra, temiz bir plastik slayt üzerinde düzenlemek, kaudal onları yönlendirme, ve başka bir temiz plastik slayt ile kaplayın. Bir tarayıcı kullanarak slaydı tarayın. Slaydın ters çevirin ve ters tarafı tazyin.Önce görüntü dosyasını açarak ve görüntü için ölçeği ayarlayarak, her bölümün enfarktüs alanını hesaplamak için ImageJ yazılımını kullanın. Ardından enfarktüs alanını seçmek için freehand seçimini kullanın ve ilgi alanını ölçmek için ilgi alanı yatırım getirisi yöneticisini kullanın. Son olarak, her bölüm için enfarktüs alanlarını toplamı ve toplam enfarktüs hacmini tahmin etmek için sonucu kesit kalınlığıile çarpın ve el yazmasında açıklandığı gibi istatistiksel analizi tamamlayın.Bu MCAO reperfüzyon prosedürü sırasında iskemi süresinin artması sağ MCA bölgesinin serebral korteksinde farklı iskemi kaynaklı infarkt hacmi ve nöronal kayıp üretti. Ayrıca, iskemi MCAO reperfüzyon sonra 48 saat hayvanın lokomotor aktivitesini azalttı. Serebral iskemi-reperfüzyonsonra, periferik bağışıklık hücrelerinin bir yığın iskemik beynin ipsilateral hemisfer sızmış.Buna ek olarak, bu iki damarlı oklüzyon modeli MCAO modeli ile karşılaştırıldığında, infarkt hacimleri önemli ölçüde farklı değildi. Mikro matkap kafatasında bir delik oluştururken dikkatle kullanılmalıdır. Uygunsuz hareketle, MCA'dan kanamaya neden olan kolay.MCA zarar görmemeli ve ligasyon işleminden önce ve sonra kanamadan kaçınılmalıdır. MCA oklüzyonu ve reperfüzyon durumu lazer Doppler tarafından kontrol edilebilir. Bu yöntem MCA kan akışının durumunu teyit edebilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Normotermik Kardiyak Arrest ve Kardiyopulmoner Resusitasyon: İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Stem Cell Transplantation in an in vitro Simulated Ischemia/Reperfusion Model

Bir Kök Hücre Nakli In vitro Simüle İskemi / Reperfüzyon Modeli

Stem cell transplantation protocols are finding their way into clinical practice1,2,3. Getting better results, making the protocols more robust, and ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Spinal Kord İskemi-reperfüzyon bir Mürin Modelinde Torasik Aort Tıkanıklığı tarafından tekrarlanabilir Parapleji

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Göz İçi Basıncı Yükselmesi ile Retina İskemi-Reperfüzyon Hasarı Fare Modeli

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Rekonstrüktif Mikrocerrahide İskemi-Reperfüzyon Hasarı Nın İnceleştirilmesinde Klinik Öncesi Sıçan Modeli

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Sıçan Karaciğer Nakli Modelinde Hemodinamik Değişiklikleri Simüle Ederek Organ İskemi-Reperfüzyon Yaralanması

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...